ICS11.020CCSC10/29T/CEMAOperationSpecificationsforMedicinalCultivationofHainanPoecilobdellamanillenIT/CEMA043-2025前言 Ⅲ 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4環(huán)境條件與設(shè)施 5管理人員要求 26藥用菲牛蛭養(yǎng)殖流程 27親蛭培育 48尾水排放 59檔案記錄 5附錄A海南金邊螞蟥藥用養(yǎng)殖標(biāo)準工作記錄表 6T/CEMA043-2025前言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由海南醫(yī)科大學(xué)（海南省醫(yī)學(xué)科學(xué)院）提出。本文件由中國民族醫(yī)藥協(xié)會歸口。本文件起草單位：海南醫(yī)科大學(xué)（海南省醫(yī)學(xué)科學(xué)院）、海南蛭久生物科技有限公司、白沙黎族自治縣人民醫(yī)院（白沙黎族自治縣醫(yī)療集團總醫(yī)院）、浙江中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院。本文件主要起草人：宮愛民、孫浠哲、李夢、丁治國、鄭立運、董秀娟、徐佳悅、段蘇卿、劉穎、李澤友、張小坡、王凱、李葉雙、劉婷婷、謝毅強、馬志健、朱愛松、王開瓊、林璐、何世龍、羅海生、林其全、符敏、陳星余、吳薇薇、劉洋洋、吳維炎、肖曉光、張晶、王玉君、王爾棟、張志武、吳立東、耿啟森、許光、陳曉東、武京妤、葉倩云、強龍、韓祺。本文件為首次發(fā)布。T/CEMA043-2025海南菲牛蛭，俗稱金邊螞蟥，屬無吻蛭目、醫(yī)蛭科、牛蛭屬吸血類水蛭，《中國動物志》記載：海南菲牛蛭是海南島水田的優(yōu)勢種，密度很大，是吸血類水蛭中個體較大的品種，生活在稻田、水溝、江河或池塘里，以吸吮人和脊椎動物（如牛、豬、馬、羊等）的血液為生。作為一種吸血的蛭類，菲牛蛭體內(nèi)及其唾液中富含多種包括抗凝血、溶栓及抗炎、鎮(zhèn)痛等功能的生物活性成分，這些成分具有顯著的作用，在臨床醫(yī)學(xué)中得到廣泛應(yīng)用，尤其是在心腦血管疾病治療和顯微外科手術(shù)中，展現(xiàn)出重要的治療價值。隨著廣西、云南、海南等省（區(qū)）菲牛蛭藥材標(biāo)準的陸續(xù)公布，菲牛蛭在藥用領(lǐng)域的應(yīng)用日益廣泛，然而，其供應(yīng)量仍顯不足，且質(zhì)量參差不齊。目前國內(nèi)在制定和執(zhí)行藥用菲牛蛭養(yǎng)殖標(biāo)準方面仍處于起步階段，相關(guān)規(guī)范和技術(shù)體系尚不完善，缺乏統(tǒng)一的行業(yè)標(biāo)準使得質(zhì)量控制變得困難。為進一步規(guī)范藥用海南菲牛蛭的養(yǎng)殖規(guī)程，本文件在制定過程中，采用文獻研究、實地調(diào)研等多種研究方法，海南醫(yī)科大學(xué)（海南省醫(yī)學(xué)科學(xué)院）聯(lián)合海南蛭久生物科技有限公司等根據(jù)《中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2022年版）》等相關(guān)法律法規(guī)制定本文件，旨在規(guī)范藥用海南菲牛蛭的養(yǎng)殖操作規(guī)范，提升藥材品質(zhì)，通過嚴格的質(zhì)量控制確保藥材安全性和療效，對推動中醫(yī)藥特色療法在國內(nèi)外的科技競爭力，促進海南黎藥的發(fā)展具有重要意義。1T/CEMA043-2025藥用海南金邊螞蟥（菲牛蛭）養(yǎng)殖操作規(guī)范本文件規(guī)定了藥用菲牛蛭養(yǎng)殖技術(shù)的術(shù)語與定義、環(huán)境條件與設(shè)施、管理人員要求、藥用菲牛蛭養(yǎng)殖流程、親蛭培育、尾水排放及檔案記錄。本文件適用于藥用海南金邊螞蟥的養(yǎng)殖。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB11607-1989漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準GB50457-2019醫(yī)藥工業(yè)潔凈廠房設(shè)計標(biāo)準GB51245-2017工業(yè)建筑節(jié)能設(shè)計統(tǒng)一標(biāo)準SC/T9101淡水池塘養(yǎng)殖水排放要求中華人民共和國藥典2020年版四部通則1106中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范2022年版3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1海南金邊螞蟥HainanPoecilobdellamanillensis海南常見的吸血螞蟥，在《中國動物志》?蛭綱?醫(yī)蛭科中收載，標(biāo)本采集地為海南陵水，是海南島水田的優(yōu)勢種。本種海南陵水縣黎語叫“媽金”，保亭縣黎語叫“客陰（king）”。海南金邊螞蟥（菲牛蛭）個體狹長且扁平，個體較大，體長4cm～11.3cm或更長，一般體寬0.3cm～1.2cm，中部最大體寬可達0.35cm～2cm；活體背面黃褐色或橄欖綠色，體正側(cè)面各有一條橙黃色或紅棕色的縱帶；腹面淡灰色或灰綠色，較光滑；兩端各具一吸盤，前吸盤與口腔一體不顯著，尾吸盤較大，但明顯小于體寬。3.2親蛭用于繁殖的性成熟水蛭。4環(huán)境條件與設(shè)施4.1場地選擇宜選擇交通便利，水源充足、排灌方便，遠離使用農(nóng)藥的農(nóng)田果園，遠離工廠、機場等產(chǎn)生噪音及震動的場所。4.2養(yǎng)殖場所，采用封閉室內(nèi)養(yǎng)殖4.2.1養(yǎng)殖箱要求2T/CEMA043-2025為提高產(chǎn)量，減少病害，養(yǎng)殖過程規(guī)范可控，宜采用室內(nèi)池養(yǎng)殖，或養(yǎng)殖箱養(yǎng)殖。養(yǎng)殖箱材質(zhì)為食品級PP材質(zhì)或食品級304不銹鋼，規(guī)格為長2.0m、寬0.7m～0.8m、高0.3m，設(shè)獨立給排水和防逃設(shè)施。進出水口設(shè)置濾網(wǎng)，防止天敵進入或菲牛蛭逃出。在控溫控濕的條件下，交配產(chǎn)繭孵化時，箱底鋪經(jīng)過消毒滅菌后的沙質(zhì)或壤質(zhì)土，或者采用食品級PP塑料管（孔徑1.5cm～2.0cm），截成10cm～20cm長段，10根左右捆扎成束，供菲牛蛭產(chǎn)繭孵化。4.2.2養(yǎng)殖室要求養(yǎng)殖室要求具有封閉條件，門窗完好，設(shè)防鼠、防蟲紗網(wǎng)，能夠正常通風(fēng)、控溫控濕、可調(diào)整光照強度，避免陽光直射，最佳水溫為22℃~30℃。有條件的養(yǎng)殖室可以配備視頻監(jiān)控。4.2.3光照強度養(yǎng)殖室內(nèi)應(yīng)以弱光為主，照明光照強度應(yīng)控制在30lx～50lx(勒克斯）之間。4.2.4空氣養(yǎng)殖室應(yīng)具備正壓式新風(fēng)空氣控制系統(tǒng)，保持空氣流通、無污染，室內(nèi)無異味。4.2.5溫度養(yǎng)殖室的溫度應(yīng)保持恒定狀態(tài)，溫度區(qū)間宜在24℃~30℃之間，波動范圍應(yīng)控制在±3℃。4.2.6濕度在菲牛蛭的幼體階段，相對較高的濕度（75%～80%）更為適宜。成體菲牛蛭對濕度的適應(yīng)范圍相對較廣，但一般也保持在70%～80%。4.3水質(zhì)4.3.1pH值：6.5～7.5；4.3.2含鹽量：包括氯化物、硫酸鹽、碳酸鹽等各種鹽類物質(zhì)總量不高于3‰（亞硝酸鹽含量應(yīng)低于1‰4.3.3溶氧量：3mg/L～5mg/L；4.3.4清潔度：水源應(yīng)無污染，重金屬含量（如汞、鎘、鉛等）需符合GB11607-1989漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準要求，例如汞含量應(yīng)低于0.0005mg/L，氨氮含量宜控制在0.02～0.2mg/L。4.3.5水質(zhì)檢測：流動水每周檢測一次，循環(huán)水隔天檢測一次。5管理人員要求5.1身體健康，無傳染性疾病，每年體檢1次，取得健康證明，無外傷，注意個人衛(wèi)生。5.2進入養(yǎng)殖區(qū)域應(yīng)穿戴防護口罩、工作帽、工作鞋或鞋套。5.3不應(yīng)在養(yǎng)殖區(qū)域內(nèi)吸煙、飲食。5.4應(yīng)熟識菲牛蛭的生物學(xué)特性和養(yǎng)殖的基本技術(shù)要求。6養(yǎng)殖流程3T/CEMA043-20256.1活體成蟲選擇應(yīng)選用人工養(yǎng)殖、繁育二代以上、養(yǎng)殖期3個月～6個月（從孵化成幼蟲算起）以上或體重5.0g～20.0g的健康、活力強、體色正常、體表無傷痕、規(guī)格整齊的海南金邊螞蟥成蟲。6.2養(yǎng)殖前準備養(yǎng)殖箱用水需使用可飲用標(biāo)準的水，儲水箱應(yīng)為304食品級不銹鋼材質(zhì)，水箱出水口應(yīng)有UVC短波紫外線殺菌設(shè)備。放養(yǎng)前2d排干凈養(yǎng)殖箱中的水，并使用聚維酮碘、過硫酸氫鉀等消毒養(yǎng)殖箱及其周圍環(huán)境，待2h~3h后，用凈化水將養(yǎng)殖箱反復(fù)沖洗干凈，消毒劑應(yīng)交替使用。6.3幼苗質(zhì)量挑選體長0.2cm以上、體表無損傷且較為活躍的個體作為菲牛蛭幼苗。6.4養(yǎng)殖密度放養(yǎng)密度根據(jù)養(yǎng)殖箱而定，一般每平方米放養(yǎng)1000條～1500條。6.5養(yǎng)殖周期藥用菲牛蛭養(yǎng)殖周期3個月～6個月（從孵化成幼蟲算起），體重達到5g～20g，健康、活力強、體色正常、體表無傷痕的菲牛蛭，即可進行為期1個月以上的凈化。6.6換水頻率每日至少一次全量換水，換水時進水水溫與養(yǎng)殖箱內(nèi)水溫溫差應(yīng)控制在±3℃,一般選在中午之后，有條件可以進行微流量持續(xù)水流進水。每次換水前應(yīng)將菲牛蛭的蛻皮、排泄物清洗干凈，每次換水嚴格執(zhí)行操作方法，以減少對金邊螞蟥的干擾，避免因應(yīng)激而影響生存。6.7飼料投喂6.7.1飼料選擇飼料以新鮮牛血喂養(yǎng)為佳（牛血供應(yīng)不足時，可選用豬血或人工血漿血液應(yīng)經(jīng)過檢驗檢疫檢測合格后方可使用，血液中不應(yīng)添加任何抗凝血劑和防腐劑，當(dāng)天血液應(yīng)當(dāng)天用，不應(yīng)過夜保存，不應(yīng)有異味。6.7.2投喂要求投喂時間應(yīng)選在上午進行，血液應(yīng)使用食品級膠原蛋白腸衣或天然腸衣進行灌裝。血腸的長度可根據(jù)腸衣的長度而定，但是每節(jié)血腸長度不宜超過60cm。待其攝食完畢后，要密切觀察攝食情況，記錄本次飽食比例為下次投喂提供參考。將養(yǎng)殖箱內(nèi)的腸衣挑出，檢查腸內(nèi)是否有菲牛蛭進入。投喂量根據(jù)菲牛蛭的生長階段、季節(jié)和天氣等因素調(diào)整，一般為菲牛蛭體重的2倍～5倍。投喂時密切觀察海南金邊螞蟥（菲牛蛭）進食情況，防止過度飽食。藥用菲牛蛭在喂養(yǎng)時一般每周投喂不超過1次，成蟲菲牛蛭喂養(yǎng)不超過20g。6.8疾病防治4T/CEMA043-2025預(yù)防為主，保持養(yǎng)殖環(huán)境清潔衛(wèi)生，定期對養(yǎng)殖池（每1周～2周）、工具（每次用后）進行消毒。合理控制養(yǎng)殖密度，避免過度擁擠導(dǎo)致疾病傳播。如出現(xiàn)菲牛蛭個體異常應(yīng)及時隔離，經(jīng)消毒處里后，做廢料處理。6.9日常巡檢每天至少進行2次巡檢，檢查養(yǎng)殖箱的水位、水質(zhì)、菲牛蛭的活動情況。發(fā)現(xiàn)有病、殘、死的菲牛蛭應(yīng)及時撿出。不應(yīng)中途補充新的菲牛蛭到養(yǎng)殖箱內(nèi)。如大量浮頭可能是水質(zhì)缺氧或惡化，發(fā)現(xiàn)病蛭及時淘汰。6.10收獲一般在凈養(yǎng)（禁食）30d后收獲。將菲牛蛭活體清洗干凈，除去雜質(zhì)后用沸水燙死或速凍處死，曬干或低溫干燥。7親蛭培育7.1親蛭來源與質(zhì)量親蛭可通過規(guī)范化人工養(yǎng)殖獲得的成蛭。自然環(huán)境條件下，菲牛蛭自出生到性成熟需14～19個月，規(guī)范化人工養(yǎng)殖性成熟可縮短到3個月～6個月。選擇規(guī)格整齊，色澤鮮亮，體質(zhì)健壯，黏液豐富，活動能力強，體表無病灶或外傷，空腹體重5g～15g，年齡在1年以上或經(jīng)過一個冬眠期后并已達到性成熟、健壯的成蛭作為親蛭。親蛭最佳的生育年限是2年～4年，標(biāo)準化、規(guī)?；斯ゐB(yǎng)殖首先要做好親蛭的優(yōu)選培育。7.2交配繁殖季節(jié)菲牛蛭交配時間在每年2月～5月。在海南亞熱帶、熱帶地區(qū)，菲牛蛭還可在10月～11月份再產(chǎn)繭繁殖一次。7.3交配前準備菲牛蛭是一種雌雄同體的動物，一般雄性生殖器官先成熟，異體受精。觀察菲牛蛭體前端生殖環(huán)帶區(qū)明顯變寬，生殖孔附近出現(xiàn)米黃色顆粒，已達性成熟個體。按照4.2.1章的要求準備好交配產(chǎn)繭孵化條件，挑選5g～15g的性腺發(fā)育成熟，但未交配的健康菲牛蛭置于箱中，溫度控制在26℃~30℃,濕度保持在60%～70%，保持通風(fēng)。7.4交配與產(chǎn)繭7.4.1菲牛蛭交配與產(chǎn)繭過程：交配主要在土壤中完成，交配時間主要在早晚時段。交配時兩個體以口吸盤相互吻吸，雌雄生殖孔互相對應(yīng)，身體前段持續(xù)反復(fù)收縮，完成受精。交配大約1個月后開始產(chǎn)繭，產(chǎn)繭要在水面以外的產(chǎn)床（消毒后的土壤或食品級PP塑料管）進行。產(chǎn)繭時，產(chǎn)卵個體雌性生殖孔開始排出透明的粘液小泡，并向側(cè)向背面擴展，把生殖環(huán)帶區(qū)繞成一圈，最后排出黃色的粘液，形成卵袋。產(chǎn)卵后身體前段完全退出卵袋并用前吸盤把卵袋的小孔封住，就完成產(chǎn)卵過程。產(chǎn)卵一般在早上或夜間進行。每次產(chǎn)繭1個～5個，平均3.2個，每個繭有菲牛蛭1條～25條，平均11.6條。7.4.2菲牛蛭交配與產(chǎn)繭要求：必須離開水面，設(shè)置產(chǎn)床（消毒后的土壤或食品級PP塑料管）。7.5卵繭人工孵化對產(chǎn)繭的土壤或食品級PP塑料管（孔徑1.5cm～2.0cm）束進行清理，挑選出卵繭放置在籃狀篩網(wǎng)中，用一個適宜大小的容器，注入一定量的水，約30mm高，水層上放置塑料托盤，放置一定數(shù)量的卵繭坐于5T/CEMA043-2025水中，卵繭上覆蓋濕布。濕布3h～4h淋水，使卵繭環(huán)境濕度保持在40%～60%。淺盤浮置于水上，托盤底部有網(wǎng)狀孔，孵出的菲牛蛭自己會很容易地鉆入水中。溫度控制在26℃~28℃,每日定時檢查2次，將孵出的菲牛蛭用毛刷或棉棒輕輕挑至幼蛭培養(yǎng)箱中。7.6幼苗培育幼蛭一般經(jīng)過2d～3d在水中的活動，就會吸吮腸管內(nèi)的血漿液。培育期間溫度為25℃~30℃,養(yǎng)殖密度為每平方水體1000條～1500條。30