病理學(xué)技術(shù)士操作技能考核題庫一、選擇題（每題2分，共20題）1.病理切片制作過程中，固定標(biāo)本最常用的液體是？A.乙醇溶液B.甲醇溶液C.乙醚溶液D.丙酮溶液2.蘇木精染色的主要原理是？A.堿性染色B.酸性染色C.中性染色D.還原染色3.病理切片脫水過程中，最常用的脫水劑是？A.乙醇B.丙酮C.乙醚D.氯仿4.石蠟包埋切片時，切片厚度通?？刂圃冢緼.1-2μmB.4-5μmC.10-12μmD.20-25μm5.病理顯微鏡觀察時，最高放大倍數(shù)通常為？A.100×B.200×C.400×D.1000×6.病理報告書寫中，描述腫瘤大小通常使用？A.長×寬×高B.長×寬C.長+寬D.長÷寬7.免疫組化染色中，最常用的封閉劑是？A.蛋白質(zhì)AB.蛋白質(zhì)BC.牛血清白蛋白（BSA）D.脫脂奶粉8.病理切片烤片時，最適宜的溫度范圍是？A.40-50℃B.50-60℃C.60-70℃D.70-80℃9.病理標(biāo)本取材時，腫瘤邊緣應(yīng)取材多少？A.1mm以內(nèi)B.1-2mmC.2-3mmD.3-4mm10.病理蠟塊保存時，最適宜的環(huán)境是？A.室溫干燥B.4℃冷藏C.-20℃冷凍D.37℃恒溫二、判斷題（每題1分，共10題）1.病理切片染色時，蘇木精和伊紅（HE）染色順序不能顛倒。（√）2.病理顯微鏡目鏡放大倍數(shù)通常為10倍。（√）3.免疫組化染色中，抗體孵育時間通常為30分鐘。（×）4.病理蠟塊長期保存時，應(yīng)避免反復(fù)融化。（√）5.病理標(biāo)本固定時，固定液濃度越高越好。（×）6.病理切片脫水后，應(yīng)立即進(jìn)行透明處理。（√）7.病理報告書寫中，腫瘤分級通常使用三級分類法。（√）8.病理顯微鏡物鏡放大倍數(shù)通常為40倍或100倍。（√）9.免疫組化染色中，陰性對照應(yīng)使用已知陰性標(biāo)本。（√）10.病理蠟塊包埋時，應(yīng)確保蠟塊均勻冷卻。（√）三、簡答題（每題5分，共4題）1.簡述病理切片制作的基本步驟。2.簡述免疫組化染色的基本原理。3.簡述病理標(biāo)本取材的注意事項。4.簡述病理報告書寫的基本要求。四、操作題（每題10分，共2題）1.操作步驟：蘇木精染色操作要求：詳細(xì)描述蘇木精染色的具體步驟和注意事項。2.操作步驟：免疫組化染色操作要求：詳細(xì)描述免疫組化染色的具體步驟和注意事項。答案與解析一、選擇題答案與解析1.答案：A解析：病理標(biāo)本固定最常用的液體是乙醇溶液，其能有效固定組織結(jié)構(gòu)，防止自溶和腐敗。2.答案：B解析：蘇木精為堿性染料，能與細(xì)胞核中的核酸結(jié)合，使其呈現(xiàn)藍(lán)色。3.答案：A解析：病理切片脫水最常用的脫水劑是乙醇，其能有效去除組織中的水分，為透明和包埋做準(zhǔn)備。4.答案：B解析：石蠟包埋切片厚度通?？刂圃?-5μm，既能保證組織結(jié)構(gòu)清晰，又能提高顯微鏡觀察效率。5.答案：D解析：病理顯微鏡最高放大倍數(shù)為1000×（目鏡10××物鏡100×），此時分辨率最高。6.答案：A解析：病理報告描述腫瘤大小通常使用長×寬×高（單位為mm），準(zhǔn)確反映腫瘤體積。7.答案：C解析：免疫組化染色最常用的封閉劑是牛血清白蛋白（BSA），能有效封閉非特異性結(jié)合位點。8.答案：C解析：病理切片烤片最適宜的溫度范圍是60-70℃，能確保蠟塊均勻硬化，切片不易破碎。9.答案：B解析：病理標(biāo)本取材時，腫瘤邊緣應(yīng)取材1-2mm，既能避免污染，又能保證標(biāo)本代表性。10.答案：C解析：病理蠟塊長期保存時，應(yīng)置于-20℃冷凍，能有效防止蠟塊變形和老化。二、判斷題答案與解析1.答案：√解析：蘇木精和伊紅染色順序不能顛倒，蘇木精染色后才能進(jìn)行伊紅復(fù)染，否則染色效果不佳。2.答案：√解析：病理顯微鏡目鏡放大倍數(shù)通常為10倍，是標(biāo)準(zhǔn)配置。3.答案：×解析：免疫組化抗體孵育時間通常為1-2小時，30分鐘孵育時間過短，影響染色效果。4.答案：√解析：病理蠟塊長期保存時，應(yīng)避免反復(fù)融化，否則蠟塊易變形，影響切片質(zhì)量。5.答案：×解析：病理標(biāo)本固定時，固定液濃度并非越高越好，過高可能導(dǎo)致組織過度收縮或染色不均。6.答案：√解析：病理切片脫水后，應(yīng)立即進(jìn)行透明處理，否則石蠟難以滲透組織。7.答案：√解析：病理報告書寫中，腫瘤分級通常使用三級分類法（G1、G2、G3），反映腫瘤惡性程度。8.答案：√解析：病理顯微鏡物鏡放大倍數(shù)通常為40倍或100倍，40倍用于初步觀察，100倍用于詳細(xì)觀察。9.答案：√解析：免疫組化染色中，陰性對照應(yīng)使用已知陰性標(biāo)本，確保染色特異性。10.答案：√解析：病理蠟塊包埋時，應(yīng)確保蠟塊均勻冷卻，否則易產(chǎn)生內(nèi)應(yīng)力，導(dǎo)致切片破碎。三、簡答題答案與解析1.病理切片制作的基本步驟：-取材：根據(jù)臨床需求選擇合適部位取材。-固定：使用10%中性緩沖甲醛溶液固定，確保組織結(jié)構(gòu)完整性。-脫水：依次使用不同濃度乙醇溶液脫水，去除水分。-透明：使用二甲苯透明，使組織透明化。-包埋：使用石蠟將組織包埋成塊。-切片：使用切片機(jī)將蠟塊切片，厚度通常為4-5μm。-染色：依次進(jìn)行蘇木精染色和伊紅復(fù)染。-脫水透明封片：依次使用不同濃度乙醇溶液脫水和二甲苯透明，最后封片。-鏡檢：使用顯微鏡觀察切片，撰寫報告。2.免疫組化染色的基本原理：-抗原修復(fù)：使用熱修復(fù)或酶修復(fù)方法，使抗原決定簇暴露。-封閉：使用BSA或脫脂奶粉封閉非特異性結(jié)合位點。-一抗孵育：使用特異性抗體與組織中的抗原結(jié)合。-二抗孵育：使用標(biāo)記二抗與一抗結(jié)合，增強(qiáng)信號。-顯色：使用酶標(biāo)底物（如DAB）顯色，形成可見色斑。-復(fù)染：使用蘇木精復(fù)染背景，最后封片。-鏡檢：觀察色斑分布，判斷抗原表達(dá)情況。3.病理標(biāo)本取材的注意事項：-避免污染：取材時避免接觸其他組織或液體。-選擇典型部位：選擇腫瘤邊緣、中心和壞死區(qū)等典型部位取材。-取材量充足：確保取材量足夠進(jìn)行切片和染色。-標(biāo)記清晰：每個標(biāo)本應(yīng)標(biāo)記清晰，避免混淆。-快速固定：取材后應(yīng)立即放入固定液中，防止自溶。4.病理報告書寫的基本要求：-標(biāo)本信息：記錄患者姓名、性別、年齡、標(biāo)本號等基本信息。-肉眼觀察：描述標(biāo)本大小、顏色、形態(tài)等肉眼所見。-顯微鏡觀察：詳細(xì)描述組織學(xué)特征，包括細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)等。-診斷結(jié)論：根據(jù)觀察結(jié)果給出明確診斷。-免疫組化結(jié)果：記錄免疫組化染色結(jié)果，如抗原表達(dá)情況。-建議或鑒別診斷：根據(jù)診斷結(jié)果提出進(jìn)一步檢查或鑒別診斷建議。四、操作題答案與解析1.蘇木精染色操作步驟與注意事項：-步驟：1.切片脫蠟：依次使用不同濃度乙醇溶液脫蠟，去除石蠟。2.水化：使用蒸餾水將切片水化。3.蘇木精染色：將切片放入蘇木精染色液中，染色時間根據(jù)需要調(diào)整（通常10-20分鐘）。4.蒸餾水沖洗：使用蒸餾水沖洗掉多余蘇木精。5.鹽酸酒精分化：使用鹽酸酒精溶液分化，使染色均勻。6.蒸餾水沖洗：使用蒸餾水沖洗掉多余分化液。7.草酸酒精媒染：使用草酸酒精溶液媒染，增強(qiáng)染色效果。8.蒸餾水沖洗：使用蒸餾水沖洗掉多余媒染液。9.伊紅復(fù)染：將切片放入伊紅染色液中，染色時間根據(jù)需要調(diào)整（通常1-3分鐘）。10.蒸餾水沖洗：使用蒸餾水沖洗掉多余伊紅。11.脫水透明：依次使用不同濃度乙醇溶液脫水，最后使用二甲苯透明。12.封片：滴加樹膠封片，蓋上蓋玻片。-注意事項：-蘇木精染色時間不宜過長，否則染色過深。-鹽酸酒精分化時間不宜過長，否則染色過淺。-草酸酒精媒染時間不宜過長，否則染色過深。-封片時樹膠應(yīng)均勻，避免氣泡。2.免疫組化染色操作步驟與注意事項：-步驟：1.切片脫蠟：依次使用不同濃度乙醇溶液脫蠟，去除石蠟。2.水化：使用蒸餾水將切片水化。3.抗原修復(fù)：使用熱修復(fù)或酶修復(fù)方法，使抗原決定簇暴露。4.封閉：使用BSA或脫脂奶粉封閉非特異性結(jié)合位點。5.一抗孵育：將切片放入一抗溶液中，孵育1-2小時或過夜。6.洗滌：使用磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌切片，去除未結(jié)合一抗。7.二抗孵育：將切片放入二抗溶液中，孵育1小時。8.洗滌：使用PBS洗滌切片，去除未結(jié)合二抗。9.顯色：將切片放入酶標(biāo)底物溶液中，顯色10-20分鐘。10.蒸餾水沖洗：使用蒸餾水沖洗掉多余顯色液。11.復(fù)染：使用蘇木精復(fù)染背景。12.脫水