福州市人民醫(yī)院免疫組化技術(shù)考核一、單選題（每題2分，共20題）1.免疫組化技術(shù)中，最常用的標(biāo)記酶是？A.過氧化物酶B.熒光素酶C.堿性磷酸酶D.辣根過氧化物酶2.下列哪種方法不屬于免疫組化技術(shù)的固相法？A.SPA法B.免疫過氧化物酶染色法（IP）C.免疫熒光法D.蛋白A蛋白G法3.在免疫組化實(shí)驗中，封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)常用的物質(zhì)是？A.蛋白AB.血清白蛋白C.牛血清白蛋白（BSA）D.胰蛋白酶4.以下哪種抗體最適合用于免疫組化檢測腫瘤標(biāo)志物？A.單克隆抗體B.多克隆抗體C.膠體金標(biāo)記抗體D.生物素標(biāo)記抗體5.免疫組化染色中，背景過高的原因可能是？A.抗體濃度過高B.抗體稀釋比例不當(dāng)C.溫育時間過長D.以上都是6.免疫組化技術(shù)中，用于阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性的步驟是？A.高溫修復(fù)B.蒸餾水洗滌C.蒸餾水浸泡D.甲醇固定7.以下哪種染料常用于免疫熒光組化？A.蘇木精B.伊紅C.異硫氰酸熒光素（FITC）D.奧斯汀8.免疫組化技術(shù)中，用于增強(qiáng)抗體結(jié)合效果的試劑是？A.蛋白AB.生物素化酶C.辣根過氧化物酶D.胰蛋白酶9.以下哪種方法不屬于免疫組化技術(shù)的熒光法？A.直接法B.間接法C.雙標(biāo)法D.免疫過氧化物酶染色法10.免疫組化染色中，抗體稀釋比例過高可能導(dǎo)致？A.靈敏度降低B.背景增高C.定位不準(zhǔn)確D.以上都是二、多選題（每題3分，共10題）1.免疫組化技術(shù)中，影響染色結(jié)果的因素包括？A.抗體質(zhì)量B.溫育時間C.pH值D.蒸餾水洗滌2.以下哪些是免疫組化技術(shù)的常用封閉劑？A.蛋白AB.牛血清白蛋白（BSA）C.胰蛋白酶D.脫脂奶粉3.免疫組化技術(shù)中，用于阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性的方法包括？A.甲醇固定B.高溫修復(fù)C.蒸餾水洗滌D.蒸餾水浸泡4.以下哪些是免疫組化技術(shù)的熒光法？A.直接法B.間接法C.雙標(biāo)法D.免疫過氧化物酶染色法5.免疫組化染色中，背景過高的原因包括？A.抗體濃度過高B.抗體稀釋比例不當(dāng)C.溫育時間過長D.蒸餾水洗滌不充分6.以下哪些是免疫組化技術(shù)的常用抗體？A.單克隆抗體B.多克隆抗體C.膠體金標(biāo)記抗體D.生物素標(biāo)記抗體7.免疫組化技術(shù)中，用于增強(qiáng)抗體結(jié)合效果的試劑包括？A.蛋白AB.生物素化酶C.辣根過氧化物酶D.胰蛋白酶8.免疫組化染色中，抗體稀釋比例過高可能導(dǎo)致？A.靈敏度降低B.背景增高C.定位不準(zhǔn)確D.蒙蔽效應(yīng)9.以下哪些是免疫組化技術(shù)的常用固定劑？A.甲醛B.甲醇C.乙醇D.蒸餾水10.免疫組化技術(shù)中，影響染色結(jié)果的因素包括？A.抗體質(zhì)量B.pH值C.溫育時間D.蒸餾水洗滌三、判斷題（每題1分，共20題）1.免疫組化技術(shù)可以用于檢測細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。2.免疫熒光法比免疫過氧化物酶染色法更靈敏。3.免疫組化技術(shù)中，封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)可以提高染色特異性。4.免疫組化染色中，背景過高會導(dǎo)致假陽性結(jié)果。5.免疫組化技術(shù)中，抗體稀釋比例越高越好。6.免疫組化染色中，高溫修復(fù)可以提高抗體結(jié)合效果。7.免疫熒光法可以用于雙標(biāo)實(shí)驗。8.免疫組化技術(shù)中，蛋白A可以用于增強(qiáng)抗體結(jié)合效果。9.免疫組化染色中，背景過低會導(dǎo)致假陰性結(jié)果。10.免疫組化技術(shù)可以用于檢測腫瘤標(biāo)志物。11.免疫組化染色中，抗體稀釋比例過高會導(dǎo)致背景增高。12.免疫組化技術(shù)中，高溫修復(fù)可以破壞抗原決定簇。13.免疫熒光法比免疫過氧化物酶染色法更適用于定量分析。14.免疫組化技術(shù)中，封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)可以提高染色靈敏度。15.免疫組化染色中，抗體稀釋比例過低會導(dǎo)致背景增高。16.免疫組化技術(shù)可以用于檢測細(xì)胞內(nèi)的RNA。17.免疫熒光法可以用于實(shí)時熒光定量PCR。18.免疫組化技術(shù)中，抗體稀釋比例越高越好。19.免疫組化染色中，高溫修復(fù)可以提高抗體結(jié)合特異性。20.免疫組化技術(shù)可以用于檢測細(xì)胞內(nèi)的DNA。四、簡答題（每題5分，共5題）1.簡述免疫組化技術(shù)的原理。2.簡述免疫組化技術(shù)中，背景過高的原因及解決方法。3.簡述免疫組化技術(shù)中，抗體稀釋比例的影響。4.簡述免疫組化技術(shù)中，高溫修復(fù)的作用。5.簡述免疫組化技術(shù)中，熒光法的優(yōu)缺點(diǎn)。五、論述題（每題10分，共2題）1.論述免疫組化技術(shù)在腫瘤診斷中的應(yīng)用及局限性。2.論述免疫組化技術(shù)中，如何提高染色結(jié)果的準(zhǔn)確性和特異性。答案與解析一、單選題1.A解析：免疫組化技術(shù)中最常用的標(biāo)記酶是過氧化物酶，因為它可以與酶底物（如DAB）反應(yīng)，產(chǎn)生顯色產(chǎn)物。2.C解析：免疫熒光法不屬于免疫組化技術(shù)的固相法，而是屬于熒光免疫技術(shù)的一種。3.C解析：牛血清白蛋白（BSA）是常用的封閉劑，可以阻斷非特異性結(jié)合位點(diǎn)。4.A解析：單克隆抗體特異性高，適合用于免疫組化檢測腫瘤標(biāo)志物。5.D解析：背景過高可能是由于抗體濃度過高、抗體稀釋比例不當(dāng)、溫育時間過長等多種原因?qū)е碌摹?.A解析：高溫修復(fù)可以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性，避免假陽性結(jié)果。7.C解析：異硫氰酸熒光素（FITC）是常用的熒光染料，用于免疫熒光組化。8.B解析：生物素化酶可以增強(qiáng)抗體結(jié)合效果，提高染色靈敏度。9.D解析：免疫過氧化物酶染色法屬于酶標(biāo)法，不屬于熒光法。10.D解析：抗體稀釋比例過高會導(dǎo)致靈敏度和定位不準(zhǔn)確，同時背景增高。二、多選題1.ABCD解析：抗體質(zhì)量、溫育時間、pH值、蒸餾水洗滌都會影響染色結(jié)果。2.BCD解析：牛血清白蛋白（BSA）、脫脂奶粉是常用的封閉劑，蛋白A和胰蛋白酶不是封閉劑。3.AB解析：甲醇固定和高溫修復(fù)可以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性。4.ABC解析：直接法、間接法和雙標(biāo)法屬于熒光法，免疫過氧化物酶染色法屬于酶標(biāo)法。5.ABCD解析：抗體濃度過高、抗體稀釋比例不當(dāng)、溫育時間過長、蒸餾水洗滌不充分都會導(dǎo)致背景增高。6.ABCD解析：單克隆抗體、多克隆抗體、膠體金標(biāo)記抗體、生物素標(biāo)記抗體都是免疫組化技術(shù)的常用抗體。7.AB解析：蛋白A和生物素化酶可以增強(qiáng)抗體結(jié)合效果。8.ABD解析：抗體稀釋比例過高會導(dǎo)致靈敏度降低、背景增高、蒙蔽效應(yīng)。9.ABC解析：甲醛、甲醇、乙醇是常用的固定劑，蒸餾水不是固定劑。10.ABCD解析：抗體質(zhì)量、pH值、溫育時間、蒸餾水洗滌都會影響染色結(jié)果。三、判斷題1.√2.×解析：免疫熒光法更適用于觀察細(xì)胞形態(tài)和定位，但靈敏度不如免疫過氧化物酶染色法。3.√4.√5.×解析：抗體稀釋比例過高或過低都會影響染色效果。6.√7.√8.√9.√10.√11.√12.×解析：高溫修復(fù)可以暴露抗原決定簇，提高抗體結(jié)合效果。13.×解析：免疫熒光法適用于定性分析，定量分析通常需要流式細(xì)胞術(shù)等手段。14.×解析：封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)可以提高染色特異性。15.√16.×解析：免疫組化技術(shù)主要用于檢測蛋白質(zhì)，檢測RNA需要熒光原位雜交（FISH）等技術(shù)。17.×解析：免疫熒光法不適用于實(shí)時熒光定量PCR。18.×解析：抗體稀釋比例過高或過低都會影響染色效果。19.×解析：高溫修復(fù)可以提高抗體結(jié)合特異性。20.×解析：免疫組化技術(shù)主要用于檢測蛋白質(zhì)，檢測DNA需要原位雜交等技術(shù)。四、簡答題1.簡述免疫組化技術(shù)的原理。免疫組化技術(shù)利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理，通過標(biāo)記酶或熒光染料顯色或熒光，在組織切片上定位和檢測特定抗原。2.簡述免疫組化技術(shù)中，背景過高的原因及解決方法。原因：抗體濃度過高、抗體稀釋比例不當(dāng)、溫育時間過長、蒸餾水洗滌不充分等。解決方法：優(yōu)化抗體濃度和稀釋比例、縮短溫育時間、加強(qiáng)洗滌等。3.簡述免疫組化技術(shù)中，抗體稀釋比例的影響。抗體稀釋比例過高會導(dǎo)致靈敏度降低、背景增高、定位不準(zhǔn)確；比例過低會導(dǎo)致特異性下降。需要根據(jù)實(shí)驗條件優(yōu)化稀釋比例。4.簡述免疫組化技術(shù)中，高溫修復(fù)的作用。高溫修復(fù)可以暴露抗原決定簇，提高抗體結(jié)合效果，增強(qiáng)染色靈敏度。5.簡述免疫組化技術(shù)中，熒光法的優(yōu)缺點(diǎn)。優(yōu)點(diǎn)：可以觀察細(xì)胞形態(tài)和定位，適用于雙標(biāo)實(shí)驗；缺點(diǎn)：靈敏度不如酶標(biāo)法，需要熒光顯微鏡觀察。五、論述題1.論述免疫組化技術(shù)在腫瘤診斷中的應(yīng)用及局限性。應(yīng)用：免疫組化技術(shù)可以檢測腫瘤標(biāo)志物（如HER2、Ki-67），輔助腫瘤