ICS65.150

CCSB50

43

湖南省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB43/T2793—2023

漁業(yè)水體底泥中氯硝柳胺的測定液相色譜

-串聯(lián)質(zhì)譜同位素內(nèi)標(biāo)法

Determinationofniclosamideinsedimentfromfisherywatersbyhighperformance

liquidchromatography-tandemmassspectrometryisotopeinternalstandardmethod

2023-11-09發(fā)布2024-02-09實施

湖南省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB43/T2793—2023

目次

前言................................................................................II

1范圍..............................................................................1

2規(guī)范性引用文件....................................................................1

3術(shù)語和定義........................................................................1

4方法原理..........................................................................1

5試劑與材料........................................................................1

6儀器與設(shè)備........................................................................2

7樣品..............................................................................2

8測定步驟..........................................................................3

9結(jié)果計算與表達(dá)....................................................................4

10方法的靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度.....................................................4

附錄A（資料性）氯硝柳胺選擇反應(yīng)監(jiān)測（SRM)色譜圖....................................6

I

DB43/T2793—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。

本文件由湖南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。

本文件由湖南省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。

本文件起草單位：湖南省水產(chǎn)科學(xué)研究所、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部漁業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心（長沙）、

衡陽市畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心。

本文件主要起草人：李小玲、索紋紋、陳湘藝、張光潔、劉伶俐、楊霄、萬譯文、肖維、曾春芳、

何詠、謝仲桂、黃向榮、黃華偉、洪波、尹升福、謝玉昆、雷琴。

II

DB43/T2793—2023

漁業(yè)水體底泥中氯硝柳胺的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜同位素內(nèi)標(biāo)法

1范圍

本文件規(guī)定了漁業(yè)水體底泥中氯硝柳胺的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜同位素內(nèi)標(biāo)法測定方法。

本文件適用于漁業(yè)水體底泥中氯硝柳胺的測定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB17378.5海洋監(jiān)測規(guī)范第5部分：沉積物分析

HJ494水質(zhì)采樣技術(shù)指導(dǎo)底部沉積物采集

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4方法原理

底泥中的氯硝柳胺，經(jīng)氨化乙腈提取，C18吸附劑凈化，用帶有電噴霧離子源的液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜

儀負(fù)離子模式測定，內(nèi)標(biāo)法定量。

5試劑與材料

除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純；水應(yīng)為符合GB/T6682規(guī)定的一級水。

試劑

5.1.1乙腈（C2H3N）：色譜純。

5.1.2氨水（NH3?H2O）。

溶液配制

5.2.12%氨化乙腈溶液：取乙腈70mL，加入2mL的氨水，用乙腈稀釋定容至100mL。

5.2.270%乙腈水溶液：取乙腈70mL，加入30mL水，混勻。

標(biāo)準(zhǔn)品

5.3.1氯硝柳胺（Niclosamide，C13H8Cl2N2O4，CAS號：50-65-7），含量≥96.0%。

666

5.3.2氯硝柳胺-13C-水合物（Niclosamide-13C-hydrate，13C?C7H8Cl2N2O4，CAS號：1325808-64-7），

含量≥99.0%。

1

DB43/T2793—2023

標(biāo)準(zhǔn)溶液

5.4.1標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（100μg/mL）：取氯硝柳胺標(biāo)準(zhǔn)品約10mg，精密稱定，于100mL棕色容量瓶

中，加乙腈10mL，超聲溶解后恢復(fù)至室溫，用乙腈稀釋定容至刻度，配制成濃度為100μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)

儲備溶液。-18℃避光保存，有效期3個月。

6

5.4.2內(nèi)標(biāo)儲備溶液（100μg/mL）：取氯硝柳胺-13C-水合物標(biāo)準(zhǔn)品約10mg，精密稱定，于100mL

棕色容量瓶中，加乙腈10mL，超聲溶解后恢復(fù)至室溫，用乙腈稀釋定容至刻度，配制成濃度為100μg/mL

的內(nèi)標(biāo)儲備溶液。-18℃避光保存，有效期3個月。

5.4.3標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（1.0μg/mL）：精密量取標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液1mL，于100mL棕色容量瓶中，用乙腈

稀釋定容至刻度，配制成濃度為1.0μg/mL標(biāo)準(zhǔn)中間溶液。-18℃避光保存，有效期30天。

5.4.4混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：根據(jù)需要，臨用時吸取一定量的氯硝柳胺標(biāo)準(zhǔn)中間溶液和氯硝柳胺內(nèi)標(biāo)儲

備溶液，用70%乙腈水溶液稀釋配制成適當(dāng)系列濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，每毫升該混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

含有氯硝柳胺-13C6-水合物10ng。4℃避光保存，有效期7天。

5.4.5內(nèi)標(biāo)工作溶液（0.1μg/mL）：精密量取適量氯硝柳胺內(nèi)標(biāo)儲備溶液，用乙腈配制成0.1μg/mL內(nèi)

標(biāo)工作溶液。4℃避光保存，有效期15天。

材料

5.5.1C18吸附劑：粒徑40μm～60μm，或相當(dāng)者。

5.5.2微孔有機濾膜：0.22μm。

6儀器與設(shè)備

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，配有電噴霧離子源。

分析天平：感量0.01g和感量0.0001g。

冷凍干燥機。

渦旋混合器。

高速離心機：轉(zhuǎn)速≥8000r/min。

超聲波清洗器。

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

7樣品

樣品采集

樣品采集應(yīng)符合HJ494的要求。

試樣制備

將采集的底泥樣品（一般不少于500g）混勻后用四分法縮分至約100g，將樣品冷凍干燥后，剔除

石塊和植物體等異物，用研缽研磨后過60目（孔徑0.25mm）網(wǎng)篩，混勻后裝入樣品袋內(nèi)，在0℃～4℃

避光保存。

試樣含水率測定

應(yīng)符合GB17378.5的要求。

2

DB43/T2793—2023

空白試樣制備

選取不含氯硝柳胺的底泥樣品，按照7.2的方法制備。

8測定步驟

樣品前處理

稱取5g（精確至±0.02g）試樣于50mL具塞離心管中，加入100μL氯硝柳胺內(nèi)標(biāo)工作溶液，加入

2%氨化乙腈溶液20mL，渦旋混合1min，超聲提取10min，6000r/min離心8min，取上清液轉(zhuǎn)移至茄

形瓶中，于45℃下減壓濃縮至近干，加入1.00mL70%乙腈水溶液渦旋振蕩溶解殘留物，再加入C18吸附

劑200mg渦旋振蕩30s，8000r/min離心5min，取上清液過0.22μm微孔有機濾膜后，供液相色譜儀

-串聯(lián)質(zhì)譜測定。

測定

8.2.1液相色譜參考條件

液相色譜參考條件如下：

a)色譜柱：C18(150×2.1mm，粒徑3μm)，或相當(dāng)者；

b)流動相：A為乙腈，B為水，梯度洗脫條件見表1；

c)進(jìn)樣量：10μL；

d)流速：0.30mL/min；

e)柱溫：35℃。

表1流動相梯度洗脫條件

時間AB

min%%

05050

2.05050

3.09010

6.59010

6.515050

7.505050

8.2.2質(zhì)譜參考條件

質(zhì)譜參考條件如下：

a)離子源：電噴霧離子源；

b)掃描方式：負(fù)離子掃描；

c)檢測方式：選擇反應(yīng)監(jiān)測（SRM）；

d)噴霧電壓：-3.0kV；

e)離子傳輸毛細(xì)管溫度：300℃；

f)選擇反應(yīng)監(jiān)測定性母離子、子離子和碰撞能量見表2。

3

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表2母離子、子離子和碰撞能量

母離子子離子碰撞能量

目標(biāo)化合物

m/zm/zeV

289.0a19

氯硝柳胺324.9

171.128

氯硝柳胺-13C6-水合物331.0294.919

a定量離子。

8.2.3定性測定

在相同測試條件下，試樣中待測物的保留時間與標(biāo)準(zhǔn)工作液中待測物的保留時間一致，偏差在

±2.5%以內(nèi)；且試樣中待測物定性離子的相對豐度與濃度相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)溶液對應(yīng)的定性離子的相對豐度

一致，其允許最大偏差應(yīng)符合表3的要求。

表3定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差

相對離子豐度KK>50%20%＜K≤50%10%＜K≤20%K≤10%

允許的相對偏差±20%±25%±30%±50%

8.2.4定量測定

按8.2.1和8.2.2設(shè)置儀器條件，將標(biāo)準(zhǔn)工作溶液、試樣溶液、空白試樣溶液等體積進(jìn)樣測定，內(nèi)標(biāo)

法定量。標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和試樣中目標(biāo)物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測線性范圍內(nèi)。氯硝柳胺的選擇反應(yīng)監(jiān)測

（SRM）色譜圖參見附錄A，氯硝柳胺標(biāo)準(zhǔn)溶液的選擇反應(yīng)監(jiān)測（SRM）色譜圖見附錄A中圖A.1，空白試

樣的選擇反應(yīng)監(jiān)測（SRM）色譜圖見附錄A中圖A.2，空白試樣中添加氯硝柳胺標(biāo)準(zhǔn)溶液的選擇反應(yīng)監(jiān)測

（SRM）色譜圖見附錄A中圖A.3。

空白實驗

按照與上述測定步驟相同的條件進(jìn)行空白試樣（見7.4）的測定。

9結(jié)果計算與表達(dá)

試樣中待測物含量按下列公式計算。計算結(jié)果須扣除空白值，保留兩位有效數(shù)字。

×

=········································································(1)

×()

????????????

????????????1?????

式中：

——試樣中待測物的含量，單位為微克每千克（μg/kg）；

——從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到的待測物溶液濃度，單位為微克每升（μg/L）；

????????

——試樣最終定容體積，單位為毫升（mL）；

????????

——試樣質(zhì)量，單位為克（g）；

????

——試樣含水率，單位為質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）。

????

????

10方法的靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度

4

DB43/T2793—2023

靈敏度

本方法氯硝柳胺的檢出限為0.2μg/kg；定量限為0.5μg/kg。

準(zhǔn)確度

本方法添加濃度為0.5μg/kg～20μg/kg時回收率為70%～120%。

精密度

本方法的批內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差≤10%，批間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差≤15%。

5

DB43/T2793—2023

A

A

附錄A

（資料性）

氯硝柳胺選擇反應(yīng)監(jiān)測（SRM)色譜圖