武漢大學(xué)《分子生物學(xué)》復(fù)習(xí)題庫(kù)及答案一、名詞解釋1.基因基因是具有遺傳效應(yīng)的DNA片段，是控制生物性狀的基本遺傳單位。它攜帶著特定的遺傳信息，通過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯等過(guò)程指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成，從而決定生物體的各種特征和功能。2.基因組一個(gè)生物體的全套遺傳物質(zhì)，包括所有的基因和非編碼DNA序列。對(duì)于真核生物，基因組存在于細(xì)胞核和細(xì)胞器（如線粒體、葉綠體）中；對(duì)于原核生物，基因組主要是其環(huán)狀的染色體DNA。3.轉(zhuǎn)錄以DNA為模板合成RNA的過(guò)程。在RNA聚合酶的作用下，按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，以DNA的一條鏈為模板合成RNA，將遺傳信息從DNA傳遞到RNA。4.翻譯以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)的過(guò)程。在核糖體上，tRNA攜帶氨基酸按照mRNA上的密碼子順序依次連接，形成多肽鏈，最終折疊成具有特定功能的蛋白質(zhì)。5.啟動(dòng)子DNA分子上位于基因上游，能夠被RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合，從而啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄的一段特定DNA序列。它包含了一些保守的元件，如TATA框、CAAT框等，對(duì)轉(zhuǎn)錄的起始和效率起著關(guān)鍵作用。6.增強(qiáng)子能夠增強(qiáng)基因轉(zhuǎn)錄活性的順式作用元件。它可以位于基因的上游、下游或內(nèi)含子中，通過(guò)與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)，促進(jìn)RNA聚合酶與啟動(dòng)子的結(jié)合，從而提高基因的轉(zhuǎn)錄水平。7.密碼子mRNA上相鄰的三個(gè)核苷酸組成的三聯(lián)體，每一個(gè)密碼子對(duì)應(yīng)一種氨基酸或作為翻譯的起始、終止信號(hào)。密碼子具有簡(jiǎn)并性、通用性等特點(diǎn)。8.反密碼子tRNA上與mRNA密碼子互補(bǔ)配對(duì)的三個(gè)核苷酸序列。通過(guò)反密碼子與密碼子的相互識(shí)別，tRNA能夠準(zhǔn)確地將特定的氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)到核糖體上參與蛋白質(zhì)合成。9.內(nèi)含子真核生物基因中存在的一段不編碼蛋白質(zhì)的DNA序列，它在轉(zhuǎn)錄后會(huì)被切除，不參與成熟mRNA的形成。內(nèi)含子的存在增加了基因表達(dá)調(diào)控的復(fù)雜性。10.外顯子真核生物基因中編碼蛋白質(zhì)的DNA序列，在轉(zhuǎn)錄后經(jīng)過(guò)加工保留在成熟mRNA中，最終被翻譯成蛋白質(zhì)。二、簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)。-兩條鏈反向平行：DNA分子由兩條脫氧核苷酸鏈組成，它們的方向相反，一條鏈的走向是5’→3’，另一條鏈的走向是3’→5’。-堿基互補(bǔ)配對(duì)：兩條鏈之間通過(guò)堿基之間的氫鍵相互連接，A（腺嘌呤）與T（胸腺嘧啶）配對(duì)，形成兩個(gè)氫鍵；G（鳥嘌呤）與C（胞嘧啶）配對(duì)，形成三個(gè)氫鍵。這種堿基互補(bǔ)配對(duì)原則保證了DNA復(fù)制和遺傳信息傳遞的準(zhǔn)確性。-右手螺旋結(jié)構(gòu)：DNA分子形成右手螺旋，每螺旋一周包含約10個(gè)堿基對(duì)，螺距為3.4nm，直徑為2nm。-大溝和小溝：雙螺旋結(jié)構(gòu)表面形成大溝和小溝，它們是蛋白質(zhì)與DNA相互作用的重要部位，許多轉(zhuǎn)錄因子等蛋白質(zhì)可以通過(guò)識(shí)別大溝和小溝中的堿基序列來(lái)調(diào)控基因表達(dá)。2.簡(jiǎn)述原核生物和真核生物基因表達(dá)調(diào)控的主要區(qū)別。-轉(zhuǎn)錄和翻譯的時(shí)空關(guān)系-原核生物：轉(zhuǎn)錄和翻譯在同一時(shí)間和空間進(jìn)行，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA不需要經(jīng)過(guò)復(fù)雜的加工就可以直接進(jìn)行翻譯。-真核生物：轉(zhuǎn)錄在細(xì)胞核中進(jìn)行，而翻譯在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行，轉(zhuǎn)錄和翻譯在時(shí)間和空間上是分開(kāi)的。并且真核生物的mRNA需要經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄后加工，如加帽、加尾、剪接等過(guò)程才能成為成熟的mRNA。-基因結(jié)構(gòu)-原核生物：基因結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，多為操縱子結(jié)構(gòu)，多個(gè)功能相關(guān)的基因串聯(lián)在一起，由一個(gè)啟動(dòng)子控制轉(zhuǎn)錄，形成多順?lè)醋觤RNA。-真核生物：基因結(jié)構(gòu)復(fù)雜，通常是單順?lè)醋?，一個(gè)基因?qū)?yīng)一條mRNA。并且真核生物基因中含有內(nèi)含子，需要進(jìn)行剪接等加工過(guò)程。-調(diào)控層次-原核生物：主要在轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行調(diào)控，通過(guò)操縱子的正負(fù)調(diào)控來(lái)實(shí)現(xiàn)基因表達(dá)的調(diào)控，如乳糖操縱子的負(fù)調(diào)控和色氨酸操縱子的正調(diào)控。-真核生物：調(diào)控層次更加復(fù)雜，包括染色質(zhì)水平的調(diào)控（如染色質(zhì)的重塑、組蛋白修飾等）、轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控（如轉(zhuǎn)錄因子的作用、增強(qiáng)子和啟動(dòng)子的相互作用等）、轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控（如mRNA的加工、穩(wěn)定性調(diào)控等）、翻譯水平的調(diào)控和翻譯后水平的調(diào)控（如蛋白質(zhì)的修飾、降解等）。3.簡(jiǎn)述RNA的種類及其功能。-信使RNA（mRNA）：作為遺傳信息的攜帶者，將DNA上的遺傳信息轉(zhuǎn)錄下來(lái)，帶到細(xì)胞質(zhì)中的核糖體上，作為蛋白質(zhì)合成的模板。不同的mRNA編碼不同的蛋白質(zhì)，其序列決定了蛋白質(zhì)中氨基酸的排列順序。-轉(zhuǎn)運(yùn)RNA（tRNA）：在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中起轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的作用。tRNA分子具有特定的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)，一端攜帶特定的氨基酸，另一端的反密碼子可以與mRNA上的密碼子互補(bǔ)配對(duì)，從而將氨基酸準(zhǔn)確地轉(zhuǎn)運(yùn)到核糖體上參與蛋白質(zhì)合成。-核糖體RNA（rRNA）：是核糖體的組成成分，與蛋白質(zhì)共同構(gòu)成核糖體。rRNA在核糖體的結(jié)構(gòu)和功能中起著重要作用，參與蛋白質(zhì)合成過(guò)程中肽鍵的形成等反應(yīng)。-小核RNA（snRNA）：主要參與真核生物mRNA的剪接過(guò)程。snRNA與一些蛋白質(zhì)組成小核核糖核蛋白顆粒（snRNP），通過(guò)與內(nèi)含子的特定序列相互作用，識(shí)別剪接位點(diǎn)，完成內(nèi)含子的切除和外顯子的連接。-微小RNA（miRNA）：是一類長(zhǎng)度較短的非編碼RNA，通過(guò)與靶mRNA的互補(bǔ)配對(duì)，抑制mRNA的翻譯或促進(jìn)其降解，從而調(diào)控基因表達(dá)，在細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化、凋亡等過(guò)程中發(fā)揮重要作用。-長(zhǎng)鏈非編碼RNA（lncRNA）：長(zhǎng)度大于200個(gè)核苷酸的非編碼RNA，可在多個(gè)層面（如染色質(zhì)重塑、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、轉(zhuǎn)錄后調(diào)控等）調(diào)控基因表達(dá)，參與胚胎發(fā)育、細(xì)胞分化、疾病發(fā)生等多種生物學(xué)過(guò)程。4.簡(jiǎn)述DNA復(fù)制的基本過(guò)程。-起始階段-解旋：在解旋酶的作用下，DNA雙鏈解開(kāi)，形成復(fù)制叉。同時(shí)，單鏈結(jié)合蛋白（SSB）結(jié)合在解開(kāi)的單鏈DNA上，防止單鏈重新配對(duì)和被核酸酶降解。-引物合成：引物酶以解開(kāi)的單鏈DNA為模板，合成一段短的RNA引物，為DNA聚合酶提供3’-OH末端，以便DNA聚合酶開(kāi)始合成DNA鏈。-延伸階段-前導(dǎo)鏈合成：DNA聚合酶Ⅲ以3’→5’方向的模板鏈為模板，按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，從引物的3’-OH末端開(kāi)始，連續(xù)地合成前導(dǎo)鏈，合成方向?yàn)?’→3’。-后隨鏈合成：后隨鏈的合成是不連續(xù)的。DNA聚合酶Ⅲ在引物的基礎(chǔ)上合成岡崎片段，每個(gè)岡崎片段的長(zhǎng)度在幾百到幾千個(gè)核苷酸不等。當(dāng)一個(gè)岡崎片段合成完成后，DNA聚合酶Ⅰ切除RNA引物，并填補(bǔ)引物留下的空缺，最后由DNA連接酶將相鄰的岡崎片段連接起來(lái)。-終止階段-當(dāng)復(fù)制叉移動(dòng)到終止位點(diǎn)時(shí)，DNA復(fù)制終止。在一些原核生物中，存在特定的終止序列和終止蛋白，它們可以阻止復(fù)制叉的繼續(xù)移動(dòng)。三、論述題1.論述基因表達(dá)調(diào)控在生物發(fā)育中的重要作用。基因表達(dá)調(diào)控在生物發(fā)育過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用，它決定了細(xì)胞的分化、組織和器官的形成以及個(gè)體的發(fā)育進(jìn)程。-細(xì)胞分化-細(xì)胞分化是指同一來(lái)源的細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過(guò)程。這一過(guò)程是通過(guò)基因表達(dá)調(diào)控實(shí)現(xiàn)的。在胚胎發(fā)育早期，所有細(xì)胞都具有相同的基因組，但隨著發(fā)育的進(jìn)行，不同細(xì)胞中特定的基因被激活或抑制，導(dǎo)致細(xì)胞合成不同的蛋白質(zhì)，從而使細(xì)胞具有不同的功能。例如，在神經(jīng)細(xì)胞分化過(guò)程中，與神經(jīng)細(xì)胞功能相關(guān)的基因如神經(jīng)遞質(zhì)合成相關(guān)基因、神經(jīng)特異性蛋白基因等被激活表達(dá)，而一些與其他細(xì)胞類型相關(guān)的基因則被抑制。-組織和器官形成-基因表達(dá)調(diào)控對(duì)于組織和器官的形成具有關(guān)鍵作用。不同組織和器官的形成是由一系列基因按照特定的時(shí)空順序表達(dá)所控制的。例如，在果蠅的發(fā)育過(guò)程中，同源異型基因（Hox基因）的表達(dá)模式?jīng)Q定了身體各部位的發(fā)育命運(yùn)。Hox基因在不同的體節(jié)中特異性表達(dá)，控制著體節(jié)的分化和器官的形成。如果Hox基因的表達(dá)發(fā)生異常，會(huì)導(dǎo)致身體結(jié)構(gòu)的異常，如出現(xiàn)腿長(zhǎng)在觸角位置等現(xiàn)象。-胚胎發(fā)育的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)-基因表達(dá)調(diào)控形成了一個(gè)復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，在胚胎發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮作用。這個(gè)網(wǎng)絡(luò)包括轉(zhuǎn)錄因子、信號(hào)通路和非編碼RNA等多個(gè)層次的調(diào)控。轉(zhuǎn)錄因子可以結(jié)合到特定的DNA序列上，激活或抑制基因的轉(zhuǎn)錄。信號(hào)通路則通過(guò)細(xì)胞間的信號(hào)傳遞，調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。非編碼RNA如miRNA和lncRNA可以在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達(dá)。這些調(diào)控因素相互作用，共同協(xié)調(diào)胚胎發(fā)育的各個(gè)階段，確保胚胎能夠正常發(fā)育成完整的個(gè)體。-發(fā)育的時(shí)序性-基因表達(dá)的時(shí)序性對(duì)于生物發(fā)育至關(guān)重要。不同的基因在發(fā)育的不同階段表達(dá)，保證了發(fā)育過(guò)程的有序進(jìn)行。例如，在植物的開(kāi)花過(guò)程中，一些與營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)相關(guān)的基因在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)階段表達(dá)，而一些與生殖生長(zhǎng)相關(guān)的基因如成花素基因等在合適的條件下（如光照、溫度等）開(kāi)始表達(dá)，促進(jìn)植物從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)向生殖生長(zhǎng)轉(zhuǎn)變，最終開(kāi)花結(jié)果。如果基因表達(dá)的時(shí)序性被打亂，會(huì)導(dǎo)致發(fā)育異常，如植物過(guò)早或過(guò)晚開(kāi)花等。2.論述蛋白質(zhì)合成的過(guò)程及影響因素。-蛋白質(zhì)合成的過(guò)程-氨基酸的活化：氨基酸在氨基酰-tRNA合成酶的催化下，與相應(yīng)的tRNA結(jié)合，形成氨基酰-tRNA。該酶具有高度的特異性，能夠識(shí)別特定的氨基酸和tRNA，保證了氨基酸與tRNA的正確結(jié)合。-起始階段-原核生物：30S小亞基首先與mRNA的核糖體結(jié)合位點(diǎn)（SD序列）結(jié)合，然后fMet-tRNAfMet（攜帶甲酰甲硫氨酸的tRNA）結(jié)合到起始密碼子AUG上，形成起始復(fù)合物。最后50S大亞基與起始復(fù)合物結(jié)合，形成完整的70S核糖體。-真核生物：首先，起始因子eIF與mRNA的5’帽子結(jié)構(gòu)結(jié)合，然后40S小亞基與起始因子、Met-tRNAMet（攜帶甲硫氨酸的tRNA）等結(jié)合，在mRNA上掃描，直到找到起始密碼子AUG，形成起始復(fù)合物。最后60S大亞基與起始復(fù)合物結(jié)合，形成完整的80S核糖體。-延伸階段-進(jìn)位：氨基酰-tRNA根據(jù)mRNA上的密碼子，在延伸因子的作用下進(jìn)入核糖體的A位。-成肽：在肽基轉(zhuǎn)移酶的作用下，P位上的肽酰-tRNA的肽鏈轉(zhuǎn)移到A位的氨基酰-tRNA上，形成新的肽鍵。-移位：在移位酶的作用下，核糖體沿mRNA向3’方向移動(dòng)一個(gè)密碼子的距離，使原來(lái)在A位的肽酰-tRNA移到P位，原來(lái)在P位的空載tRNA移到E位并釋放。-終止階段-當(dāng)核糖體遇到終止密碼子（UAA、UAG、UGA）時(shí)，釋放因子（RF）識(shí)別終止密碼子并結(jié)合到核糖體上，促使肽酰-tRNA之間的酯鍵水解，釋放出合成好的多肽鏈，然后核糖體亞基解離，mRNA也從核糖體上釋放出來(lái)。-影響蛋白質(zhì)合成的因素-營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸是蛋白質(zhì)合成的原料，缺乏必需氨基酸會(huì)影響蛋白質(zhì)合成的進(jìn)行。此外，能量物質(zhì)（如ATP、GTP）對(duì)于氨基酸的活化、起始復(fù)合物的形成、肽鏈的延伸等過(guò)程都至關(guān)重要，能量供應(yīng)不足會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成受阻。-激素：一些激素可以調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)合成。例如，生長(zhǎng)激素可以促進(jìn)蛋白質(zhì)合成，增加肌肉質(zhì)量和身體生長(zhǎng)。胰島素可以促進(jìn)氨基酸進(jìn)入細(xì)胞，同時(shí)促進(jìn)蛋白質(zhì)合成相關(guān)基因的表達(dá)，從而提高蛋白質(zhì)合成的速率。-溫度：溫度會(huì)影響酶的活性，蛋白質(zhì)合成過(guò)程中涉及多種酶（如氨基酰-tRNA合成酶、肽基轉(zhuǎn)移酶等），適宜的溫度有利于酶發(fā)揮活性，保證蛋白質(zhì)合成的正常進(jìn)行。溫度過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響酶的活性，從而影響蛋白質(zhì)合成。-藥物和毒素：某些藥物和毒素可以抑制蛋白質(zhì)合成。例如，氯霉素可以與原核生物核糖體的50S大亞基結(jié)合，抑制肽基轉(zhuǎn)移酶的活性，從而阻斷蛋白質(zhì)合成；嘌呤霉素的結(jié)構(gòu)與氨基酰-tRNA相似，可以進(jìn)入核糖體的A位，參與肽鍵形成，但隨后會(huì)使肽鏈提前釋放，導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成終止。-基因表達(dá)調(diào)控：基因表達(dá)調(diào)控在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平都會(huì)影響蛋白質(zhì)合成。轉(zhuǎn)錄水平上，轉(zhuǎn)錄因子的活性、啟動(dòng)子和增強(qiáng)子的功能等會(huì)影響mRNA的合成量；翻譯水平上，如miRNA可以與mRNA結(jié)合，抑制mRNA的翻譯，從而影響蛋白質(zhì)合成的量。3.論述基因突變的類型、原因及生物學(xué)意義。-基因突變的類型-堿基置換：指DNA分子中一個(gè)堿基被另一個(gè)堿基所取代。分為轉(zhuǎn)換（嘌呤與嘌呤之間或嘧啶與嘧啶之間的替換）和顛換（嘌呤與嘧啶之間的替換）。堿基置換可能導(dǎo)致密碼子的改變，從而影響蛋白質(zhì)的氨基酸序列。-插入和缺失：插入是指在DNA序列中插入一個(gè)或多個(gè)堿基；缺失是指DNA序列中缺失一個(gè)或多個(gè)堿基。插入和缺失可能會(huì)導(dǎo)致閱讀框的改變，使后續(xù)的密碼子發(fā)生錯(cuò)位，產(chǎn)生截短或異常的蛋白質(zhì)。-移碼突變：由于插入或缺失的堿基數(shù)目不是3的倍數(shù)，導(dǎo)致從突變位點(diǎn)開(kāi)始的密碼子閱讀框發(fā)生改變，從而使翻譯出的蛋白質(zhì)氨基酸序列發(fā)生很大變化。-動(dòng)態(tài)突變：某些基因中的短串聯(lián)重復(fù)序列（如三核苷酸重復(fù)序列）在世代傳遞過(guò)程中拷貝數(shù)發(fā)生擴(kuò)增，導(dǎo)致疾病的發(fā)生。例如，亨廷頓病就是由于Huntingtin基因中的CAG三核苷酸重復(fù)序列擴(kuò)增引起的。-基因突變的原因-自發(fā)突變-DNA復(fù)制錯(cuò)誤：DNA聚合酶在復(fù)制過(guò)程中可能會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤，雖然DNA聚合酶具有校對(duì)功能，但仍有少量錯(cuò)誤會(huì)保留下來(lái)，導(dǎo)致基因突變。-堿基的自發(fā)化學(xué)變化：如堿基的脫氨基作用，會(huì)使胞嘧啶變成尿嘧啶，腺嘌呤變成次黃嘌呤等，從而導(dǎo)致堿基配對(duì)錯(cuò)誤，引起基因突變。-誘發(fā)突變-物理因素：如紫外線、X射線、γ射線等。紫外線可以使DNA分子中的相鄰嘧啶堿基形成二聚體，影響DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄；X射線和γ射線等高能射線可以直接破壞DNA分子的化學(xué)鍵，導(dǎo)致DNA斷裂、堿基損傷等。-化學(xué)因素：許多化學(xué)物質(zhì)可以誘發(fā)基因突變，如亞硝酸可以使堿基發(fā)生脫氨基作用；烷化劑可以使堿基發(fā)生烷基化修飾，導(dǎo)致堿基配對(duì)錯(cuò)誤；堿基類似物（如5-溴尿嘧啶）可以在DNA復(fù)制時(shí)摻入到DNA分子中，引起堿基配對(duì)錯(cuò)誤。-生物因素：某些病毒和細(xì)菌可以引起基因突變。例如，一些逆轉(zhuǎn)錄病毒可以將其基因組整合到宿主細(xì)胞的DNA中，導(dǎo)致宿主基因結(jié)構(gòu)和功能的改變。-基因突變的生物學(xué)意義-為生物進(jìn)化提供原材料：基因突變產(chǎn)生新的等位基因，增加了基因的多樣性。這些新的基因可能會(huì)使生物具有新的性狀和功能，在自然選擇的作用下，適應(yīng)環(huán)境的突變基因會(huì)被保留和積累，從而推動(dòng)生物的進(jìn)化。-導(dǎo)致遺傳疾病：許多基因突變會(huì)導(dǎo)致遺傳疾病的發(fā)生。例如，鐮刀型細(xì)胞貧血癥是由于血紅蛋白基因中的一個(gè)堿基置換，使編碼的氨基酸發(fā)生改變，導(dǎo)致血紅蛋白結(jié)構(gòu)異常，紅細(xì)胞變形能力下降，容易破裂，引起貧血等癥狀。-影響生物的生長(zhǎng)發(fā)育和生理功能：基因突變可能會(huì)影響生物體內(nèi)基因的正常表達(dá)和調(diào)控，從而影響生物的生長(zhǎng)發(fā)育和生理功能。例如，一些基因突變可能導(dǎo)致植物的生長(zhǎng)矮小、開(kāi)花異常等。-用于基因功能研究：通過(guò)人為誘導(dǎo)基因突變或研究自然發(fā)生的基因突變，可以了解基因的功能。例如，通過(guò)研究基因突變導(dǎo)致的表型變化，可以推斷該基因在生物體內(nèi)的作用。四、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證某一基因是否為某一信號(hào)通路的關(guān)鍵調(diào)控基因。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模候?yàn)證某一基因是否為某一信號(hào)通路的關(guān)鍵調(diào)控基因。實(shí)驗(yàn)材料：細(xì)胞系、含有目的基因的表達(dá)載體、目的基因的siRNA、信號(hào)通路相關(guān)的抗體、熒光定量PCR試劑、Westernblot試劑等。實(shí)驗(yàn)步驟：1.基因過(guò)表達(dá)實(shí)驗(yàn)-將含有目的基因的表達(dá)載體轉(zhuǎn)染到細(xì)胞系中，同時(shí)設(shè)置轉(zhuǎn)染空載體的對(duì)照組。-培養(yǎng)一段時(shí)間后，收集細(xì)胞。