2025年高三生物高考生物技術(shù)實(shí)踐模擬試題一、選擇題（每題2分，共20分）下列關(guān)于微生物培養(yǎng)基制備的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.配制固體培養(yǎng)基時(shí)需加入瓊脂作為凝固劑，且需在滅菌前調(diào)節(jié)pHB.以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基可用于篩選產(chǎn)脲酶的微生物C.倒平板時(shí)需將培養(yǎng)基冷卻至50℃左右，在酒精燈火焰附近操作D.高壓蒸汽滅菌法通常采用121℃、101kPa條件下滅菌30分鐘在果酒和果醋發(fā)酵實(shí)驗(yàn)中，下列操作正確的是（）A.果酒發(fā)酵時(shí)，每隔12小時(shí)打開(kāi)瓶蓋釋放CO?B.果醋發(fā)酵階段應(yīng)封閉充氣口，防止雜菌污染C.葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)需留有1/3空間，避免發(fā)酵液溢出D.檢測(cè)果醋產(chǎn)生時(shí)，可通過(guò)品嘗或用pH試紙測(cè)定發(fā)酵液酸性下列關(guān)于酶的固定化技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.物理吸附法固定化酶對(duì)其活性影響較小，但結(jié)合力較弱B.包埋法常用的載體有瓊脂糖、海藻酸鈉和聚丙烯酰胺等C.固定化酵母細(xì)胞可用于工業(yè)化生產(chǎn)酒精，提高酶的利用率D.固定化酶技術(shù)可實(shí)現(xiàn)酶的重復(fù)利用，但無(wú)法解決產(chǎn)物分離問(wèn)題分離土壤中分解纖維素的微生物時(shí)，下列操作不合理的是（）A.制備選擇培養(yǎng)基時(shí)需加入纖維素粉作為唯一碳源B.采用稀釋涂布平板法時(shí)，需將土壤樣液稀釋至10??～10??倍C.剛果紅染色后，透明圈直徑與菌落直徑比值越大，菌株分解能力越強(qiáng)D.為避免污染，需對(duì)培養(yǎng)皿、接種環(huán)和土壤樣液進(jìn)行滅菌處理下列關(guān)于植物有效成分提取的敘述，正確的是（）A.蒸餾法提取玫瑰精油時(shí)，溫度計(jì)應(yīng)插入蒸餾燒瓶液面以下B.壓榨法提取橘皮精油時(shí)，需將橘皮在石灰水中浸泡10小時(shí)以上C.萃取法提取胡蘿卜素時(shí)，應(yīng)選用沸點(diǎn)高的乙醇作為萃取劑D.紙層析法鑒定胡蘿卜素時(shí)，需用蒸餾水作為層析液某同學(xué)采用平板劃線(xiàn)法分離純化大腸桿菌，下列操作錯(cuò)誤的是（）A.接種前需用70%酒精擦拭雙手和工作臺(tái)面B.接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后，需冷卻后再蘸取菌液C.每次劃線(xiàn)應(yīng)從上一次劃線(xiàn)末端開(kāi)始，共劃3～5個(gè)區(qū)域D.劃線(xiàn)結(jié)束后，需將培養(yǎng)皿正放于37℃恒溫箱中培養(yǎng)在“血紅蛋白的提取與分離”實(shí)驗(yàn)中，下列說(shuō)法正確的是（）A.洗滌紅細(xì)胞時(shí)，需用生理鹽水快速攪拌，以去除雜蛋白B.透析時(shí)，需將血紅蛋白溶液裝入透析袋，置于磷酸緩沖液中C.凝膠色譜法分離時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)先流出層析柱D.電泳時(shí)，血紅蛋白在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)，因?yàn)槠鋷д姾上铝嘘P(guān)于PCR技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.每次循環(huán)包括變性、復(fù)性和延伸三個(gè)階段，需耐高溫DNA聚合酶B.引物與模板DNA的結(jié)合遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，具有特異性C.反應(yīng)體系中需加入模板DNA、引物、dNTP和解旋酶等物質(zhì)D.若目的基因片段長(zhǎng)度為500bp，30次循環(huán)后理論上可擴(kuò)增至23?倍某實(shí)驗(yàn)小組欲探究溫度對(duì)加酶洗衣粉洗滌效果的影響，下列設(shè)計(jì)合理的是（）A.實(shí)驗(yàn)自變量為溫度，無(wú)關(guān)變量為洗衣粉用量、污漬類(lèi)型等B.用相同濃度的洗衣粉溶液處理不同污漬，觀察去污時(shí)間C.水溫設(shè)置為0℃、20℃、40℃、60℃，每組重復(fù)3次D.實(shí)驗(yàn)結(jié)論：加酶洗衣粉在60℃時(shí)洗滌效果最佳下列關(guān)于生物技術(shù)實(shí)踐中“無(wú)菌操作”的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.植物組織培養(yǎng)時(shí)，外植體需用70%酒精和5%次氯酸鈉消毒B.微生物接種時(shí)，接種環(huán)、涂布器等需通過(guò)灼燒滅菌C.發(fā)酵工程中，需對(duì)培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備進(jìn)行干熱滅菌D.無(wú)菌操作的目的是防止雜菌污染，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性二、填空題（每空1分，共30分）微生物培養(yǎng)中，培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分包括碳源、氮源、和。若培養(yǎng)乳酸桿菌，需在培養(yǎng)基中添加________作為生長(zhǎng)因子，且培養(yǎng)過(guò)程需________（填“有氧”或“無(wú)氧”）條件。腐乳制作過(guò)程中，毛霉等微生物產(chǎn)生的________可將豆腐中的蛋白質(zhì)水解為_(kāi)_______和________，可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加鹽腌制的目的是析出水分、抑制雜菌生長(zhǎng)和。固定化酶技術(shù)中，常用的方法有________、和。與游離酶相比，固定化酶的優(yōu)點(diǎn)是________、________（答出兩點(diǎn)即可）。土壤中分解尿素的細(xì)菌篩選實(shí)驗(yàn)中，需在培養(yǎng)基中加入________指示劑，若培養(yǎng)基變紅，說(shuō)明細(xì)菌能分解尿素，其原理是________。該實(shí)驗(yàn)中，對(duì)照組應(yīng)設(shè)置為_(kāi)_______的培養(yǎng)基。血紅蛋白提取實(shí)驗(yàn)中，洗滌紅細(xì)胞的目的是去除________，釋放血紅蛋白時(shí)需加入________（填“蒸餾水”或“生理鹽水”）使紅細(xì)胞破裂。粗提取的血紅蛋白溶液需通過(guò)________法去除小分子雜質(zhì)。某同學(xué)用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)土壤中細(xì)菌數(shù)量，將1g土壤樣液稀釋10?倍后，取0.1mL涂布3個(gè)平板，培養(yǎng)后菌落數(shù)分別為32、35、38，則每克土壤中活菌數(shù)為_(kāi)_______個(gè)。該方法統(tǒng)計(jì)結(jié)果往往比實(shí)際值________（填“偏高”或“偏低”），原因是________。三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題（共50分）17.微生物培養(yǎng)與篩選實(shí)驗(yàn)（15分）背景：某研究小組欲從長(zhǎng)期施用農(nóng)藥的農(nóng)田土壤中篩選出能降解有機(jī)磷農(nóng)藥（如樂(lè)果）的微生物，以用于污染土壤的生物修復(fù)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）設(shè)計(jì)篩選該微生物的選擇培養(yǎng)基，寫(xiě)出其基本成分（至少4種），并說(shuō)明選擇依據(jù)。（5分）（2）若采用平板劃線(xiàn)法純化菌株，第二次劃線(xiàn)時(shí)需從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始，目的是什么？若劃線(xiàn)后發(fā)現(xiàn)所有平板均未出現(xiàn)菌落，可能的原因有哪些？（4分）（3）為確定篩選出的菌株對(duì)樂(lè)果的降解效率，設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)方案，要求寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路、檢測(cè)指標(biāo)及預(yù)期結(jié)果。（6分）18.發(fā)酵工程綜合實(shí)驗(yàn)（15分）背景：某工廠利用酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)酒精，為提高產(chǎn)量，需優(yōu)化發(fā)酵條件。請(qǐng)根據(jù)所學(xué)知識(shí)，完成以下實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄繙囟群统跏紁H對(duì)酵母菌酒精發(fā)酵速率的影響。實(shí)驗(yàn)材料：酵母菌懸液、葡萄糖溶液、pH緩沖液（pH4.0、5.0、6.0、7.0）、恒溫培養(yǎng)箱等。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）寫(xiě)出該實(shí)驗(yàn)的自變量、因變量及無(wú)關(guān)變量（各列舉2項(xiàng)）。（3分）（2）設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)表格，用于記錄不同溫度（25℃、30℃、35℃）和pH條件下的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。（4分）（3）實(shí)驗(yàn)中需檢測(cè)酒精產(chǎn)量，寫(xiě)出兩種檢測(cè)方法，并說(shuō)明其原理。（4分）（4）若實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示30℃、pH5.0時(shí)酒精產(chǎn)量最高，為進(jìn)一步確定最適溫度，應(yīng)如何調(diào)整后續(xù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)？（4分）19.酶技術(shù)應(yīng)用實(shí)驗(yàn)（20分）背景：α-淀粉酶可用于淀粉水解生產(chǎn)葡萄糖，工業(yè)上常采用固定化酶技術(shù)提高其利用率。某實(shí)驗(yàn)小組欲比較游離α-淀粉酶和固定化α-淀粉酶的催化效率及重復(fù)使用效果。實(shí)驗(yàn)材料：α-淀粉酶、可溶性淀粉、碘液、海藻酸鈉、CaCl?溶液、透析袋等。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）簡(jiǎn)述用包埋法固定化α-淀粉酶的實(shí)驗(yàn)步驟（寫(xiě)出關(guān)鍵步驟即可）。（6分）（2）設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)比較游離酶和固定化酶的催化效率，寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路（含對(duì)照組設(shè)置）。（6分）（3）若要探究固定化酶的重復(fù)使用效果，實(shí)驗(yàn)中需測(cè)定的指標(biāo)是什么？預(yù)期結(jié)果如何？（4分）（4）實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，固定化酶的催化效率略低于游離酶，分析可能的原因。（4分）參考答案及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)（部分示例）一、選擇題A（解析：調(diào)節(jié)pH應(yīng)在滅菌前進(jìn)行，A正確；瓊脂在滅菌后不會(huì)影響pH，B正確；倒平板時(shí)需在酒精燈火焰附近操作，防止雜菌污染，C正確；高壓蒸汽滅菌條件為121℃、101kPa、30分鐘，D正確。）C（解析：果酒發(fā)酵時(shí)需擰松瓶蓋釋放CO?，不能打開(kāi)瓶蓋，A錯(cuò)誤；果醋發(fā)酵需通入氧氣，B錯(cuò)誤；葡萄汁裝瓶時(shí)留有1/3空間，防止發(fā)酵液溢出，C正確；果醋發(fā)酵液呈酸性，可通過(guò)pH試紙檢測(cè)，D正確。）二、填空題水、無(wú)機(jī)鹽；維生素；無(wú)氧蛋白酶；多肽；氨基酸；脂肪酶；調(diào)味物理吸附法；化學(xué)結(jié)合法；包埋法；重復(fù)利用；易于分離產(chǎn)物三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題（要點(diǎn)提示）17.（1）基本成分：樂(lè)果（唯一碳源）、NH?NO?（氮源）、KH?PO?（無(wú)機(jī)鹽）、水、瓊脂（凝固劑）；選擇依據(jù)：只有能降解樂(lè)果的微生物可在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。（2）目的：將聚集的菌種逐步稀釋?zhuān)@得單菌落；可能原因：接種環(huán)未冷卻、培養(yǎng)基滅菌不徹底、劃線(xiàn)操作失誤等。（3）實(shí)驗(yàn)思路：設(shè)置不同樂(lè)果濃度梯度的培養(yǎng)基，接種篩選菌株，測(cè)定一定時(shí)間后樂(lè)果剩余量；檢測(cè)指標(biāo)：樂(lè)果濃度（高效液相色譜法）；預(yù)期結(jié)果：樂(lè)果濃度隨時(shí)間下降，降解率與菌株數(shù)量正相關(guān)。18.（1）自變量：溫度（25℃、30℃、35℃）、pH（4.0、5.0、6.0、7.0）；因變量：酒精產(chǎn)量、CO?釋放量；無(wú)關(guān)變量：葡萄糖濃度、酵母菌數(shù)量、培養(yǎng)時(shí)間。（2）實(shí)驗(yàn)表格（示例）：|溫度（℃）|pH4.0|pH5.0|pH6.0|pH7.0||------------|--------|--------|--------|--------||25|酒精產(chǎn)量（g/L）|酒精產(chǎn)量（g/L）|酒精產(chǎn)量（g/L）|酒精產(chǎn)量（g/L）||30|酒精產(chǎn)量（g/L）|酒精產(chǎn)量（g/L）|酒精產(chǎn)量（g/L）|酒精產(chǎn)量（g/L）||35|酒精產(chǎn)量（g/L）|酒精產(chǎn)量（g/L）|酒精產(chǎn)量（g/L）|酒精產(chǎn)量（g/L）|19.（1）包埋法步驟：①溶解海藻酸鈉：加熱溶解海藻酸鈉溶液；②混合酶液：冷卻至室溫后加入α-淀粉酶，攪拌均勻；③滴加成型：用注射器將混合液滴入CaCl?溶液中，形成凝膠珠；④洗滌保存：用蒸餾水洗滌凝膠珠，置于4℃冰箱保存。（2）實(shí)驗(yàn)思路：設(shè)置三組實(shí)驗(yàn)，①游離酶組：淀粉溶液+游離α-淀粉酶；②固定化酶組：淀粉溶液+固定化α-淀粉酶；③對(duì)照組：淀粉溶液+等量蒸餾水。在相同條件下反應(yīng)，每隔5分鐘取樣，用碘液檢測(cè)淀粉剩余量，比較反應(yīng)速率。（3）指標(biāo)：固定化酶重復(fù)使用次數(shù)與淀粉水解率；預(yù)期結(jié)果：隨著使用次數(shù)增加，水解率逐漸下降，第3次使用后水解率降至初始值的50%以下。（4）原因：固定化過(guò)程中酶分子空間結(jié)構(gòu)改變；底物與酶結(jié)合位點(diǎn)接觸受阻；部分酶活性在包埋過(guò)程中喪失。試題設(shè)計(jì)說(shuō)明：模塊覆蓋：試題涵蓋微生物培養(yǎng)（11、12、17題）、發(fā)酵工程（12、18題）、酶技術(shù)（13