ICS67.050

CCSX04

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)

T/CEACXXX—2024

有助于維持尿酸健康水平功能性食品功效

評價(jià)方法

Evaluationmethodforfunctionalfoodefficacythathelpsmaintainhealthylevelsof

uricacid

2024-XX-XX發(fā)布2024-XX-XX實(shí)施

中國商業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)會(huì)發(fā)布

T/CEACXXX—2024

有助于維持尿酸健康水平功能性食品功效評價(jià)方法

1范圍

本文件規(guī)定了有助于維持尿酸健康水平功能性食品功效評價(jià)的試驗(yàn)分類、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、人體試食試

驗(yàn)。

本文件適用于有助于維持尿酸健康水平功能性食品功效評價(jià)。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件。

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4試驗(yàn)分類

4.1有助于維持尿酸健康水平功效試驗(yàn)分為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和人體試食試驗(yàn)。

4.2動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分為兩種模型：

a)UOX基因敲除自發(fā)高尿酸小鼠模型；

b)藥物誘導(dǎo)高尿酸小鼠模型。

5動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法

以受試樣品給予自發(fā)高尿酸小鼠動(dòng)物模型或通過實(shí)驗(yàn)方法造成的高尿酸動(dòng)物模型，觀察受試樣品

對高尿酸動(dòng)物模型的血清尿酸、尿尿酸等指標(biāo)的影響，評價(jià)受試樣品對尿酸的調(diào)節(jié)作用。

5.1UOX基因敲除自發(fā)高尿酸小鼠模型

5.1.1原理

鼠、兔等常用作動(dòng)物模型的哺乳動(dòng)物體內(nèi)存在尿酸氧化酶（UOX），UOX可催化體內(nèi)尿酸氧化成尿

囊素或其他物質(zhì)。UOX基因敲除小鼠可以大幅提高血尿酸水平，尿酸水平穩(wěn)定，能較好的模擬人類高尿

酸狀態(tài)。

5.1.2儀器及試劑

全自動(dòng)生化儀、天平、尿酸測定試劑盒。

5.1.3動(dòng)物選擇

自發(fā)高尿酸小鼠（Uoxem1Cli），Uoxem1Cli宜選用8-12周齡，體重20±2g，雌雄可以兼用，每組

8～10只。正常動(dòng)物選擇C57BL/6J小鼠。

5.1.4劑量分組及受試樣品給予時(shí)間

實(shí)驗(yàn)設(shè)三個(gè)劑量組、一個(gè)模型對照組和空白對照組，以人體推薦量的10倍為其中的一個(gè)劑組，另

設(shè)二個(gè)劑量組，高劑量一般不超過30倍。同時(shí)設(shè)給予受試樣品高劑量的正常動(dòng)物組。受試樣品給予時(shí)

間30天，必要時(shí)可延長至45天。

5.1.5實(shí)驗(yàn)方法

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5.1.5.1正常動(dòng)物降尿酸實(shí)驗(yàn)

選健康成年動(dòng)物按血尿酸水平分組，隨機(jī)選1個(gè)對照組和1個(gè)劑量組。對照組給予溶劑，劑量組給

予高劑量濃度受試樣品，連續(xù)30天，測血尿酸值，比較兩組動(dòng)物血尿酸值。

5.1.5.2高尿酸模型動(dòng)物降尿酸實(shí)驗(yàn)

選高尿酸模型動(dòng)物按血尿酸水平隨機(jī)分組，設(shè)1個(gè)模型對照組和3個(gè)劑量組（組間血尿酸差不大于

30μmol/L），每組8只。劑量組給予不同濃度受試樣品，模型對照組給予溶劑，連續(xù)30天，測血尿酸，

比較各組動(dòng)物血尿酸值及血尿酸下降百分率。

5.1.6觀察指標(biāo)

血尿酸：實(shí)驗(yàn)前后，測血尿酸，比較各組動(dòng)物血尿酸值及血尿酸下降百分率。

（實(shí)驗(yàn)前血尿酸值?實(shí)驗(yàn)后血尿酸值）

血尿酸下降率%=×100%

實(shí)驗(yàn)前血尿酸值

5.1.7數(shù)據(jù)處理

一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算F值，F(xiàn)值＜0.05，

結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性；F值≥0.05，P≤0.05，用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對照組間均數(shù)的兩兩比

較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用

轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

5.1.8結(jié)果判定

5.1.8.1正常動(dòng)物降尿酸試驗(yàn)：

血尿酸指標(biāo)：受試樣品劑量組與對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，判定對正常動(dòng)物血尿酸無影響。

5.1.8.2高尿酸模型降尿酸試驗(yàn)：

血尿酸指標(biāo)：模型成立的前提下，受試樣品劑量組與模型對照組比較，血尿酸下降或血尿酸下降

百分率升高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，判定該受試樣品對血尿酸指標(biāo)結(jié)果陽性。

5.1.8.3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定：血清尿酸指標(biāo)陽性，且對正常動(dòng)物血清尿酸無影響，即可判定該受試樣

品有助于維持尿酸健康水平功效。

5.1.9注意事項(xiàng)

5.1.9.1高尿酸動(dòng)物模型構(gòu)建：氧嗪酸鉀誘導(dǎo)模型小鼠形成的高尿酸血癥存在時(shí)效性，氧嗪酸鉀注射

后1.5～2.5h取血，檢測血尿酸。

5.1.9.2高尿酸小鼠模型成立的判定：模型小鼠平均血尿酸是正常小鼠平均值的2倍以上，且與正常

小鼠存在顯著差異，則判定模型成立。

5.2藥物誘導(dǎo)高尿酸小鼠模型

5.2.1原理

鼠、兔等常用作動(dòng)物模型的哺乳動(dòng)物體內(nèi)存在尿酸氧化酶（UOX），UOX可催化體內(nèi)尿酸氧化成尿

囊素或其他物質(zhì)?？梢酝ㄟ^基因誘導(dǎo)或環(huán)境誘導(dǎo)的方法，抑制或者消除尿酸酶的活性建立高尿酸小鼠

模型。

氧嗪酸鉀是抑制UOX造模的常用藥物，其結(jié)構(gòu)與尿酸的嘌呤環(huán)相似，可競爭性地與尿酸酶結(jié)合，部

分抑制尿酸酶的活性，導(dǎo)致尿酸分解減少，造成短時(shí)間內(nèi)體內(nèi)尿酸蓄積增多，聯(lián)合高酵母飼料，提高

小鼠體內(nèi)嘌呤含量，增加尿酸的生成。

乙胺丁醇會(huì)抑制尿酸經(jīng)過腎小管排泄，進(jìn)而造成血液尿酸升高，聯(lián)合高酵母飼料，提高小鼠體內(nèi)

嘌呤含量，增加尿酸的生成，提高體內(nèi)血尿酸水平。

5.2.2儀器及試劑

全自動(dòng)生化儀、天平、氧嗪酸鉀（C4H2KN3O4，分子量195.17）、羧甲基纖維素鈉、乙胺丁醇

（C10H24N2O2，分子量204.31）尿酸測定試劑盒。

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5.2.3動(dòng)物選擇

推薦用雄性C57BL/6J小鼠，8～12周齡，體重20±2g，每組12～15只。

5.2.4劑量分組及受試樣品給予時(shí)間

實(shí)驗(yàn)設(shè)三個(gè)劑量組、一個(gè)模型對照組和空白對照組，以人體推薦量的10倍為其中的一個(gè)劑組，

另設(shè)二個(gè)劑量組，高劑量一般不超過30倍。同時(shí)設(shè)給予受試樣品高劑量的正常動(dòng)物組。受試樣品給予

時(shí)間15天，必要時(shí)可延長至30天。

5.2.5實(shí)驗(yàn)方法

5.2.5.1正常動(dòng)物降尿酸實(shí)驗(yàn)

選健康成年動(dòng)物按血尿酸水平分組，隨機(jī)選1個(gè)對照組和1個(gè)劑量組。對照組給予溶劑，劑量組給

予高劑量濃度受試樣品，連續(xù)15天，測血尿酸值，比較兩組動(dòng)物血尿酸值。

5.2.5.2高尿酸模型動(dòng)物降尿酸實(shí)驗(yàn)

5.2.5.2.1高酵母飼料聯(lián)合氧嗪酸鉀誘導(dǎo)高尿酸小鼠模型

購入成年動(dòng)物，適應(yīng)3～5天后，隨機(jī)取15只動(dòng)物測血尿酸，作為該批次動(dòng)物基礎(chǔ)血尿酸值。隨機(jī)

分為5各組，即空白對照組，模型對照組和3個(gè)劑量組，每組15只?？瞻讓φ战M不作處理，3個(gè)劑量組灌

胃給予不同濃度受試樣品，模型對照組給予同體積溶劑，連續(xù)15天。空白對照組給與維持飼料飼養(yǎng)，

模型對照組和3個(gè)劑量組給予高酵母飼料，在此基礎(chǔ)上，給予模型對照組和3個(gè)劑量組氧嗪酸鉀250

mg/kgBW腹腔注射，每日1次，至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。

5.2.5.2.2氧嗪酸鉀聯(lián)合乙胺丁醇誘導(dǎo)高尿酸小鼠模型

購入成年動(dòng)物，適應(yīng)3～5天后，隨機(jī)取15只動(dòng)物測血尿酸，作為該批次動(dòng)物基礎(chǔ)血尿酸值。隨機(jī)

分為5各組，即空白對照組，模型對照組和3個(gè)劑量組，每組15只?？瞻讓φ战M不作處理，3個(gè)劑量組灌

胃給予不同濃度受試樣品，模型對照組給予同體積溶劑，連續(xù)15天。給予模型對照組和3個(gè)劑量組氧嗪

酸鉀250mg/kgBW腹腔注射，同時(shí)乙胺丁醇灌胃250mg/kgBW，每日1次，至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。

5.2.6觀察指標(biāo)

5.2.6.1血尿酸：實(shí)驗(yàn)前后，測血尿酸，比較各組動(dòng)物血尿酸值及血尿酸下降百分率。

（實(shí)驗(yàn)前血尿酸值?實(shí)驗(yàn)后血尿酸值）

血尿酸下降率=×100%

實(shí)驗(yàn)前血尿酸值

5.2.6.2尿尿酸：實(shí)驗(yàn)前后，收集24h尿，測尿尿酸，計(jì)算尿尿酸排泄量，比較各組動(dòng)物尿尿酸排泄

量及尿尿酸排泄量增加百分率。

（實(shí)驗(yàn)后尿尿酸排泄量?實(shí)驗(yàn)前尿尿酸排泄量）

尿尿酸排泄量增加率%=×100%

實(shí)驗(yàn)前尿尿酸排泄量

5.2.7數(shù)據(jù)處理

一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算F值，F(xiàn)值＜0.05，

結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性；F值≥0.05，P≤0.05，用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對照組間均數(shù)的兩兩比

較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用

轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

5.2.8結(jié)果判定

5.2.8.1正常動(dòng)物降尿酸試驗(yàn)：血尿酸指標(biāo)：受試樣品劑量組與對照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，判定對正

常動(dòng)物血尿酸無影響。

5.2.8.2高尿酸模型降尿酸試驗(yàn)：

a)血尿酸指標(biāo)：模型成立的前提下，受試樣品劑量組與模型對照組比較，血尿酸下降或血尿酸

下降百分率升高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，判定該受試樣品對血尿酸指標(biāo)結(jié)果陽性。

b)尿尿酸：模型成立的前提下，受試樣品劑量組與模型對照組比較，尿尿酸升高或尿尿酸排血

量增加有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，則判定該受試樣品對尿尿酸指標(biāo)結(jié)果陽性。

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5.2.8.3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定：血清尿酸和尿酸排泄量兩項(xiàng)中任一項(xiàng)為陽性，且對正常動(dòng)物血尿酸無影

響，可判定該受試樣品具有有助于維持尿酸健康水平功效。

5.2.9注意事項(xiàng)

5.2.9.1高尿酸動(dòng)物模型構(gòu)建：氧嗪酸鉀誘導(dǎo)模型小鼠形成的高尿酸血癥存在時(shí)效性，氧嗪酸鉀注射

后1.5～2.5h取血，檢測血尿酸。

5.2.9.2高尿酸小鼠模型成立的判定：模型小鼠平均血尿酸是正常小鼠平均值的2倍以上，且與正常

小鼠存在顯著差異，則判定模型成立。

5.2.9.3尿酸測定方法：采用試劑盒，按說明書操作。

6人體試食試驗(yàn)方法

6.1受試者納入標(biāo)準(zhǔn)

6.1.1年齡18～65歲，不限制性別；420μmol/L≤血清尿酸水平＜540μmol/L（無合并癥）或

420μmol/L≤血清尿酸水平＜480μmol/L（有下列合并癥之一：高血壓、脂代謝異常、糖尿病、肥

胖、腦卒中、冠心病、心功能不全、CKD≥2期）的高尿酸人群。

6.1.2獲得知情同意書，自愿參加試驗(yàn)者

6.2排除受試者標(biāo)準(zhǔn)

6.2.1痛風(fēng)病病人。

6.2.2年齡在18歲以下或65歲以上，妊娠或哺乳期婦女，對受試樣品過敏者。

6.2.3有心、肝、腎等主要臟器并發(fā)癥，或合并有其它嚴(yán)重疾病，精神病患者，服用糖皮質(zhì)激素類藥

物、降尿酸藥物或其它影響血尿酸藥物者。

6.2.4不能配合飲食控制而影響觀察結(jié)果者。

6.2.5近3個(gè)月內(nèi)曾參加過其它試食實(shí)驗(yàn)或臨床試驗(yàn)者。

6.2.6短期內(nèi)服用與受試功能有關(guān)的物品，影響到對結(jié)果的判斷者。

6.2.7凡不符合納入標(biāo)準(zhǔn)，未按規(guī)定服用受試樣品，或資料不全影響觀察結(jié)果者。

6.3受試樣品的劑量和使用方法

根據(jù)受試樣品推薦量和推薦方法確定。

6.4試驗(yàn)設(shè)計(jì)和分組要求

采用組間對照設(shè)計(jì)。根據(jù)隨機(jī)盲法的要求進(jìn)行分組。按受試者的血尿酸水平隨機(jī)分為試食組和對

照組，盡可能考慮影響結(jié)果的主要因素如年齡、性別、飲食等，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)，以保證組間的可比

性。每組受試者不少于50例。

6.5觀察指標(biāo)

6.5.1安全性指標(biāo)

6.5.1.1一般狀況（包括精神、睡眠、飲食、大小便等）。

6.5.1.2血、尿、便常規(guī)檢查。

6.5.1.3肝、腎功能檢查。

6.5.1.4胸片、心電圖、腹部B超檢查（僅在試驗(yàn)開始前檢查一次）。

6.5.2功效指標(biāo)

6.5.2.1血尿酸測量：每4周定時(shí)測量血尿酸。

6.5.2.2血尿酸下降幅度計(jì)算公式：

試驗(yàn)前血尿酸值?實(shí)驗(yàn)后血尿酸值

血尿酸下降百分率=×100%

試驗(yàn)前血尿酸值

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6.5.2.324小時(shí)尿尿酸排泄量測量：實(shí)施前后測量24小時(shí)尿尿酸排泄量。

6.5.2.424小時(shí)尿尿酸排泄量增加幅度：

試驗(yàn)后24小時(shí)尿尿酸排泄量?試驗(yàn)前24小時(shí)尿尿酸排泄量

24小時(shí)尿尿酸排泄量增加百分率=×100%

試驗(yàn)前24小時(shí)尿尿酸排泄量

6.5.2.5晨尿pH：每周定時(shí)測量晨尿pH。

6.6試驗(yàn)方法

試驗(yàn)前對每一位受試者按性別、年齡、不同勞動(dòng)強(qiáng)度、理想體重參照原來生活習(xí)慣規(guī)定相應(yīng)的飲

食，試食期間堅(jiān)持飲食控制。試食組在飲食指導(dǎo)的基礎(chǔ)上，按推薦服用方法和服用量每日服用受試樣

品，對照組可服用安慰劑或采用空白對照。受試樣品給予時(shí)間3個(gè)月，必要時(shí)可延長至6個(gè)月。

6.7數(shù)據(jù)處理

凡自身對照資料可以采用配對t檢驗(yàn)，兩組均數(shù)比較采用成組t檢驗(yàn)，后者需進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，

對非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)方差齊后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)；

若轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)仍不能滿足正態(tài)方差齊要求，改用t’檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)；方差齊但變異系數(shù)太大（如CV＞

50%）的資料應(yīng)用秩和檢驗(yàn)。有效率及總有效率采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行檢驗(yàn)。四格表總例數(shù)小于40，或總例數(shù)

等于或大于40但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1時(shí)，應(yīng)改用確切概率法。

6.7.1結(jié)果判定

6.7.1.1血尿酸

a)試食前后自身比較，血尿酸下降差異有顯著性，或試驗(yàn)后平均血尿酸恢復(fù)正