2025年高職化工生物技術(shù)（生化分離技術(shù)）實(shí)操測試卷

（考試時(shí)間：90分鐘滿分100分）班級(jí)______姓名______一、單項(xiàng)選擇題（總共10題，每題3分，每題只有一個(gè)正確答案，請將正確答案填寫在括號(hào)內(nèi)）1.以下哪種分離技術(shù)利用了物質(zhì)在兩相之間的分配系數(shù)差異進(jìn)行分離？（）A.離心分離B.萃取分離C.過濾分離D.離子交換分離2.在生化分離中，常用于蛋白質(zhì)沉淀的試劑是（）。A.乙醇B.氯化鈉C.氫氧化鈉D.鹽酸3.超濾分離的原理主要基于（）。A.分子大小B.電荷差異C.溶解度不同D.沸點(diǎn)差異4.離子交換樹脂的活性基團(tuán)不包括以下哪種類型？（）A.強(qiáng)酸性B.弱酸性C.中性D.強(qiáng)堿性5.以下關(guān)于親和色譜的說法，錯(cuò)誤的是（）。A.具有高度特異性B.利用生物分子間的親和力C.固定相為一般的樹脂D.可用于蛋白質(zhì)的分離6.凝膠過濾色譜中，最先被洗脫出來的是（）。A.大分子物質(zhì)B.小分子物質(zhì)C.中等分子物質(zhì)D.都有可能7.對于發(fā)酵液的預(yù)處理，常用的方法不包括（）。A.加熱B.調(diào)節(jié)pH值C.加入助濾劑D.離心8.在萃取操作中，影響分配系數(shù)的因素不包括（）。A.溫度B.溶質(zhì)濃度C.萃取劑種類D.攪拌速度9.以下哪種色譜技術(shù)可用于分離揮發(fā)性有機(jī)化合物？（）A.氣相色譜B.液相色譜C.離子色譜D.凝膠色譜10.蛋白質(zhì)等生物大分子的分離純化中，常用的檢測方法是（）。A.紫外可見分光光度法B.紅外光譜法C.核磁共振法D.質(zhì)譜法二、多項(xiàng)選擇題（總共5題，每題5分，每題有兩個(gè)或兩個(gè)以上正確答案，請將正確答案填寫在括號(hào)內(nèi)，多選、少選、錯(cuò)選均不得分）1.以下屬于生化分離技術(shù)的有（）。A超濾B.離子交換C.蒸餾D.親和色譜E.萃取2.影響離心分離效果的因素有（）。A.離心轉(zhuǎn)速B.離心時(shí)間C.樣品體積D.離心機(jī)類型E.離心管材質(zhì)3.離子交換分離中，常用的洗脫方法有（）。A.改變pH值B.改變離子強(qiáng)度C.升高溫度D.降低壓力E.加入有機(jī)溶劑4.凝膠過濾色譜的特點(diǎn)包括（）。A.分離依據(jù)是分子大小B.大分子先流出C.可用于蛋白質(zhì)分子量測定D.分辨率高E.操作簡單5.萃取分離中，選擇萃取劑的原則有（）。A.對溶質(zhì)有較大的溶解度B.與原溶劑互不相溶C.化學(xué)穩(wěn)定性好D.價(jià)格便宜E.毒性小三、判斷題（總共10題，每題2分，請判斷下列說法的正誤，正確的打“√”，錯(cuò)誤的打“×”）1.離心分離只能用于分離細(xì)胞和細(xì)胞碎片。（）2.蛋白質(zhì)在酸性條件下易沉淀。（）3.超濾膜的截留分子量越大，過濾效果越好。（）4.離子交換樹脂使用后需要再生。（）5.親和色譜的特異性非常高，所以應(yīng)用范圍很窄。（）6.凝膠過濾色譜中，小分子物質(zhì)在柱內(nèi)停留時(shí)間長。（）7.發(fā)酵液預(yù)處理的目的是提高分離效率。（）8.萃取過程中，分配系數(shù)越大，萃取效果越好。（）9.氣相色譜可用于分析熱不穩(wěn)定的化合物。（）10.蛋白質(zhì)純度檢測中，電泳法是常用的方法之一。（）四、簡答題（總共3題，每題10分，請簡要回答下列問題）1.簡述超濾分離的基本原理及操作要點(diǎn)。2.說明離子交換分離的過程及影響離子交換效果的因素。3.闡述親和色譜的原理，并舉例說明其在生化分離中的應(yīng)用。五、綜合分析題（總共1題，每題20分，請結(jié)合所學(xué)知識(shí)，分析解決以下實(shí)際問題）某發(fā)酵液中含有目標(biāo)蛋白質(zhì)A、雜質(zhì)蛋白質(zhì)B以及一些小分子雜質(zhì)。請?jiān)O(shè)計(jì)一套分離純化蛋白質(zhì)A的方案，并說明每一步操作的目的及原理。答案：一、單項(xiàng)選擇題1.B2.A3.A4.C5.C6.A7.D8.D9.A10.A二、多項(xiàng)選擇題1.ABDE2.ABCD3.AB4.ABCE5.ABCDE三、判斷題1.×2.√3.×4.√5.×6.×7.√8.√9.×10.√四、簡答題1.超濾分離原理：以壓力為推動(dòng)力，利用超濾膜的孔徑大小不同，截留大于膜孔徑的大分子物質(zhì)，使小分子物質(zhì)透過膜而實(shí)現(xiàn)分離。操作要點(diǎn)：選擇合適截留分子量的超濾膜；控制操作壓力和溫度；注意料液的預(yù)處理，防止膜污染；定期對膜進(jìn)行清洗。2.離子交換分離過程：離子交換樹脂與溶液中的離子發(fā)生交換反應(yīng)，使目標(biāo)離子與樹脂結(jié)合，然后用適當(dāng)?shù)南疵搫⒛繕?biāo)離子從樹脂上洗脫下來。影響因素：樹脂類型、離子濃度、離子強(qiáng)度、pH值、溫度等。3.親和色譜原理：利用生物分子間的特異性親和力，將一種生物分子固定在載體上作為配基，制成親和吸附劑，當(dāng)含有目標(biāo)分子的混合物通過親和柱時(shí)，目標(biāo)分子與配基特異性結(jié)合，其他雜質(zhì)則不被吸附而流出，然后用適當(dāng)?shù)姆椒▽⒛繕?biāo)分子從配基上洗脫下來。應(yīng)用：如從血清中分離免疫球蛋白等。五、綜合分析題方案：首先采用離心分離，去除發(fā)酵液中的細(xì)胞和細(xì)胞碎片。目的是初步分離出固形物雜質(zhì)，原理是利用離心力使固液分離。然后進(jìn)行超濾，截留蛋白質(zhì)A和雜質(zhì)蛋白質(zhì)B，去除小分子雜質(zhì)。目的是進(jìn)一步純化，原理是根據(jù)分子大小分離。接著