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文檔簡介
2025年大學《生物技術》專業(yè)題庫——質譜技術在生物分析中的應用考試時間:______分鐘總分:______分姓名:______一、選擇題(每題2分,共20分)1.在質譜中,用于將離子按照質荷比(m/z)分離的主要物理過程是?A.離子的生成B.離子的電離C.離子在電場或磁場中的偏轉D.離子檢測2.下列哪種電離方式通常適用于分析極性、熱不穩(wěn)定的小分子,如代謝物?A.MALDIB.ESIC.ICPD.GC-MS中的EI3.質譜圖中的基峰(BasePeak)通常代表?A.最重的離子B.最多的離子C.最穩(wěn)定的離子D.質譜儀的本底噪聲4.蛋白質組學研究中,用于鑒定蛋白質分子量大小和結構信息的常用質譜技術是?A.MALDI-TOFMSB.ESI-Q-TOFMSC.OrbitrapMSD.LC-MS/MS5.在進行蛋白質質譜分析時,樣品前處理中“酶解”的主要目的是?A.去除樣品中的鹽分B.將蛋白質分解成較小的肽段,便于分析C.對蛋白質進行染色D.使蛋白質變性6.代謝組學研究的目的是什么?A.鑒定生物體內(nèi)的蛋白質種類和數(shù)量B.定量分析生物體內(nèi)所有小分子代謝物的種類和豐度C.研究基因的表達調(diào)控機制D.鑒定微生物的種類7.下面哪種技術通常不與質譜聯(lián)用進行生物樣品分析?A.液相色譜(LC)B.氣相色譜(GC)C.離子交換色譜(IEX)D.毛細管電泳(CE)8.質譜儀的靈敏度通常用哪種指標來衡量?A.分辨率B.精度C.檢測限(LOD)或定量限(LOQ)D.掃描速度9.同位素標記技術(如13C標記)在代謝組學研究中主要用來?A.提高質譜儀的靈敏度B.區(qū)分結構相似的非標記分子C.降低樣品前處理復雜度D.鑒定蛋白質的翻譯后修飾10.質譜技術在食品安全檢測中可以用于哪些分析?(多選,請將選項字母填寫在括號內(nèi))A.農(nóng)藥殘留檢測B.食品添加劑分析C.獸藥殘留篩查D.食品過敏原鑒定E.外源污染物檢測二、填空題(每空1分,共15分)1.質譜的英文全稱是________。2.根據(jù)分離原理,質譜儀可分為________質譜儀、________質譜儀和________質譜儀。3.MALDI通常使用的矩陣物質有________、________等。4.ESI有________、________兩種基本形式。5.蛋白質質譜中,________是指酶解后的肽段經(jīng)過液相色譜分離,依次進入質譜儀進行質譜掃描得到的一組質譜圖。6.代謝組學根據(jù)分析對象的不同,可分為________代謝組學、________代謝組學和________代謝組學。7.質譜數(shù)據(jù)的定量分析方法主要包括________定量、________定量和________定量。三、名詞解釋(每題3分,共12分)1.分子量2.質荷比(m/z)3.蛋白質組學4.數(shù)據(jù)依賴采集(DDA)四、簡答題(每題5分,共20分)1.簡述MALDI-TOFMS和ESI-Q-TOFMS在質譜分析中的主要區(qū)別。2.簡述生物樣品進行質譜分析前通常需要進行哪些預處理步驟,并說明每一步的目的。3.簡述質譜技術在藥物代謝研究中的應用過程。4.簡述蛋白質質譜圖中,如何通過肽質量指紋圖譜(PMF)來鑒定蛋白質。五、論述題(每題7分,共14分)1.論述質譜技術在蛋白質組學研究中的優(yōu)勢、局限性以及克服這些局限性的方法。2.論述代謝組學分析在系統(tǒng)生物學研究中的意義,并舉例說明其在疾病診斷或藥物研發(fā)中的應用潛力。試卷答案一、選擇題(每題2分,共20分)1.C2.B3.B4.A5.B6.B7.D8.C9.B10.A,B,C,D,E二、填空題(每空1分,共15分)1.MassSpectrometry2.時間飛行(Time-of-Flight),四極桿(Quadrupole),離子阱(IonTrap)3.吡啶,三氟乙酸4.帶正電(PositiveESI),帶負電(NegativeESI)5.質譜聯(lián)用(TandemMassSpectrometry/MS/MS)6.細胞,組織,代謝物7.鑒定(LigandIdentification)定量(Quantification),相對定量(RelativeQuantification)三、名詞解釋(每題3分,共12分)1.分子量:一個分子中所有原子的相對原子質量的總和。2.質荷比(m/z):離子質量與所帶電荷量的比值,是質譜中分離和檢測離子的基本參數(shù)。3.蛋白質組學:研究生物體內(nèi)所有蛋白質種類、數(shù)量、結構、功能及其動態(tài)變化規(guī)律的科學領域。4.數(shù)據(jù)依賴采集(DDA):一種質譜數(shù)據(jù)采集模式,系統(tǒng)根據(jù)前一次掃描得到的信號強度自動選擇下一個進行分析的肽段或離子。四、簡答題(每題5分,共20分)1.MALDI-TOFMS通常通過激光解吸電離,適用于分析分子量較大的分子(如蛋白質),提供較高的分子量精確度,但離子類型單一(通常是單電荷離子),且為非選擇性離子源。ESI-Q-TOFMS通過電噴霧電離,可產(chǎn)生多電荷離子,提高了低分子量物質的靈敏度,并具有較好的選擇性和質量精確度,可以通過Q-TOF部分進行高精度質量分析。2.生物樣品質譜分析前處理通常包括:樣品提?。ㄈコs質,使目標物溶解)、純化(去除干擾物,提高信號質量)、濃縮(增加目標物濃度)和酶解(將蛋白質分解為肽段,便于液相色譜分離和質譜分析)。目的分別是提高分析效率、保證數(shù)據(jù)質量和適應質譜儀的進樣要求。3.質譜技術在藥物代謝研究中的應用:首先通過LC-MS/MS或LC-TOFMS等技術對服藥前后生物樣本(如血漿、尿液)進行分離和檢測,鑒定藥物原型及其代謝產(chǎn)物,確定代謝途徑(如氧化、還原、水解),定量分析原型藥和代謝物的濃度變化,評估藥物的吸收、分布、代謝和排泄(ADME)過程。4.通過酶解將目標蛋白質分解成一系列肽段,然后使用液相色譜將肽段分離,每個肽段進入質譜儀后進行質譜掃描,得到該肽段的質譜圖(m/zvsintensity)。將得到的肽段質譜圖與理論蛋白質數(shù)據(jù)庫中的肽段質譜圖進行比對,如果多個肽段的質譜圖都能在數(shù)據(jù)庫中找到對應的匹配,且分子量之和與理論蛋白質分子量相符,則可鑒定該蛋白質。五、論述題(每題7分,共14分)1.優(yōu)勢:可鑒定未知化合物,無需預制備標準品,高通量,可提供分子量、結構信息,靈敏度較高。局限性:儀器昂貴,操作和數(shù)據(jù)分析復雜,數(shù)據(jù)解析(尤其對于復雜混合物)困難,定性定量能力相對有限(相比色譜)??朔椒ǎ洪_發(fā)自動化樣品前處理和進樣技術,利用數(shù)據(jù)庫搜索和人工智能算法輔助數(shù)據(jù)分析,結合高分辨率質譜和色譜聯(lián)用提高分離和鑒定能力,與其他技術(如核磁)聯(lián)用。2.意義:代謝組學能夠系統(tǒng)研究生物體內(nèi)所有小分子代謝物的整體變化,反映生命活動的整體狀態(tài)和響應環(huán)
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