高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1河北省邯鄲市六校聯(lián)考2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期期中考試內(nèi)容與范圍：選必3第一章～第三章第2節(jié)全卷滿分：100分；考試時(shí)間：75分鐘注意事項(xiàng)：1．答題前，先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在試卷和答題卡上，并將條形碼粘貼在答題卡上的指定位置。2．請按題號順序在答題卡上各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，寫在試卷、草稿紙和答題卡上的非答題區(qū)域均無效。3．選擇題用2B鉛筆在答題卡上把所選答案的標(biāo)號涂黑，非選擇題用黑色簽字筆在答題卡上作答，字體工整，筆跡清楚。4．考試結(jié)束后，請將試卷和答題卡一并上交一、選擇題（本題共13小題，每題2分，共26分，在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)符合題目要求。）1.葡萄酒的制作離不開酵母菌。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.無氧條件下酵母菌能存活但不能大量繁殖B.自然發(fā)酵制作葡萄酒時(shí)起主要作用的菌是野生型酵母菌C.葡萄酒的顏色是葡萄皮中的色素進(jìn)入發(fā)酵液形成的D.制作過程中隨著發(fā)酵的進(jìn)行發(fā)酵液中糖含量增加【答案】D〖祥解〗果酒制備的菌種是酵母菌，條件：溫度18-25℃，先通氣后密閉。通氣階段，酵母菌有氧呼吸獲得能量大量繁殖，密閉階段發(fā)酵產(chǎn)生酒精。pH最好是弱酸性?！驹斘觥緼、酵母菌進(jìn)行有氧呼吸獲得能量大量繁殖，無氧條件下，發(fā)酵產(chǎn)生酒精，故無氧條件下酵母菌能進(jìn)行無氧呼吸存活但不能大量繁殖，A正確；B、自然發(fā)酵制作葡萄酒時(shí)起主要作用的菌是葡萄皮上的野生型酵母菌，B正確；C、葡萄皮中的色素進(jìn)入發(fā)酵液使葡萄酒呈現(xiàn)顏色，C正確；D、制作過程中隨著發(fā)酵的進(jìn)行發(fā)酵液中糖含量減少，D錯(cuò)誤。故選D。2.下列操作能達(dá)到滅菌目的的是（）A.用免洗酒精凝膠擦手 B.制作泡菜前用開水燙洗容器C.在火焰上灼燒接種環(huán) D.防疫期間用石炭酸噴灑教室【答案】C〖祥解〗滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等?！驹斘觥緼、用免洗酒精凝膠擦手屬于消毒，A錯(cuò)誤；B、制作泡菜前用開水燙洗容器屬于消毒過程，B錯(cuò)誤；C、在火焰上灼燒接種環(huán)能達(dá)到滅菌目的，C正確；D、防疫期間用石炭酸噴灑教室，屬于消毒，D錯(cuò)誤。故選C。3.“白菜-甘藍(lán)”的培養(yǎng)過程如圖所示，下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A.雜種細(xì)胞與愈傷組織細(xì)胞中遺傳物質(zhì)相同B.誘導(dǎo)原生質(zhì)體的融合可用PEG或滅活的病毒C.獲取原生質(zhì)體可用纖維素酶和果膠酶處理體細(xì)胞D.愈傷組織形成白菜-甘藍(lán)幼苗需添加一定量的植物激素【答案】B〖祥解〗分析題圖：圖示表示“白菜一甘藍(lán)”的培育過程，首先需要用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細(xì)胞壁；其次需要用物理（如電激、離心、振動）或化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將雜種細(xì)胞培養(yǎng)成雜種植株，包括脫分化和再分化兩個(gè)重要過程?！驹斘觥緼、愈傷組織細(xì)胞由雜種細(xì)胞脫分化而來，遺傳物質(zhì)未發(fā)生變化，A正確；B、誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合不能用滅活的病毒，B錯(cuò)誤；C、原生質(zhì)體是植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁之后的結(jié)構(gòu)，植物細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠，故可用纖維素酶和果膠酶對白菜和甘藍(lán)的體細(xì)胞進(jìn)行去壁處理，C正確；D、再分化培養(yǎng)基需要加入一定量的生長素和細(xì)胞分裂素，D正確。故選B。4.研究表明，髓系細(xì)胞觸發(fā)受體2（TREM2）是一種免疫抑制受體，在腫瘤免疫逃逸中發(fā)揮重要作用。因此，TREM2抗體藥物有望提高腫瘤免疫療法的療效。下圖為TREM2單克隆抗體的制備流程圖，下列說法正確的是（）A.步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗體的雜交瘤細(xì)胞B.經(jīng)步驟②誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞既能分泌TREM2抗體又可無限增殖C.步驟③和④的培養(yǎng)孔中均含有TREM2蛋白，依據(jù)的原理都是抗原一抗體雜交D.步驟⑥和植物組織培養(yǎng)均需使用二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)【答案】A〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：（1）制備產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體；（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取?！驹斘觥緼、步驟①向小鼠注射TREM2蛋白，讓小鼠發(fā)生免疫反應(yīng)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞；步驟⑤向小鼠腹腔注射雜交瘤細(xì)胞，目的是獲得單克隆抗體，A正確；B、經(jīng)步驟②誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞只有雜交瘤細(xì)胞才能既能分泌TREM2抗體又可無限增殖，B錯(cuò)誤；C、步驟三是特定培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞，步驟4是抗原抗體雜交，C錯(cuò)誤；D、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中二氧化碳用于調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH值，而植物組織培養(yǎng)的過程中不需要二氧化碳培養(yǎng)箱，D錯(cuò)誤。故選A。5.下列有關(guān)哺乳動物的受精卵形成過程的敘述正確的是（）①獲能精子與卵子相遇時(shí)釋放多種酶②獲能精子與卵子相遇時(shí)釋放的酶可溶解透明帶、卵細(xì)胞膜③卵子與精子結(jié)合前已完成減數(shù)分裂Ⅱ④精子和卵子的細(xì)胞核經(jīng)過相關(guān)生理過程，分別形成雄原核和雌原核⑤精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，透明帶迅速發(fā)生生理反應(yīng)，阻止后來的精子進(jìn)入透明帶A.①②⑤ B.②③④ C.①④⑤ D.②④⑤【答案】C〖祥解〗（1）受精作用過程：a、頂體反應(yīng)：精子釋放頂體酶溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)，穿越放射冠；b、透明帶反應(yīng)：頂體酶可將透明帶溶出孔道，精子穿入，在精子觸及卵黃膜的瞬間阻止后來精子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)（它是防止多精子入卵受精的第一道屏障）；c、卵細(xì)胞膜反應(yīng)：精子外膜和卵黃膜融合，精子入卵后，卵黃膜會拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)的過程（它是防止多精子入卵受精的第二道屏障）；d、精子尾部脫落，原有核膜破裂形成雄原核，同時(shí)卵子完成減二分裂，形成雌原核；e、雌、雄原核融合形成合子。（2）胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造?！驹斘觥竣倬优c卵子接觸，釋放多種酶，以溶解卵細(xì)胞膜外的結(jié)構(gòu)（如透明帶等），①正確；②獲能精子與卵子相遇時(shí)釋放的酶可溶解放射冠、透明帶，②錯(cuò)誤；③卵子與精子結(jié)合前已完成減數(shù)分裂Ⅰ，③錯(cuò)誤；④受精過程中，精子的核變成雄原核、卵子的核成為雌原核，④正確；⑤透明帶反應(yīng)是指當(dāng)精子越過放射冠，進(jìn)入透明帶并接觸卵細(xì)胞膜的瞬間，卵子發(fā)出指令，產(chǎn)生阻止后續(xù)的精子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)，⑤正確。故選C。6.下列有關(guān)哺乳動物早期胚胎發(fā)育的敘述正確的是（）A.動物排出的卵子成熟程度都一樣，都需要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，到MⅡ期時(shí)，才具備與精子受精的能力B.受精卵在輸卵管內(nèi)進(jìn)行卵裂時(shí)，細(xì)胞數(shù)量增加，但胚胎總體積并不增加C.受精卵發(fā)育為桑葚胚的過程是在透明帶內(nèi)完成的，孵化后進(jìn)入囊胚期D.胚胎發(fā)育至原腸胚時(shí)期即開始了細(xì)胞分化，隨后發(fā)育形成三個(gè)胚層【答案】B〖祥解〗卵細(xì)胞形成過程，其中減數(shù)第一次分裂是在雌性動物排卵前后完成的，場所在卵巢；減數(shù)第二次分裂是在受精過程中完成的，場所在輸卵管中;受精作用的標(biāo)志：在卵黃膜和透明帶之間的間隙可以觀察到兩個(gè)極體（一個(gè)是第一極體，還有一個(gè)是第二極體）?！驹斘觥緼、動物排出的卵子成熟程度不同，有的排出的是初級卵母細(xì)胞，有的排出是次級卵母細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、形成的受精卵在輸卵管內(nèi)開始進(jìn)行卵裂，卵裂過程中，每個(gè)細(xì)胞的體積不斷縮小，細(xì)胞的總體積基本不變或略有縮小，故卵裂過程中細(xì)胞數(shù)量增加但胚胎總體積基本不增加，B正確；C、孵化是指囊胚從透明帶出來，孵化后進(jìn)入原腸胚階段，C錯(cuò)誤；D、細(xì)胞分化開始于囊胚時(shí)期，D錯(cuò)誤。故選B。7.下圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡易流程圖，有關(guān)敘述正確的是（）A.后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質(zhì)共同決定B.過程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體C.過程②常使用顯微操作去核法對受精卵進(jìn)行處理D.過程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)至原腸胚后移植【答案】B〖祥解〗分析圖解：圖示過程為體細(xì)胞克隆過程，取乙牛體細(xì)胞，對處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞去核，然后進(jìn)行細(xì)胞核移植；融合后的細(xì)胞激活后培養(yǎng)到早期胚胎，再進(jìn)行胚胎移植，最終得到克隆牛?！驹斘觥緼、后代丁的細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)來自甲，細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)來自于乙牛，則丁的遺傳性狀由甲和乙的遺傳物質(zhì)共同決定，A錯(cuò)誤；B、動物細(xì)胞培養(yǎng)中需要提供95%空氣（保證細(xì)胞的有氧呼吸）和5%CO2（維持培養(yǎng)液的pH）的混合氣體，B正確；C、過程②常使用顯微操作去核法對卵母細(xì)胞進(jìn)行處理，C錯(cuò)誤；D、過程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)至囊胚或桑椹胚后移植，D錯(cuò)誤。故選B。8.如圖是科學(xué)家采用不同方法培育良種牛的過程，a~h為操作過程。下列說法正確的是（）A.A、B、C牛均為雄性B.圖中d、f均代表胚胎移植，它是胚胎工程的最終技術(shù)環(huán)節(jié)C.c要注意將桑椹胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割D.圖中涉及體外受精、動物細(xì)胞核移植、胚胎分割、胚胎移植等多項(xiàng)技術(shù)【答案】B〖祥解〗題圖分析:圖示是科學(xué)家采用不同方法培育良種牛的過程，其中a表示體外受精、b是胚胎發(fā)育過程、c是胚胎分割、d和f表示胚胎移植、e和g是妊娠。b過程形成的是囊胚，其中①是滋養(yǎng)層細(xì)胞、②是囊胚腔、③是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞?！驹斘觥緼、依據(jù)圖示信息，題目中未提供精子的染色體核型，所以無法判斷A、B、C牛的性別，A錯(cuò)誤；B、圖d和f表示胚胎移植，實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移，它是胚胎工程的最終技術(shù)環(huán)節(jié)，B正確；C、要注意將囊胚期胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，C錯(cuò)誤；D、圖中未涉及動物細(xì)胞核移植技術(shù)，D錯(cuò)誤。故選B。9.下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”、“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A.可將提取到的白色絲狀物與二苯胺試劑充分混勻，沸水浴加熱后變藍(lán)B.PCR反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶可在延伸過程中起作用C.瓊脂糖溶液混合的核酸染料與DNA分子結(jié)合，便于在紫外燈下觀察D.DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中可利用DNA不溶于酒精而某些蛋白質(zhì)溶于酒精來粗提DNA【答案】A〖祥解〗DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精；鑒定DNA時(shí)，需要先將DNA溶解在NaCl溶液中，再與二苯胺溶液混合，并在水浴加熱條件下呈現(xiàn)藍(lán)色；耐高溫的DNA聚合酶在延伸環(huán)節(jié)時(shí)進(jìn)行子鏈的合成?！驹斘觥緼、將絲狀物溶于2mol/L的5mL的NaCl溶液中，然后向試管中加入4mL的二苯胺試劑，沸水浴加熱5min，試管冷卻后溶液呈現(xiàn)藍(lán)色，A錯(cuò)誤；B、PCR反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶在延伸過程中根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則合成新的DNA鏈，B正確；C、瓊脂糖溶液混合的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，C正確；D、DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中利用DNA不溶于酒精、但某些蛋白質(zhì)溶于酒精的原理，可以初步粗提取DNA，D正確。故選A。10.下圖表示PCR過程中某個(gè)階段反應(yīng)體系的情況，①②③④表示相關(guān)物質(zhì)，L、R表示方向。下列敘述正確的是（）A.②鏈從L到R的方向?yàn)?′→5′，①②鏈均可作為子鏈合成的模板B.PCR過程需要通過解旋酶斷開氫鍵，且為邊解旋邊復(fù)制C.以1個(gè)DNA為模板經(jīng)3次循環(huán)需消耗8個(gè)引物③D.物質(zhì)③的5′端添加了某序列，至少需經(jīng)2次循環(huán)才可獲得該序列的雙鏈產(chǎn)物【答案】D〖祥解〗PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）：過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶高溫條件下氫鍵可自動解開）：低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。【詳析】A、根據(jù)DNA分子中兩條鏈的反向平行關(guān)系可判斷，②鏈從L到R的方向?yàn)?′→3′，圖中①②鏈均可作為子鏈合成的模板，A錯(cuò)誤；B、PCR過程需要通過高溫處理使雙鏈中氫鍵斷裂成為單鏈，而后通過降溫使子鏈和引物之間形成雙鏈結(jié)構(gòu)，而后調(diào)節(jié)溫度是子鏈沿著引物的3’端延伸，B錯(cuò)誤；C、以1個(gè)DNA為模板經(jīng)3次循環(huán)產(chǎn)生的DNA分子數(shù)目為23=8，則需消耗引物③的數(shù)目為（8×2-2）÷2=7，C錯(cuò)誤；D、物質(zhì)③的5′端添加了某序列，至少需經(jīng)2次循環(huán)才可獲得以該序列為模板合成的雙鏈DNA產(chǎn)物，D正確。故選D。11.光敏色素基因在調(diào)節(jié)作物生長發(fā)育中具有重要作用。為探討玉米中光敏色素基因A（含大約256個(gè)堿基對）在棉花種質(zhì)資源創(chuàng)制中的利用價(jià)值，研究人員將A基因轉(zhuǎn)入到棉花中，對棉花受體細(xì)胞進(jìn)行檢測，并通過電泳技術(shù)分析結(jié)果。該過程所用質(zhì)粒與含光敏色素基因的DNA上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖甲、乙所示，電泳檢測結(jié)果如圖丙。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.為構(gòu)建正確連接的表達(dá)載體，應(yīng)選用BamHI和HindⅢ這兩種限制酶B.PCR擴(kuò)增目的基因過程中每次循環(huán)都要經(jīng)歷一次升溫和兩次降溫C.表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞后，可用含四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行初步篩選D.由圖丙電泳結(jié)果可知，1、2、3、4號轉(zhuǎn)基因棉花均培育成功【答案】C〖祥解〗基因工程的基本操作程序是：目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定?！驹斘觥緼、由圖可知：構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)選用BclⅠ和HindⅢ這兩種限制酶，若用BamHⅠ，則目的基會因?yàn)楫a(chǎn)生相同的末端而出現(xiàn)自身環(huán)化的現(xiàn)象，A錯(cuò)誤；B、PCR反應(yīng)過程中每次循環(huán)都要經(jīng)歷目的各不相同的兩次升溫（第一次使目的基因變性，第二次使目的基因延伸）和一次降溫（使目的基因復(fù)性），B錯(cuò)誤；C、在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中，卡那霉素抗性基因被破壞，而四環(huán)素抗性基因在目的基因表達(dá)載體中存在，因此，在表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞后，可用含四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行初步篩選，而后在通過含有卡那霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行再次篩選，篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞，C正確；D、光敏色素基因A含大約256個(gè)堿基對，由圖丙電泳結(jié)果可知，1、2、3、4號均導(dǎo)入光敏色素基因A成功，但轉(zhuǎn)基因棉花是否培育成功還需要進(jìn)行生物個(gè)體水平上的鑒定，D錯(cuò)誤。故選C。12.農(nóng)桿菌能感染雙子葉植物而通常不感染單子葉植物，是因?yàn)槭軅碾p子葉植物能分泌某些酚類物質(zhì)誘導(dǎo)Ti質(zhì)粒中的Vir基因區(qū)段表達(dá)，該表達(dá)產(chǎn)物能誘導(dǎo)Ti質(zhì)粒產(chǎn)生一條新的T-DNA單鏈分子。此單鏈分子可進(jìn)入植物細(xì)胞并整合到染色體。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.可以通過在傷口施加相關(guān)酚類物質(zhì)而使單子葉植物也成為農(nóng)桿菌易感植物B.農(nóng)桿菌感染宿主細(xì)胞的原理與肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的原理類似C.使用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時(shí)，目的基因應(yīng)插入Ti質(zhì)粒的T-DNA中D.合成新的T-DNA單鏈需要的DNA連接酶與限制酶，均在宿主細(xì)胞內(nèi)合成【答案】D〖祥解〗農(nóng)桿菌特點(diǎn)：易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T?DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T?DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上。【詳析】A、農(nóng)桿菌易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力，原因是多數(shù)單子葉植物細(xì)胞不能合成酚類化合物，可以通過在傷口施加相關(guān)酚類物質(zhì)而使單子葉植物也成為農(nóng)桿菌易感植物，A正確；B、農(nóng)桿菌感染宿主細(xì)胞是把它的T?DNA上，通過轉(zhuǎn)化作用，整合到植物細(xì)胞染色體的DNA上，其原理與肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的原理類似，都是基因重組，B正確；C、使用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時(shí)，T-DNA可將插入Ti質(zhì)粒T-DNA中的目的基因轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中，并能整合到染色體DNA上，C正確；D、Ti質(zhì)粒中的Vir基因區(qū)段在宿主細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)產(chǎn)物能誘導(dǎo)Ti質(zhì)粒產(chǎn)生一條新的T-DNA單鏈分子，而合成新的T-DNA單鏈不需要限制酶，需要DNA聚合酶、DNA連接酶等，因?yàn)橄拗泼傅淖饔檬亲R別DNA中的堿基序列，并在特定位點(diǎn)切割DNA分子，D錯(cuò)誤。故選D。13.DNA測序時(shí)，先將待測單鏈DNA模板、引物、有關(guān)酶、4種脫氧核苷三磷酸（dNTP，N代表A、T、C、G，能提供能量并作為DNA復(fù)制的原料）均加入4個(gè)試管中，再分別加入一定量的含放射性同位素標(biāo)記的ddNTP（ddGTP、ddATP、ddCTP、ddTTP）。不同于dNTP的是，ddNTP的五碳糖的3位不含羥基。在DNA合成時(shí)ddNTP隨機(jī)與dNTP競爭核苷酸鏈延長位點(diǎn)，并終止DNA的延伸，從而形成不同長度的一系列終止處帶有放射性同位素標(biāo)記的DNA鏈。下圖是DNA測序時(shí)得到含放射性標(biāo)記的子代DNA的電泳圖譜。下列相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A.反應(yīng)體系中的引物為單鏈，DNA聚合酶從引物的3'端連接脫氧核苷酸B.ddNTP終止子鏈延伸，其原理可能是其五碳糖3'位不含羥基，無法連接新的脫氧核苷酸C.圖中加入ddCTP的一組中，可以形成3種長度的子鏈D.圖中子代DNA的堿基序列是5'-GATCCGAAT-3'【答案】D〖祥解〗基因檢測是指通過檢測生物體中的DNA序列，以了解生物體基因狀況的技術(shù)手段。雙脫氧鏈終止法是DNA測序的基本方法，其原理是：核酸模板在核酸聚合酶、帶有3′-OH末端的單鏈核苷酸引物、四種dNTP存在的條件下復(fù)制或轉(zhuǎn)錄時(shí)，如果在反應(yīng)系統(tǒng)中分別引入單一種類的ddNTP（即2、3雙脫氧核苷三磷酸，在脫氧核糖的3′位置缺少一個(gè)羥基，故不能同后續(xù)的dNTP形成磷酸二酯鍵），只要ddNTP摻入鏈端，該鏈就停止延長，末端摻入dNTP的片段可繼續(xù)延長。【詳析】A、引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對的短單鏈核酸；PCR反應(yīng)體系中的引物為單鏈，DNA聚合酶從引物的3'端連接脫氧核苷酸，A正確；B、題干信息可知，ddNTP的五碳糖的3位不含羥基，在DNA合成時(shí)ddNTP隨機(jī)與dNTP競爭核苷酸鏈延長位點(diǎn)，并終止DNA的延伸，可見ddNTP終止子鏈延伸，其原理可能是其五碳糖的3'位不含羥基，無法連接新的脫氧核苷酸，B正確；C、在DNA合成時(shí)ddNTP隨機(jī)與dNTP競爭核苷酸鏈延長位點(diǎn)，并終止DNA的延伸，根據(jù)電泳圖譜可知，待測DNA的堿基序列中含有2個(gè)C（胞嘧啶），且C（胞嘧啶）不在DNA的末端，故利用上圖中待測DNA序列，加入ddCTP的一組中，可以形成34種長度的子鏈，除了題圖所示兩種長度的子鏈還包括完整的子鏈長度，C正確；D、ddNTP的3號碳上沒羥基，參與聚合反應(yīng)后無法與游離脫氧核苷酸形成磷酸二酯鍵，因此ddNTP一旦參與聚合反應(yīng)，則DNA單鏈延伸即終止，因此可知左上角的第一個(gè)G所在位置為3'端（第一位），依據(jù)圖中堿基的排序可知，圖中子代DNA的堿基序列是3'-GATCCGAAT-5'，D錯(cuò)誤。故選D。二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，有一項(xiàng)或多項(xiàng)是符合題目要求的，全部選對得3分，選對但不全的得1分，有錯(cuò)選的得0分。14.某種物質(zhì)A（一種含有C、H、N的有機(jī)物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解A。研究人員按照如圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解A的細(xì)菌菌株。圖中③將M中的菌液稀釋一定倍數(shù)后，取0.1mL涂布到平板上，初步估測搖瓶M中1mL菌液中細(xì)菌數(shù)為2.4×108個(gè)。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.實(shí)驗(yàn)時(shí)，淤泥及盛有培養(yǎng)基的搖瓶通常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌B.③接種方法為稀釋涂布平板法，涂布時(shí)用涂布器蘸取菌液均勻涂布于平板上C.乙平板中大小不同的菌落一定是分解菌分解能力不同導(dǎo)致的D.若乙平板上菌落數(shù)平均為240個(gè)，則菌液稀釋倍數(shù)為105【答案】ABC〖祥解〗微生物的培養(yǎng)與滅菌：培養(yǎng)基等常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，但取樣的淤泥不能滅菌，否則會殺死目標(biāo)菌種。

?選擇培養(yǎng)基：以物質(zhì)A為唯一碳源和氮源的培養(yǎng)基，可篩選出能降解A的細(xì)菌。固體培養(yǎng)基需添加瓊脂等凝固劑。

【詳析】A、要從淤泥中分離能高效降解A的細(xì)菌菌株，圖①是淤泥取樣稀釋，淤泥本身含有菌種，若對其進(jìn)行滅菌處理，就會殺死其中的目標(biāo)菌種，所以淤泥不能滅菌；而盛有培養(yǎng)基的搖瓶為了避免雜菌污染，通常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，A錯(cuò)誤；B、稀釋涂布平板法中，先將涂布器灼燒滅菌，冷卻后，取0.1mL稀釋后的菌液滴在培養(yǎng)基表面，再用涂布器均勻涂布，不是用涂布器蘸取菌液，B錯(cuò)誤；C、乙平板中大小不同的菌落說明分解菌對物質(zhì)A的分解能力不同，但是乙平板中可能還存在其他分解菌，也可能是不同分解菌所形成的菌落大小不同，C錯(cuò)誤；D、已知乙平板上長出的菌落數(shù)平均為240個(gè)，設(shè)稀釋倍數(shù)為a。搖瓶M中1mL菌液中細(xì)菌數(shù)為2.4×108個(gè)，每個(gè)平板上涂布的是0.1mL稀釋后的菌液。根據(jù)公式：每毫升原液中的細(xì)菌數(shù)=（平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)）÷涂布的菌液體積，可列出等式240×a÷0.1=2.4×108，a=105，D正確。故選ABC。15.抗體藥物偶聯(lián)物（ADC）是采用特定技術(shù)將具有生物活性的小分子藥物連接到單克隆抗體上，實(shí)現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞精準(zhǔn)的選擇性殺傷。ADC的結(jié)構(gòu)及其發(fā)揮作用的機(jī)理如下圖，有關(guān)敘述正確的是（）A.ADC實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)殺傷腫瘤細(xì)胞基礎(chǔ)是抗體與抗原特異性結(jié)合B.該腫瘤細(xì)胞死亡是在ADC誘導(dǎo)下細(xì)胞程序性被動死亡的過程C.將特定抗原注射到小鼠體內(nèi)，可以從小鼠血清中獲得單克隆抗體D.對特定抗原篩選出的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)可獲得單克隆抗體【答案】AD〖祥解〗分析題圖，抗體藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將具有生物活性的小分子藥物與單克隆抗體結(jié)合，被腫瘤細(xì)胞特異性識別，通過胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，導(dǎo)致溶酶體裂解，釋放藥物，實(shí)現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷?！驹斘觥緼、由于單克隆抗體的特異性強(qiáng)，能特異性識別抗原，因此可以把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體跟放射性同位素、藥物等相結(jié)合，借助單克隆抗體的定位導(dǎo)向作用將藥物定向帶到癌細(xì)胞，故ADC實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)殺傷腫瘤細(xì)胞的基礎(chǔ)是抗體與抗原特異性結(jié)合，A正確；B、抗體進(jìn)入細(xì)胞后，溶酶體裂解，釋放藥物，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，腫瘤細(xì)胞凋亡是細(xì)胞主動死亡的過程，存在基因的選擇性表達(dá)，B錯(cuò)誤；C、將特定抗原注射到小鼠體內(nèi)，可以從小鼠血清中獲得抗體，獲得的抗體可能有多種，不是單克隆抗體，C錯(cuò)誤；D、對特定抗原篩選出的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)可獲得單克隆抗體，該種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生所需抗體，D正確。故選AD。16.從牛卵巢采集卵母細(xì)胞進(jìn)行體外成熟培養(yǎng)，探究高溫對卵母細(xì)胞成熟的影響，結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的有（）A.選取發(fā)育狀態(tài)一致的卵母細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)B.體外培養(yǎng)卵母細(xì)胞時(shí)通常加入濕熱滅菌后的血清C.對采集的卵母細(xì)胞傳代培養(yǎng)以產(chǎn)生大量卵細(xì)胞D.體外培養(yǎng)時(shí)高溫提高了卵母細(xì)胞發(fā)育的成熟率【答案】BCD〖祥解〗在探究高溫對卵母細(xì)胞成熟的影響實(shí)驗(yàn)中，需要控制變量，選取發(fā)育狀態(tài)一致的卵母細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。血清可以為卵母細(xì)胞的培養(yǎng)提供營養(yǎng)物質(zhì)?！驹斘觥緼、選取發(fā)育狀態(tài)一致的卵母細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，這樣可以排除其他因素的干擾，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果是由溫度這一變量引起的，A正確；B、體外培養(yǎng)卵母細(xì)胞時(shí)通常加入血清，但是動物血清并不能進(jìn)行濕熱滅菌，否則會使其中部分有效成分失活，B錯(cuò)誤；C、卵母細(xì)胞不能進(jìn)行傳代培養(yǎng)，因?yàn)槁涯讣?xì)胞是生殖細(xì)胞，不具有連續(xù)分裂的能力，C錯(cuò)誤；D、由圖可知，高溫降低了卵母細(xì)胞發(fā)育的成熟率，而不是提高，D錯(cuò)誤。故選BCD。17.線粒體腦肌病是由線粒體DNA異常而引起的人類遺傳病，“三親嬰兒”技術(shù)的應(yīng)用可避免該遺傳病基因傳遞給子代，培育過程如下圖，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.該過程涉及細(xì)胞核移植、體外受精、胚胎移植等技術(shù)B.卵母細(xì)胞在MⅡ期與獲能后的精子受精C.“三親嬰兒”胚胎早期發(fā)育依次經(jīng)歷了受精卵、囊胚、桑葚胚、原腸胚階段D.“三親嬰兒”的基因來自于自己的父親、母親和捐獻(xiàn)者【答案】ABD〖祥解〗核移植技術(shù)指的是將動物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動物個(gè)體；用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物，原理是動物細(xì)胞核的全能性；動物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。【詳析】A、試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)，圖示表示三親嬰兒的培育過程，由圖可知，三親嬰兒的培育采用了細(xì)胞核移植、體外受精、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等技術(shù)，A正確；B、精子與卵子結(jié)合前，受精過程若想順利進(jìn)行必須滿足兩個(gè)條件：來自父方的精子要進(jìn)行精子獲能；來自母方的卵子要培養(yǎng)至培養(yǎng)至MⅡ即減數(shù)第二次分裂中期，B正確；C、胚胎發(fā)育的過程為受精卵→桑葚胚→囊胚→原腸胚→幼體，所以哺乳動物胚胎的早期發(fā)育依次經(jīng)歷桑葚胚、囊胚、原腸胚等不同發(fā)育階段，C錯(cuò)誤；D、分析題意可知，“三親嬰兒”的細(xì)胞核基因一半來自母親，一半來自父親，線粒體基因來自于卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者，D正確。故選ABD。18.融合PCR技術(shù)采用具有互補(bǔ)末端的引物，形成具有重疊鏈的PCR產(chǎn)物，通過PCR產(chǎn)物重疊鏈的延伸，從而將不同來源的任意DNA片段連接起來。其原理如圖所示，據(jù)圖分析正確的是（）A.上述過程中使用的引物P2和P3的堿基需要完全互補(bǔ)配對B.設(shè)計(jì)引物的目的是為了能夠從其3'端開始連接脫氧核苷酸C.融合PCR的第一步兩條鏈重疊部位可互為另一條鏈的引物D.進(jìn)行融合PCR的第二步時(shí)需選用的引物為P1和P4【答案】BCD〖祥解〗PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。它是一項(xiàng)根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)。PCR反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中才能進(jìn)行，需提供DNA模板，分別與兩條模板鏈結(jié)合的2種引物，4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶，同時(shí)通過控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行?！驹斘觥緼、融合PCR中，引物P2和P3的作用是在基因甲和基因乙的末端引入重疊序列，使兩者的PCR產(chǎn)物末端部分互補(bǔ)（而非完全互補(bǔ)），以便后續(xù)通過重疊區(qū)域退火連接。完全互補(bǔ)并非必要條件，只需重疊區(qū)域足夠長（通常15-25bp）以保證退火穩(wěn)定性，A錯(cuò)誤；B、PCR中，DNA聚合酶只能從引物的3'端開始延伸DNA鏈，因此引物的3'端必須與模板鏈嚴(yán)格互補(bǔ)，確保延伸反應(yīng)啟動。設(shè)計(jì)引物時(shí)，3'端的特異性直接影響擴(kuò)增效率和準(zhǔn)確性，B正確；C、融合PCR第一步中，兩個(gè)DNA片段經(jīng)擴(kuò)增后產(chǎn)生具有重疊末端的產(chǎn)物。這些重疊部位的單鏈可相互配對，此時(shí)每條鏈的重疊區(qū)域可作為另一條鏈的“引物”，在DNA聚合酶作用下延伸，從而實(shí)現(xiàn)兩條片段的連接，C正確；D、第二步中，兩個(gè)帶有重疊末端的PCR產(chǎn)物退火后，重疊區(qū)域互補(bǔ)配對，形成完整的雙鏈模板。此時(shí)需要擴(kuò)增整個(gè)融合基因，需使用外側(cè)引物P1（針對基因甲的5'端）和P4（針對基因乙的3'端），以確保擴(kuò)增出完整的融合片段，D正確。

故選BCD。三、非選擇題（共5題，共59分）19.酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng)，這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母，并進(jìn)行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程，請回答下列問題：（1）為分離培養(yǎng)該酵母菌，配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)以_____為唯一碳源，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，及時(shí)對培養(yǎng)基進(jìn)行分裝，并進(jìn)行_____滅菌。（2）取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無菌培養(yǎng)皿中，在步驟③中將溫度約_____℃的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻，冷凝后倒置培養(yǎng)。（3）挑取分離平板中長出的單菌落，按步驟④所示進(jìn)行劃線。下列敘述不合理的是_______（單選）。a．為保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b．劃線時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落c．可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株d．挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落，分別測定酵母細(xì)胞中甲醇的含量（4）步驟⑤中，為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證_____的充足供應(yīng)。為監(jiān)測酵母的活細(xì)胞密度，將發(fā)酵液稀釋1000倍后，經(jīng)等體積臺盼藍(lán)染液染色，用25×16型血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù)，理論上______色細(xì)胞的個(gè)數(shù)應(yīng)不少于_____，才能達(dá)到每毫升4×109個(gè)活細(xì)胞的預(yù)期密度。（5）通過發(fā)酵獲得的大量的酵母菌菌體，即______，可作為飼料蛋白的來源。【答案】（1）①.甲醇②.高壓蒸汽（濕熱）（2）50（3）d（4）①.營養(yǎng)和氧氣②.無③.40（5）單細(xì)胞蛋白〖祥解〗配制培養(yǎng)基的操作步驟為計(jì)算→稱量→溶化→定容→調(diào)pH→培養(yǎng)基的分裝→包扎→滅菌→倒平板。據(jù)圖分析，從土壤樣品中分離該類酵母的實(shí)驗(yàn)流程為①稱量土樣→②梯度稀釋→③平板澆注分離→④劃線純化→⑤擴(kuò)大培養(yǎng)?！窘馕觥浚?）因?yàn)橐蛛x能利用工業(yè)廢甲醇作為碳源的酵母菌，所以配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)以甲醇為唯一碳源。對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌通常采用高壓蒸汽（或濕熱）滅菌法進(jìn)行滅菌。（2）倒平板時(shí)，培養(yǎng)基的溫度約為50℃，這樣既不會因?yàn)闇囟冗^高殺死菌種，也不會因?yàn)闇囟冗^低導(dǎo)致培養(yǎng)基凝固。經(jīng)培養(yǎng)后，可在培養(yǎng)基的表面和內(nèi)部部位出現(xiàn)菌落，因?yàn)樵跐沧⒎蛛x過程中，酵母菌可能分布在培養(yǎng)基內(nèi)部和表面。（3）a、接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌，做到無菌操作，a正確；b、劃線時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以防止大量酵母菌聚集，不能形成正常菌落，b正確；c、可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株，c正確；d、挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落，分別測定培養(yǎng)液中甲醇的含量，d錯(cuò)誤。故選d。（4）酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖，因此為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和氧氣；活細(xì)胞膜具有選擇透過性，經(jīng)等體積臺盼藍(lán)染液染色，無色細(xì)胞是活細(xì)胞才能計(jì)數(shù)；為監(jiān)測酵母的活細(xì)胞密度，將發(fā)酵液稀釋1000倍后，用25×16型血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù)（假設(shè)為n），達(dá)到每毫升4×109個(gè)活細(xì)胞的預(yù)期密度，而臺盼藍(lán)與菌液等體積加入，則n÷80×400÷（0.1×10-3）×1000×2=4×109，n=40。（5）通過發(fā)酵獲得的大量的酵母菌菌體，即單細(xì)胞蛋白，可作為飼料蛋白的來源。20.人參和西洋參是五加科人參屬的藥用植物，它們含有的人參皂苷具有抗腫瘤等作用?？蒲腥藛T選用人參和西洋參有性雜交獲得的雜種胚細(xì)胞以及人參種子胚、西洋參種子胚的愈傷組織進(jìn)行懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，建立其單細(xì)胞株系并對三者的部分特性進(jìn)行比較研究，下圖1是主要流程：（1）過程①稱為_____，培養(yǎng)基中需使用的植物激素是_____。過程④優(yōu)化懸浮細(xì)胞培養(yǎng)體系，最重要的條件是蔗糖濃度的篩選，蔗糖濃度過低和過高均不利于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)，蔗糖濃度不能過高的原因是_____。（2）科研人員研究了三種愈傷組織中的人參皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，結(jié)果見圖2，其中Rg3具有抗癌作用。若要獲得具有抗癌作用的藥物應(yīng)優(yōu)先選擇_____的愈傷組織。（3）科研人員繼續(xù)研究了Rg3和常見的化療藥物5-FU對腫瘤的抑制效果：①首先培養(yǎng)胃癌細(xì)胞，培養(yǎng)液中除了加入葡萄糖、氨基酸等必要的營養(yǎng)成分外，往往還需要加入一定量的_____，以滿足動物細(xì)胞培養(yǎng)的營養(yǎng)需要。培養(yǎng)條件中5%CO2的作用是_____，溫度為37℃。將準(zhǔn)備好的胃癌細(xì)胞懸濁液皮下接種小鼠裸鼠，每只裸鼠接種0.1mL細(xì)胞懸濁液。接種后2周可見背部長出腫塊，證明接種成功。②將上述40只裸鼠隨機(jī)分為四組，生理鹽水組對照組、5-FU組、Rg3組和5-FU+Rg3組（聯(lián)合給藥組）。各組均采用腹腔注射給藥，給藥前測定腫瘤體積，給藥后每2日測量1次腫瘤體積。請根據(jù)圖3寫出計(jì)算腫瘤體積變化的公式：_____。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得出的結(jié)論_____?！敬鸢浮浚?）①.脫分化②.細(xì)胞分裂素和生長素③.過高會造成滲透壓過高細(xì)胞失水死亡（2）人參（種子胚）（3）①.血清②.維持培養(yǎng)液pH③.給藥后腫瘤體積/給藥前腫瘤的體積④.5-FU和Rg3均能抑制腫瘤生長，5-FU和Rg3聯(lián)合給藥效果更好〖祥解〗植物的組織培養(yǎng)指的是在無菌的條件下，將植物的莖尖、莖段或是葉片等切成小塊，培養(yǎng)在特制的培養(yǎng)基上，通過細(xì)胞的增殖和分化，使它逐漸發(fā)育成完整的植物體。【解析】（1）過程①表示由人參種子胚、西洋參種子胚、雜種胚形成愈傷組織的過程，稱為脫分化，培養(yǎng)基中需使用的植物激素是生長素和細(xì)胞分裂素。過程④優(yōu)化懸浮細(xì)胞培養(yǎng)體系，最重要的條件是蔗糖濃度的篩選，蔗糖濃度過低不能給細(xì)胞提供足夠的碳源和能源，過高會造成滲透壓過高細(xì)胞失水死亡。（2）由圖可知，Rg3具有抗癌作用，若要獲得具有抗癌作用的藥物應(yīng)優(yōu)先選擇人參種子胚的愈傷組織。（3）①首先培養(yǎng)胃癌細(xì)胞，培養(yǎng)液中需要加入一定量血清，以滿足動物細(xì)胞培養(yǎng)的營養(yǎng)需要。培養(yǎng)條件中5%CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH；②將上述40只裸鼠隨機(jī)分為四組，生理鹽水組對照組、5-FU組、Rg3組和5-FU+Rg3組（聯(lián)合給藥組）。各組均采用腹腔注射給藥，給藥前測定腫瘤的體積，給藥后每2日測量1次腫瘤體積。根據(jù)圖3計(jì)算腫瘤體積變化的公式：給藥后腫瘤體積/給藥前腫瘤的體積。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，依據(jù)圖像可以得出的結(jié)論有：與生理鹽水組對照組相比較，5-FU和Rg3均能抑制腫瘤生長，且5-FU和Rg3聯(lián)合給藥效果更好。21.我國研究人員在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，經(jīng)體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出第一批靈長類動物——食蟹猴，流程如圖所示，①—⑥表示過程，該動物可作為研究癌癥等人類疾病的動物模型。（1）獲得食蟹猴的體細(xì)胞核移植技術(shù)難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，原因是體細(xì)胞_____，恢復(fù)其全能性較難。（2）過程①利用_____技術(shù)。操作過程中，為了達(dá)到無菌、無毒的環(huán)境，應(yīng)采取_____措施。（各寫一條措施）（3）過程③是將成纖維細(xì)胞注入經(jīng)_____處理的MII卵母細(xì)胞中，使兩細(xì)胞融合，形成重構(gòu)胚。（4）過程⑤利用_____技術(shù)，其實(shí)質(zhì)是早期胚胎在_____條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。受體對移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生_____反應(yīng)，這為胚胎存活提供了可能。（5）研究人員在確定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用時(shí)，做了兩組實(shí)驗(yàn)，其中A組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)融合細(xì)胞，B組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)注入了Kd4d的mRNA的融合細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知_____?！敬鸢浮浚?）分化程度高（2）①.動物細(xì)胞培養(yǎng)②.無菌：對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理、在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作、添加抗生素；無毒：定期更換培養(yǎng)液（3）去核（4）①.胚胎移植②.相同生理③.免疫排斥（5）Kd4d的mRNA既能提高融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率，又能提高囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率〖祥解〗動物細(xì)胞核移植是用體細(xì)胞作為供體細(xì)胞進(jìn)行的細(xì)胞核移植，將供核細(xì)胞注射到培養(yǎng)到去核的減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞中，用人工的方法將其培養(yǎng)成胚胎，再將胚胎移植到雌性動物子宮內(nèi)，就可以孕育出新的個(gè)體?！窘馕觥浚?）獲得食蟹猴的體細(xì)胞核移植技術(shù)難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，原因是體細(xì)胞分化程度高，所以恢復(fù)其全能性較難。（2）過程①進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞自身的代謝產(chǎn)物積累會對細(xì)胞造成危害，所以要定期更換培養(yǎng)液。無菌可以對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理、在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作、添加抗生素。（3）過程③是將成纖維細(xì)胞注入經(jīng)去核處理的MII卵母細(xì)胞中，使兩細(xì)胞融合，形成重構(gòu)胚。（4）過程⑤用到了胚胎移植技術(shù)，其實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理?xiàng)l件下空間位置的轉(zhuǎn)移。受體對移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎存活提供了可能。（5）依據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，與對照組相比較，由左圖可知，注入Kd4d的mRNA的融合細(xì)胞能提高融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率，由右圖可知，注入Kd4d的mRNA的融合細(xì)胞能提高囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率，說明Kd4d的mRNA既能提高融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率，又能提高囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率。22.某種RNA病毒的抗原性和感染性與其表面的S蛋白（刺突糖蛋白）密切相關(guān)，現(xiàn)利用基因工程的方法生產(chǎn)相關(guān)疫苗。圖甲為構(gòu)建S蛋白基因表達(dá)載體的過程，圖乙為重組質(zhì)粒被相關(guān)酶切后的電泳結(jié)果。請回答下列問題：（1）①過程所使用的酶為______，PCR技術(shù)中復(fù)性的目的是______。（2）PCR過程經(jīng)過4次循環(huán)，消耗的引物的數(shù)量是______個(gè)。（3）構(gòu)建好的重組質(zhì)粒長度共2000bp，用限制酶HindⅢ及限制酶HindⅢ和BamHⅠ分別對重組質(zhì)粒進(jìn)行切割并電泳，結(jié)果如圖乙所示，可推測BamHⅠ在重組質(zhì)粒上有______個(gè)酶切位點(diǎn)。為使S蛋白基因在受體細(xì)胞中高效表達(dá)，需要將S蛋白基因插入重組質(zhì)粒的______之間。（4）腺病毒載體疫苗是將S蛋白基因插入到改造后的腺病毒基因組中，該疫苗進(jìn)入人體后，S蛋白基因利用人體細(xì)胞的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)指導(dǎo)S蛋白的合成，其過程是______（用文字和箭頭表示）?！敬鸢浮浚?）①.逆轉(zhuǎn)錄酶②.低溫下，引物能與相應(yīng)互補(bǔ)DNA序列結(jié)合（引物通過堿基互補(bǔ)配對與單鏈DNA結(jié)合）（2）30（3）①.3②.啟動子和終止子（4）S蛋白基因mRNAS蛋白〖祥解〗題意分析，圖甲中①是逆轉(zhuǎn)錄過程，②是經(jīng)過復(fù)制形成雙鏈cDNA，③是將S蛋白基因和質(zhì)粒結(jié)合形成基因表達(dá)載體，圖乙是用限制酶切割后形成的電泳圖?！窘馕觥浚?）①過程為逆轉(zhuǎn)錄過程，該過程所使用的酶為逆轉(zhuǎn)錄酶，PCR技術(shù)中復(fù)性的目的是在低溫下，使引物能與相應(yīng)互補(bǔ)DNA序列結(jié)合，為后續(xù)子鏈延伸做準(zhǔn)備。（2）PCR過程經(jīng)過4次循環(huán)，即復(fù)制4次，則形成的子代DNA的數(shù)目為24=16個(gè)，每個(gè)DNA分子有兩條鏈，且只有原來的模板鏈不帶有引物，其他的子鏈均需要引物，因此，該過程中消耗的引物的數(shù)量是16×2-2=30個(gè)。（3）構(gòu)建好的重組質(zhì)粒長度共2000bp，用限制酶HindⅢ及限制酶HindⅢ和BamHⅠ分別對重組質(zhì)粒進(jìn)行切割并電泳，根據(jù)圖乙所示，HindⅢ在質(zhì)粒上有三個(gè)酶切位點(diǎn)，進(jìn)而出現(xiàn)了200、400和1400的片段，而兩種酶同時(shí)切割后出現(xiàn)的片段為200、420和560片段，且420+420+560=1400，因而推測在質(zhì)粒中距離較遠(yuǎn)的HindⅢ識別序列中有兩個(gè)BamHⅠ的酶切位點(diǎn)，又知電泳結(jié)果中沒有400片段，因而可推測在該片段中間存在一個(gè)BamHⅠ酶切位點(diǎn)，因此，在重