高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1甘肅省酒泉市四校聯(lián)考2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中一、選擇題：本題共16小題，每小題3分，共48分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求。1.酒釀是一種傳統(tǒng)發(fā)酵食品，香甜醇美，其制作流程為：糯米洗凈→蒸熟→冷卻至30℃→與酒曲（含根霉、酵母菌等微生物）混勻→24℃～28℃發(fā)酵2天（包括糖化和酒化）→保存。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.混勻使微生物與糯米充分接觸B.糖化過(guò)程主要依賴(lài)于根霉分泌的酶C.發(fā)酵時(shí)應(yīng)加蓋密封以利于酒化D.常溫保存使酒釀保持甜味濃郁【答案】D〖祥解〗酒釀的制作過(guò)程中，發(fā)酵是一個(gè)關(guān)鍵步驟，這個(gè)過(guò)程中涉及到糖化和酒化兩個(gè)階段。糖化過(guò)程主要依賴(lài)于根霉分泌的酶，這些酶能夠?qū)⑴疵字械牡矸鄯纸鉃樘?，為酵母菌提供發(fā)酵的原料。酵母菌在發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生酒精，這就是酒化過(guò)程?！驹斘觥緼、混勻可以使酒曲中的微生物（根霉和酵母菌）與糯米充分接觸，有利于微生物的生長(zhǎng)和發(fā)酵過(guò)程的進(jìn)行，A正確；B、根霉分泌的酶能夠?qū)⑴疵字械牡矸鄯纸鉃樘?，為酵母菌提供發(fā)酵的原料，B正確；C、發(fā)酵過(guò)程中，酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸，因此應(yīng)加蓋密封以利于酒化，C正確；D、應(yīng)在低溫下保存，抑制酵母菌繼續(xù)發(fā)酵，產(chǎn)生太多酒精，破壞風(fēng)味，D錯(cuò)誤。故選D。2.獲得純凈微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，無(wú)菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開(kāi)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.滅菌和消毒均可以殺死環(huán)境中的一切微生物，包括芽孢和孢子B.分別對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間和操作者的衣物、手進(jìn)行滅菌和消毒C.為了避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，微生物接種應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行D.灼燒滅菌、干熱滅菌都屬于無(wú)菌技術(shù)，紫外線照射不屬于【答案】C〖祥解〗無(wú)菌技術(shù)：（1）關(guān)鍵：防止外來(lái)雜菌的入侵。（2）具體操作：①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒。②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。③為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周?chē)奈锲方佑|?！驹斘觥緼、滅菌能夠殺死環(huán)境中的一切微生物，包括芽孢和孢子，消毒能夠殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物，不包括芽孢和孢子，A錯(cuò)誤；B、無(wú)菌操作時(shí)，對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣物和手進(jìn)行消毒，B錯(cuò)誤；C、為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，這是因?yàn)榫凭珶艋鹧媾源嬖跓o(wú)菌區(qū)域，C正確；D、灼燒滅菌、干熱滅菌都屬于無(wú)菌技術(shù)，紫外線照射屬于滅菌，也屬于無(wú)菌技術(shù)，D錯(cuò)誤。故選C。3.自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中氮?dú)獾募?xì)菌?？蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離實(shí)驗(yàn)，相關(guān)實(shí)驗(yàn)流程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.該實(shí)驗(yàn)中取樣獲取的土壤一般取自表層土壤B.圖中純化培養(yǎng)固氮菌時(shí)的方法是稀釋涂布平板法C.圖中所用培養(yǎng)基不需要添加氮源，培養(yǎng)基的pH應(yīng)在滅菌前調(diào)制成中性或弱堿性D.結(jié)合圖示并通過(guò)計(jì)算可知每克土壤中含有的自生固氮菌數(shù)目約為1.8×108個(gè)【答案】D〖祥解〗用稀釋涂布平板法測(cè)定菌落數(shù)時(shí)，在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求平均值，再通過(guò)計(jì)算得出總數(shù)?！驹斘觥緼、自生固氮菌為需氧細(xì)菌，獲取土壤時(shí)一般取自淺層土壤，A正確；B、圖示純化培養(yǎng)的方法是稀釋涂布平板法，其操作過(guò)程是用移液器將菌液滴加在培養(yǎng)基表面，再用滅菌后的涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面，B正確；C、自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中氮?dú)獾募?xì)菌，培養(yǎng)自生固氮菌時(shí)，不需要添加氮源，為了防止雜菌污染，應(yīng)先調(diào)pH再滅菌，且在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要將培養(yǎng)基在滅菌前調(diào)制成中性或弱堿性，C正確；D、結(jié)合圖示的結(jié)果可知，整個(gè)過(guò)程中稀釋倍數(shù)為106，故每克土壤中的固氮菌數(shù)目約為：（178＋180＋182）÷3÷0.1×106＝1.8×109個(gè)，D錯(cuò)誤。故選D。4.聚乙烯醇（PVA）是難降解的大分子有機(jī)物，PVA分解菌能產(chǎn)生PVA酶降解PVA.PVA可與碘形成藍(lán)綠色復(fù)合物，復(fù)合物被降解后藍(lán)綠色消失，形成透明圈。下圖為PVA分解菌的篩選過(guò)程，其中SG培養(yǎng)基為一種分離培養(yǎng)基，①~⑤表示過(guò)程，Ⅰ~Ⅲ表示菌落。下列敘述正確的是（）A.甲培養(yǎng)基為添加PVA和碘的選擇培養(yǎng)基，可篩選出PVA分解菌B.過(guò)程③應(yīng)選菌落Ⅱ中菌種進(jìn)行接種，該菌種分解PVA的能力最強(qiáng)C.若按圖中④所示的接種方法接種，接種環(huán)需要灼燒5次D.利用以PVA為唯一碳源的丙培養(yǎng)基對(duì)篩選出的PVA分解菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)【答案】B〖祥解〗微生物常見(jiàn)的接種方法：（1）平板劃線分離法：是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面，通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落；（2）涂布接種法：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的一種操作方法，由于將含菌材料現(xiàn)加到還較燙的培養(yǎng)基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡，而且采用稀釋倒平臺(tái)法也會(huì)使一些嚴(yán)格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長(zhǎng)，因此在微生物學(xué)研究中更常用的純種分離方法是涂布平板法，與劃線分離法相比，此方法可用于菌落計(jì)數(shù)。【詳析】A、②的結(jié)果有透明圈，結(jié)合題目信息可知甲培養(yǎng)基為添加PVA和碘的鑒別培養(yǎng)基，可篩選出分解PVA能力強(qiáng)的PVA分解菌，A錯(cuò)誤；B、根據(jù)題目信息可知，PVA能與碘產(chǎn)生藍(lán)綠色復(fù)合物，PVA分解菌能產(chǎn)生PVA酶降解PVA，復(fù)合物被PVA分解菌降解后藍(lán)綠色消失形成透明圈，透明圈越大，說(shuō)明該菌種分解PVA的能力越強(qiáng)，故應(yīng)選擇透明圈最大的菌落Ⅱ進(jìn)行接種培養(yǎng)，B正確；C、純化菌種時(shí)，采用圖示方法接種時(shí)，每次劃線前后都要灼燒接種環(huán)，共有5個(gè)劃線區(qū)域，因此接種環(huán)需要灼燒6次，C錯(cuò)誤；D、可利用液體完全培養(yǎng)基對(duì)已篩選出的PVA分解菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。故選B。5.植物組織培養(yǎng)是植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)，下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A.取蘭花芽或莖尖作為外植體是因?yàn)檫@些部位的組織細(xì)胞分化程度低，全能性也低B.接種外植體后先暗處培養(yǎng)一段時(shí)間，再在光下培養(yǎng)C.莖尖材料消毒時(shí)，需用酒精和次氯酸鈉混合液沖洗D.生根試管苗在煉苗后，應(yīng)連帶培養(yǎng)基栽植于肥沃疏松基質(zhì)中【答案】B〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的過(guò)程為：離體的植物組織，器官或細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化（避光）形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化（需光）過(guò)程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育形成植株。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類(lèi)和比例，特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要?！驹斘觥緼、一般情況下，隨著分化程度的不斷提高，細(xì)胞的全能性逐漸降低，蘭花的芽或莖尖的組織細(xì)胞分化程度低，分裂能力強(qiáng)，細(xì)胞的全能性高，A錯(cuò)誤；B、接種外植體后，在脫分化形成愈傷組織階段需避光培養(yǎng)，當(dāng)愈傷組織再分化出芽和葉時(shí)，一定要有光照，有利于葉片內(nèi)葉綠素的合成，B正確；C、莖尖材料消毒時(shí)，將流水充分沖洗后的莖尖材料用酒精消毒30s，然后立即用無(wú)菌水清洗2~3次；再用次氯酸鈉溶液處理30min后，立即用無(wú)菌水清洗2~3次，C錯(cuò)誤；D、生根試管苗在培養(yǎng)箱內(nèi)生長(zhǎng)幾日，用流水清洗掉根部的培養(yǎng)基后，將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中，待其長(zhǎng)壯后再移栽入土，D錯(cuò)誤。故選B。6.郁金香甘肅省花，某研究員通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)郁金香種苗進(jìn)行快速繁殖及脫毒研究，若取郁金香莖段進(jìn)行組織培養(yǎng)，莖段未能誘導(dǎo)出愈傷組織，其原因不包括（）A.莖段接種時(shí)倒插B.激素配比不合理C.外植體消毒過(guò)度D.培養(yǎng)時(shí)遮光處理【答案】D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)技術(shù)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，人工配制的培養(yǎng)基上，給予適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件，誘導(dǎo)其生成完整植株的技術(shù)。【詳析】A、將郁金香莖段切斷，形態(tài)學(xué)下端插入誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基中，不應(yīng)倒插，不符合題意，A正確；B、培養(yǎng)基中植物激素的濃度、比例等都會(huì)影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向，如生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素比例適中時(shí)有利于產(chǎn)生愈傷組織，不符合題意，B正確；C、外植體需要用70%的酒精消毒30s，立即用無(wú)菌水沖洗2~3次；再用5%的次氯酸鈉消毒30min后，立即用無(wú)菌水沖洗2~3次，若消毒過(guò)度會(huì)影響植物組織的活性，因而可能導(dǎo)致無(wú)愈傷組織產(chǎn)生，不符合題意，C正確；D、誘導(dǎo)愈傷組織的形成過(guò)程通常需要避光處理，這不會(huì)導(dǎo)致沒(méi)有愈傷組織產(chǎn)生，符合題意，D錯(cuò)誤。故選D。7.DHA俗稱(chēng)腦黃金，是構(gòu)成人腦神經(jīng)細(xì)胞膜的成分，若攝入不足會(huì)造成心腦血管方面的疾病。科研人員利用富含DHA但生長(zhǎng)緩慢的綠色巴夫藻和不含DHA但生長(zhǎng)迅速的四鞭藻，培育出DHA含量高又生長(zhǎng)迅速的融合藻株，下列有關(guān)培育過(guò)程的敘述正確的是（）A.細(xì)胞融合之前必須用胰蛋白酶處理兩種藻，獲得有活力的原生質(zhì)體B.兩種原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是觀察到細(xì)胞核融合C.細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中含有的細(xì)胞類(lèi)型有3種D.通過(guò)第一次篩選獲得的融合藻株還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和DHA檢測(cè)【答案】D〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交是指將不同來(lái)源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。在進(jìn)行體細(xì)胞雜交之前，必須先利用纖維素酶和果膠酶去除這層細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體?！驹斘觥緼、兩種藻是植物，所以細(xì)胞融合之前應(yīng)用纖維素酶和果膠酶處理兩種藻，獲得有活力的原生質(zhì)體，A錯(cuò)誤；B、兩種原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中含有的細(xì)胞類(lèi)型有5種，四倍體的綠色巴夫藻，四倍體四鞭藻，融合的綠色巴夫藻-四鞭藻的融合體，未融合的兩種藻，C錯(cuò)誤；D、通過(guò)第一次篩選獲得的融合藻株還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和DHA檢測(cè)，以獲得DHA含量高又生長(zhǎng)迅速的融合藻株，D正確。故選D。8.通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)構(gòu)建的人造皮膚在治療大面積燒傷時(shí)具有較好的應(yīng)用前景，下列敘述正確的是（）A.由于對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)未全部研究清楚，培養(yǎng)時(shí)通常加入血清B.選擇非患者細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)獲得人造皮膚，可以降低免疫排斥的發(fā)生C.細(xì)胞培養(yǎng)獲得人造皮膚的過(guò)程中，可加入纖維素酶處理貼壁的細(xì)胞D.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需置于含有95%O2和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱【答案】A〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；（3）溫度和pH；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）?！驹斘觥緼、在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中通常需加入血清、血漿等一些天然成分，主要目的是為細(xì)胞提供促生長(zhǎng)因子，以補(bǔ)充細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖過(guò)程中所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，A正確；B、選擇患者自身的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)獲得人造皮膚，可以避免免疫排斥的發(fā)生，選擇非患者細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)獲得人造皮膚，一般會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞培養(yǎng)獲得人造皮膚的過(guò)程中，可加入胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理貼壁的細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需置于95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。故選A。9.我國(guó)科學(xué)家將iPS細(xì)胞注射到囊胚中得到存活并有生殖能力的小鼠。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.iPS細(xì)胞能分化成多種組織、器官B.可用iPS細(xì)胞治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血C.定期更換培養(yǎng)液有利于滿足iPS細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)代謝的營(yíng)養(yǎng)需求D.iPS細(xì)胞被稱(chēng)為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，均是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)的【答案】D〖祥解〗胚胎干細(xì)胞：（1）來(lái)源：哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng)ES或EK細(xì)胞，來(lái)源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來(lái)。（2）特點(diǎn)：具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。【詳析】A、iPS細(xì)胞可分化成多種不同的細(xì)胞或組織，A正確；B、由可利用體外制備的iPS細(xì)胞，誘導(dǎo)分化成正常的紅細(xì)胞，治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血，B正確；C、體外培養(yǎng)iPS，定期更換培養(yǎng)液可清除細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，避免代謝廢物積累對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒害作用，即定期更換培養(yǎng)液有利于滿足iPS細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)代謝的營(yíng)養(yǎng)需求，C正確；D、除成纖維細(xì)胞外，已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞，D錯(cuò)誤。故選D。10.乙型肝炎病毒（HBV）感染是全球公共衛(wèi)生的重大挑戰(zhàn)，目前尚無(wú)徹底治愈的方案，現(xiàn)階段治療的主要目標(biāo)是實(shí)現(xiàn)功能性治愈（HBsAg為其標(biāo)志性抗原）。抗HBV單克隆抗體的研究不僅有助于深入解析HBV感染機(jī)制，還能加深對(duì)機(jī)體免疫反應(yīng)的理解，并為疫苗開(kāi)發(fā)提供重要支持。下列敘述正確的是（）A.血清中檢測(cè)到HBsAg和HBV-DNA，說(shuō)明HBV在血漿中增殖B.制備抗HBsAg單克隆抗體需骨髓瘤細(xì)胞和T細(xì)胞融合獲得雜種細(xì)胞C.制備的抗HBsAg單克隆抗體可使被HBV感染的肝細(xì)胞裂解死亡D.抗HBsAg單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高，可用于人體血液中HBV的檢測(cè)【答案】D〖祥解〗單克隆抗體的制備流程：人工誘導(dǎo)經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，通過(guò)培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞得到單克隆抗體。【詳析】A、病毒過(guò)寄生生活，乙肝病毒只能在肝細(xì)胞中增殖，A錯(cuò)誤；B、制備抗HBsAg單克隆抗體需要骨髓瘤細(xì)胞和B細(xì)胞融合獲得雜種細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、抗HBsAg單克隆抗體只能識(shí)別抗原，不能使靶細(xì)胞裂解死亡，C錯(cuò)誤；D、單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高，可以大量制備，已被廣泛應(yīng)用于疾病的診斷和治療，大量靈敏的抗HBsAg單克隆抗體還可用于人體血液中HBV的檢測(cè)，D正確。故選D。11.在部分地區(qū)，牛的胚胎移植技術(shù)已進(jìn)入生產(chǎn)應(yīng)用階段，胚胎移植時(shí)受體母牛須具備的條件是（）A.具有產(chǎn)奶量較高等優(yōu)良性狀B.與供體母牛的遺傳特性一致C.免疫力正常且具有健康體質(zhì)D.與供體母牛的繁殖潛能相當(dāng)【答案】C〖祥解〗胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。【詳析】供體母牛的主要職能是產(chǎn)生具有優(yōu)良遺傳特性的胚胎；受體母牛必須具備健康的體質(zhì)和正常的繁殖能力。ABD錯(cuò)誤，C正確。故選C。12.一種能實(shí)現(xiàn)“線粒體置換”目的的技術(shù)原理如圖所示，該技術(shù)可預(yù)防人類(lèi)線粒體遺傳病傳給子代。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.患者第一極體基本不攜帶線粒體遺傳病的致病基因B.重組次級(jí)卵母細(xì)胞膜外極體的遺傳物質(zhì)與患者相同C.可將受精卵培養(yǎng)至囊胚期時(shí)移植到患者的子宮中D.精子體外獲能處理后才能與重組次級(jí)卵母細(xì)胞受精【答案】B〖祥解〗圖示是體外受精技術(shù)培育試管動(dòng)物的大致流程，體外受精包括精子的采集和獲能、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、受精作用。【詳析】A、第一極體是卵原細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)第一次分裂產(chǎn)生的，線粒體存在于細(xì)胞質(zhì)中，減數(shù)第一次分裂主要是同源染色體分離，第一極體基本不含細(xì)胞質(zhì)，也就基本不攜帶線粒體遺傳病的致病基因，A不符合題意；B、重組次級(jí)卵母細(xì)胞是患者的卵母細(xì)胞核移植到供體去核的次級(jí)卵母細(xì)胞中形成的，其細(xì)胞膜外極體的遺傳物質(zhì)來(lái)自供體，與患者不同，B符合題意；C、在胚胎移植時(shí)，可將受精卵培養(yǎng)至桑葚胚或囊胚期時(shí)移植到患者的子宮中，C不符合題意；D、精子在體外需要進(jìn)行獲能處理后，才具備與卵子受精的能力，D不符合題意。故選B。13.如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的部分操作流程。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.將圖1中的研磨液過(guò)濾后保留沉淀B.圖2過(guò)程，用玻璃棒進(jìn)行快速交叉攪拌會(huì)使DNA析出更快C.圖2析出得到的白色絲狀物只能溶于2mol/L的NaCl溶液D.圖3對(duì)提取后的DNA進(jìn)行鑒定，兩支試管中均要加入二苯胺試劑【答案】D〖祥解〗DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理：①DNA在NaCl溶液中的溶解度，是隨著NaCl的濃度變化而改變的，當(dāng)NaCl的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí)，DNA的溶解度最低，利用這一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液，利用這一原理，可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA；③洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜但是對(duì)DNA沒(méi)有影響；④蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度，在80°C條件下會(huì)變性，而DNA對(duì)溫度的耐受性較高；⑤DNA遇二苯膠（沸水?。?huì)染成藍(lán)色，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斘觥緼、圖1中新鮮洋蔥研磨后DNA存在于研磨液中，過(guò)濾后應(yīng)保留濾液，A錯(cuò)誤；B、圖2過(guò)程，用玻璃棒要輕輕攪拌且攪拌要沿同一方向進(jìn)行，防止DNA分子斷裂，B錯(cuò)誤；C、圖2析出得到的白色絲狀物主要成分是DNA，DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度高，并不是只能溶于2mol/L的NaCl溶液，C錯(cuò)誤；D、圖3對(duì)提取后的DNA進(jìn)行鑒定，作為對(duì)照，兩支試管中均要加入等量的二苯胺試劑，D正確。故選D。14.PCR是“聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction）”的英文簡(jiǎn)寫(xiě)，在基因工程的四個(gè)主要階段中一般不會(huì)用到PCR技術(shù)的是（）A.目的基因的獲取和擴(kuò)增B.檢測(cè)基因表達(dá)載體構(gòu)建是否成功C.將含有目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞D.目的基因的檢測(cè)與鑒定（是否導(dǎo)入及其表達(dá)情況）【答案】C〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳析】A、如果目的基因的一段序列已知，可以根據(jù)已知序列設(shè)計(jì)引物，通過(guò)PCR技術(shù)獲取和擴(kuò)增目的基因，A不符合題意；B、根據(jù)目的基因的序列設(shè)計(jì)引物，用構(gòu)建的基因表達(dá)載體作模板，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增載體，如果有擴(kuò)增產(chǎn)物，說(shuō)明載體構(gòu)建成功，B不符合題意；C、將含有目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞通常是物理或化學(xué)方法，比如轉(zhuǎn)化法將質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌，或者用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞等，這個(gè)過(guò)程不需要PCR技術(shù)，C符合題意；D、通過(guò)PCR技術(shù)可檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入目的基因及其在受體細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，D不符合題意。故選C。15.限制酶HindⅢ和XhoI的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別為A↓AGCTT和C↓TCGAG，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.兩種限制酶能識(shí)別單鏈DNA分子并特異性切割B.兩種限制酶切割形成的黏性末端都是—AGCTC.兩種限制酶切割時(shí)斷開(kāi)的化學(xué)鍵不完全相同D.操作中可通過(guò)控制反應(yīng)時(shí)間、酶的濃度等控制酶切效果【答案】D〖祥解〗限制性核酸內(nèi)切酶是可以識(shí)別并附著特定的核苷酸序列，并對(duì)每條鏈中特定部位的兩個(gè)脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割的一類(lèi)酶，簡(jiǎn)稱(chēng)限制酶?！驹斘觥緼、兩種限制酶能識(shí)別雙鏈DNA分子并特異性切割，A錯(cuò)誤；B、HindⅢ切割形成的黏性末端是-AGCTT，而XhoI切割形成的黏性末端都是-TCGAG，B錯(cuò)誤；C、兩種限制酶切割時(shí)斷開(kāi)的化學(xué)鍵完全相同，均為磷酸二酯鍵，C錯(cuò)誤；D、實(shí)驗(yàn)中可通過(guò)控制反應(yīng)時(shí)間、酶的濃度、溫度、底物的量等控制酶切效果，D正確。故選D。16.研究人員將胰島素B鏈的第28位氨基酸替換為天冬氨酸，抑制了胰島素聚合，從而獲得速效胰島素類(lèi)似物。下列敘述正確的是（）A.該產(chǎn)品是通過(guò)直接改造胰島素來(lái)生產(chǎn)的B.改變氨基酸的種類(lèi)不會(huì)影響胰島素的空間結(jié)構(gòu)C.可通過(guò)定向誘導(dǎo)胰島素基因堿基增添達(dá)到改造目的D.胰島素改造的基本思路與天然蛋白質(zhì)合成過(guò)程相反【答案】D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程概念及基本原理（1）蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）。（2）蛋白質(zhì)工程崛起的緣由：基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)。（3）蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來(lái)設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，又稱(chēng)為第二代的基因工程。（4）基本途徑：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），最終還是回到基因工程上來(lái)解決蛋白質(zhì)的合成?！驹斘觥緼、蛋白質(zhì)工程最終還是回到基因工程上來(lái)解決蛋白質(zhì)的合成，即改造胰島素的過(guò)程實(shí)際是改造胰島素基因的過(guò)程，A錯(cuò)誤；B、氨基酸的種類(lèi)及排列順序影響蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，B錯(cuò)誤；C、可通過(guò)定向誘導(dǎo)胰島素基因堿基替換達(dá)到第28位氨基酸替換為天冬氨酸的目的，C錯(cuò)誤；D、蛋白質(zhì)工程的基本途徑是預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），胰島素改造的基本思路與天然蛋白質(zhì)合成過(guò)程（基因→蛋白質(zhì)合成）相反，D正確。故選D。二、非選擇題：本題共5小題，共52分。17.維生素K2在預(yù)防骨質(zhì)疏松、心血管疾病等方面具有重要作用。科研人員以淀粉芽孢桿菌（GSA-184）為研究對(duì)象，通過(guò)優(yōu)化發(fā)酵工藝，提高了維生素K2的產(chǎn)量。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）從土壤中篩選芽孢桿菌時(shí)，利用的培養(yǎng)基成分含有酵母浸粉、蛋白胨、NaCl和水等。其中蛋白胨提供的主要營(yíng)養(yǎng)為_(kāi)_____和維生素等。（2）科研人員進(jìn)行了優(yōu)化培養(yǎng)基碳源的實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。據(jù)圖判斷，若對(duì)菌株GSA-184擴(kuò)大培養(yǎng)，所用培養(yǎng)基的最佳碳源是______；若想大量獲取維生素K2，所用培養(yǎng)基的最佳碳源是______。（3）科研人員探究了菌株GSA-184在不控制pH和控制pH為7.0條件下的發(fā)酵情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2和圖3所示。兩種條件下的溶解氧在發(fā)酵3h內(nèi)從100%附近急劇下降到2%附近，說(shuō)明______；在圖2中，發(fā)酵80h后溶解氧開(kāi)始從2%附近逐漸上升，可能的原因是______。對(duì)比圖2和圖3，______條件下有助于維持菌體的活性，從而提高維生素K2產(chǎn)量?！敬鸢浮浚?）碳源、氮源（2）①.L-阿拉伯糖②.甘油（3）①.該菌株為需氧型，發(fā)酵初期菌體繁殖耗氧量很大②.發(fā)酵罐內(nèi)的pH較高，菌體活性降低且菌體數(shù)量下降，耗氧量逐漸減少③.穩(wěn)定而合理的pH〖祥解〗培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無(wú)氧的條件。【解析】（1）在微生物培養(yǎng)基中，蛋白胨含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，其主要為微生物生長(zhǎng)提供氮源、碳源和維生素等。因?yàn)榈鞍纂耸菍⒌鞍踪|(zhì)經(jīng)過(guò)酶解等處理得到的，其中的含氮有機(jī)物可作為氮源，同時(shí)其中的碳元素也可為微生物提供碳源等。（2）擴(kuò)大培養(yǎng)菌株GSA-184，目的是讓菌株數(shù)量增多，也就是要使活菌生物量達(dá)到最大。從圖1中可以看出，在以L-阿拉伯糖為碳源時(shí)，活菌生物量的數(shù)值最高。所以若對(duì)菌株GSA-184擴(kuò)大培養(yǎng)，所用培養(yǎng)基的最佳碳源是L-阿拉伯糖；若想大量獲取維生素K2，就要找使維生素K2產(chǎn)量最高的碳源。從圖中可知，當(dāng)以甘油為碳源時(shí)，維生素K2產(chǎn)量的數(shù)值最大。所以若想大量獲取維生素K2，所用培養(yǎng)基的最佳碳源是甘油。（3）兩種條件下的溶解氧在發(fā)酵3h內(nèi)從100%附近急劇下降到2%附近，這說(shuō)明該菌株為需氧型，發(fā)酵初期菌體繁殖耗氧量很大；在圖2中，發(fā)酵80h后溶解氧開(kāi)始從2%附近逐漸上升，可能是發(fā)酵罐內(nèi)的pH較高，菌體活性降低且菌體數(shù)量減少，耗氧量逐漸減少；對(duì)比圖2（不控制pH）和圖3（控制pH為7.0），可以發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定而合理的pH，控制pH為7.0時(shí)，維生素K2產(chǎn)量更高，活菌生物量在后期也能維持相對(duì)較好的水平，這說(shuō)明控制pH為7.0條件下有助于維持菌體的活性，從而提高維生素K2產(chǎn)量。18.鐵皮石斛具有益胃生津、滋陰清熱的功效，其主要成分石斛多糖具有提高機(jī)體免疫力的功能。自然條件下其繁殖力很低，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖鐵皮石斛是解決其資源短缺的有效途徑。相關(guān)的培育流程如圖所示，數(shù)字代表相關(guān)過(guò)程。回答下列問(wèn)題：（1）過(guò)程①是_____，該過(guò)程進(jìn)行前一般需要用_____法對(duì)使用的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。（2）繼代培養(yǎng)是繼初代培養(yǎng)之后連續(xù)數(shù)代的擴(kuò)培過(guò)程，旨在繁殖出相當(dāng)數(shù)量的無(wú)根苗，最后能達(dá)到邊繁殖邊生根的目的。該過(guò)程_____（填“需要”或“不需要”）光照，所用的培養(yǎng)基與②過(guò)程的主要區(qū)別是_____。（3）通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖鐵皮石斛，屬于_____繁殖，這種繁殖方式的優(yōu)點(diǎn)是_____。（4）若要通過(guò)植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)石斛多糖，需將外植體培養(yǎng)到_____（填結(jié)構(gòu)名稱(chēng)）階段。該技術(shù)不占用耕地，幾乎不受_____等的限制，因此對(duì)于社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、環(huán)境保護(hù)具有重要意義?！敬鸢浮浚?）①.接種②.高壓蒸汽滅菌（2）①.需要②.生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同（3）①.無(wú)性②.能保持親本的優(yōu)良性狀、繁殖速度快、可大量培養(yǎng)脫毒苗等（4）①.愈傷組織②.季節(jié)、氣候〖祥解〗（1）植物組織培養(yǎng)技術(shù)是根據(jù)植物細(xì)胞具有全能性這一理論，在無(wú)菌條件下，將植物體的一部分（如器官、組織或細(xì)胞）接種到人工配制的培養(yǎng)基上，提供適宜的環(huán)境條件，使其生長(zhǎng)、分化并最終發(fā)育成完整的植株或其他有用的產(chǎn)物。這項(xiàng)技術(shù)不僅能夠快速繁殖優(yōu)良品種，還能夠在短時(shí)間內(nèi)大量生產(chǎn)藥物、香料等珍貴植物產(chǎn)品，并且可以用于病毒侵染鑒定、脫毒處理、種質(zhì)保存以及遠(yuǎn)緣雜交育種等多個(gè)方面；（2）植物組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素使用比例對(duì)植物細(xì)胞發(fā)育的影響：生長(zhǎng)素用量比細(xì)胞分裂素用量，比值高時(shí)，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時(shí)，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的形成?！窘馕觥浚?）植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，過(guò)程①是接種。培養(yǎng)基的滅菌方法一般是高壓蒸汽滅菌法，因?yàn)楦邏赫羝麥缇茉诟邷馗邏合職⑺琅囵B(yǎng)基中的所有微生物，包括細(xì)菌、真菌、芽孢等，保證培養(yǎng)基的無(wú)菌環(huán)境，為后續(xù)的組織培養(yǎng)提供良好條件；（2）繼代培養(yǎng)過(guò)程中，植物組織需要進(jìn)行光合作用相關(guān)的生理活動(dòng)，合成有機(jī)物等，所以需要光照。②過(guò)程是脫分化形成愈傷組織，而繼代培養(yǎng)是在愈傷組織基礎(chǔ)上進(jìn)行的進(jìn)一步培養(yǎng)，其所用培養(yǎng)基與脫分化過(guò)程培養(yǎng)基的主要區(qū)別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同。生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的不同比例會(huì)影響植物組織的分化方向和生長(zhǎng)狀態(tài)，在繼代培養(yǎng)中需要調(diào)整合適的比例來(lái)促進(jìn)無(wú)根苗的繁殖和生根；（3）植物組織培養(yǎng)沒(méi)有經(jīng)過(guò)兩性生殖細(xì)胞的結(jié)合，屬于無(wú)性繁殖。無(wú)性繁殖的優(yōu)點(diǎn)有很多，比如能保持親本的優(yōu)良性狀，因?yàn)樽哟倪z傳物質(zhì)與親本基本相同，不會(huì)出現(xiàn)性狀分離；繁殖速度快，可以在短時(shí)間內(nèi)獲得大量的植株；可大量培養(yǎng)脫毒苗，通過(guò)選取植物的特定部位（如莖尖）進(jìn)行培養(yǎng)，可以去除植物體內(nèi)的病毒，獲得無(wú)病毒的健康植株等；（4）若要通過(guò)植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)石斛多糖，需將外植體培養(yǎng)到愈傷組織階段，因?yàn)橛鷤M織細(xì)胞代謝旺盛，能合成和積累大量的石斛多糖等物質(zhì)。該技術(shù)不占用耕地，幾乎不受季節(jié)、氣候等的限制，在室內(nèi)等人工控制的環(huán)境下就可以進(jìn)行培養(yǎng)，因此對(duì)于社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、環(huán)境保護(hù)具有重要意義。19.下圖是我國(guó)科學(xué)家利用胚胎干細(xì)胞建立體外胚胎和胚胎發(fā)育潛能研究的流程。人胚胎干細(xì)胞存在兩種不同狀態(tài)，即原始態(tài)（naive）和始發(fā)態(tài)（primed）。naive干細(xì)胞具有最高的發(fā)育潛能，primed干細(xì)胞全能性相對(duì)較低。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）猴子芽體相當(dāng)于______期的胚胎，過(guò)程③的起點(diǎn)細(xì)胞應(yīng)取自芽體的______部位，將來(lái)發(fā)育成______。（2）過(guò)程④⑤之后形成的胚胎是______，由該胚胎表面細(xì)胞向內(nèi)遷移形成______。（3）過(guò)程⑥是指______，需對(duì)代孕母猴進(jìn)行______處理，目的是______。（4）primed干細(xì)胞與神經(jīng)干細(xì)胞相比，前者的特點(diǎn)是______?！敬鸢浮浚?）①.囊胚②.內(nèi)細(xì)胞團(tuán)③.胎兒各種組織（2）①.原腸胚②.內(nèi)胚層（3）①.胚胎移植②.同期發(fā)情③.使供體和受體的生殖器官生理變化同步，為移入受體的胚胎提供相同的生理環(huán)境（4）具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種類(lèi)型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體所有的組織和器官甚至個(gè)體的潛能〖祥解〗胚胎移植的生理基礎(chǔ)（1）供體與受體相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境；(2）胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能；（3）子宮不對(duì)外來(lái)胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能；(4)胚胎遺傳性狀不受受體任何影響?！窘馕觥浚?）從圖示流程來(lái)看，猴子芽體后續(xù)能進(jìn)一步發(fā)育形成胚胎，在胚胎發(fā)育過(guò)程中，囊胚期的胚胎開(kāi)始出現(xiàn)細(xì)胞分化，具有內(nèi)細(xì)胞團(tuán)等結(jié)構(gòu)，可進(jìn)一步發(fā)育成個(gè)體，所以猴子芽體相當(dāng)于囊胚期的胚胎。囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織，所以過(guò)程③的起點(diǎn)細(xì)胞應(yīng)取自芽體的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)部位。（2）過(guò)程④⑤是從囊胚進(jìn)一步發(fā)育，之后形成的胚胎是原腸胚，原腸胚發(fā)育過(guò)程中，由該胚胎表面細(xì)胞向內(nèi)遷移形成內(nèi)胚層。（3）在胚胎移植前，需要對(duì)胚胎供體和受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，使供體和受體的生殖器官生理變化同步，為移入受體的胚胎提供相同的生理環(huán)境。（4）primed干細(xì)胞全能性相對(duì)較低，神經(jīng)干細(xì)胞是已經(jīng)分化的細(xì)胞，primed干細(xì)胞與神經(jīng)干細(xì)胞相比，primed干細(xì)胞是具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種類(lèi)型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體所有的組織和器官甚至個(gè)體的潛能。20.人干擾素（IFN）是機(jī)體免疫細(xì)胞產(chǎn)生的一類(lèi)細(xì)胞因子。用白細(xì)胞生產(chǎn)干擾素時(shí)，每個(gè)細(xì)胞最多只能產(chǎn)生100~1000個(gè)干擾素分子，而利用基因工程技術(shù)改造的工程菌發(fā)酵生產(chǎn)，在1~2天內(nèi)每個(gè)菌體能產(chǎn)生20萬(wàn)個(gè)干擾素分子。回答下列問(wèn)題：（1）基因工程的核心步驟是______，此步驟需要的工具酶是______，其作用部位都是磷酸二酯鍵。圖中四環(huán)素抗性基因的作用是______。（2）PCR技術(shù)所依據(jù)的原理是______。在PCR反應(yīng)體系中一般需要加入Mg2+的原因是______。（3）在基因工程操作中，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞時(shí)要用含______溶液處理，使其處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)（感受態(tài)）。研究人員選擇工程菌時(shí)選擇了酵母菌而沒(méi)有選擇大腸桿菌，理由是因?yàn)榻湍妇鷂_____。（4）干擾素基因在工程菌中也能合成人體所需的干擾素，說(shuō)明生物界中幾乎所有生物______?！敬鸢浮浚?）①.構(gòu)建基因表達(dá)載體②.限制酶和DNA連接酶③.作為標(biāo)記基因，篩選重組質(zhì)粒（2）①.DNA半保留復(fù)制②.Mg2+能激活DNA聚合酶（3）①.Ca2+②.含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等多種細(xì)胞器，能對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工（4）都共用一套遺傳密碼〖祥解〗圖中表示利用基因工程生產(chǎn)人干擾素（IFN）的過(guò)程，構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程需使用逆轉(zhuǎn)錄酶、限制酶和DNA連接酶，其中四環(huán)素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因，可用于篩選重組質(zhì)粒?！窘馕觥浚?）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體。此步驟需用到限制酶和DNA連接酶。圖中四環(huán)素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因，四環(huán)素抗性基因的作用是用于篩選重組質(zhì)粒。（2）PCR全稱(chēng)為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，PCR技術(shù)所依據(jù)的原理是DNA半保留復(fù)制。Mg2+在PCR反應(yīng)體系中可激活DNA聚合酶。（3）使工程菌處于感受態(tài)需要使用鈣離子溶液處理。利用基因工程生產(chǎn)IFN，最好選擇酵母菌作為受體細(xì)胞，因?yàn)榻湍妇钦婧松铮袃?nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等多種細(xì)胞器，能對(duì)IFN分泌蛋白質(zhì)進(jìn)行加工。（4）干擾素基因在工程菌中也能合成人體所需的干擾素，說(shuō)明生物界中幾乎所有生物都共用同一套遺傳密碼。21.白介素—10（IL-10）是一種多功能的細(xì)胞因子，主要參與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)，能抑制腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。科研人員利用大腸桿菌構(gòu)建人IL-10工程菌，下圖為目的基因IL-10的部分序列。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：目的基因5'—ATGCACAGCTCA………ATACGAAACTGA—3'3'—TACGTGTCGAGT………TATGCTTTGACT—5'（1）科研人員可以從基因文庫(kù)中獲取人IL-10cDNA基因序列，也可以從相應(yīng)細(xì)胞中提取mRNA后，在______酶的作用下獲得cDNA.（2）利用PCR技術(shù)進(jìn)行目的基因的擴(kuò)增，應(yīng)設(shè)計(jì)的一對(duì)引物分別是______和______（寫(xiě)出引物序列的前9個(gè)核苷酸，方向由5'到3'）。（3）下圖顯示了IL-10基因附近的限制酶切割位點(diǎn)、pET-44質(zhì)粒的模式圖及其相關(guān)的限制酶切割位點(diǎn)，已知LacZ基因的表達(dá)產(chǎn)物為半乳糖苷酶，該酶催化X-gal分解產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，進(jìn)而使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落表現(xiàn)白色?？蒲腥藛T將轉(zhuǎn)化后的宿主菌接種在含有X-gal和氨芐青霉素的培養(yǎng)基上篩選陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子。據(jù)圖分析，完答下列問(wèn)題：①要將IL-10基因整合到大腸桿菌pET-44質(zhì)粒中，應(yīng)選用的兩種限制酶是______。②經(jīng)①中兩種限制酶的處理后，陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子的菌落呈現(xiàn)______色，理由是______。③若某科研小組僅選用NdeⅠ進(jìn)行酶切處理，含有重組質(zhì)粒的菌落______（填“能”“不能”或“不確定”）表達(dá)產(chǎn)生IL-10蛋白。④最初翻譯成的IL-10蛋白包含178個(gè)氨基酸，需切除18個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成的信號(hào)肽序列，才能產(chǎn)生成熟的IL-10蛋白。不能從大腸桿菌得到成熟的IL-10蛋白，原因是______。【答案】（1）逆轉(zhuǎn)錄（2）①.5'—ATGCACAGC—3'②.5'—TCAGTTTCG—3'（3）①.NdeⅠ和XhoⅠ②.白③.重組質(zhì)粒LacZ基因被破壞，無(wú)法正常表達(dá)合成半乳糖苷酶，進(jìn)而X-gal不能被分解產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，菌落呈現(xiàn)白色④.不確定⑤.蛋白質(zhì)的加工修飾發(fā)生在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體中，而原核生物大腸桿菌沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等細(xì)胞器，因而不能對(duì)多肽鏈進(jìn)行加工，無(wú)法獲得成熟的IL-10蛋白〖祥解〗基因工程的基本操作程序：①目的基因的篩選與獲?。虎诨虮磉_(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定。【解析】（1）以細(xì)胞中提取的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以脫氧核苷酸為原料，可以獲得IL-10基因的cDNA序列。（2）引物與DNA的兩條模板鏈結(jié)合，根據(jù)目的基因IL-10的部分序列可知，一對(duì)引物序列為分別為5'-ATGCACAGC-3'和5'-TCAGTTTCG-3'。（3）①為了篩選重組質(zhì)粒，必需保留抗生素抗性基因，不能選擇PstⅠ和BamHⅠ，采用雙酶切法，據(jù)圖分析選用的兩種限制酶是NdeⅠ和XhoⅠ。②由于IL-10基因插入質(zhì)粒LacZ基因所在位置，重組質(zhì)粒LacZ基因被破壞，無(wú)法正常表達(dá)合成半乳糖苷酶，因?yàn)樵撁复呋疿-gal分解產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，故X-gal不能被分解產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)使菌落呈現(xiàn)白色，因?yàn)殛?yáng)性轉(zhuǎn)化子為白色菌落。③在IL-10基因的上下游分別有一個(gè)NdeⅠ酶切位點(diǎn)，若是僅選用NdeⅠ進(jìn)行酶切處理，則會(huì)產(chǎn)生相同的兩個(gè)末端，構(gòu)建的重組質(zhì)粒會(huì)出現(xiàn)兩種情況：第一種是目的基因和質(zhì)粒的正向連接，該種連接可以獲得IL-10蛋白。第二種是目的基因和質(zhì)粒反向連接，反向連接使得目的基因無(wú)法表達(dá)，無(wú)法獲得IL-10蛋白，即若某科研小組僅選用NdeⅠ進(jìn)行酶切處理，含有重組質(zhì)粒的菌落不確定表達(dá)產(chǎn)生IL-10蛋白。④大腸桿菌是原核生物，只有核糖體，可以合成多肽鏈，但是沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等細(xì)胞器，而蛋白質(zhì)的加工修飾發(fā)生在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體中，因而大腸桿菌不能對(duì)合成的多肽鏈進(jìn)行加工，無(wú)法獲得成熟的IL-10蛋白。甘肅省酒泉市四校聯(lián)考2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中一、選擇題：本題共16小題，每小題3分，共48分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求。1.酒釀是一種傳統(tǒng)發(fā)酵食品，香甜醇美，其制作流程為：糯米洗凈→蒸熟→冷卻至30℃→與酒曲（含根霉、酵母菌等微生物）混勻→24℃～28℃發(fā)酵2天（包括糖化和酒化）→保存。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.混勻使微生物與糯米充分接觸B.糖化過(guò)程主要依賴(lài)于根霉分泌的酶C.發(fā)酵時(shí)應(yīng)加蓋密封以利于酒化D.常溫保存使酒釀保持甜味濃郁【答案】D〖祥解〗酒釀的制作過(guò)程中，發(fā)酵是一個(gè)關(guān)鍵步驟，這個(gè)過(guò)程中涉及到糖化和酒化兩個(gè)階段。糖化過(guò)程主要依賴(lài)于根霉分泌的酶，這些酶能夠?qū)⑴疵字械牡矸鄯纸鉃樘?，為酵母菌提供發(fā)酵的原料。酵母菌在發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生酒精，這就是酒化過(guò)程?！驹斘觥緼、混勻可以使酒曲中的微生物（根霉和酵母菌）與糯米充分接觸，有利于微生物的生長(zhǎng)和發(fā)酵過(guò)程的進(jìn)行，A正確；B、根霉分泌的酶能夠?qū)⑴疵字械牡矸鄯纸鉃樘牵瑸榻湍妇峁┌l(fā)酵的原料，B正確；C、發(fā)酵過(guò)程中，酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸，因此應(yīng)加蓋密封以利于酒化，C正確；D、應(yīng)在低溫下保存，抑制酵母菌繼續(xù)發(fā)酵，產(chǎn)生太多酒精，破壞風(fēng)味，D錯(cuò)誤。故選D。2.獲得純凈微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，無(wú)菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開(kāi)。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.滅菌和消毒均可以殺死環(huán)境中的一切微生物，包括芽孢和孢子B.分別對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間和操作者的衣物、手進(jìn)行滅菌和消毒C.為了避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，微生物接種應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行D.灼燒滅菌、干熱滅菌都屬于無(wú)菌技術(shù)，紫外線照射不屬于【答案】C〖祥解〗無(wú)菌技術(shù)：（1）關(guān)鍵：防止外來(lái)雜菌的入侵。（2）具體操作：①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒。②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。③為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周?chē)奈锲方佑|。【詳析】A、滅菌能夠殺死環(huán)境中的一切微生物，包括芽孢和孢子，消毒能夠殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物，不包括芽孢和孢子，A錯(cuò)誤；B、無(wú)菌操作時(shí)，對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣物和手進(jìn)行消毒，B錯(cuò)誤；C、為避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，這是因?yàn)榫凭珶艋鹧媾源嬖跓o(wú)菌區(qū)域，C正確；D、灼燒滅菌、干熱滅菌都屬于無(wú)菌技術(shù)，紫外線照射屬于滅菌，也屬于無(wú)菌技術(shù)，D錯(cuò)誤。故選C。3.自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中氮?dú)獾募?xì)菌。科研人員進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離實(shí)驗(yàn)，相關(guān)實(shí)驗(yàn)流程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.該實(shí)驗(yàn)中取樣獲取的土壤一般取自表層土壤B.圖中純化培養(yǎng)固氮菌時(shí)的方法是稀釋涂布平板法C.圖中所用培養(yǎng)基不需要添加氮源，培養(yǎng)基的pH應(yīng)在滅菌前調(diào)制成中性或弱堿性D.結(jié)合圖示并通過(guò)計(jì)算可知每克土壤中含有的自生固氮菌數(shù)目約為1.8×108個(gè)【答案】D〖祥解〗用稀釋涂布平板法測(cè)定菌落數(shù)時(shí)，在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求平均值，再通過(guò)計(jì)算得出總數(shù)?！驹斘觥緼、自生固氮菌為需氧細(xì)菌，獲取土壤時(shí)一般取自淺層土壤，A正確；B、圖示純化培養(yǎng)的方法是稀釋涂布平板法，其操作過(guò)程是用移液器將菌液滴加在培養(yǎng)基表面，再用滅菌后的涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面，B正確；C、自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中氮?dú)獾募?xì)菌，培養(yǎng)自生固氮菌時(shí)，不需要添加氮源，為了防止雜菌污染，應(yīng)先調(diào)pH再滅菌，且在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要將培養(yǎng)基在滅菌前調(diào)制成中性或弱堿性，C正確；D、結(jié)合圖示的結(jié)果可知，整個(gè)過(guò)程中稀釋倍數(shù)為106，故每克土壤中的固氮菌數(shù)目約為：（178＋180＋182）÷3÷0.1×106＝1.8×109個(gè)，D錯(cuò)誤。故選D。4.聚乙烯醇（PVA）是難降解的大分子有機(jī)物，PVA分解菌能產(chǎn)生PVA酶降解PVA.PVA可與碘形成藍(lán)綠色復(fù)合物，復(fù)合物被降解后藍(lán)綠色消失，形成透明圈。下圖為PVA分解菌的篩選過(guò)程，其中SG培養(yǎng)基為一種分離培養(yǎng)基，①~⑤表示過(guò)程，Ⅰ~Ⅲ表示菌落。下列敘述正確的是（）A.甲培養(yǎng)基為添加PVA和碘的選擇培養(yǎng)基，可篩選出PVA分解菌B.過(guò)程③應(yīng)選菌落Ⅱ中菌種進(jìn)行接種，該菌種分解PVA的能力最強(qiáng)C.若按圖中④所示的接種方法接種，接種環(huán)需要灼燒5次D.利用以PVA為唯一碳源的丙培養(yǎng)基對(duì)篩選出的PVA分解菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)【答案】B〖祥解〗微生物常見(jiàn)的接種方法：（1）平板劃線分離法：是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面，通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落；（2）涂布接種法：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的一種操作方法，由于將含菌材料現(xiàn)加到還較燙的培養(yǎng)基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡，而且采用稀釋倒平臺(tái)法也會(huì)使一些嚴(yán)格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長(zhǎng)，因此在微生物學(xué)研究中更常用的純種分離方法是涂布平板法，與劃線分離法相比，此方法可用于菌落計(jì)數(shù)?！驹斘觥緼、②的結(jié)果有透明圈，結(jié)合題目信息可知甲培養(yǎng)基為添加PVA和碘的鑒別培養(yǎng)基，可篩選出分解PVA能力強(qiáng)的PVA分解菌，A錯(cuò)誤；B、根據(jù)題目信息可知，PVA能與碘產(chǎn)生藍(lán)綠色復(fù)合物，PVA分解菌能產(chǎn)生PVA酶降解PVA，復(fù)合物被PVA分解菌降解后藍(lán)綠色消失形成透明圈，透明圈越大，說(shuō)明該菌種分解PVA的能力越強(qiáng)，故應(yīng)選擇透明圈最大的菌落Ⅱ進(jìn)行接種培養(yǎng)，B正確；C、純化菌種時(shí)，采用圖示方法接種時(shí)，每次劃線前后都要灼燒接種環(huán)，共有5個(gè)劃線區(qū)域，因此接種環(huán)需要灼燒6次，C錯(cuò)誤；D、可利用液體完全培養(yǎng)基對(duì)已篩選出的PVA分解菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。故選B。5.植物組織培養(yǎng)是植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)，下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A.取蘭花芽或莖尖作為外植體是因?yàn)檫@些部位的組織細(xì)胞分化程度低，全能性也低B.接種外植體后先暗處培養(yǎng)一段時(shí)間，再在光下培養(yǎng)C.莖尖材料消毒時(shí)，需用酒精和次氯酸鈉混合液沖洗D.生根試管苗在煉苗后，應(yīng)連帶培養(yǎng)基栽植于肥沃疏松基質(zhì)中【答案】B〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的過(guò)程為：離體的植物組織，器官或細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化（避光）形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化（需光）過(guò)程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育形成植株。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類(lèi)和比例，特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要?！驹斘觥緼、一般情況下，隨著分化程度的不斷提高，細(xì)胞的全能性逐漸降低，蘭花的芽或莖尖的組織細(xì)胞分化程度低，分裂能力強(qiáng)，細(xì)胞的全能性高，A錯(cuò)誤；B、接種外植體后，在脫分化形成愈傷組織階段需避光培養(yǎng)，當(dāng)愈傷組織再分化出芽和葉時(shí)，一定要有光照，有利于葉片內(nèi)葉綠素的合成，B正確；C、莖尖材料消毒時(shí)，將流水充分沖洗后的莖尖材料用酒精消毒30s，然后立即用無(wú)菌水清洗2~3次；再用次氯酸鈉溶液處理30min后，立即用無(wú)菌水清洗2~3次，C錯(cuò)誤；D、生根試管苗在培養(yǎng)箱內(nèi)生長(zhǎng)幾日，用流水清洗掉根部的培養(yǎng)基后，將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中，待其長(zhǎng)壯后再移栽入土，D錯(cuò)誤。故選B。6.郁金香甘肅省花，某研究員通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)郁金香種苗進(jìn)行快速繁殖及脫毒研究，若取郁金香莖段進(jìn)行組織培養(yǎng)，莖段未能誘導(dǎo)出愈傷組織，其原因不包括（）A.莖段接種時(shí)倒插B.激素配比不合理C.外植體消毒過(guò)度D.培養(yǎng)時(shí)遮光處理【答案】D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)技術(shù)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，人工配制的培養(yǎng)基上，給予適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件，誘導(dǎo)其生成完整植株的技術(shù)?！驹斘觥緼、將郁金香莖段切斷，形態(tài)學(xué)下端插入誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基中，不應(yīng)倒插，不符合題意，A正確；B、培養(yǎng)基中植物激素的濃度、比例等都會(huì)影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向，如生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素比例適中時(shí)有利于產(chǎn)生愈傷組織，不符合題意，B正確；C、外植體需要用70%的酒精消毒30s，立即用無(wú)菌水沖洗2~3次；再用5%的次氯酸鈉消毒30min后，立即用無(wú)菌水沖洗2~3次，若消毒過(guò)度會(huì)影響植物組織的活性，因而可能導(dǎo)致無(wú)愈傷組織產(chǎn)生，不符合題意，C正確；D、誘導(dǎo)愈傷組織的形成過(guò)程通常需要避光處理，這不會(huì)導(dǎo)致沒(méi)有愈傷組織產(chǎn)生，符合題意，D錯(cuò)誤。故選D。7.DHA俗稱(chēng)腦黃金，是構(gòu)成人腦神經(jīng)細(xì)胞膜的成分，若攝入不足會(huì)造成心腦血管方面的疾病?？蒲腥藛T利用富含DHA但生長(zhǎng)緩慢的綠色巴夫藻和不含DHA但生長(zhǎng)迅速的四鞭藻，培育出DHA含量高又生長(zhǎng)迅速的融合藻株，下列有關(guān)培育過(guò)程的敘述正確的是（）A.細(xì)胞融合之前必須用胰蛋白酶處理兩種藻，獲得有活力的原生質(zhì)體B.兩種原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是觀察到細(xì)胞核融合C.細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中含有的細(xì)胞類(lèi)型有3種D.通過(guò)第一次篩選獲得的融合藻株還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和DHA檢測(cè)【答案】D〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交是指將不同來(lái)源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。在進(jìn)行體細(xì)胞雜交之前，必須先利用纖維素酶和果膠酶去除這層細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體?！驹斘觥緼、兩種藻是植物，所以細(xì)胞融合之前應(yīng)用纖維素酶和果膠酶處理兩種藻，獲得有活力的原生質(zhì)體，A錯(cuò)誤；B、兩種原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中含有的細(xì)胞類(lèi)型有5種，四倍體的綠色巴夫藻，四倍體四鞭藻，融合的綠色巴夫藻-四鞭藻的融合體，未融合的兩種藻，C錯(cuò)誤；D、通過(guò)第一次篩選獲得的融合藻株還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和DHA檢測(cè)，以獲得DHA含量高又生長(zhǎng)迅速的融合藻株，D正確。故選D。8.通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)構(gòu)建的人造皮膚在治療大面積燒傷時(shí)具有較好的應(yīng)用前景，下列敘述正確的是（）A.由于對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)未全部研究清楚，培養(yǎng)時(shí)通常加入血清B.選擇非患者細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)獲得人造皮膚，可以降低免疫排斥的發(fā)生C.細(xì)胞培養(yǎng)獲得人造皮膚的過(guò)程中，可加入纖維素酶處理貼壁的細(xì)胞D.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需置于含有95%O2和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱【答案】A〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；（3）溫度和pH；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。【詳析】A、在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中通常需加入血清、血漿等一些天然成分，主要目的是為細(xì)胞提供促生長(zhǎng)因子，以補(bǔ)充細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖過(guò)程中所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，A正確；B、選擇患者自身的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)獲得人造皮膚，可以避免免疫排斥的發(fā)生，選擇非患者細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)獲得人造皮膚，一般會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞培養(yǎng)獲得人造皮膚的過(guò)程中，可加入胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理貼壁的細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需置于95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。故選A。9.我國(guó)科學(xué)家將iPS細(xì)胞注射到囊胚中得到存活并有生殖能力的小鼠。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.iPS細(xì)胞能分化成多種組織、器官B.可用iPS細(xì)胞治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血C.定期更換培養(yǎng)液有利于滿足iPS細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)代謝的營(yíng)養(yǎng)需求D.iPS細(xì)胞被稱(chēng)為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，均是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)的【答案】D〖祥解〗胚胎干細(xì)胞：（1）來(lái)源：哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng)ES或EK細(xì)胞，來(lái)源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來(lái)。（2）特點(diǎn)：具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造?！驹斘觥緼、iPS細(xì)胞可分化成多種不同的細(xì)胞或組織，A正確；B、由可利用體外制備的iPS細(xì)胞，誘導(dǎo)分化成正常的紅細(xì)胞，治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血，B正確；C、體外培養(yǎng)iPS，定期更換培養(yǎng)液可清除細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，避免代謝廢物積累對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒害作用，即定期更換培養(yǎng)液有利于滿足iPS細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)代謝的營(yíng)養(yǎng)需求，C正確；D、除成纖維細(xì)胞外，已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞，D錯(cuò)誤。故選D。10.乙型肝炎病毒（HBV）感染是全球公共衛(wèi)生的重大挑戰(zhàn)，目前尚無(wú)徹底治愈的方案，現(xiàn)階段治療的主要目標(biāo)是實(shí)現(xiàn)功能性治愈（HBsAg為其標(biāo)志性抗原）。抗HBV單克隆抗體的研究不僅有助于深入解析HBV感染機(jī)制，還能加深對(duì)機(jī)體免疫反應(yīng)的理解，并為疫苗開(kāi)發(fā)提供重要支持。下列敘述正確的是（）A.血清中檢測(cè)到HBsAg和HBV-DNA，說(shuō)明HBV在血漿中增殖B.制備抗HBsAg單克隆抗體需骨髓瘤細(xì)胞和T細(xì)胞融合獲得雜種細(xì)胞C.制備的抗HBsAg單克隆抗體可使被HBV感染的肝細(xì)胞裂解死亡D.抗HBsAg單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高，可用于人體血液中HBV的檢測(cè)【答案】D〖祥解〗單克隆抗體的制備流程：人工誘導(dǎo)經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，通過(guò)培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞得到單克隆抗體?！驹斘觥緼、病毒過(guò)寄生生活，乙肝病毒只能在肝細(xì)胞中增殖，A錯(cuò)誤；B、制備抗HBsAg單克隆抗體需要骨髓瘤細(xì)胞和B細(xì)胞融合獲得雜種細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、抗HBsAg單克隆抗體只能識(shí)別抗原，不能使靶細(xì)胞裂解死亡，C錯(cuò)誤；D、單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高，可以大量制備，已被廣泛應(yīng)用于疾病的診斷和治療，大量靈敏的抗HBsAg單克隆抗體還可用于人體血液中HBV的檢測(cè)，D正確。故選D。11.在部分地區(qū)，牛的胚胎移植技術(shù)已進(jìn)入生產(chǎn)應(yīng)用階段，胚胎移植時(shí)受體母牛須具備的條件是（）A.具有產(chǎn)奶量較高等優(yōu)良性狀B.與供體母牛的遺傳特性一致C.免疫力正常且具有健康體質(zhì)D.與供體母牛的繁殖潛能相當(dāng)【答案】C〖祥解〗胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查?！驹斘觥抗w母牛的主要職能是產(chǎn)生具有優(yōu)良遺傳特性的胚胎；受體母牛必須具備健康的體質(zhì)和正常的繁殖能力。ABD錯(cuò)誤，C正確。故選C。12.一種能實(shí)現(xiàn)“線粒體置換”目的的技術(shù)原理如圖所示，該技術(shù)可預(yù)防人類(lèi)線粒體遺傳病傳給子代。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.患者第一極體基本不攜帶線粒體遺傳病的致病基因B.重組次級(jí)卵母細(xì)胞膜外極體的遺傳物質(zhì)與患者相同C.可將受精卵培養(yǎng)至囊胚期時(shí)移植到患者的子宮中D.精子體外獲能處理后才能與重組次級(jí)卵母細(xì)胞受精【答案】B〖祥解〗圖示是體外受精技術(shù)培育試管動(dòng)物的大致流程，體外受精包括精子的采集和獲能、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、受精作用?！驹斘觥緼、第一極體是卵原細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)第一次分裂產(chǎn)生的，線粒體存在于細(xì)胞質(zhì)中，減數(shù)第一次分裂主要是同源染色體分離，第一極體基本不含細(xì)胞質(zhì)，也就基本不攜帶線粒體遺傳病的致病基因，A不符合題意；B、重組次級(jí)卵母細(xì)胞是患者的卵母細(xì)胞核移植到供體去核的次級(jí)卵母細(xì)胞中形成的，其細(xì)胞膜外極體的遺傳物質(zhì)來(lái)自供體，與患者不同，B符合題意；C、在胚胎移植時(shí)，可將受精卵培養(yǎng)至桑葚胚或囊胚期時(shí)移植到患者的子宮中，C不符合題意；D、精子在體外需要進(jìn)行獲能處理后，才具備與卵子受精的能力，D不符合題意。故選B。13.如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的部分操作流程。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.將圖1中的研磨液過(guò)濾后保留沉淀B.圖2過(guò)程，用玻璃棒進(jìn)行快速交叉攪拌會(huì)使DNA析出更快C.圖2析出得到的白色絲狀物只能溶于2mol/L的NaCl溶液D.圖3對(duì)提取后的DNA進(jìn)行鑒定，兩支試管中均要加入二苯胺試劑【答案】D〖祥解〗DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理：①DNA在NaCl溶液中的溶解度，是隨著NaCl的濃度變化而改變的，當(dāng)NaCl的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí)，DNA的溶解度最低，利用這一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液，利用這一原理，可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA；③洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜但是對(duì)DNA沒(méi)有影響；④蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度，在80°C條件下會(huì)變性，而DNA對(duì)溫度的耐受性較高；⑤DNA遇二苯膠（沸水?。?huì)染成藍(lán)色，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑?！驹斘觥緼、圖1中新鮮洋蔥研磨后DNA存在于研磨液中，過(guò)濾后應(yīng)保留濾液，A錯(cuò)誤；B、圖2過(guò)程，用玻璃棒要輕輕攪拌且攪拌要沿同一方向進(jìn)行，防止DNA分子斷裂，B錯(cuò)誤；C、圖2析出得到的白色絲狀物主要成分是DNA，DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度高，并不是只能溶于2mol/L的NaCl溶液，C錯(cuò)誤；D、圖3對(duì)提取后的DNA進(jìn)行鑒定，作為對(duì)照，兩支試管中均要加入等量的二苯胺試劑，D正確。故選D。14.PCR是“聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction）”的英文簡(jiǎn)寫(xiě)，在基因工程的四個(gè)主要階段中一般不會(huì)用到PCR技術(shù)的是（）A.目的基因的獲取和擴(kuò)增B.檢測(cè)基因表達(dá)載體構(gòu)建是否成功C.將含有目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞D.目的基因的檢測(cè)與鑒定（是否導(dǎo)入及其表達(dá)情況）【答案】C〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、如果目的基因的一段序列已知，可以根據(jù)已知序列設(shè)計(jì)引物，通過(guò)PCR技術(shù)獲取和擴(kuò)增目的基因，A不符合題意；B、根據(jù)目的基因的序列設(shè)計(jì)引物，用構(gòu)建的基因表達(dá)載體作模板，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增載體，如果有擴(kuò)增產(chǎn)物，說(shuō)明載體構(gòu)建成功，B不符合題意；C、將含有目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞通常是物理或化學(xué)方法，比如轉(zhuǎn)化法將質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌，或者用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞等，這個(gè)過(guò)程不需要PCR技術(shù)，C符合題意；D、通過(guò)PCR技術(shù)可檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入目的基因及其在受體細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，D不符合題意。故選C。15.限制酶HindⅢ和XhoI的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別為A↓AGCTT和C↓TCGAG，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.兩種限制酶能識(shí)別單鏈DNA分子并特異性切割B.兩種限制酶切割形成的黏性末端都是—AGCTC.兩種限制酶切割時(shí)斷開(kāi)的化學(xué)鍵不完全相同D.操作中可通過(guò)控制反應(yīng)時(shí)間、酶的濃度等控制酶切效果【答案】D〖祥解〗限制性核酸內(nèi)切酶是可以識(shí)別并附著特定的核苷酸序列，并對(duì)每條鏈中特定部位的兩個(gè)脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割的一類(lèi)酶，簡(jiǎn)稱(chēng)限制酶。【詳析】A、兩種限制酶能識(shí)別雙鏈DNA分子并特異性切割，A錯(cuò)誤；B、HindⅢ切割形成的黏性末端是-AGCTT，而XhoI切割形成的黏性末端都是-TCGAG，B錯(cuò)誤；C、兩種限制酶切割時(shí)斷開(kāi)的化學(xué)鍵完全相同，均為磷酸二酯鍵，C錯(cuò)誤；D、實(shí)驗(yàn)中可通過(guò)控制反應(yīng)時(shí)間、酶的濃度、溫度、底物的量等控制酶切效果，D正確。故選D。16.研究人員將胰島素B鏈的第28位氨基酸替換為天冬氨酸，抑制了胰島素聚合，從而獲得速效胰島素類(lèi)似物。下列敘述正確的是（）A.該產(chǎn)品是通過(guò)直接改造胰島素來(lái)生產(chǎn)的B.改變氨基酸的種類(lèi)不會(huì)影響胰島素的空間結(jié)構(gòu)C.可通過(guò)定向誘導(dǎo)胰島素基因堿基增添達(dá)到改造目的D.胰島素改造的基本思路與天然蛋白質(zhì)合成過(guò)程相反【答案】D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程概念及基本原理（1）蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）。（2）蛋白質(zhì)工程崛起的緣由：基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)。（3）蛋白質(zhì)工程的基本原理：它可以根據(jù)人的需求來(lái)設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，又稱(chēng)為第二代的基因工程。（4）基本途徑：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），最終還是回到基因工程上來(lái)解決蛋白質(zhì)的合成?！驹斘觥緼、蛋白質(zhì)工程最終還是回到基因工程上來(lái)解決蛋白質(zhì)的合成，即改造胰島素的過(guò)程實(shí)際是改造胰島素基因的過(guò)程，A錯(cuò)誤；B、氨基酸的種類(lèi)及排列順序影響蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，B錯(cuò)誤；C、可通過(guò)定向誘導(dǎo)胰島素基因堿基替換達(dá)到第28位氨基酸替換為天冬氨酸的目的，C錯(cuò)誤；D、蛋白質(zhì)工程的基本途徑是預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），胰島素改造的基本思路與天然蛋白質(zhì)合成過(guò)程（基因→蛋白質(zhì)合成）相反，D正確。故選D。二、非選擇題：本題共5小題，共52分。17.維生素K2在預(yù)防骨質(zhì)疏松、心血管疾病等方面具有重要作用?？蒲腥藛T以淀粉芽孢桿菌（GSA-184）為研究對(duì)象，通過(guò)優(yōu)化發(fā)酵工藝，提高了維生素K2的產(chǎn)量。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）從土壤中篩選芽孢桿菌時(shí)，利用的培養(yǎng)基成分含有酵母浸粉、蛋白胨、NaCl和水等。其中蛋白胨提供的主要營(yíng)養(yǎng)為_(kāi)_____和維生素等。（2）科研人員進(jìn)行了優(yōu)化培養(yǎng)基碳源的實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。據(jù)圖判斷，若對(duì)菌株GSA-184擴(kuò)大培養(yǎng)，所用培養(yǎng)基的最佳碳源是______；若想大量獲取維生素K2，所用培養(yǎng)基的最佳碳源是______。（3）科研人員探究了菌株GSA-184在不控制pH和控制pH為7.0條件下的發(fā)酵情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2和圖3所示。兩種條件下的溶解氧在發(fā)酵3h內(nèi)從100%附近急劇下降到2%附近，說(shuō)明______；在圖2中，發(fā)酵80h后溶解氧開(kāi)始從2%附近逐漸上升，可能的原因是______。對(duì)比圖2和圖3，______條件下有助于維持菌體的活性，從而提高維生素K2產(chǎn)量?！敬鸢浮浚?）碳源、氮源（2）①.L-阿拉伯糖②.甘油（3）①.該菌株為需氧型，發(fā)酵初期菌體繁殖耗氧量很大②.發(fā)酵罐內(nèi)的pH較高，菌體活性降低且菌體數(shù)量下降，耗氧量逐漸減少③.穩(wěn)定而合理的pH〖祥解〗培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無(wú)氧的條件?！窘馕觥浚?）在微生物培養(yǎng)基中，蛋白胨含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，其主要為微生物生長(zhǎng)提供氮源、碳源和維生素等。因?yàn)榈鞍纂耸菍⒌鞍踪|(zhì)經(jīng)過(guò)酶解等處理得到的，其中的含氮有機(jī)物可作為氮源，同時(shí)其中的碳元素也可為微生物提供碳源等。（2）擴(kuò)大培養(yǎng)菌株GSA-184，目的是讓菌株數(shù)量增多，也就是要使活菌生物量達(dá)到最大。從圖1中可以看出，在以L-阿拉伯糖為碳源時(shí)，活菌生物量的數(shù)值最高。所以若對(duì)菌株GSA-184擴(kuò)大培養(yǎng)，所用培養(yǎng)基的最佳碳源是L-阿拉伯糖；若想大量獲取維生素K2，就要找使維生素K2產(chǎn)量最高的碳源。從圖中可知，當(dāng)以甘油為碳源時(shí)，維生素K2產(chǎn)量的數(shù)值最大。所以若想大量獲取維生素K2，所用培養(yǎng)基的最佳碳源是甘油。（3）兩種條件下的溶解氧在發(fā)酵3h內(nèi)從100%附近急劇下降到2%附近，這說(shuō)明該菌株為需氧型，發(fā)酵初期菌體繁殖耗氧量很大；在圖2中，發(fā)酵80h后溶解氧開(kāi)始從2%附近逐漸上升，可能是發(fā)酵罐內(nèi)的pH較高，菌體活性降低且菌體數(shù)量減少，耗氧量逐漸減少；對(duì)比圖2（不控制pH）和圖3（控制pH為7.0），可以發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定而合理的pH，控制pH為7.0時(shí)，維生素K2產(chǎn)量更高，活菌生物量在后期也能維持相對(duì)較好的水平，這說(shuō)明控制pH為7.0條件下有助于維持菌體的活性，從而提高維生素K2產(chǎn)量。18.鐵皮石斛具有益胃生津、滋陰清熱的功效，其主要成分石斛多糖具有提高機(jī)體免疫力的功能。自然條件下其繁殖力很低，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖鐵皮石斛是解決其資源短缺的有效途徑。相關(guān)的培育流程如圖所示，數(shù)字代表相關(guān)過(guò)程?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）過(guò)程①是_____，該過(guò)程進(jìn)行前一般需要用_____法對(duì)使用的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。（2）繼代培養(yǎng)是繼初代培養(yǎng)之后連續(xù)數(shù)代的擴(kuò)培過(guò)程，旨在繁殖出相當(dāng)數(shù)量的無(wú)根苗，最后能達(dá)到邊繁殖邊生根的目的。該過(guò)程_____（填“需要”或“不需要”）光照，所用的培養(yǎng)基與②過(guò)程的主要區(qū)別是_____。（3）通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖鐵皮石斛，屬于_____繁殖，這種繁殖方式的優(yōu)點(diǎn)是_____。（4）若要通過(guò)植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)石斛多糖，需將外植體培養(yǎng)到_____（填結(jié)構(gòu)名稱(chēng)）階段。該技術(shù)不占用耕地，幾乎不受_____等的限制，因此對(duì)于社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、環(huán)境保護(hù)具有重要意義?！敬鸢浮浚?）①.接種②.高壓蒸汽滅菌（2）①.需要②.生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同（3）①.無(wú)性②.能保持親本的優(yōu)良性狀、繁殖速度快、可大量培養(yǎng)脫毒苗等（4）①.愈傷組織②.季節(jié)、氣候〖祥解〗（1）植物組織培養(yǎng)技術(shù)是根據(jù)植物細(xì)胞具有全能性這一理論，在無(wú)菌條件下，將植物體的一部分（如器官、組織或細(xì)胞）接種到人工配制的培養(yǎng)基上，提供適宜的環(huán)境條件，使其生長(zhǎng)、分化并最終發(fā)育成完整的植株或其他有用的產(chǎn)物。這項(xiàng)技術(shù)不僅能夠快速繁殖優(yōu)良品種，還能夠在短時(shí)間內(nèi)大量生產(chǎn)藥物、香料等珍貴植物產(chǎn)品，并且可以用于病毒侵染鑒定、脫毒處理、種質(zhì)保存以及遠(yuǎn)緣雜交育種等多個(gè)方面；（2）植物組織培養(yǎng)中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素使用比例對(duì)植物細(xì)胞發(fā)育的影響：生長(zhǎng)素用量比細(xì)胞分裂素用量，比值高時(shí)，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時(shí)，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的形成?！窘馕觥浚?）植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，過(guò)程①是接種。培養(yǎng)基的滅菌方法一般是高壓蒸汽滅菌法，因?yàn)楦邏赫羝麥缇茉诟邷馗邏合職⑺琅囵B(yǎng)基中的所有微生物，包括細(xì)菌、真菌、芽孢等，保證培養(yǎng)基的無(wú)菌環(huán)境，為后續(xù)的組織培養(yǎng)提供良好條件；（2）繼代培養(yǎng)過(guò)程中，植物組織需要進(jìn)行光合作用相關(guān)的生理活動(dòng)，合成有機(jī)物等，所以需要光照。②過(guò)程是脫分化形成愈傷組織，而繼代培養(yǎng)是在愈傷組織基礎(chǔ)上進(jìn)行的進(jìn)一步培養(yǎng)，其所用培養(yǎng)基與脫分化過(guò)程培養(yǎng)基的主要區(qū)別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同。生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的不同比例會(huì)影響植物組織的分化方向和生長(zhǎng)狀態(tài)，在繼代培養(yǎng)中需要調(diào)整合適的比例來(lái)促進(jìn)無(wú)根苗的繁殖和生根；（3）植物組織培養(yǎng)沒(méi)有經(jīng)過(guò)兩性生殖細(xì)胞的結(jié)合，屬于無(wú)性繁殖。無(wú)性繁殖的優(yōu)點(diǎn)有很多，比如能保持親本的優(yōu)良性狀，因?yàn)樽哟倪z傳物質(zhì)與親本基本相同，不會(huì)出現(xiàn)性狀分離；繁殖速度快，可以在短時(shí)間內(nèi)獲得大量的植株；可大量培養(yǎng)脫毒苗，通過(guò)選取植物的特定部位（如莖尖）進(jìn)行培養(yǎng)，可以去除植物體內(nèi)的病毒，獲得無(wú)病毒的健康植株等；（4）若要通過(guò)植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)石斛多糖，需將外植體培養(yǎng)到愈傷組織階段，因?yàn)橛鷤M織細(xì)胞代謝旺盛，能合成和積累大量的石斛多糖等物質(zhì)。該技術(shù)不占用耕地，幾乎不受季節(jié)、氣候等的限制，在室內(nèi)等人工控制的環(huán)境下就可以進(jìn)行培養(yǎng)，因此對(duì)于社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、環(huán)境保護(hù)具有重要意義。19.下圖是我國(guó)科學(xué)家利用胚胎干細(xì)胞建立體外胚胎和胚胎發(fā)育潛能研究的流程。人胚胎干細(xì)胞存在兩種不同狀態(tài)，即原始態(tài)（naive）和始發(fā)態(tài)（primed）。naive干細(xì)胞具有最高的發(fā)育潛能，prime