杭州市中醫(yī)院分子質(zhì)控管理考核一、單選題（共10題，每題2分，共20分）1.杭州市中醫(yī)院分子診斷實(shí)驗(yàn)室在SOP制定過(guò)程中，應(yīng)優(yōu)先考慮以下哪個(gè)因素？A.實(shí)驗(yàn)室設(shè)備新舊程度B.操作人員經(jīng)驗(yàn)水平C.檢測(cè)項(xiàng)目臨床需求D.醫(yī)院預(yù)算限制2.以下哪種方法最適合用于PCR產(chǎn)物凝膠電泳質(zhì)量評(píng)估？A.高效液相色譜（HPLC）B.毛細(xì)管電泳（CapillaryElectrophoresis）C.數(shù)字PCR（dPCR）D.熒光定量PCR（qPCR）3.杭州市中醫(yī)院分子診斷實(shí)驗(yàn)室使用的內(nèi)對(duì)照（InternalControl,IC）應(yīng)具備以下哪個(gè)特性？A.與靶基因完全相同B.僅在正常組織中表達(dá)C.對(duì)PCR擴(kuò)增效率無(wú)影響D.可替代外標(biāo)定量4.在評(píng)估PCR擴(kuò)增特異性時(shí)，以下哪個(gè)指標(biāo)最為關(guān)鍵？A.Ct值重復(fù)性B.產(chǎn)物條帶亮度C.產(chǎn)物熔解曲線形狀D.電泳遷移距離5.杭州市中醫(yī)院分子質(zhì)控中，室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（EQA）主要目的是什么？A.評(píng)估儀器性能B.監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室間差異C.優(yōu)化實(shí)驗(yàn)流程D.減少試劑消耗6.以下哪種方法適用于PCR產(chǎn)物污染的檢測(cè)？A.液體熒光檢測(cè)B.限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）C.次級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)（Mfold）D.原位雜交（FISH）7.杭州市中醫(yī)院分子診斷實(shí)驗(yàn)室使用的陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)包含哪些成分？A.純凈的靶基因DNAB.病毒顆粒C.已知拷貝數(shù)的模板D.上述所有選項(xiàng)8.在評(píng)估數(shù)字PCR（dPCR）線性范圍時(shí)，應(yīng)選擇哪種模板濃度梯度？A.10?2~10?拷貝/反應(yīng)B.10??~10?1拷貝/反應(yīng)C.10?~103拷貝/反應(yīng)D.10?1~10?拷貝/反應(yīng)9.杭州市中醫(yī)院分子質(zhì)控中，以下哪個(gè)環(huán)節(jié)最容易引入操作誤差？A.樣本提取B.數(shù)據(jù)分析C.儀器校準(zhǔn)D.試劑配制10.在評(píng)估PCR擴(kuò)增效率時(shí)，理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率應(yīng)接近多少？A.-0.5B.-1.0C.-1.5D.-2.0二、多選題（共5題，每題3分，共15分）1.杭州市中醫(yī)院分子診斷實(shí)驗(yàn)室制定SOP時(shí)，應(yīng)包含哪些內(nèi)容？A.實(shí)驗(yàn)原理B.試劑耗材清單C.質(zhì)量控制措施D.人員操作步驟E.異常情況處理2.以下哪些指標(biāo)可用于評(píng)估PCR擴(kuò)增特異性？A.產(chǎn)物熔解曲線B.非特異性條帶C.Ct值重復(fù)性D.產(chǎn)物測(cè)序E.電泳條帶數(shù)量3.杭州市中醫(yī)院分子質(zhì)控中，室內(nèi)質(zhì)控（IQC）常用的方法包括哪些？A.健康對(duì)照樣本檢測(cè)B.內(nèi)對(duì)照（IC）使用C.空白樣本檢測(cè)D.陽(yáng)性對(duì)照檢測(cè)E.次級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品驗(yàn)證4.在評(píng)估數(shù)字PCR（dPCR）精密度時(shí)，應(yīng)關(guān)注哪些指標(biāo)？A.Ct值標(biāo)準(zhǔn)差B.重復(fù)實(shí)驗(yàn)一致性C.檢測(cè)效率（E）D.模板濃度線性范圍E.污染率5.杭州市中醫(yī)院分子診斷實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)（LIS）應(yīng)具備哪些功能？A.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)自動(dòng)錄入B.質(zhì)量控制結(jié)果匯總C.報(bào)告自動(dòng)生成D.實(shí)驗(yàn)流程優(yōu)化E.與HIS系統(tǒng)對(duì)接三、判斷題（共10題，每題1分，共10分）1.杭州市中醫(yī)院分子診斷實(shí)驗(yàn)室的SOP應(yīng)每年至少修訂一次。（√）2.PCR產(chǎn)物凝膠電泳時(shí)，條帶亮度越高代表擴(kuò)增效率越好。（×）3.數(shù)字PCR（dPCR）的絕對(duì)定量不需要使用外標(biāo)。（√）4.室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（EQA）主要評(píng)估實(shí)驗(yàn)室間的一致性。（√）5.PCR產(chǎn)物污染主要通過(guò)氣溶膠傳播。（√）6.杭州市中醫(yī)院分子質(zhì)控中，陽(yáng)性對(duì)照必須包含已知病原體。（×）7.室內(nèi)質(zhì)控（IQC）結(jié)果超標(biāo)時(shí)應(yīng)立即停機(jī)檢查。（×）8.限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RFLP）可用于PCR產(chǎn)物特異性驗(yàn)證。（√）9.數(shù)字PCR（dPCR）的線性范圍越寬越好。（×）10.分子診斷實(shí)驗(yàn)室的LIS系統(tǒng)應(yīng)具備數(shù)據(jù)追溯功能。（√）四、簡(jiǎn)答題（共5題，每題5分，共25分）1.簡(jiǎn)述杭州市中醫(yī)院分子診斷實(shí)驗(yàn)室制定SOP的基本原則。2.如何通過(guò)熔解曲線分析PCR擴(kuò)增特異性？3.杭州市中醫(yī)院分子質(zhì)控中，室內(nèi)質(zhì)控（IQC）的頻率應(yīng)如何設(shè)定？4.數(shù)字PCR（dPCR）絕對(duì)定量時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率和截距分別代表什么？5.簡(jiǎn)述PCR產(chǎn)物污染的常見(jiàn)原因及預(yù)防措施。五、論述題（共2題，每題10分，共20分）1.結(jié)合杭州市中醫(yī)院實(shí)際情況，論述分子診斷實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控（IQC）的優(yōu)化策略。2.分析杭州市中醫(yī)院分子質(zhì)控中可能存在的風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)，并提出相應(yīng)的改進(jìn)措施。答案與解析一、單選題答案與解析1.C：實(shí)驗(yàn)室制定SOP時(shí)應(yīng)優(yōu)先考慮臨床需求，確保檢測(cè)項(xiàng)目的實(shí)用性和準(zhǔn)確性。2.B：毛細(xì)管電泳最適合用于PCR產(chǎn)物大小和純度評(píng)估。3.A：內(nèi)對(duì)照應(yīng)與靶基因相同，用于檢測(cè)模板丟失或提取失敗。4.C：熔解曲線形狀可反映產(chǎn)物特異性，單一峰代表特異性擴(kuò)增。5.B：EQA主要評(píng)估實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果的一致性，發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)性偏差。6.C：次級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)可識(shí)別潛在的引物二聚體或非特異性產(chǎn)物。7.D：陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)包含純凈靶基因、已知模板濃度及內(nèi)對(duì)照等。8.A：dPCR線性范圍通常為10?2~10?拷貝/反應(yīng)，確保定量準(zhǔn)確性。9.A：樣本提取環(huán)節(jié)涉及多步操作，易受人為因素影響。10.B：理想斜率為-1.0，代表擴(kuò)增效率100%。二、多選題答案與解析1.A、B、C、D、E：SOP應(yīng)包含實(shí)驗(yàn)原理、耗材、質(zhì)量控制、操作步驟及異常處理。2.A、B、D、E：熔解曲線、非特異性條帶、測(cè)序和電泳條帶數(shù)量均反映特異性。3.A、B、C、D：IQC需通過(guò)健康對(duì)照、內(nèi)對(duì)照、空白和陽(yáng)性對(duì)照監(jiān)控實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性。4.A、B：Ct值標(biāo)準(zhǔn)差和重復(fù)實(shí)驗(yàn)一致性反映精密度。5.A、B、C、E：LIS應(yīng)支持?jǐn)?shù)據(jù)錄入、質(zhì)控匯總、報(bào)告生成及HIS對(duì)接。三、判斷題答案與解析1.√：SOP需定期更新以反映技術(shù)或法規(guī)變化。2.×：條帶亮度受凝膠條件影響，不代表擴(kuò)增效率。3.√：dPCR絕對(duì)定量?jī)H需已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品。4.√：EQA通過(guò)盲樣評(píng)估實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果一致性。5.√：氣溶膠是PCR產(chǎn)物污染的主要途徑。6.×：陽(yáng)性對(duì)照可為含靶基因的質(zhì)粒或臨床樣本。7.×：IQC超標(biāo)需分析原因，但無(wú)需立即停機(jī)。8.√：RFLP可驗(yàn)證PCR產(chǎn)物序列特異性。9.×：線性范圍需滿(mǎn)足臨床需求，過(guò)寬可能增加成本。10.√：LIS需支持?jǐn)?shù)據(jù)追溯，確保結(jié)果可追溯。四、簡(jiǎn)答題答案與解析1.SOP制定原則：科學(xué)性、規(guī)范性、可操作性、持續(xù)改進(jìn)。需結(jié)合臨床需求和技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。2.熔解曲線分析：特異性擴(kuò)增產(chǎn)物呈現(xiàn)單一峰，非特異性產(chǎn)物產(chǎn)生額外峰。3.IQC頻率：常規(guī)檢測(cè)每日1次，關(guān)鍵項(xiàng)目增加頻率；EQA前需強(qiáng)化IQC。4.標(biāo)準(zhǔn)曲線：斜率（-R2）反映擴(kuò)增效率，截距（Y軸）代表背景信號(hào)。5.污染預(yù)防：嚴(yán)格分區(qū)操作、蓋膜避光、定期檢測(cè)空白樣本。五、論述題答案與解析1.IQC優(yōu)化策略：-建立標(biāo)準(zhǔn)化操作流程，減少人為差異；-定期評(píng)估試劑和耗材質(zhì)量；-引入多水平質(zhì)控（如低、中、高濃度樣本）；-結(jié)合EQA結(jié)果