ICS65.020.20

CCSB30

DB36

江西省地方標準

DB36/T1742—2023

大球蓋菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

Technicalregulationsofspawnproductionforstrophararugosoannulata

2023-02-10發(fā)布2023-08-01實施

江西省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB36/T1742—2023

目次

前言................................................................................II

1范圍..............................................................................1

2規(guī)范性引用文件....................................................................1

3術(shù)語和定義........................................................................1

4菌種生產(chǎn)場地要求..................................................................1

5菌種生產(chǎn)設施設備要求..............................................................1

6母種制作..........................................................................2

7原種制作..........................................................................2

8栽培種制作........................................................................3

9標簽、標志、貯存和留樣............................................................4

I

DB36/T1742—2023

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起

草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。

本文件由江西省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。

本文件起草單位：江西省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)應用微生物研究所、江西農(nóng)業(yè)大學、江西省農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣

中心、江西生物科技職業(yè)學院、江西省中小企業(yè)發(fā)展促進中心。

本文件起草人：陳緒濤、魏云輝、龔正、馮艷、魏楨、胡文君、熊澤亞、孫鵬、戴建成、彭新紅、

胡佳、戴丹、王振、李菁。

II

DB36/T1742—2023

大球蓋菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了大球蓋菇菌種生產(chǎn)的范圍、規(guī)范性引用文件、術(shù)語和定義、菌種生產(chǎn)場地要求、菌種

生產(chǎn)設施設備要求、母種制作、原種制作、栽培種制作及標簽、標志、貯存和留樣等技術(shù)要求。

本文件適用于各級大球蓋菇菌種生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB191包裝儲運圖示標志

GB4806.7食品安全國家標準食品接觸用塑料材料及制品

GB5749生活飲用水衛(wèi)生標準

NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

NY/T1935食用菌栽培基質(zhì)質(zhì)量安全要求

3術(shù)語和定義

NY/T528中確定的術(shù)語和定義及下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

大球蓋菇Strophariarugosoannulata

隸屬于傘菌綱Agaricomycetes、傘菌目Agaricales、球蓋菇科Strophariaceae，是一種可食用的大

型真菌。

4菌種生產(chǎn)場地要求

選擇地勢高燥，通風良好，排水暢通，交通便利的場地。要求300m內(nèi)無畜牧舍、垃圾場、食用菌

栽培場等污染源。

5菌種生產(chǎn)設施設備要求

各級菌種生產(chǎn)有各自隔離的原材料庫、配料分裝室、滅菌室、冷卻室、接種室、培養(yǎng)室、儲存室、

菌種檢驗室等設施。有磅秤、天平、高壓滅菌鍋、凈化工作臺或接種箱、調(diào)溫設備、除濕設備、培養(yǎng)架、

恒溫箱或培養(yǎng)室、冰箱或冷庫等常規(guī)設備。菌種生產(chǎn)設施設備應符合NY/T528的規(guī)定。

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DB36/T1742—2023

6母種制作

6.1容器規(guī)格

使用玻璃試管或培養(yǎng)皿。試管的規(guī)格宜為18mm×180mm或20mm×200mm，培養(yǎng)皿的規(guī)格宜為直

徑70mm～90mm，錐形瓶規(guī)格宜為250mL～500mL。試管塞宜用硅膠塞。

6.2培養(yǎng)基配方

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）：馬鈴薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL，

pH自然。

6.3培養(yǎng)基分裝和滅菌

培養(yǎng)基配制后應在4h內(nèi)進鍋滅菌。

6.3.1斜面分裝和滅菌

分裝培養(yǎng)基至試管長度的1/4~2/5處，用硅膠塞封口，每10只試管為1把，牛皮紙包裹硅膠塞，扎緊，

試管口朝上放置，在121℃～123℃(0.10MPa～0.12MPa)滅菌30min。滅菌結(jié)束后溫度降至65℃±5℃時，

在潔凈的環(huán)境中擺斜面，要求斜面長度不超過試管長度的2/3。

6.3.2培養(yǎng)皿分裝和滅菌

培養(yǎng)基裝入錐形瓶最大刻度的2/3處，用封口膜或硅膠塞封口，在121℃～123℃(0.10MPa～0.12MPa)

滅菌30min。滅菌結(jié)束后溫度降至65℃±5℃時，在超凈工作臺內(nèi)將錐形瓶中的培養(yǎng)基分裝至無菌培養(yǎng)皿

高度的1/3～1/2處。

6.4接種

試管斜面或平板冷卻凝固后，按照無菌操作在超凈工作臺或接種箱內(nèi)接種，將菌種接種在試管或培

養(yǎng)皿培養(yǎng)基的中部，封口做好標記。

6.5培養(yǎng)

接種好的試管或培養(yǎng)皿放置24℃～26℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，定期檢查，及時挑出有雜菌污染的大球

蓋菇菌種。菌絲長滿2/3時放入4℃冰箱備用。

7原種制作

7.1菌種瓶規(guī)格

選擇容積750mL（口徑4.5cm×高度18cm×底徑8.5cm）的帶蓋聚丙烯塑料瓶，瓶蓋帶有透氣棉，

塑料瓶材質(zhì)應符合GB4806.7的規(guī)定。

7.2培養(yǎng)料配方

7.2.1所用培養(yǎng)料的配方如下：

配方一：闊葉樹木屑80%，麩皮18%，石灰1%，石膏1%，含水量60%±2%；

配方二：玉米芯40%，闊葉樹木屑30%，稻草粉28%，石灰1%，石膏1%，含水量60%±2%；

配方三：麥粒88%，谷殼10%，石灰1%，石膏1%，含水量60%±2%。

2

DB36/T1742—2023

7.2.2原材料要求干燥、新鮮、無霉變，其中木屑不能為松樹、杉樹和樟樹等芳香氣味的樹種。原材

料應符合NY/T1935的要求。生產(chǎn)用水應符合GB5749的要求。

7.3裝瓶滅菌

培養(yǎng)料按配方配制后，裝入菌種瓶的2/3處，壓實，旋緊瓶蓋，立即進鍋滅菌，121℃～123℃

（0.10MPa～0.12MPa）滅菌2h，自然降溫。

7.4接種

料溫冷卻至28℃以下，按照無菌操作在超凈工作臺或接種箱內(nèi)接種，每瓶接入2cm～3cm大小母種

1～2塊，做好標記。

7.5培養(yǎng)

將接好母種的菌種瓶放置24℃～26℃恒溫避光的培養(yǎng)室中培養(yǎng)，菌絲快要長滿菌種瓶時，將培養(yǎng)溫

度降低至22℃左右。培養(yǎng)過程中定期檢查，及時挑出污染的大球蓋菇菌種。

8栽培種制作

8.1菌袋規(guī)格

選擇12cm×24cm的聚丙烯塑料袋，聚丙烯材質(zhì)的子母套環(huán)（直徑4.5cm）進行封口，菌袋材質(zhì)應符

合GB4806.7的規(guī)定。

8.2培養(yǎng)料配方

8.2.1所用培養(yǎng)料的配方如下：

配方一：闊葉樹木屑65%，牛糞15%，谷殼15%，豆粕3%，石灰1%，石膏1%，含水量65%±2%。

配方二：玉米芯50%，闊葉樹木屑48%，石灰1%，石膏1%，含水量65%±2%；

配方三：闊葉樹木屑78%，谷殼10%，豆粕10%，石灰1%，石膏1%，含水量65%±2%；

8.2.2原材料要求干燥、新鮮、無霉變，其中木屑不能為松樹、杉樹和樟樹等芳香氣味的樹種。原材

料應符合NY/T1935的要求。生產(chǎn)用水應符合GB5749的要求。

8.3培養(yǎng)料發(fā)酵

配制好的培養(yǎng)料按以下步驟進行發(fā)酵。

a)將培養(yǎng)料混合均勻，堆成寬2.0m～2.5m、高1.2m～1.5m、長度不限的料堆，料堆堆好后，從

料堆頂部至底部自上而下用木棍打2排孔徑10cm左右的通氣孔；

b)當料堆溫度達到60°C保持2d～3d后翻堆，翻堆時將外層低溫料層翻到內(nèi)層，把內(nèi)層高溫料

層翻到外層，重新建堆和打通氣孔；

c)當料溫再次達到60°C后保持2d~3d，在發(fā)酵過程中翻堆2～3次；

d)發(fā)酵好的培養(yǎng)料含水量適中、質(zhì)地松軟且無酸臭氨氣味，培養(yǎng)料發(fā)酵好后及時散堆降溫，備用。

8.4裝袋滅菌

發(fā)酵好的培養(yǎng)料裝入菌袋的2/3處，壓實，套上子母套環(huán)，立即進鍋滅菌，121℃～123℃(0.10MPa～

0.12MPa)滅菌2h，自然降溫。

8.5接種

3

DB36/T1742—2023

料溫冷卻至28℃以下，按照無菌操作在超凈工作臺或接種箱內(nèi)接種，每個栽培種菌包接入原種量≥

15g，做好標記。

8.6培養(yǎng)

將栽培種菌包放置20℃～22℃恒溫培養(yǎng)室培養(yǎng)，菌絲快要長滿菌袋時，將培養(yǎng)溫度降低至18℃。培

養(yǎng)過程中定期檢查，及時挑出污染的大球蓋菇菌種。

9標簽、標志、貯存和留樣

9.1標簽、標志

大球蓋菇菌種應貼標簽。注明菌種種類、品種、級別、接種日期、生產(chǎn)單位、地址電話等。外包裝

上應