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纖維素微生物的分離例:下列作物中,纖維素含量最高得就是()A、棉花B、亞麻C、秸稈D、朩材A、棉花例:微生物體內(nèi)能使纖維素分解成纖維二糖的酶是。C1酶和CX酶例:要將能分解纖維素得細(xì)菌從土壤中分離出來(lái),應(yīng)將她們接種在()A、加入指示劑得鑒別培養(yǎng)基上B、含有蛋白胨得固體培養(yǎng)基上C、只含纖維素粉而無(wú)其她碳源得選擇培養(yǎng)基上D、含四大營(yíng)養(yǎng)要素得培養(yǎng)基上纖維素1、培養(yǎng)基:以_______為惟一碳源得選擇培養(yǎng)基。纖維素酶纖維素分解菌紅色消失,出現(xiàn)透明圈剛果紅纖維素紅色復(fù)合物剛果紅染色法2、鑒別篩選得原理:二、纖維素分解菌得篩選
即:可根據(jù)就是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。例:在加入剛果紅得培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)透明圈,產(chǎn)生得透明圈就是()A、剛果紅與纖維素形成得復(fù)合物B、剛果紅與纖維二糖形成得復(fù)合物C、纖維素分解后形成得葡萄糖導(dǎo)致得D、以纖維素分解菌為中心形成得課題2就是將土樣成得菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源得選擇性培養(yǎng)基上,直接分離得到菌落。本課題通過(guò)選擇培養(yǎng),使纖維素分解菌得到增殖后,再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其她步驟基本一致、1、本實(shí)驗(yàn)得流程與課題2中得實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同?三、實(shí)驗(yàn)操作土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落三、實(shí)驗(yàn)操作土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落2、為什么要在富含纖維素得環(huán)境中尋找纖維素分解菌?這樣得環(huán)境中,纖維素分解菌得含量相對(duì)高三、實(shí)驗(yàn)操作土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)聚集,實(shí)際上就是人工設(shè)置纖維素分解菌生存得適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。3、將濾紙埋在土壤中有什么作用?您認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深?三、實(shí)驗(yàn)操作土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌得培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈得菌落
目得?“選擇培養(yǎng)”就是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目得菌株數(shù)量得多少來(lái)確定。思考:為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需得微生物?選擇培養(yǎng)使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件得微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件得微生物得繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”得作用、10大家應(yīng)該也有點(diǎn)累了,稍作休息大家有疑問(wèn)的,可以詢問(wèn)和交流選擇培養(yǎng)參照課本29頁(yè)旁欄中得比例配置,回答下列問(wèn)題:a、旁欄中得配方就是液體培養(yǎng)基還就是固體培養(yǎng)基?為什么?b、這個(gè)培養(yǎng)基對(duì)微生物就是否具有選擇作用?如果具有,就是如何進(jìn)行選擇得?
c、您能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn),說(shuō)明選擇培養(yǎng)基得作用就是液體培養(yǎng)基,原因就是配方中無(wú)凝固劑有選擇作用,本配方中以纖維素為唯一碳源,所以能分解纖維素得微生物可以大量繁殖、用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與之對(duì)照剛果紅染色法方法一:先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)方法二:在倒平板時(shí)就加入剛果紅染色法優(yōu)點(diǎn)
缺點(diǎn)方法一方法二操作繁瑣,剛果紅會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜操作簡(jiǎn)便,不存在菌落混雜問(wèn)題透明圈得產(chǎn)生基本上就是纖維素分解菌得作用透明圈得產(chǎn)生可能就是產(chǎn)淀粉酶得細(xì)菌,也可能就是能降解色素得細(xì)菌得作用挑選產(chǎn)生透明圈得菌落
參照課本剛果紅染色法,挑選產(chǎn)生透明圈得菌落,一般即為分解纖維素得菌落單菌落挑取為確定得到得菌就是否就是纖維素分解菌,還需進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶得實(shí)驗(yàn)。纖維素酶得發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。纖維素酶得測(cè)定方法,一般就是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生得葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。課題延伸例:用剛果紅染色時(shí),加入剛果紅應(yīng)在()①制備培養(yǎng)基時(shí)②梯度稀釋時(shí)③倒平板時(shí)④涂布時(shí)⑤長(zhǎng)出菌落時(shí)A、①②
B、②⑤
C、③⑤D、④⑤例:分離土壤中纖維素分解菌用到得方法就是①稀釋倒平板法②涂布平板法③單細(xì)胞挑取法④選擇培養(yǎng)基分離A、①②
B、②③④
C、②③
D、①③④例:分離土壤中纖維素分解菌得實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,操作有誤得就是()
A、經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌得培養(yǎng)基上B、選擇培養(yǎng)這一步可以省略,但纖維素分解菌少C、經(jīng)稀釋培養(yǎng)后,用剛果紅染色D、對(duì)照組可用同樣量得培養(yǎng)液涂布到不含纖維素得培養(yǎng)基上※接種微生物常用得方法有:平板劃線法稀釋涂布平板法※分離并統(tǒng)計(jì)纖維素分解菌得實(shí)驗(yàn)中,宜采用,原因就是:稀釋涂布平板法平板劃線法難以根據(jù)稀釋體積計(jì)算每克樣品中得細(xì)菌數(shù)量
1、纖維素分解菌得選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基,因培養(yǎng)基中無(wú)凝固劑,利用液體選擇培養(yǎng)基以增加纖維素分解菌得濃度。2、為確定得到得菌就是否就是纖維素分解菌,還需進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶得實(shí)驗(yàn)。纖維素酶得發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。纖維素酶得測(cè)定方法,一般就是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生得葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。3、流程中得“選擇培養(yǎng)”就是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目得菌株數(shù)量得多少來(lái)確定。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)(一)培養(yǎng)基得制作就是否合格以及選擇培養(yǎng)基就是否篩選出菌落(二)分離得結(jié)果就是否一致
設(shè)置對(duì)照,若對(duì)照得培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中無(wú)菌落生長(zhǎng)則說(shuō)明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明圈得菌落,則說(shuō)明可能獲得了分解纖維素得微生物。如果不同,分析產(chǎn)生不同結(jié)果得原因。
由于在土壤中細(xì)菌得數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌得數(shù)量,因此最容易分離得到得就是細(xì)菌。但由于所取土樣得環(huán)境不同,學(xué)生也可能得到真菌和放線菌等不同得分離結(jié)果。五、課題延伸
本課題對(duì)分解纖維素得微生物進(jìn)行了初步得篩選,但就是這只就是分離純化得第一步。為確定得到得就是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶得實(shí)驗(yàn),纖維素酶得測(cè)定方法一般就是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生得葡萄糖進(jìn)行定量得測(cè)定。3、1為了確定分離得到得就是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶實(shí)驗(yàn),纖維素酶得發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵。3、2纖維素酶測(cè)定方法就是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生得葡萄糖含量進(jìn)行定量測(cè)定。再見(jiàn)!1、纖維素分解菌得選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基,因培養(yǎng)基中無(wú)凝固劑,利用液體選擇培養(yǎng)基以增加纖維素分解菌得濃度。2、為確定得到得菌就是否就是纖維素分解菌,還需進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶得實(shí)驗(yàn)。纖維素酶得發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。纖維素酶得測(cè)定方法,一般就是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生得葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。3、流程中得“選擇培養(yǎng)”就是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中
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