山東省濰坊市2024-2025學年高二下學期期中考試一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。每小題只有一個選項符合題目要求。1.支原體的膜蛋白LAMPs能夠與宿主細胞表面的受體結(jié)合，從而黏附到宿主細胞表面。在抗生素類藥物中，頭孢可抑制病原體細胞壁的合成，阿奇霉素可與病原體的核糖體結(jié)合抑制蛋白質(zhì)的合成。下列說法正確的是（）A.支原體營寄生生活，利用宿主細胞的核糖體合成蛋白質(zhì)B.LAMPs需經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工后到達細胞表面C.頭孢和阿奇霉素均不可用于治療支原體肺炎D.支原體的核酸徹底水解可得到8種化合物【答案】D【分析】支原體屬于原核細胞，沒有細胞壁，不具有眾多細胞器，只具有核糖體這一種細胞器，抑制細胞壁合成的抗生素對治療支原體肺炎沒有作用效果；真核細胞與原核細胞兩者結(jié)構(gòu)上最主要的區(qū)別是有無以核膜為界限的細胞核?！驹斀狻緼、支原體為原核細胞，細胞內(nèi)核糖體，利用自己細胞內(nèi)的核糖體合成蛋白質(zhì)，A錯誤；B、支原體為原核細胞，細胞內(nèi)無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，故支原體的膜蛋白LAMPs不需經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工，B錯誤；C、依題意，頭孢可抑制病原體細胞壁合成，阿奇霉素可與病原體的核糖體結(jié)合抑制蛋白質(zhì)的合成。支原體沒有細胞壁，有核糖體，可利用核糖體合成蛋白質(zhì)。因此，頭孢不可用于治療支原體肺炎，但阿奇霉素可用于治療支原體肺炎，C錯誤；D、支原體含DNA和RNA，DNA和RNA徹底水解后產(chǎn)生A、T、G、C、U、脫氧核糖、核糖、磷酸共8種化合物，D正確。故選D。2.水和無機鹽對植物的正常生命活動有著重要意義。下列說法正確的是（）A.高粱秸稈充分曬干后剩余的物質(zhì)主要是無機鹽B.大豆種子萌發(fā)過程中吸收的水與蛋白質(zhì)等物質(zhì)結(jié)合后仍具有溶解性C.玉米種子成熟過程中結(jié)合水與自由水的含量比值上升D.小麥從土壤中吸收的礦質(zhì)元素可用于合成淀粉【答案】C【分析】（1）無機鹽主要以離子的形式存在，其生理作用有：①細胞中某些復雜化合物的重要組成成分；如Fe2+是血紅蛋白的主要成分；Mg2+是葉綠素的必要成分。②維持細胞的生命活動，如鈣可調(diào)節(jié)肌肉收縮和血液凝固，血鈣過高會造成肌無力，血鈣過低會引起抽搐。③維持細胞的酸堿平衡和細胞的形態(tài)。（2）結(jié)合水：與細胞內(nèi)其它物質(zhì)結(jié)合，是細胞結(jié)構(gòu)的組成成分。自由水：（占大多數(shù)）以游離形式存在，可以自由流動。生理功能：①良好的溶劑，②運送營養(yǎng)物質(zhì)和代謝的廢物，③參與許多化學反應，綠色植物進行光合作用的原料；④為細胞提供液體環(huán)境?！驹斀狻緼、高粱秸稈充分曬干后主要丟失的是自由水，其體內(nèi)剩余的物質(zhì)主要是有機物，A錯誤；B、大豆種子萌發(fā)過程中吸收的水與蛋白質(zhì)等物質(zhì)結(jié)合后形成結(jié)合水，不具有溶解性，B錯誤；C、玉米種子成熟過程中（代謝會減慢）結(jié)合水與自由水的含量比值上升，抗逆性增強，C正確；D、淀粉的元素是C、H、O，小麥從土壤中吸收的礦質(zhì)元素（礦質(zhì)元素為除C、H、O其余元素子）不可用于合成淀粉，D錯誤。故選C。3.輕度酶解是在較溫和的條件下，通過酶的作用將生物大分子分解成較小的片段，而非完全降解成單體。下列說法錯誤的是（）A.蛋白質(zhì)輕度酶解產(chǎn)物可與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應B.淀粉和糖原輕度酶解產(chǎn)物基本單位相同C.DNA和RNA輕度酶解產(chǎn)物中部分堿基相同D.纖維素的輕度酶解產(chǎn)物不以碳鏈為基本骨架【答案】D【分析】（1）核酸的種類：脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。（2）核酸的基本組成單位：核苷酸，是由一分子磷酸、一分子五碳糖（DNA為脫氧核糖、RNA為核糖）和一分子含氮堿基組成；組成DNA的核苷酸叫做脫氧核苷酸，組成RNA的核苷酸叫做核糖核苷酸?！驹斀狻緼、蛋白質(zhì)輕度酶解后的多肽片段仍然含有肽鍵，雙縮脲試劑能與含有兩個或兩個以上肽鍵的化合物發(fā)生紫色反應，所以蛋白質(zhì)輕度酶解產(chǎn)物可與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應，A正確；B、淀粉和糖原都是由葡萄糖聚合而成的大分子物質(zhì)，所以淀粉和糖原輕度酶解產(chǎn)物基本單位相同，B正確；C、DNA和RNA中都含有A、G、C三種堿基，所以DNA和RNA輕度酶解得到的部分片段中堿基可能相同，C正確；D、纖維素由葡萄糖組成，其酶解產(chǎn)物（如纖維二糖或更小的片段）仍以碳鏈為基本骨架，D錯誤。故選D。4.下列有關傳統(tǒng)發(fā)酵技術和發(fā)酵工程的說法，正確的是（）A.啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)中焙烤是為了使淀粉酶失活B.泡菜完整發(fā)酵過程中可檢測到亞硝酸鹽含量逐漸降低C.谷氨酸棒狀桿菌在中性和酸性條件下會積累谷氨酸D.單細胞蛋白指通過發(fā)酵獲得的微生物菌體【答案】D【分析】發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種技術。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、種子擴大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純（生物分離工程）等方面。【詳解】A、在啤酒生產(chǎn)中，焙烤的目的是殺死種子胚但不使淀粉酶失活，這樣可以在后續(xù)的糖化過程中，淀粉酶能夠?qū)⒌矸鄯纸鉃樘穷?，A錯誤；B、在泡菜發(fā)酵過程中，亞硝酸鹽含量并非逐漸降低，發(fā)酵初期，由于微生物活動，亞硝酸鹽含量會先升高，隨后在發(fā)酵中后期，亞硝酸鹽含量逐漸降低，B錯誤；C、谷氨酸棒狀桿菌在發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸時，控制發(fā)酵條件為中性和弱堿性，會積累谷氨酸，若發(fā)酵條件為酸性條件則容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，C錯誤；D、單細胞蛋白又叫微生物蛋白，是指通過發(fā)酵獲得的微生物菌體，D正確。故選D。5.液體深層培養(yǎng)是以獲得大量發(fā)酵產(chǎn)物為目的的發(fā)酵罐大容量液體培養(yǎng)，可通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH、溫度和營養(yǎng)條件等促使微生物迅速生長，產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物。下列說法正確的是（）A.與液體深層培養(yǎng)相比，傳統(tǒng)發(fā)酵技術不需要防止雜菌污染B.液體深層培養(yǎng)只能利用厭氧微生物進行發(fā)酵生產(chǎn)C.通過發(fā)酵罐中的觀察孔可隨時取樣檢測培養(yǎng)液中微生物數(shù)量D.可通過提取、分離和純化等方法獲得微生物的代謝產(chǎn)物【答案】D【分析】（1）發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)：發(fā)酵工程一般包括菌種的選育、擴大培養(yǎng)、培養(yǎng)基的配制、滅菌、接種、發(fā)酵、產(chǎn)品的分離、提純等方面。（2）液體深層培養(yǎng)是在發(fā)酵罐中進行的大容量液體培養(yǎng)，通過控制pH、溫度、營養(yǎng)等條件，促使微生物快速生長并積累代謝產(chǎn)物，適用于需氧或厭氧微生物。【詳解】A、無論是傳統(tǒng)發(fā)酵還是液體深層培養(yǎng)，雜菌污染均會影響發(fā)酵產(chǎn)物的質(zhì)量和產(chǎn)量。傳統(tǒng)發(fā)酵雖未使用嚴格的無菌技術，但仍通過控制環(huán)境（如高鹽、低氧、酸性條件）抑制雜菌生長，并非“不需要防止雜菌污染”，A錯誤；B、液體深層培養(yǎng)可根據(jù)需求培養(yǎng)需氧微生物或厭氧微生物：培養(yǎng)需氧微生物時，發(fā)酵罐需通入無菌空氣并攪拌；培養(yǎng)厭氧微生物時，需維持無氧環(huán)境，B錯誤；C、發(fā)酵罐的觀察孔主要用于觀察培養(yǎng)液狀態(tài)（如顏色、氣泡），取樣需通過專門的取樣口，以避免污染。直接通過觀察孔取樣會破壞發(fā)酵罐的無菌環(huán)境，導致雜菌污染或發(fā)酵條件改變，C錯誤；D、微生物的代謝產(chǎn)物存在于培養(yǎng)液或細胞內(nèi)，需通過提取、分離、純化等方法獲得微生物的代謝產(chǎn)物，D正確。故選D。6.生長圖形法是一種測定微生物營養(yǎng)需求的方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類，研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分數(shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖。下列說法錯誤的是（）A.倒成平板后不需要再進行滅菌處理B.結(jié)果表明該菌可能合成生長因子甲C.結(jié)果表明該菌需要生長因子乙或丙D.可設置添加無菌水的培養(yǎng)基作為對照【答案】C【分析】題圖分析：據(jù)圖分析，菌落主要分布于添加了乙和丙的交界區(qū)域，說明該細菌需要額外提供的生長因子為乙和丙?！驹斀狻緼、倒平板前先要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌，倒成平板后不需要再滅菌，A正確；BC、圖示結(jié)果菌落集中在加了乙和丙的交界區(qū)域（即同時存在生長因子乙和丙時，該菌能在培養(yǎng)基上形成菌落），說明該細菌額外需要的生長因子為乙和丙，可能合成生長因子甲，B正確，C錯誤；D、可設置添加無菌水的培養(yǎng)基作為對照，以排除實驗過程中可能出現(xiàn)的雜菌污染，D正確。故選C。7.土壤中某些細菌分泌的幾丁質(zhì)酶能抑制稻瘟菌的生長，可用于稻瘟病的防治。科研人員設計實驗用透明圈法篩選能高效降解幾丁質(zhì)的菌株。下列說法錯誤的是（）A.實驗中培養(yǎng)基的pH為中性或弱堿性B.實驗中培養(yǎng)基需用干熱滅菌法進行滅菌C.在以幾丁質(zhì)為唯一碳源的培養(yǎng)基上生長的菌落不一定是目標微生物D.可依據(jù)“透明圈直徑/菌落直徑”的值來篩選目的菌株【答案】B【分析】培養(yǎng)基的滅菌方法：培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法，干熱滅菌法適用于耐高溫、需保持干燥的物品，如玻璃器皿、金屬用具等?！驹斀狻緼、細菌適宜在中性或弱堿性環(huán)境中生長，所以實驗中培養(yǎng)基的pH為中性或弱堿性有利于細菌生長，A正確；B、培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，而干熱滅菌法適用于耐高溫、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金屬用具等，培養(yǎng)基不能用干熱滅菌法，B錯誤；C、在以幾丁質(zhì)為唯一碳源的培養(yǎng)基上生長的菌落，可能是能降解幾丁質(zhì)的目標微生物，也可能是利用了空中的二氧化碳的自養(yǎng)型微生物，不一定是目標微生物，C正確；D、“透明圈直徑/菌落直徑”的值越大，說明該菌株降解幾丁質(zhì)的能力越強，所以可依據(jù)此值來篩選目的菌株，D正確。故選B。8.獲取次生代謝產(chǎn)物的兩種途徑如圖，下列說法正確的是（）A.外植體可用乙醇和次氯酸鈉混合液消毒B.兩種途徑均利用了植物細胞的全能性C.①②過程中的培養(yǎng)基所含生長素和細胞分裂素的比例不同D.④過程主要利用促進細胞生長的培養(yǎng)條件提高單個細胞中次生代謝物的含量【答案】C【分析】由于植物細胞的次生代謝物含量很低，從植物組織提取會大量破壞植物資源，有些產(chǎn)物又不能或難以通過化學合成途徑得到，因此人們期望利用植物細胞培養(yǎng)來獲得目標產(chǎn)物，這個過程就是細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斀狻緼、外植體消毒通常先用體積分數(shù)為70%的酒精消毒30-60s，然后用無菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉溶液處理30min左右，最后用無菌水清洗3-5次，不是乙醇和次氯酸鈉混合液消毒，A錯誤；B、細胞的全能性是指已經(jīng)分化的細胞，仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能。圖中途徑一獲得了完整植株，利用了植物細胞的全能性；途徑二只是從細胞懸液中獲取次生代謝產(chǎn)物，沒有發(fā)育成完整個體，未利用植物細胞的全能性，B錯誤；C、①過程是脫分化，②過程是再分化，脫分化和再分化過程中培養(yǎng)基所含生長素和細胞分裂素的比例不同。生長素和細胞分裂素的比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值適中時，促進愈傷組織的形成，C正確；D、④過程主要是利用促進細胞分裂的培養(yǎng)條件，增加細胞數(shù)量，從而提高次生代謝產(chǎn)物的總量，而不是提高單個細胞中次生代謝物的含量，D錯誤。故選C。9.培養(yǎng)用于植皮的皮膚細胞常用以下兩種方法。下列說法錯誤的是（）方法一：無血清無滋養(yǎng)層法方法二：有血清有滋養(yǎng)層法優(yōu)點1.培養(yǎng)基成分清晰2.避免異源蛋白引發(fā)免疫反應3.減少血清帶來的病原微生物的污染1.血清富含生長因子和激素2.滋養(yǎng)層細胞能分泌生長因子A方法一所用培養(yǎng)液應含生長因子、激素、維生素和氨基酸等B.方法二為防止雜菌污染，血清需經(jīng)高溫處理后加入培養(yǎng)基C.方法二血清中存在的異源蛋白增大了植皮者出現(xiàn)免疫排斥的風險D.方法二所用滋養(yǎng)層細胞應經(jīng)處理使其失去增殖能力【答案】B【分析】動物細胞培養(yǎng)條件：（1）無菌無毒環(huán)境：無菌--對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理；在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。；無毒--定期更換培養(yǎng)液，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對自身造成危害。（2）營養(yǎng)成分：所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴格配制而成的培養(yǎng)基）（3）溫度和pH值：哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。O2：是細胞代謝所必需的CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH?！驹斀狻緼、在動物細胞培養(yǎng)過程中，所需營養(yǎng)物質(zhì)需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，A正確；B、血清經(jīng)過高溫處理后，其中活性成分變性失活，失去原有功能，無法滿足細胞生長所需，可能使細胞生長緩慢，B錯誤；C、血清的成分復雜，各成分的含量及作用差別大，血清中的異源蛋白增大了植皮者出現(xiàn)過敏的風險，C正確；D、本實驗中使用滋養(yǎng)層細胞作為飼養(yǎng)層，這時需要對滋養(yǎng)層細胞進行特殊的處理，使其失去增殖能力，但仍然保持存活狀態(tài)，即能分泌生長因子，D正確。故選B。10.HER2/neu是一種原癌基因，在乳腺癌細胞中過量表達H蛋白。H蛋白是跨膜蛋白，結(jié)構(gòu)如圖?？笻蛋白單克隆抗體能有效抑制乳腺癌細胞的生長。下列說法正確的是（）A.H蛋白可作為抗體的作用靶點的原因之一是HER2/neu在正常細胞中低表達B.制備免疫小鼠用的H蛋白時，應將其胞內(nèi)區(qū)基因片段轉(zhuǎn)入工程菌表達并提純C.對小鼠多次注射H蛋白可以獲得大量的抗H蛋白單克隆抗體D.體外大量培養(yǎng)所需雜交瘤細胞后，需破裂細胞以提取單克隆抗體【答案】A【分析】單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體?！驹斀狻緼、HER2/neu在乳腺癌細胞中過量表達H蛋白，而在正常細胞中表達量較低，所以可以作為抗體的作用靶點，A正確；B、由于抗體主要存在于細胞外液中，因此根據(jù)H蛋白的結(jié)構(gòu)圖可知，若用H蛋白制備抗原需要利用胞外區(qū)基因，由制備獲得的抗體作用于該抗原的胞外區(qū)，B錯誤；C、將雜交瘤細胞經(jīng)過體外培養(yǎng)或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，獲得大量的單克隆抗體，C錯誤；D、體外大量培養(yǎng)所需雜交瘤細胞后，從培養(yǎng)液中提取單克隆抗體，無需破裂細胞，D錯誤。故選A。11.體外受精、動物細胞核移植、胚胎分割、基因工程等四項技術都可以獲得早期胚胎，早期胚胎均需移植給代孕動物才能獲得后代。下列說法錯誤的是（）A.體外受精前的精子獲能指為精子參與受精提供能量B.動物細胞核移植和胚胎分割均屬于動物克隆技術C.基因工程能定向改造生物的性狀D.四項技術獲得的動物遺傳特性均與代孕動物無關【答案】A【分析】（1）體外受精主要包括：卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精。（2）動物細胞核移植：將體細胞核移入去核卵母細胞中，重構(gòu)胚胎，屬于無性繁殖。（3）胚胎分割是指采用機械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術。（4）基因工程：通過導入目的基因定向改造生物性狀，再通過胚胎移植獲得轉(zhuǎn)基因個體?！驹斀狻緼、精子在雌性生殖道或體外特定培養(yǎng)液中發(fā)生生理變化，獲得與卵子結(jié)合的能力，而非直接提供能量，A錯誤；B、克隆技術的定義是通過無性繁殖獲得遺傳物質(zhì)相同的個體。動物細胞核移植通過核移植技術產(chǎn)生與供核個體遺傳物質(zhì)基本相同的后代；胚胎分割將一個胚胎分割成多個，后代遺傳物質(zhì)一致，均屬于克隆技術，B正確；C、基因工程通過人工導入目的基因，可精確修飾或添加特定性狀（如抗蟲、抗?。?，實現(xiàn)對生物性狀的定向改造，C正確；D、代孕動物的作用僅為胚胎提供發(fā)育場所和營養(yǎng)，不參與胚胎的遺傳物質(zhì)組成。體外受精的遺傳物質(zhì)來自精子和卵子；核移植來自供核細胞；胚胎分割來自原胚胎；基因工程來自導入的目的基因和受體細胞，均與代孕動物無關，D正確。故選A。12.下列關于胚胎工程相關內(nèi)容的說法，錯誤的是（）A.精子入卵后透明帶會迅速發(fā)生生理反應阻止其他精子入卵B.在自然條件下，哺乳動物受精過程在輸卵管中完成C.設計試管嬰兒需要取早期胚胎滋養(yǎng)層細胞進行基因檢測D.我國不允許將人胚胎干細胞制備的囊胚植入到人的生殖系統(tǒng)進行發(fā)育【答案】A【分析】治療性克?。褐咐每寺〖夹g產(chǎn)生特定細胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植．生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g用于生育目的，即用于產(chǎn)生人類個體。【詳解】A、在精子觸及卵細胞膜的瞬間，發(fā)生透明帶反應；精子外膜和卵細胞膜融合，精子入卵后，卵細胞膜反應，阻止其他精子入卵，A錯誤；B、在自然條件下，哺乳動物受精過程在輸卵管中完成，B正確；C、設計試管嬰兒需要取早期胚胎滋養(yǎng)層細胞進行基因檢測，C正確；D、我國不允許將人胚胎干細胞制備的囊胚植入到人的生殖系統(tǒng)進行發(fā)育，D正確。故選A。13.關于“DNA的粗提取與鑒定”實驗，下列說法錯誤的是（）A.提取DNA可選用新鮮的菠菜、洋蔥、豬肝等作為實驗材料B.離心研磨液是為了加速DNA的沉淀C.鑒定過程中DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生改變D.僅設置一個對照組即可排除二苯胺加熱后可能變藍的干擾【答案】B【分析】DNA的粗提取與鑒定的實驗原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點可以選擇適當濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達到分離的目的;②DNA不溶于酒精溶液，細胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進一步分離;③在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍色?！驹斀狻緼、新鮮的菠菜、洋蔥、豬肝等富含DNA，適宜作為提取DNA的材料，A正確；B、離心研磨液是為了加速不溶物的沉淀，DNA位于上清中，B錯誤；C、加入二苯胺試劑后要進行沸水浴處理，鑒定過程中DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，C正確；D、加入二苯胺試劑后沸水浴處理的時間要在5分鐘以上，且要等到冷卻后再觀察結(jié)果，這樣才可以觀察到較為明顯的顯色反應，僅設置一個對照組可以排除二苯胺加熱后可能變藍的干擾，D正確。故選B。14.將突變基因?qū)霐M南芥的染色體DNA時，可出現(xiàn)三種結(jié)果：仍為野生型（導入失?。?、突變雜合子(在一對同源染色體上只導入1個突變基因)及突變純合子。研究人員進行了如圖1轉(zhuǎn)基因操作后，用引物LP、RP和BP對擬南芥DNAPCR擴增并進行電泳檢測，得到結(jié)果如圖2。不考慮突變基因插入染色體的其他位置。下列說法錯誤的是（）A.乙組、丙組分別為突變純合子、突變雜合子B.由LP+RP組電泳結(jié)果可知，加樣孔位于電泳條帶上方C.模板鏈過長導致使用引物BP+LP無法產(chǎn)生PCR產(chǎn)物D.甲與乙雜交后代的DNA利用上述引物PCR擴增后，電泳結(jié)果與丙相同【答案】C【分析】PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時引物與單鏈按 堿基互補配對的原則結(jié)合，再調(diào) 溫度至DNA聚合酶最適反應溫度（72°C左右），DNA聚合酶 沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈?；诰酆厦钢圃斓腜CR儀實際就是一個溫控設備，能在變性溫度，復性溫度，延伸溫度之間很好地進行控制?！驹斀狻緼B、乙組LP+RP組只有一條帶，說明導入了外源基因或為野生型，丙組LP+RP組有一條帶，說明丙為雜合子，即既有野生型條帶又有插入后的條帶，且插入后條帶分子量更大，移動更慢，靠近加樣孔，因此加樣孔位于電泳條帶上方，且乙為突變純合子，AB正確；C、引物BP+LP均與同一條鏈結(jié)合，不能擴增出條帶，C錯誤；D、甲為野生型，乙為突變純合子，甲與乙雜交后代為雜合子，與丙相同，因此利用上述引物PCR擴增后，電泳結(jié)果與丙相同，D正確。故選C。15.新城疫病毒(NDV)是一種可侵染腫瘤細胞的病毒?？蒲腥藛T將編碼豬α-(抗原的基因植入NDV獲得了一種重組病毒，該病毒能使被感染腫瘤細胞表面表達豬α-Gla抗原，從而引發(fā)人體強烈的免疫反應。下列說法正確的是（）A.NDV和腫瘤細胞均屬于生命系統(tǒng)最基本的結(jié)構(gòu)層次B.NDV可作為載體將目的基因送入腫瘤細胞C.對NDV的基因進行改造使其在腫瘤細胞表達出豬α-Cla抗原屬于蛋白質(zhì)工程D.在腫瘤細胞表面檢測到豬a-Cla抗原即說明該重組病毒可用于治療腫瘤【答案】B【分析】題干描述了新城疫病毒（NDV）能侵染腫瘤細胞，科研人員通過將編碼豬α-Gla抗原的基因植入NDV，得到重組病毒。此重組病毒可讓被感染的腫瘤細胞表面表達豬α-Gla抗原，而該抗原能引發(fā)人體強烈免疫反應。這為后續(xù)從病毒作為載體送基因、基因工程應用及病毒治療腫瘤可行性等角度設置問題做鋪墊?！驹斀狻緼、生命系統(tǒng)最基本的結(jié)構(gòu)層次是細胞，NDV是病毒，沒有細胞結(jié)構(gòu)，不屬于生命系統(tǒng)最基本的結(jié)構(gòu)層次，A錯誤；B、由題意“科研人員將編碼豬α-(抗原基因植入NDV獲得了一種重組病毒，該病毒能使被感染腫瘤細胞表面表達豬α-Gla抗原”可知，NDV可作為載體將目的基因（編碼豬α-Gla抗原的基因）送入腫瘤細胞，B正確；C、蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關系作為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。對NDV的基因進行改造使其在腫瘤細胞表達出豬α-Gla抗原，這是將外源基因?qū)氩《?，不屬于對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造或制造新蛋白質(zhì)，不屬于蛋白質(zhì)工程，C錯誤；D、在腫瘤細胞表面檢測到豬α-Gla抗原，只能說明重組病毒成功將目的基因?qū)肽[瘤細胞并表達，但不能說明該重組病毒可用于治療腫瘤，還需要進一步驗證其引發(fā)的免疫反應是否能有效殺傷腫瘤細胞等，D錯誤。故選B。二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。每小題有一個或多個選項符合題目要求，全部選對得3分，選對但不全的得1分，有選錯的得0分。16.在一定條件下，斐林試劑可與葡萄糖反應生成磚紅色沉淀，去除沉淀后測定溶液中Cu2+吸光值，可用于計算葡萄糖濃度，用該方法檢測不同樣本的結(jié)果如圖。下列說法正確的是（）A.需將斐林試劑的兩種溶液等量均勻混合后再加入樣本溶液B.吸光值與樣本的葡萄糖濃度有關，與斐林試劑的用量無關C.若某樣本的吸光值為0.578，則其葡萄糖濃度大于0.4mg/mLD.該方法可對蔗糖、麥芽糖、果糖等可溶性糖的濃度進行測定【答案】A【分析】斐林試劑可用于鑒定還原糖，在水浴加熱的條件下，溶液的顏色變化為磚紅色沉淀。斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖（如葡萄糖、麥芽糖、果糖）存在與否，而不能鑒定非還原性糖（如淀粉）。斐林試劑是由甲液（質(zhì)量濃度為0.1g/mL氫氧化鈉溶液）和乙液（質(zhì)量濃度為0.05g/mL硫酸銅溶液）組成，使用時要將甲液和乙液混合均勻后再加入含樣品的試管中?！驹斀狻緼、斐林試劑使用時需要將甲液和乙液等量混勻后再加入到樣本溶液，A正確；B、吸光值與溶液的濃度有關，故與樣本的葡萄糖含量和斐林試劑的用量有關，B錯誤；C、從圖中可以看出，吸光值與葡萄糖含量呈負相關，吸光值越大，葡萄糖含量越低，當吸光值為0.578時，對比圖中數(shù)據(jù)，其吸光值大于葡萄糖含量為0.4mg/mL時對應的吸光值，所以其葡萄糖含量應小于0.4mg/mL，C錯誤；D、蔗糖為非還原糖，斐林試劑不能鑒定非還原糖，D錯誤。故選A。17.琥珀酸是一種天然有機酸，廣泛應用于制藥、食品等行業(yè)。產(chǎn)琥珀酸放線桿菌(SW)能利用糖類發(fā)酵產(chǎn)琥珀酸，但是耐酸能力差?？蒲腥藛T將編碼Gad系統(tǒng)的基因?qū)隨W中，獲得了耐酸性強的重組菌株CSW。當外界環(huán)境pH降低時、GSW啟動Gad系統(tǒng)，促進谷氨酸進入細胞緩解酸脅迫。科研人員對SW和CSW進行耐酸性實驗測定，結(jié)果如圖。下列關于實驗過程及結(jié)果的分析，錯誤的是（）A.實驗中所用培養(yǎng)基應為酸性B.培養(yǎng)基中的“某種物質(zhì)”是指谷氨酸C.實驗應將接種后的培養(yǎng)基放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.實驗結(jié)果說明GSW的耐酸能力明顯增強，可直接用于工業(yè)化生產(chǎn)【答案】CD【分析】基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲??；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細胞；④目的基因的檢測與表達。其中，基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心。【詳解】A、因為要測定菌株的耐酸性，所以實驗中所用培養(yǎng)基應為酸性，這樣才能模擬酸性環(huán)境來觀察菌株的生長情況，A正確；B、由題干“當外界環(huán)境pH降低時，GSW啟動Gad系統(tǒng)，促進谷氨酸進入細胞緩解酸脅迫”以及圖中“+”“-”的設置可知，培養(yǎng)基中的“某種物質(zhì)”是指谷氨酸，添加谷氨酸后觀察菌株的生長狀況，B正確；C、本實驗要測定菌株的耐酸性，自變量為菌株的種類和濃度以及是否添加某種物質(zhì)，pH為無關變量，需要相同且適宜，而CO2溶于水會形成碳酸，會改變培養(yǎng)基的pH，對實驗結(jié)果有干擾，C錯誤；D、雖然實驗結(jié)果說明GSW的耐酸能力明顯增強，但工業(yè)化生產(chǎn)還需要考慮其他諸多因素，如發(fā)酵成本、產(chǎn)量、對其他環(huán)境條件的適應性等，不能僅根據(jù)耐酸能力就直接用于工業(yè)化生產(chǎn)，D錯誤。故選CD。18.科學家利用馬鈴薯和番茄葉片獲取原生質(zhì)體并進行細胞雜交，最終獲得了雜種植株，相關過程如圖所示。下列說法正確的是（）A.過程①應將葉片上表皮向上，放置于低滲酶溶液中，以免細胞失水B.過程②可以通過離心的方法將原生質(zhì)體與細胞碎片分離開C.過程③可用高Ca2+一高pH融合法促進原生質(zhì)體融合D.過程④中所用的培養(yǎng)基均為固體培養(yǎng)基【答案】BCD【分析】植物體細胞雜交要將不同種的植物細胞誘導融合成一個雜種細胞，再利用植物組織培養(yǎng)技術將雜種細胞培育成植株，體現(xiàn)的生物學原理為細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。在融合之前需先用纖維素酶和果膠酶去除植物的細胞壁獲得原生質(zhì)體，雜種細胞再生出新的細胞壁是細胞融合完成的標志?！驹斀狻緼、過程①是用酶解法去除細胞壁獲得原生質(zhì)體，應將葉片下表皮（下表皮氣孔多，有利于酶與細胞接觸）向下，放置于等滲或略高滲酶溶液中，若置于低滲溶液中，原生質(zhì)體可能會吸水漲破，A錯誤；B、過程②中，由于原生質(zhì)體與細胞碎片的質(zhì)量等存在差異，可以通過離心的方法將原生質(zhì)體與細胞碎片分離開，B正確；C、誘導原生質(zhì)體融合的化學法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法等，④過程可用高Ca2＋—高pH融合法，目的是促進原生質(zhì)體融合，C正確；D、過程④為植物組織培養(yǎng)過程，脫分化和再分化過程中均使用固體培養(yǎng)基，D正確。故選BCD。19.研究人員將基因OSNL導入從黑羽雞胚中分離出的成纖維細胞(CEFs)中，使其重編程為誘導多能干細胞(iPS),再促使iPS分化為誘導原始生殖細胞(iPGCs),然后將iPGCs注射到白羽雞胚中，最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代。下列說法錯誤的是（）A.為分離得到CEFs,需要將雞胚組織剪碎后用胃蛋白酶處理B.基因的選擇性表達導致iPS和iPGCs的結(jié)構(gòu)、功能不同C.基因OSNL的獲取方法有人工合成、PCR擴增和從基因文庫中獲取D.該過程中用到的技術有動物細胞培養(yǎng)、動物細胞核移植【答案】AD【分析】胚胎干細胞（ES細胞）具有自我更新及多向分化潛能，為發(fā)育學、遺傳學、人類疾病的發(fā)病機理與替代治療等研究提供非常寶貴的資源。iPS細胞技術是借助基因?qū)爰夹g將某些特定因子基因?qū)雱游锘蛉说捏w細胞，以將其重編程或誘導為ES細胞樣的細胞，即iPS細胞。動物細胞培養(yǎng)時，雞胚組織剪碎后需用胰蛋白酶處理，以獲得單細胞懸液。動物細胞培養(yǎng)時一般需要在合成培養(yǎng)基中添加血清等天然成分，以滿足細胞對某些細胞因子的需求?！驹斀狻緼、在細胞培養(yǎng)中，通常使用胰蛋白酶來分解細胞間的連接，以獲得單細胞懸液。胃蛋白酶只能在酸性環(huán)境下發(fā)揮活性，不能用于獲得單細胞懸液，A錯誤；B、iPS細胞是多能干細胞，具有分化為多種細胞類型的潛力；而iPGCs是原始生殖細胞，具有特定的功能。它們的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能差異源于基因的選擇性表達，B正確；C、PCR擴增可以用于獲取特定基因序列，從基因文庫中可以篩選出目標基因，人工合成法則可以直接合成所需的基因序列。這些方法均可用于體外獲取OSNL，C正確；

D、實驗中涉及將OSNL基因?qū)牒谟痣u胚成纖維細胞（CEFs）并誘導其重編程為iPS細胞，這需要使用基因工程技術；同時，iPS細胞的培養(yǎng)和分化也需要動物細胞培養(yǎng)技術，另外還需要胚胎培養(yǎng)技術，不需要動物細胞核移植，D錯誤。

故選AD。20.細菌中的蛋白激酶Y能感受外界環(huán)境變化從而調(diào)控細菌的生長。研究人員欲利用無縫連接技術將Y基因（編碼蛋白激酶Y)與綠色熒光蛋白(GFP)基因拼接成Y-GFP融合基因，并表達出Y-GFP融合蛋白，以分析蛋白激酶Y的功能。圖1為無縫連接技術，T5核酸外切酶能沿5'→3'方向降解DNA單鏈；圖2為Y基因、GFP基因及Y-GFP融合基因示意圖。下列說法錯誤的是（）A.T5核酸外切酶可破壞DNA中的磷酸二酯鍵B.圖1中③過程所需酶是DNA聚合酶、DNA連接酶C.為完成Y基因、GFP基因的連接需在引物P2、P3的5'端添加對應的堿基序列D.去掉Y基因的終止子，融合基因即可表達出Y-GFP融合蛋白【答案】CD【分析】基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的篩選和獲?。?）基因表達載體的構(gòu)建（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞（4）目的基因的檢測與鑒定【詳解】A、根據(jù)題意可知T5核酸外切酶能沿5'→3'方向降解DNA單鏈，所以可推測T5核酸外切酶可破壞DNA中的磷酸二酯鍵，A正確；B、圖1中③過程中有DNA鏈的延伸，也存在DNA鏈的連接過程，所需酶是DNA聚合酶、DNA連接酶，B正確；C、DNA擴增過程中，Y基因的模板鏈是圖示Y基因的下鏈，所以應以P1為引物，GFP基因的模板鏈是圖示GFP基因的上鏈，所以應以P4為引物，所以為完成Y基因、GFP基因的連接需在引物P1、P4的5'端添加對應的堿基序列，C錯誤；D、從構(gòu)建好的重組質(zhì)粒上看，GFP基因位于目的基因下游，若構(gòu)建Y基因與GFP基因的融合基因時Y基因可以編碼終止密碼子，核糖體移動到終止密碼子多肽鏈就斷開，蛋白GFP也就不能被翻譯出來，所以構(gòu)建Y基因與GFP基因的融合基因時，也應將Y基因中編碼終止密碼子的序列刪除，D錯誤。故選CD。三、非選擇題：本題共5小題，共55分。21.賴氨酸是一種必需氨基酸，在玉米中含量較低，玉米中賴氨酸的代謝過程如圖。（1）天冬氨酸與賴氨酸在結(jié)構(gòu)上的差別是______不同。氨基酸之間能夠形成_________等,從而使得肽鏈能盤曲、折疊,形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)分子（2）玉米中賴氨酸含量升高后會抑制酶①的活性、從而降低賴氨酸的生成量，這種調(diào)節(jié)機制屬于___________________（填“正反饋”或“負反饋”）調(diào)節(jié)。據(jù)圖分析，通過抑制________________(填圖中酶的序號)的活性可提高玉米中賴氨酸的含量。（3）科研人員通過蛋白質(zhì)工程改造酶①、減弱了賴氨酸對酶①活性的抑制、使玉米中賴氨酸含量升高。蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，以__________作為基礎。在評價各種食物中蛋白質(zhì)成分的營養(yǎng)價值時，人們格外注重其中賴氨酸等必需氨基酸的種類和含量，原因是____________?！敬鸢浮浚?）①.側(cè)鏈基團(R基)②.氫鍵（2）①.負反饋②.②④（3）①.蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關系②.必需氨基酸人體不能合成，只能從食物中獲得【分析】蛋白質(zhì)工程的過程為：預期蛋白質(zhì)功能→設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有氨基酸序列→找到對應的脫氧核苷酸序列（基因）?！窘馕觥浚?）不同氨基酸的區(qū)別在于側(cè)臉基團R基的不同。氨基酸之間能夠形成氫鍵等,從而使得肽鏈能盤曲、折疊,形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)分子。（2）玉米中賴氨酸含量升高后會抑制酶①的活性、從而降低賴氨酸的生成量，這種調(diào)節(jié)機制屬于負反饋調(diào)節(jié)。分析題圖可知，酶③能催化中間產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為賴氨酸，賴氨酸在酶④的催化作用下形成酵母氨酸，而酶②能催化中間產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為高絲氨酸，因此通過抑制酶②④的活性可提高玉米中賴氨酸的含量。（3）蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關系為基礎。必需氨基酸必須從食物中獲取，本身不能合成或轉(zhuǎn)化，當攝入的必需氨基酸種類、含量不足時，會造成營養(yǎng)的缺乏。22.自生固氮菌是土壤中能固定空氣中N2的細菌，將玉米種子用自生固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量?？蒲腥藛T進行了如圖的操作，以從土壤中分離得到自生固氮菌。（1）相對于一般微生物培養(yǎng)基，本實驗中所用培養(yǎng)基成分上的特點是__________________；培養(yǎng)基乙相對于培養(yǎng)基甲需額外添加___________________。用培養(yǎng)基甲擴大培養(yǎng)時需置于搖床上進行，目的是________________以及充分利用培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)。（2）用移液器取0.1mL菌液接種到培養(yǎng)基乙上用涂布器進行涂布，涂布前需要對涂布器進行_____________（填“干熱”“濕熱”或“灼燒”）滅菌；涂布后、待____________________，再將平板進行倒置并培養(yǎng)。（3）根據(jù)圖示結(jié)果推測，每毫升培養(yǎng)基甲中微生物數(shù)為__________________個。一般情況下，用該法測得的數(shù)目比培養(yǎng)基甲中微生物實際數(shù)目___________（填“偏大”“偏小”或“相同”)，原因是_______________。【答案】（1）①.不添加氮源②.凝固劑（瓊脂）③.增加培養(yǎng)基中O2（和N2）的含量（2）①.灼燒②.涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收（3）①.1.7×108②.偏?、?當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只有一個菌落【分析】微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！窘馕觥浚?）自生固氮菌能夠固定空氣中的氮氣，所以其培養(yǎng)基成分上的特點是無氮源（因為它不需要從培養(yǎng)基中獲取氮源，能自己固定空氣中的N2）；培養(yǎng)基甲用于擴大培養(yǎng)，培養(yǎng)基乙用于分離單菌落，從擴大培養(yǎng)到分離單菌落，培養(yǎng)基乙相對于培養(yǎng)基甲需額外添加瓊脂（瓊脂是凝固劑，使液體培養(yǎng)基變?yōu)楣腆w培養(yǎng)基，便于分離單菌落）。用培養(yǎng)基甲擴大培養(yǎng)時置于搖床上進行，目的是增加溶氧量（搖床可以使菌液與空氣充分接觸，增加溶氧量，滿足微生物有氧呼吸對氧氣的需求）以及充分利用培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)。（2）用移液器取0.1mL菌液接種到培養(yǎng)基乙上用涂布器進行涂布，涂布前需要對涂布器進行灼燒滅菌（灼燒滅菌能有效殺死涂布器上的微生物，防止雜菌污染）。涂布后，待菌液被培養(yǎng)基吸收（若菌液未被吸收就倒置培養(yǎng)，菌液會流動，影響菌落的形成和分布），再將平板進行倒置并培養(yǎng)。（3）首先計算平均菌落數(shù)(168+175+167)÷3=170個，菌液稀釋倍數(shù)為105，取0.1mL菌液涂布，所以每毫升培養(yǎng)基甲中微生物數(shù)為（170÷0.1）×105=1.7×108個。一般情況下，用該法測得的數(shù)目比培養(yǎng)基甲中微生物實際數(shù)目偏小。原因是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落（所以統(tǒng)計的菌落數(shù)會比實際的微生物細胞數(shù)少）。23.一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗原決定簇只能刺激機體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細胞制備抗p72的單克隆抗體（簡稱單抗）、也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。（1）培養(yǎng)骨髓瘤細胞時，氣體環(huán)境中CO2作用是_________________。B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞后，篩選單一類型的雜交瘤細胞的方法是__________________，該過程篩選得到的雜交瘤細胞的特點是____________________。（2）注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對___________（填“單抗”或“多抗”）純度的影響大，原因是________________。（3）研究人員獲得三種抗p72單抗A、B、C,并用雙抗體夾心法定量檢測抗原p72,檢測過程如圖，有色產(chǎn)物量可反映抗原含量。用一種單抗同時作固相抗體和酶標抗體定量檢測抗原效果較差，原因是____________。為檢測單抗A、B、C之間哪種組合方式更適用于雙抗體夾心法，科研人員至少需要設置_____________組實驗,檢測并比較各組實驗的有色產(chǎn)物量?！敬鸢浮浚?）①.維持培養(yǎng)液的pH②.克隆化培養(yǎng)和抗體檢測③.既能迅速大量增殖又能產(chǎn)生所需抗體（2）①.多抗②.制備單抗的過程中需要經(jīng)過篩選，而多抗從血清中直接提取，后者受抗原純度影響大（3）①.一種單抗只能與抗原表面的一種抗原決定簇結(jié)合，該單抗作為固相抗體與抗原結(jié)合后，會影響同種單抗構(gòu)成的酶標抗體與抗原結(jié)合②.6（或六）【分析】單克隆抗體的制備：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應的B淋巴細胞。（2）獲得雜交瘤細胞：①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。（4）將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取?！窘馕觥浚?）動物細胞培養(yǎng)時的氣體條件為95%空氣＋5%CO2，5%CO2的作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH。B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞后，篩選單一類型的雜交瘤細胞的方法是進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，該過程篩選得到的雜交瘤細胞的特點是既能迅速大量增殖又能產(chǎn)生所需抗體。（2）制備單抗的過程中需要經(jīng)過篩選，而多抗從血清中直接提取，不需要進行篩選，抗原純度越高，產(chǎn)生的多抗純度越高，因此注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對多抗純度的影響大。（3）用一種單抗同時作固相抗體和酶標抗體定量檢測抗原效果較差，原因是一種單抗只能與抗原表面的一種抗原決定簇結(jié)合，該單抗作為固相抗體與抗原結(jié)合后，會影響同種單抗構(gòu)成的酶標抗體與抗原結(jié)合。為檢測單抗A、B、C之間哪種組合方式更適用于雙抗體夾心法，從A、B、C三個單抗中任選2個進行組合，共有=6種組合方式，因此至少需要設置6組實驗。24.研究發(fā)現(xiàn)，雌果蠅在胚胎時期會切除dsx基因內(nèi)部序列N轉(zhuǎn)錄出的mRNA片段，而雄果蠅無此切除功能。蓖麻毒素A(RTA)是一種能引起果蠅死亡的蛋白質(zhì)，科研人員利用RTA基因和序列N構(gòu)建N-RTA基因，研發(fā)雌性特異性致死基因系統(tǒng)。dsx和RTA基因結(jié)構(gòu)如圖，stop表示終止密碼子對應的DNA序列。（1）啟動子的作用是________________。圖中X、Y、Z代表堿基對數(shù)目，若X=20,Y=80,Z=50,則自然狀態(tài)下果蠅中dsx基因表達產(chǎn)物分子量較大的是_____________（填“雌果蠅”或“雄果蠅”)，雌雄果蠅的dsx基因表達產(chǎn)物最多相差_______個氨基酸。（2）為了獲得雌性特異性致死基因系統(tǒng)，在改造RTA基因時，序列N應插入_____________(填“位點1”或“位點2”),理由是_____________。（3）科研人員將N-RTA基因與質(zhì)粒重組后導入經(jīng)_____________處理的大腸桿菌中進行擴增，然后再導入果蠅。對重組質(zhì)粒進行擴增時用大腸桿菌而不用PCR,原因是_________________?！敬鸢浮浚?）①.RNA聚合酶識別和結(jié)合位點，驅(qū)動轉(zhuǎn)錄②.雌果蠅③.10（2）①.位點1②.插入位點1時，只有雌性果蠅能表達完整的RTA蛋白導致死亡；插入位點2時，無論雌性還是雄性果蠅均能表達完整的RTA蛋白導致死亡（3）①.Ca2+②.PCR不能擴增出環(huán)狀DNA分子【分析】基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定?！窘馕觥浚?）啟動子的作用是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。據(jù)圖可知雌果蠅在胚胎時期會切除dsx基因內(nèi)部序列N轉(zhuǎn)錄出的mRNA片段，而雄果蠅無此切除功能，所以雌果蠅切除N序列的同時會把第一個stop點切除，即雌果蠅會把Z段基因表達，而雄果蠅的基因表達會在第一個stop點停止，即只表達X段基因，Z＞X，所以自然狀態(tài)下果蠅中dsx基因