ICS65.100.01

CCSB17

13

河北省地方標準

DB13/T5423—2021

水果和蔬菜中氯蟲苯甲酰胺農(nóng)藥殘留量分

析技術指南

2021-07-28發(fā)布2021-08-28實施

河北省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB13/T5423—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)

定起草。

本文件由河北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。

本文件起草單位：河北省農(nóng)藥檢定監(jiān)測總站、河北農(nóng)業(yè)大學植保學院、河北翔致檢測技術有限

公司。

本文件主要起草人：楊殿賢、武麗芬、劉云肖、周靜、田建芳、李思涵、劉穎超、張曉光、范朋

微。

I

DB13/T5423—2021

水果和蔬菜中氯蟲苯甲酰胺農(nóng)藥殘留量分析技術指南

1范圍

本文件規(guī)定了水果和蔬菜中氯蟲苯甲酰胺殘留量分析的原理、試劑與材料、儀器和設備、試樣

制備、測定步驟、結果計算、精密度、定量限和回收率等。

本文件適用于利用液相色譜-質譜聯(lián)用法分析水果和蔬菜中氯蟲苯甲酰胺殘留量。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用

文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）

適用于本文件。

GB2763食品安全國家標準食品中農(nóng)藥最大殘留限量

GB/T6379.1測量方法與結果的準確度（正確度與精密度）第1部分：總則與定義

GB/T6379.2測量方法與結果的準確度（正確度與精密度）第2部分：確定標準測量方法重復

性與再現(xiàn)性的基本方法

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

3術語和定義

本文件沒有需要界定的術語和定義。

4原理

試樣用乙腈提取，經(jīng)分散固相萃取凈化，液相色譜-質譜聯(lián)用儀測定，外標法定量。

5試劑與材料

除另有說明外，所用試劑均為色譜純試劑，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。

試劑

5.1.1乙腈（C2H3N，CAS號：75-05-8）。

5.1.2甲酸（HCO2H，CAS號：64-18-6）。

5.1.3硫酸鎂（MgSO4，CAS號：7487-88-9），分析純。

5.1.4氯化鈉（NaCl，CAS號：7647-14-5），分析純。

5.1.5檸檬酸鈉（Na3C6H5O7，CAS號：6132-04-3），分析純。

5.1.6檸檬酸氫二鈉（C6H6Na2O7，CAS號：6132-05-4），分析純。

5.1.7丙酮（CH3COCH3，CAS號：67-64-1)。

5.1.8甲酸水溶液(0.05%)：取0.5mL甲酸加水定容至1000mL，搖勻。

5.1.9氯蟲苯甲酰胺標準品（C18H14BrCl2N5O2，CAS號：500008-45-7）：1000mg/L。

5.1.10標準儲備溶液（100mg/L）：將1000mg/L的標準品用丙酮(5.1.7)稀釋成100mg/L的標準

儲備溶液，搖勻。避光0℃～4℃保存。

5.1.11標準工作溶液：用乙腈(5.1.1)逐級稀釋成0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L和

0.5mg/L系列標準工作溶液。避光0℃～4℃保存。

材料

5.2.1乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠（PSA）：40μm～60μm。

5.2.2微孔濾膜（有機相）：0.22μm。

1

DB13/T5423—2021

5.2.3陶瓷均質子：2cm(長)×1cm（外徑）。

6儀器和設備

液相色譜-三重四極桿質譜聯(lián)用儀：配電噴霧離子源（ESI）。

食品粉碎機。

分析天平：感量0.01g。

氮吹儀：溫度范圍0～100℃。

離心機：轉速不低于4000r/min。

漩渦混合器。

移液器：100μL～1000μL。

7試樣制備

水果、蔬菜樣品取樣部位按GB2763相關要求執(zhí)行，將樣品切碎縮分后制成勻漿，裝入潔凈的容

器內待測。

8測定步驟

前處理步驟

8.1.1提取

準確稱取10g試樣（精確至0.01g）于50mL離心管中，加10mL乙腈(5.1.1)后渦旋提取4min，加

入4g硫酸鎂(5.1.3)，1g氯化鈉(5.1.4)，1g檸檬酸鈉(5.1.5)，0.5g檸檬酸氫二鈉(5.1.6)以及2顆

陶瓷均質子，渦旋4min后，以4000r/min離心5min。

8.1.2凈化

吸取6mL上清液加到內含0.9g硫酸鎂(5.1.3)、0.15gPSA(5.2.1)的15mL離心管中，渦旋4min，

以4000r/min離心5min，準確吸取2mL上清液于10mL試管中，在80℃氮吹儀上吹至近干，先加入1mL

乙腈(5.1.1)，再用水定容至2.0mL，漩渦混合器混勻后，過微孔濾膜，待上機測定。

儀器參考條件

8.2.1色譜參考條件

色譜柱：C18（3.0mmI.D.×75mm，3μm）或性能相當者；

流動相A：0.05%甲酸水溶液(5.1.8)，流動相B：乙腈(5.1.1)，梯度洗脫程序見表1；

流速：0.5mL/min；

柱溫:40℃；

進樣量:5μL。

表1流動相洗脫程序

時間（min）流動相B/(%)流動相A/(%)

01090

5.0955

8.0955

8.11090

11.51090

8.2.2質譜參考條件

離子源：電噴霧離子源（ESI）；

掃描方式：正離子掃描；

2

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檢測方式：MRM，多重反應監(jiān)測（MRM）條件參數(shù)見表2；

離子源溫度：550℃；

離子化電壓：5500V；

輔助加熱氣：50psi；

氣簾氣：20psi；

碰撞氣：4psi；

霧化氣：50psi。

表2多重反應監(jiān)測（MRM）條件

名稱保留時間定性離子對定量離子對去簇電壓射入電壓碰撞電壓碰撞池入口電射出電壓

(min)(m/z)(m/z)（DP）（EP）（CE）壓（CEP）（CXP）

484.1/285.9425.121192

氯蟲苯甲酰胺5.1484.1/285.9

484.1/453.0375.127194

標準曲線

將空白基質溶液80℃氮氣吹干，分別加入2mL不同濃度的標準工作溶液（5.1.11）復溶，過微

孔濾膜配制成系列基質標準工作溶液，按參考儀器條件測定。以氯蟲苯甲酰胺的質量濃度為橫坐標，

以定量離子的色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，基質標準工作溶液應現(xiàn)用現(xiàn)配。

注：空白基質溶液取樣量應與相應的試樣處理取樣量一致。

定性測定

在相同實驗條件下進行樣品測定時，如果檢出的色譜峰的保留時間與標準品相一致，并且在扣

除背景后的樣品質譜圖中，所選離子均出現(xiàn)，樣品中目標化合物的定性離子和定量離子的相對豐度

比與濃度相當?shù)幕|標準溶液相比，其允許偏差不超過表3規(guī)定的范圍，則可判定樣品中存在氯蟲苯

甲酰胺。定性測定時相對離子豐度的最大允許偏差詳見表3。

表3定性測定時相對離子豐度的最大允許偏差

相對離子豐度＞50%＞20%至50%＞10%至20%≤10%

允許相對偏差±20%±25%±30%±50%

定量測定

本文件采用外標法定量。樣品溶液峰面積與標準溶液峰面積比較定量。待測樣品溶液中的氯蟲

苯甲酰胺的響應值應在儀器檢測的定量測定線性范圍之內，超出線性范圍應根據(jù)測定濃度與基質標

準溶液同步稀釋后再進行分析。氯蟲苯甲酰胺總離子流色譜圖和選擇離子色譜圖參考附錄A。

平行試驗

按以上步驟對同一試樣進行平行試驗。

空白試驗

除不加試料外，采用完全相同的試劑、設備和測定步驟進行操作。

9結果計算

氯蟲苯甲酰胺殘留量以質量分數(shù)ω計，單位以毫克每千克（mg/kg）表示，按式（1）計算。

式中：

3

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ω——試樣中氯蟲苯甲酰胺的殘留量，單位為毫克每千克(mg/kg)；

V1——提取溶劑總體積，單位為毫升(mL)；

A——試樣溶液中氯蟲苯甲酰胺的色譜峰面積；

V3——試樣溶液定容體積，單位為毫升(mL)；

ρ——標準溶液中氯蟲苯甲酰胺的質量濃度，單位為毫克每升(mg/L)；

V2——吸取出用于檢測用的提取溶液的體積，單位為毫升(mL)；

AS——標準溶液中氯蟲苯甲酰胺的色譜峰面積；

m——試樣的質量，單位為克(g)。

注：計算結果應扣除空白樣品，測定結果用平行測定的算術平均值表示，計算結果保留三位有效數(shù)字。

10精密度

本文件精密度數(shù)據(jù)是按照GB/T6379.1和GB/T6379.2的規(guī)定確定的，獲得重復性限和再現(xiàn)性限

的值以95%的可信度來計算的。本標準方法的精密度數(shù)據(jù)參考附錄B。

11定量限和回收率

本方法的定量限為0.01mg/kg。

當添加水平為0.01mg/kg，0.5mg/kg，2.0mg/kg時，添加回收率參考附錄C。

4

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A

A

附錄A

（資料性）

氯蟲苯甲酰胺標準物質總離子流色譜圖和多反應監(jiān)測（MRM）色譜圖

A.1氯蟲苯甲酰胺標準物質總離子流色譜圖和多反應監(jiān)測（MRM）色譜圖

TICof+MRM(2pairs):fromSample5(0.1by-001)ofbzqx.wiff(TurboSpray)Max.6.2e4cps.

5.12

6.2e4

6.0e4

5.5e4

5.0e4

4.5e4

4.0e4

3.5e4

3.0e4

Intensity,cps

2.5e4

2.0e4

1.5e4

1.0e4

5000.0

0.0

1.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.0

Time,min

圖A.1氯蟲苯甲酰胺標準物質總離子流色譜圖

XICof+MRM(2pairs):484.100/285.900amuExpectedRT:5.1ID:LCBJXA1fromSample5(0.1by-001)ofbzqx.wiff(TurboSpray)Max.2.7e4cps.

5.13

2.7e4

2.6e4

2.4e4

2.2e4

2.0e4

1.8e4

1.6e4

1.4e4

Inten1.2e4sity,cps

1.0e4

8000.0

6000.0

4000.0

2000.0

0.0

1.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.0

Time,min

圖A.20.1mg/L氯蟲苯甲酰胺多反應監(jiān)測色譜圖（離子對484.1/285.9）

5

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XICof+MRM(2pairs):484.100/453.000amuExpectedRT:5.1ID:LCBJXA2fromSample5(0.1by-001)ofbzqx.wiff(TurboSpray)Max.3.5e4cps.

5.12

3.4e4

3.2e4

3.0e4

2.8e4

2.6e4

2.4e4

2.2e4

2.0e4

1.8e4

1.6e4

Intensity,cps

1.4e4

1.2e4

1.0e4

8000.0

6000.0

4000.0

2000.0

0.0

1.02.03.04.05.06.07.08.09.010.011.0

Time,min

圖A.30.1mg/L氯蟲苯甲酰胺多反應監(jiān)測色譜圖（離子對484.1/453.0）

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B

B

附錄B

（資料性）

不同蔬菜和水果中重復性限和再現(xiàn)性限

表B.1不同蔬菜和水果中重復性限和再現(xiàn)性限結果

添加濃度（mg/kg）

樣品名稱0.010.52

rRrRrR

甘藍0.00120.00110.0480.0440.130.95

番茄0.00140.00530.0870.100.270.87

菜豆0.00130.00120.0540.0870.0820.89

柑橘0.00160.00300.0280.130.150.45

蘋果0.00130.00190.0400.0560.220.96

桃0.00130.00120.0540.0640.140.64

注：r為重復性限，R為再現(xiàn)性限。

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C

C

附錄C

（資料性）

不同蔬菜和水果中添加回收率

C.1不同蔬菜和水果中添加回收率結果

添加水平添加回收率(%)相對標準偏

樣品名稱

(mg/kg)12345平均值差(%)

0.0186.092.295.188.192.790.84.1

甘藍0.592.2