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宣城市中醫(yī)院常規(guī)石蠟切片技術(shù)考核一、選擇題(每題2分,共20題)1.石蠟切片技術(shù)中,組織固定最常用的fixative是?A.乙醇-醋酸溶液B.甲醛溶液C.戊二醛溶液D.冰醋酸溶液2.切片厚度通??刂圃诙嗌傥⒚??A.1-2μmB.4-5μmC.10-12μmD.20-25μm3.組織脫水后,進(jìn)入包埋前,需要經(jīng)過(guò)哪個(gè)步驟?A.透明化B.脫水C.重新水化D.固定4.石蠟切片中,包埋最常用的材料是?A.脂肪B.明膠C.石蠟D.聚乙二醇5.切片機(jī)刀片材質(zhì)最常用的是?A.不銹鋼B.碳化鎢C.陶瓷D.玻璃6.切片過(guò)程中,組織切片易碎的原因可能是?A.固定不充分B.脫水過(guò)度C.包埋過(guò)硬D.切片刀不鋒利7.石蠟切片染色最常用的染料是?A.蘇木精-伊紅(H&E)B.吉姆薩染料C.甲基藍(lán)D.亞甲基藍(lán)8.組織切片脫蠟后,進(jìn)入染色前,需要經(jīng)過(guò)哪個(gè)步驟?A.透明化B.脫水C.水化D.固定9.切片染色后,脫水過(guò)程中最常用的脫水劑是?A.乙醇B.丙酮C.乙醚D.苯10.石蠟切片封片最常用的封片劑是?A.中性樹(shù)膠B.甘油C.乙醇D.丙酮二、填空題(每空1分,共10空)1.石蠟切片技術(shù)的核心步驟包括:固定、______、脫水、______、包埋、______、染色、______、封片。2.組織固定常用的濃度是10%的______溶液。3.石蠟切片包埋前,需要先進(jìn)行______處理,以防止組織收縮變形。4.切片機(jī)刀片使用后,需要用______溶液清洗,以去除殘留組織。5.蘇木精染色的原理是利用其______性,使細(xì)胞核著色。6.切片脫水后,需要經(jīng)過(guò)______和______兩個(gè)步驟,才能進(jìn)入染色。7.切片封片時(shí),最常用的封片劑是______,可以長(zhǎng)期保存切片。8.切片厚度不均勻的原因可能是______不均勻或______不鋒利。9.石蠟切片中,組織透明化的目的是使組織透明,便于______。10.切片染色時(shí),pH值過(guò)高會(huì)影響______的染色效果。三、簡(jiǎn)答題(每題5分,共5題)1.簡(jiǎn)述石蠟切片技術(shù)中,組織固定的作用。2.簡(jiǎn)述石蠟切片包埋的注意事項(xiàng)。3.簡(jiǎn)述切片機(jī)刀片保養(yǎng)的方法。4.簡(jiǎn)述蘇木精染色的原理。5.簡(jiǎn)述切片封片的目的。四、論述題(每題10分,共2題)1.詳細(xì)說(shuō)明石蠟切片技術(shù)中,脫水步驟的具體操作及注意事項(xiàng)。2.詳細(xì)說(shuō)明石蠟切片染色過(guò)程中,H&E染色的具體步驟及原理。答案與解析一、選擇題答案與解析1.B解析:甲醛溶液(Formalin)是石蠟切片中最常用的fixative,能很好地固定組織細(xì)胞結(jié)構(gòu),防止腐敗。2.B解析:常規(guī)石蠟切片厚度為4-5μm,既能保證組織結(jié)構(gòu)清晰,又能提高觀察效率。3.A解析:組織脫水后,需經(jīng)過(guò)透明化處理,使組織透明,便于包埋。4.C解析:石蠟是石蠟切片包埋最常用的材料,能很好地固定組織形狀。5.B解析:碳化鎢刀片硬度高,耐磨損,是切片機(jī)刀片的常用材質(zhì)。6.C解析:包埋過(guò)硬會(huì)導(dǎo)致組織切片時(shí)易碎,影響切片質(zhì)量。7.A解析:蘇木精-伊紅(H&E)染色是石蠟切片最常用的染色方法,能清晰顯示細(xì)胞結(jié)構(gòu)。8.C解析:脫蠟后,需經(jīng)過(guò)水化處理,使組織重新吸水,便于染色。9.A解析:乙醇是石蠟切片脫水最常用的脫水劑,能逐步去除組織中的水分。10.A解析:中性樹(shù)膠是石蠟切片封片最常用的封片劑,能長(zhǎng)期保存切片并提高透明度。二、填空題答案與解析1.脫水、透明化、包埋、切片解析:石蠟切片技術(shù)的核心步驟包括固定、脫水、透明化、包埋、切片、染色、脫水(染色前)、封片。2.甲醛解析:甲醛溶液是石蠟切片中最常用的fixative,濃度通常為10%。3.透明化解析:組織透明化可以防止組織收縮變形,提高包埋質(zhì)量。4.乙醇解析:切片機(jī)刀片使用后,需用乙醇清洗,去除殘留組織。5.酸性解析:蘇木精是酸性染料,能結(jié)合細(xì)胞核中的帶正電荷的蛋白質(zhì),使其著色。6.脫水、水化解析:脫水后需經(jīng)過(guò)透明化和水化,才能進(jìn)入染色。7.中性樹(shù)膠解析:中性樹(shù)膠是石蠟切片最常用的封片劑,能長(zhǎng)期保存切片。8.包埋、切片刀解析:切片厚度不均勻可能是包埋不均勻或切片刀不鋒利導(dǎo)致的。9.染色解析:組織透明化的目的是使組織透明,便于染色。10.DNA解析:pH值過(guò)高會(huì)影響DNA的染色效果,導(dǎo)致細(xì)胞核著色不均勻。三、簡(jiǎn)答題答案與解析1.石蠟切片技術(shù)中,組織固定的作用解析:組織固定能迅速停止細(xì)胞代謝,防止組織自溶和腐敗,并使細(xì)胞結(jié)構(gòu)保持原狀,便于后續(xù)處理。2.石蠟切片包埋的注意事項(xiàng)解析:包埋前需進(jìn)行透明化處理,包埋時(shí)需確保組織塊平整,包埋劑需均勻,避免氣泡。3.切片機(jī)刀片保養(yǎng)的方法解析:切片機(jī)刀片使用后需用乙醇清洗,晾干后涂少量石蠟,存放在干燥處。4.蘇木精染色的原理解析:蘇木精是酸性染料,能結(jié)合細(xì)胞核中的帶正電荷的蛋白質(zhì)(如組蛋白),使其著色。5.切片封片的目的解析:封片能防止切片干燥、脫色,并提高觀察時(shí)的透明度,便于長(zhǎng)期保存。四、論述題答案與解析1.石蠟切片技術(shù)中,脫水步驟的具體操作及注意事項(xiàng)解析:脫水步驟是將組織從固定液中逐步置換成有機(jī)溶劑的過(guò)程。具體操作:①用30%、50%、70%、90%、95%、100%乙醇逐級(jí)脫水,每次15-20分鐘;②用無(wú)水乙醇與二甲苯混合液(1:1)處理15分鐘,再用純二甲苯處理15分鐘,以去除乙醇,使組織透明;③注意事項(xiàng):①脫水梯度需逐級(jí)進(jìn)行,避免組織收縮變形;②二甲苯需充分去除,否則會(huì)影響包埋和染色。2.石蠟切片染色過(guò)程中,H&E染色的具體步驟及原理解析:H&E染色是石蠟切片最常用的染色方法,具體步驟:①脫蠟后,用梯度乙醇水化(100%→95%→70%→50%→30%乙醇,每次5分鐘);②蘇木精染色5-10分鐘;③流水沖洗1分鐘;④1%鹽酸酒精分化30秒;⑤流水沖洗1分鐘;⑥伊紅染色1分鐘
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