ICS67.080.01X24DB61DB61/T954—2015水果及果汁產(chǎn)品中多種農(nóng)藥殘留量測定方法液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法DeterminationofMultiplePesticideResiduesinFruitsandFruitJuices—LC-MS/MS2015-02-12發(fā)布2015-05-01實施陜西省質(zhì)量技術監(jiān)督局發(fā)布IDB61/T954—2015本標準按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標準的附錄A為規(guī)范性附錄，附錄B為資料性附錄。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構不承擔識別這些專利的責任。本標準由陜西出入境檢驗檢疫局提出。本標準由陜西省質(zhì)量技術監(jiān)督局歸口。本標準由陜西出入境檢驗檢疫局負責解釋。本標準起草單位：陜西出入境檢驗檢疫局，寶雞出入境檢驗檢疫局，西安理工大學。本標準主要起草人：何強、孔祥虹、李建華、鄒陽、張璐、巨亞杰、劉學芝、付騁宇、李瑩。本標準首次發(fā)布。聯(lián)系信息如下：單位：陜西出入境檢驗檢疫局；地址：西安市含光北路10號；DB61/T954—20151水果及果汁產(chǎn)品中多種農(nóng)藥殘留量測定方法液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法本標準規(guī)定了水果及果汁產(chǎn)品中61種農(nóng)藥（見附表A.1）殘留量的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。本標準適用于蘋果、梨、石榴、獼猴桃、葡萄、柑桔、蘋果汁、梨汁、石榴汁、獼猴桃汁、葡萄汁等水果及果汁產(chǎn)品中61種農(nóng)藥殘留量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3方法提要試樣中加入磷酸氫二鈉緩沖溶液，調(diào)pH后用乙腈萃取，N-丙基乙二胺（PSA）固相萃取柱凈化，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定，外標法定量。4術語和定義下列術語和定義適用于本標準。4.1定量限LimitofQuantity是指樣品中被測物能被定量測定的最低量，其測定結果應具有一定的準確度和精密度。5試劑和材料5.1除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純，水為符合GB/T6682規(guī)定的一級水。5.2乙腈：色譜純。5.4磷酸氫二鈉（Na2HPO4·12H2O）。5.5氯化鈉。5.6氫氧化鈉。5.7無水硫酸鈉：650℃灼燒4h，貯于密封容器中備用。5.9氫氧化鈉溶液（2mol/L）5.10稱取8g氫氧化鈉，用水溶解并定容至100mL。2DB61/T954—20155.11磷酸氫二鈉緩沖液：稱取50g磷酸氫二鈉、300g氯化鈉，用水溶解并定容至1000mL。5.12乙腈-甲醇（1+1，V/V取50mL乙腈、505.13甲酸溶液（0.1%）：取500mL超純水，加入500μL甲酸，混勻。5.14甲醇-甲酸溶液（65+35，V/V取65mL甲醇，加入本標準5.13條規(guī)定的甲酸溶液35mL，混5.15農(nóng)藥標準物質(zhì)：相關信息見附錄A中表A.1。5.16標準儲備液：分別稱取適量的農(nóng)藥標準物質(zhì)，用避光保存。5.17混合標準溶液：分別移取各個農(nóng)藥的標準儲備液，用甲醇定容，配制成濃度均為5μg/mL的標準混合溶液，-18℃避光保存。5.18基質(zhì)混合標準工作溶液：用樣品空白溶液配制，現(xiàn)用現(xiàn)配。5.19N-丙基乙二胺（PSA）固相萃取柱：500mg/3mL或相當者。使用前在柱上端裝填約2cm高的本標準5.7條要求的無水硫酸鈉，然后用5mL乙腈活化，保持柱體濕潤。5.20微孔濾膜：0.2μm，有機系。6儀器和設備6.1液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有ESI電離源、串聯(lián)四級桿質(zhì)量分析器。6.2分析天平：感量0.01mg、0.01g。6.3組織搗碎機。6.4振蕩器。6.5固相萃取裝置。6.6離心機：轉速不低于4000r/min。6.7減壓旋轉蒸發(fā)器。7試樣制備與保存7.1取代表性水果樣品約500g，將其可食用部分切碎后，用組織搗碎機將樣品加工成漿狀，混勻，裝入潔凈的容器內(nèi)，密閉并標明標記，于-18℃冷凍避光保存。7.2取代表性果汁樣品約500g，混勻，裝入潔凈的容器內(nèi)，密閉并標明標記，于4℃避光保存。7.3在制樣的操作過程中，應防止樣品受到污染或發(fā)生殘留物含量的變化。8測定步驟8.1提取凈化8.1.1稱取2.0g（精確至0.01g）試樣于50mL離心管中，加入6mL磷酸氫二鈉緩沖液，振搖1min，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至8～9，加入10.0mL乙腈，振蕩提取10min，4000r/min離心5min。8.1.2準確取5.0mL上層乙腈提取液，上樣于活化好的N-丙基乙二胺（PSA）固相萃取柱，然后用5mL乙腈-甲醇洗脫，固相萃取過程保持流速2～3mL/min，收集上樣液和洗脫液于50mL玻璃濃縮瓶中。8.1.3收集液于40℃旋轉蒸發(fā)至近干，用1.00mL甲醇-甲酸溶液溶解定容，過0.2μm微孔濾膜，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測。8.2測定DB61/T954—201538.2.1液相色譜參考條件a)色譜柱：HSST3柱1)，長100mm，內(nèi)徑2.1mm，粒徑1.8μm，或相當者；b)流動相：甲醇-甲酸溶液梯度洗脫，參見表1，梯度變化模式為線性遞增或遞減；表1流動相條件55a)柱溫：35oC；c)61種農(nóng)藥的參考色譜保留時間參見附錄B中表B.1。8.2.2質(zhì)譜參考條件b)毛細管電壓：3kV；c)萃取電壓：3V；d)脫溶劑氣：氮氣，純度≥99.9%，500L/h；e)錐孔氣：氮氣，純度≥99.9%，50L/h；f)碰撞氣：氬氣，純度≥99.999%，0.2mL/min；g)脫溶劑氣溫度：400oC；h)離子源溫度：115oC；i)采集模式：多重反應監(jiān)測模式（MRM）；j)多重反應監(jiān)測條件參見附錄B中表B.1。8.3定量測定及定性確證8.3.1定性鑒定對標準工作液及樣液按本標準8.2規(guī)定的條件進行測定時，如果樣液與標準工作液的選擇離子流圖中，樣液中目標物質(zhì)的保留時間與相近濃度標準溶液的保留時間偏差在±2.5%以內(nèi)；且定性離子對的相對豐度與相近濃度標準溶液對應定性離子對的相對豐度進行比較，若偏差不超過表2規(guī)定的范圍，則可判定為樣品中存在對應的待測物。DB61/T954—20154表2定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差8.3.2定量測定根據(jù)樣液中農(nóng)藥殘留含量情況，選定與樣液濃度相近的標準工作溶液，標準工作溶液和樣液中農(nóng)藥的響應值均應在儀器檢測線性范圍內(nèi)，如果樣液中農(nóng)藥含量超出檢測的線性范圍，則稀釋后再進樣。對標準工作溶液和樣液等體積分時段參插進樣測定，外標法定量。8.4空白試驗除不加試樣外，均按上述檢測步驟進行。8.5結果計算和表述8.5.1用色譜數(shù)據(jù)處理機或按式（1）計算試樣中各個農(nóng)藥殘留量。X——試樣中農(nóng)藥的含量（mg/kgA——樣液中農(nóng)藥的色譜峰面積；cs——標準工作液中農(nóng)藥的濃度(μg/mL)；V——樣液最終定容體積(mL)；As——標準工作液中農(nóng)藥的色譜峰面積；m——最終樣液所代表的試樣量(g)。8.5.2計算結果保留兩位有效數(shù)字。9檢出限、定量限、回收率9.1檢出限、定量限本方法中61種農(nóng)藥的檢出限均為0.003mg/kg，定量限均為0.01mg/kg。9.2回收率不同樣品基質(zhì)中61種農(nóng)藥的加標回收率均在65%～125%范圍內(nèi)，平均回收率均大于75%，回收率相對標準偏差均低于15%。DB61/T954—20155（規(guī)范性附錄）農(nóng)藥標準物質(zhì)信息表A.1農(nóng)藥標準物質(zhì)基本信息CAS.號1CHClNO2CHClNO63CHClN74CHClNO5CHNO6CHClFNO7CHClNOS8CHClOP89CHClOPCHClNOPSCHNO3CHClNOCHNOPSCHClFN2OCHClFNOCHFNSiCHClFNOCHFNOCHNOPS1CHNOPSCHNOCHNOCHClNCHNO9CHNOCHClNOCHClNOCHNOPSCHNCHNODB61/T954—20156CAS.號CHNCHNOS4CHOPSCHClNOCHClNCHNS5CHClNOSCHNSCHClNOCHClNOCHNOPSCHClNOPSCHNOPSCHClNCHNOCHOPSCHClNCHClNOC