撫州市人民醫(yī)院真菌鏡檢與培養(yǎng)技術(shù)考核一、單選題（共10題，每題2分，計20分）1.撫州市人民醫(yī)院真菌鏡檢中，最常用的染色方法是？A.革蘭染色B.抗酸染色C.墨汁負染D.嗜銀染色E.蘇木精染色2.真菌培養(yǎng)中，用于分離酵母菌和霉菌的培養(yǎng)基通常是？A.血瓊脂平板B.沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）C.麥康凱瓊脂D.中國藍瓊脂E.巧克力瓊脂3.真菌菌落形態(tài)特征中，哪項是白色念珠菌的典型表現(xiàn)？A.絨毛狀，白色，邊緣整齊B.黏液狀，無色透明C.絲絨狀，粉色或紅色D.顆粒狀，黃色E.膜狀，灰綠色4.真菌鏡檢時，假菌絲的形成通常提示哪種真菌？A.新型隱球菌B.曲霉菌C.白色念珠菌D.鐮刀菌E.毛霉菌5.真菌培養(yǎng)中，哪些真菌在室溫（25℃）條件下生長較快？A.隱球菌屬B.曲霉菌屬C.念珠菌屬D.毛霉菌屬E.鐮刀菌屬6.真菌培養(yǎng)陽性標本，初步鑒定時首先觀察的是？A.菌落顏色B.菌落形態(tài)C.革蘭染色結(jié)果D.顯微鏡下形態(tài)E.生化反應7.撫州市人民醫(yī)院夏季分離率較高的機會性真菌是？A.白色念珠菌B.光滑念珠菌C.熱帶念珠菌D.曲霉菌E.隱球菌8.真菌培養(yǎng)中，以下哪項操作有助于提高霉菌檢出率？A.增菌培養(yǎng)B.使用低糖培養(yǎng)基C.延長培養(yǎng)時間至7天以上D.厭氧培養(yǎng)E.高溫培養(yǎng)9.真菌鏡檢中，哪種真菌可見“出芽雙相形態(tài)”？A.曲霉菌B.新型隱球菌C.白色念珠菌D.毛霉菌E.鐮刀菌10.真菌培養(yǎng)中，以下哪種條件最適合曲霉菌生長？A.pH7.2-7.4，營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基B.厭氧環(huán)境C.高鹽培養(yǎng)基D.低溫（4℃）培養(yǎng)E.無菌空氣二、多選題（共5題，每題3分，計15分）1.真菌鏡檢時，哪些形態(tài)特征有助于鑒別曲霉菌和毛霉菌？A.菌絲有隔B.菌絲無隔C.孢子囊形態(tài)D.菌絲顏色E.生長速度2.真菌培養(yǎng)中，哪些培養(yǎng)基適合用于真菌分離培養(yǎng)？A.沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）B.酵母菌蛋白胨葡萄糖瓊脂（YPD）C.血瓊脂平板D.麥康凱瓊脂E.馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）3.真菌感染患者標本中，哪些指標提示機會性真菌感染風險增高？A.免疫功能低下B.長期使用廣譜抗生素C.住院時間超過1周D.留置中心靜脈導管E.正常菌群定植4.真菌培養(yǎng)陽性后，進行初步鑒定時需觀察哪些特征？A.菌落形態(tài)（顏色、質(zhì)地）B.顯微鏡下形態(tài)（菌絲、孢子）C.菌落生長速度D.生化反應E.培養(yǎng)溫度偏好5.撫州市人民醫(yī)院常見真菌污染源包括？A.空氣傳播B.醫(yī)療器械（如呼吸機管路）C.患者皮膚黏膜定植D.病房環(huán)境（空調(diào)系統(tǒng)）E.供水系統(tǒng)三、判斷題（共10題，每題1分，計10分）1.真菌鏡檢時，墨汁負染是觀察真菌細胞壁結(jié)構(gòu)的最佳方法。（×）2.真菌培養(yǎng)中，所有真菌均在37℃條件下生長最佳。（×）3.白色念珠菌在顯微鏡下可見假菌絲和芽生孢子。（√）4.曲霉菌培養(yǎng)陽性時，需注意鑒別其與黑曲霉、黃曲霉的種間差異。（√）5.真菌感染標本采集時，應避免使用含消毒劑的容器。（√）6.鐮刀菌在真菌培養(yǎng)中通常表現(xiàn)為快速生長的絲狀菌落。（√）7.真菌鏡檢時，假菌絲是念珠菌屬的特征性結(jié)構(gòu)。（×）8.真菌培養(yǎng)陽性后，需進行藥敏試驗以指導臨床用藥。（√）9.撫州市人民醫(yī)院夏季分離率較高的真菌通常是條件致病菌。（√）10.真菌培養(yǎng)中，所有霉菌均可見典型的分生孢子囊結(jié)構(gòu)。（×）四、簡答題（共5題，每題5分，計25分）1.簡述真菌鏡檢時墨汁負染的操作步驟及注意事項。2.簡述真菌培養(yǎng)中沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）的用途及配制方法。3.簡述撫州市人民醫(yī)院夏季真菌感染常見的病原菌種類及其臨床意義。4.簡述真菌培養(yǎng)陽性后，進行初步鑒定的常用方法及步驟。5.簡述真菌感染標本采集的要點及常見誤區(qū)。五、論述題（共2題，每題10分，計20分）1.結(jié)合撫州市人民醫(yī)院的實際情況，論述真菌鏡檢與培養(yǎng)技術(shù)的質(zhì)量控制措施。2.結(jié)合臨床案例，論述真菌感染標本的及時送檢對診斷和治療的重要性。答案與解析一、單選題1.C墨汁負染是真菌鏡檢最常用的染色方法，尤其適用于觀察隱球菌莢膜和酵母菌形態(tài)。2.B沙氏葡萄糖瓊脂（SDA）是分離酵母菌和霉菌的常用培養(yǎng)基。3.A白色念珠菌典型表現(xiàn)為絨毛狀、白色、邊緣整齊的菌落。4.C假菌絲是念珠菌屬的特征性結(jié)構(gòu)，表現(xiàn)為菌絲分枝但無橫隔。5.D毛霉菌等絲狀真菌在室溫（25℃）條件下生長較快。6.B初步鑒定時首先觀察菌落形態(tài)，如顏色、質(zhì)地、生長速度等。7.C撫州市夏季高溫高濕，熱帶念珠菌分離率較高。8.C延長培養(yǎng)時間至7天以上有助于提高霉菌檢出率。9.C白色念珠菌在顯微鏡下可見出芽雙相形態(tài)（酵母相和菌絲相）。10.A曲霉菌在pH7.2-7.4、營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上生長最佳。二、多選題1.A、B、C曲霉菌菌絲有隔，毛霉菌菌絲無隔；孢子囊形態(tài)（曲霉菌為球形，毛霉菌為柱狀）；菌絲顏色（曲霉菌為綠色，毛霉菌為黑色）。2.A、B、ESDA、YPD、PDA適合真菌分離培養(yǎng)；麥康凱瓊脂用于腸道細菌培養(yǎng)；血瓊脂平板用于細菌培養(yǎng)。3.A、B、C、D免疫功能低下、廣譜抗生素使用、長期住院、留置導管均增加機會性真菌感染風險。4.A、B、C、D菌落形態(tài)、顯微鏡下形態(tài)、生長速度、生化反應均需觀察；培養(yǎng)溫度偏好需結(jié)合生長條件分析。5.A、B、C、D、E真菌污染源包括空氣、醫(yī)療器械、皮膚黏膜定植、病房環(huán)境、供水系統(tǒng)等。三、判斷題1.×墨汁負染主要用于觀察隱球菌莢膜，革蘭染色或抗酸染色更適用于其他真菌。2.×部分真菌（如霉菌）在室溫或25℃生長更快，37℃僅適合部分酵母菌。3.√白色念珠菌可見假菌絲和芽生孢子。4.√曲霉菌需鑒別黑曲霉、黃曲霉等近緣種。5.√消毒劑會破壞真菌結(jié)構(gòu)，影響鏡檢和培養(yǎng)結(jié)果。6.√鐮刀菌為快速生長的絲狀真菌。7.×假菌絲是念珠菌屬特征，出芽雙相形態(tài)是酵母菌特征。8.√真菌培養(yǎng)陽性后需進行藥敏試驗指導用藥。9.√撫州市夏季高溫高濕，熱帶念珠菌等條件致病菌分離率較高。10.×部分霉菌（如曲霉菌）無典型分生孢子囊結(jié)構(gòu)。四、簡答題1.墨汁負染操作步驟及注意事項：-將少量標本置于載玻片中央，滴加墨汁，蓋上蓋玻片輕壓；-熒光顯微鏡下觀察，真菌結(jié)構(gòu)不著色，背景呈黑色；-注意事項：避免標本過厚導致壓碎，墨汁需新鮮無凝塊。2.SDA的用途及配制：-用途：分離酵母菌和霉菌，尤其用于隱球菌培養(yǎng)；-配制：葡萄糖20g、蛋白胨10g、瓊脂15g，加蒸餾水至1000mL，高壓滅菌。3.撫州市夏季常見真菌及臨床意義：-熱帶念珠菌、白色念珠菌、曲霉菌；-臨床意義：免疫功能低下患者易感染，需及時診斷并抗真菌治療。4.真菌培養(yǎng)初步鑒定方法及步驟：-觀察：菌落形態(tài)（顏色、質(zhì)地）、顯微鏡下形態(tài)；-生化試驗：如糖發(fā)酵試驗、重氮試驗等；-生長溫度：25℃和37℃生長情況。5.真菌感染標本采集要點及誤區(qū)：-要點：無菌操作、避免污染、及時送檢；-誤區(qū)：使用含消毒劑容器、標本過度處理、未注明采集時間。五、論述題1.真菌鏡檢與培養(yǎng)技術(shù)的質(zhì)量控制措施：-標本采集規(guī)范：避免污染；-鏡檢質(zhì)量控制：墨汁負染標準化操作；-培養(yǎng)質(zhì)量控制：培養(yǎng)基配制準確、滅菌徹底；-鑒定質(zhì)量