ICS11.220

CCSB41

DB63

青海省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB63/T1586—2022

代替DB63/T1586-2017

牦牛衣原體病防治技術(shù)規(guī)范

2022-08-24發(fā)布2022-09-20實(shí)施

青海省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB63/T1586—2022

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起

草。

本文件代替DB63/T1586-2017《牦牛衣原體病防治技術(shù)規(guī)范》，與DB63/T1586-2017相比，除結(jié)構(gòu)

調(diào)整和編輯性改動(dòng)外，主要技術(shù)變化如下：

——更改了陳述“范圍”所使用的表述形式（見(jiàn)第1章，2017版的第1章）；

——更改了相關(guān)的規(guī)范性引用文件（見(jiàn)第2章，2017版的第2章）；

——更改了牦牛衣原體病的定義（見(jiàn)3.1，2017版的3.1）；

——更改了種群分布、時(shí)間分布和地區(qū)分布的位置（見(jiàn)4.1.1、4.1.2、4.1.3，2017版的6.6）；

——更改了流行病學(xué)診斷的表述（見(jiàn)4.2，2017版的4.1）；

——更改了地區(qū)分布、流行病學(xué)特征、調(diào)入檢疫和消毒的表述形式，增加了引導(dǎo)語(yǔ)（見(jiàn)4.1.3、4.2、

6.1.2.2、6.4，2017版的6.6.3、4.1、7.3.3、7.1）；

——更改了臨床癥狀的表述形式（見(jiàn)4.3，2017版的4.2）；

——更改了懷孕牛流產(chǎn)的表述（見(jiàn)4.3.1，2017版的4.2.1）；

——更改了腸炎的表述（見(jiàn)4.3.4，2017版的4.2.4）；

——增加了qPCR診斷方法（見(jiàn)4.2.2.2）；

——更改了疫情處置和防治措施中的內(nèi)容（見(jiàn)第6章，2017版的第6章和第7章）；

——更改了藥物與方法的內(nèi)容（見(jiàn)6.2.2，2017年版7.4.2）；

——更改了免疫接種的表述形式（見(jiàn)6.1.3，2017年版7.5）；

——增加了其它措施（見(jiàn)6.3.4）；

——增加了檢測(cè)牦牛衣原體病qPCR方法的引物和探針序列（見(jiàn)表A.1）和qPCR反應(yīng)體系（見(jiàn)表B.1）。

本文件由青海省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。

本文件起草單位：青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心。

本文件主要起草人：孫生禎、胡廣衛(wèi)、蔡金山、趙全邦、闞威、游瀟倩、張曉英、周繼章、李兆才、

馬艷萍、魏夢(mèng)君、曾占豪、張茂華、才加、林元清、陳長(zhǎng)江、徐生瑞、丁玲、張璐、張先忠、辛富元、

炊文婷。

本文件的歷次版本發(fā)布情況為：

——DB63/T1586-2017。

本文件由青海省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳監(jiān)督實(shí)施。

I

DB63/T1586—2022

牦牛衣原體病防治技術(shù)規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了牦牛衣原體病的診斷、疫情報(bào)告、防治措施等技術(shù)內(nèi)容。

本文件適用于牦牛衣原體病防治。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

NY/T562-2015動(dòng)物衣原體病診斷技術(shù)

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

牦牛衣原體病

由流產(chǎn)嗜性衣原體（Chlamydiaabortus）感染牦牛引起的一種地方流行性的接觸性傳染病，以妊

娠母牛流產(chǎn)、早產(chǎn)、死產(chǎn)或產(chǎn)無(wú)活力犢牛為主要特征。

4診斷

4.1流行病學(xué)調(diào)查

4.1.1種群分布

統(tǒng)計(jì)并分析不同年齡段和不同性別牦牛的發(fā)病率和死亡率。

4.1.2時(shí)間分布

調(diào)查發(fā)病的季節(jié)性、周期性和波動(dòng)性等特點(diǎn)。

4.1.3地區(qū)分布

影響發(fā)病地區(qū)的因素包括自然因素和社會(huì)因素：

——自然因素包括發(fā)病地區(qū)的水源、氣候、地形、土壤、植被和媒介昆蟲(chóng)情況；

——社會(huì)因素包括飼養(yǎng)方式、管理制度、調(diào)運(yùn)情況、飼養(yǎng)人員的專業(yè)技術(shù)水平和獸醫(yī)制度等情

況。

1

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4.2流行病學(xué)特征

牦牛衣原體病的流行病學(xué)特征主要包括以下內(nèi)容：

——地方性流行，冬春季節(jié)多發(fā)；

——病牛和隱性帶菌牛是主要的傳染來(lái)源；

——患病懷孕牛流產(chǎn)或產(chǎn)犢時(shí)，大量衣原體會(huì)隨羊水排出到體外污染環(huán)境，通過(guò)消化道和呼吸道感

染其它健康牛；

——種公牛和母牛通過(guò)交配相互感染；

——一些蜱等媒介寄生蟲(chóng)和嚙齒動(dòng)物能長(zhǎng)期帶菌，并通過(guò)叮咬或其它途徑將病原傳播給健康牛；

——本病主要侵害頭胎母牛或從非疫區(qū)引進(jìn)的母牛，流產(chǎn)率高達(dá)25%～75%，可引起母牛子宮內(nèi)膜

炎和不育。

4.3臨床診斷

4.3.1懷孕牛流產(chǎn)

感染本病后，各個(gè)孕期的母牛均可發(fā)病，發(fā)病前母牛一般不表現(xiàn)任何特殊征兆，多數(shù)在懷孕中后期

突然發(fā)生流產(chǎn)，產(chǎn)出死胎或無(wú)活力的犢牛，有的胎衣排出遲緩，有的發(fā)生子宮內(nèi)膜炎、輸卵管炎、乳房

炎，產(chǎn)奶量低。

4.3.2公牛精囊炎綜合癥

患病公牛的精囊腺、副性腺和睪丸出現(xiàn)慢性炎癥，精液品質(zhì)下降。

4.3.3犢牛支氣管性肺炎

6月齡以內(nèi)的犢牛易感，在停喂母乳轉(zhuǎn)入育成牛欄喂養(yǎng)時(shí)易發(fā)病。病犢體溫達(dá)40℃～41℃,精神沉

郁，食欲下降或消退，短時(shí)腹瀉，咳嗽，流鼻涕，呼吸加快，肺部聽(tīng)診有鑼音。

4.3.4腸炎

5月～6月齡犢牛多發(fā)。病犢體溫升高到41℃～42℃，食欲不振，精神沉郁，心跳加快，出現(xiàn)持久性

腹瀉，糞便稀薄帶血，病犢嚴(yán)重消瘦，脫水。

4.3.5腦脊髓炎

病牛發(fā)燒，虛弱，共濟(jì)失調(diào)，有的并發(fā)肺炎、腹膜炎、心包炎等癥狀。

4.3.6結(jié)膜炎

病牛流淚，怕光，眼瞼腫脹，眼角有多量分泌物。有的眼瞼外翻、充血、潮紅，第二眼瞼高度腫脹

并遮蓋眼球。炎癥發(fā)展波及角膜，引起角膜炎和角膜混濁、潰瘍。

4.3.7關(guān)節(jié)炎

多見(jiàn)于犢牛。病牛行動(dòng)遲緩，臥地后驅(qū)趕不愿起立或起立困難。站立時(shí)以健肢負(fù)重，不愿走動(dòng)。急

性期體溫升高，關(guān)節(jié)腫脹，患病關(guān)節(jié)局部皮溫升高，患肢僵硬，觸摸敏感，跛行。

4.3.8乳房炎

乳房腫脹，產(chǎn)奶量大幅度下降。

2

DB63/T1586—2022

4.4實(shí)驗(yàn)室診斷

4.4.1血清學(xué)診斷

按NY/T562第5章的規(guī)定執(zhí)行。

4.4.2病原分子生物學(xué)診斷

4.4.2.1普通PCR診斷

按NY/T562第4章的規(guī)定執(zhí)行。

4.4.2.2qPCR診斷

試驗(yàn)所用的器材、方法、反應(yīng)體系、擴(kuò)增程序和結(jié)果判定如下：

——器材：PCR熒光擴(kuò)增儀、生物安全柜、高速低溫離心機(jī)、移液器、1.5mL離心管等；

——方法：衣原體全基因組的提取按NY/T562第4章的規(guī)定執(zhí)行；

——引物和探針見(jiàn)附錄A表A.1；

——qPCR反應(yīng)體系：見(jiàn)附錄B表B.1；

——PCR擴(kuò)增程序：95℃10min；95℃15s，60℃1min，45個(gè)循環(huán)；

——結(jié)果判定：當(dāng)陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品出現(xiàn)Ct值，且有特異擴(kuò)增曲線，陰性標(biāo)準(zhǔn)品無(wú)Ct值，且沒(méi)有特異擴(kuò)

增曲線，試驗(yàn)成立。被檢樣品Ct值<35且有特異擴(kuò)增曲線，則判定為衣原體病陽(yáng)性。

5疫情報(bào)告

5.1疫情發(fā)現(xiàn)

發(fā)現(xiàn)病例或者疑似病例的單位和個(gè)人，應(yīng)向當(dāng)?shù)孬F醫(yī)主管部門(mén)、動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督機(jī)構(gòu)、動(dòng)物疫病預(yù)防

控制機(jī)構(gòu)報(bào)告。

5.2逐級(jí)報(bào)告

接到動(dòng)物疫情報(bào)告的單位，逐級(jí)向上一級(jí)主管單位報(bào)告。

5.3疫情控制

在報(bào)告牦牛衣原體病的同時(shí)，將染疫、疑似染疫牦牛與其他牦牛隔離，對(duì)有關(guān)場(chǎng)所和用具進(jìn)行消毒，

不應(yīng)出售、轉(zhuǎn)移該場(chǎng)所牦牛，不應(yīng)拋棄死亡牦牛，防止疫情擴(kuò)散。報(bào)告疫情的同時(shí)，冷凍保存流產(chǎn)物等

病料，以便動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)進(jìn)行采樣和檢測(cè)診斷。

6防治措施

6.1預(yù)防

6.1.1監(jiān)測(cè)

6.1.1.1血清學(xué)監(jiān)測(cè)

每年的春季采集牦牛群中全部種公牛和10%母牛的血清，用間接血凝試驗(yàn)（IHA）或者補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)

（CF）進(jìn)行衣原體病檢測(cè)。

3

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6.1.1.2病原學(xué)監(jiān)測(cè)

采集流產(chǎn)胎兒或者胎盤(pán)，送至符合國(guó)家生物安全管理規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行診斷檢測(cè)。

6.1.2檢疫

6.1.2.1產(chǎn)地檢疫

牦牛調(diào)出前，應(yīng)當(dāng)提前3天向當(dāng)?shù)貏?dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督機(jī)構(gòu)申請(qǐng)并實(shí)施產(chǎn)地檢疫，種用牦牛應(yīng)當(dāng)提15天申

報(bào)檢疫，檢疫合格獲取檢疫證明，方可起運(yùn)。

6.1.2.2調(diào)入檢疫

調(diào)入的牦牛必須滿足以下條件。

——由異地調(diào)入的牦牛，必須來(lái)自非疫區(qū)，并事前報(bào)告當(dāng)?shù)孬F醫(yī)部門(mén)，登記注冊(cè)。

——牦牛調(diào)入后，應(yīng)隔離觀察45日以上，觀察結(jié)束前，應(yīng)再次進(jìn)行衣原體病血清學(xué)檢查，均為陰

性者，方準(zhǔn)許與當(dāng)?shù)亟】蹬Ｈ夯祓B(yǎng)。

——如果檢查有陽(yáng)性反應(yīng)的牦牛，應(yīng)隔離、淘汰，同群其余陰性牦牛再做2次復(fù)查，全部為陰性時(shí)，

可視為健康牦牛。

6.1.3免疫接種

按照疫苗使用說(shuō)明進(jìn)行常規(guī)免疫。發(fā)生疫情時(shí)，根據(jù)疫病區(qū)域流行情況對(duì)疫區(qū)內(nèi)疑似、染疫牦牛群

進(jìn)行緊急接種。對(duì)曾經(jīng)發(fā)病的牛場(chǎng)，每年除定期進(jìn)行血清學(xué)監(jiān)測(cè)外，還應(yīng)制定疫苗免疫計(jì)劃，定期進(jìn)行

疫苗免疫接種。對(duì)繁殖母牛，在每次配種前1個(gè)月或配種后1個(gè)月免疫1次，對(duì)再次發(fā)生流產(chǎn)或產(chǎn)弱犢的

母牛應(yīng)予以淘汰；種公牛每年免疫2次；淘汰發(fā)病種公牛。

6.2治療

6.2.1治療原則

早發(fā)現(xiàn)，早治療；聯(lián)合用藥，防止產(chǎn)生抗藥性；藥物治療與消毒、疫苗接種等措施相結(jié)合。

6.2.2藥物與方法

最常用的藥物是四環(huán)素和土霉素，在感染早期，連續(xù)5天以上投給大劑量的四環(huán)素，可使疫病得到

控制。對(duì)妊娠病牛，肌肉注射長(zhǎng)效土毒素，按20mg/kg，每天1次，持續(xù)2周，可減少暴發(fā)衣原體性流

產(chǎn)和胎兒死亡。也可用青霉素肌肉注射，每天1次—2次，連用3d。在精液中發(fā)現(xiàn)衣原體的種牛，應(yīng)做

淘汰。對(duì)流產(chǎn)母牛，尤其是出現(xiàn)子宮內(nèi)膜炎的病例除全身治療外，還應(yīng)向子宮內(nèi)投藥。

6.3其他措施

6.3.1易感牦牛飼養(yǎng)、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)等場(chǎng)所應(yīng)符合國(guó)家農(nóng)業(yè)部規(guī)定的動(dòng)物防疫條件并加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。

6.3.2各飼養(yǎng)場(chǎng)、屠宰廠（場(chǎng)）、交易市場(chǎng)、動(dòng)物防疫監(jiān)督檢查站等要建立并實(shí)施嚴(yán)格的檢疫制度，

避免購(gòu)入未檢疫牦牛，并加強(qiáng)種牦牛調(diào)運(yùn)檢疫管理。

6.3.3對(duì)確診感染了衣原體的種公牛和母牦牛予以淘汰，其所產(chǎn)犢牛不能作為種畜。

6.3.4在發(fā)病后的牛場(chǎng)，病牛的糞便、尿、乳汁及流產(chǎn)胎兒、胎衣和羊水等，進(jìn)行集中徹底的無(wú)害化

處理。

6.4消毒

4

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對(duì)相關(guān)場(chǎng)所、用具、物品等按照如下環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格消毒：

——圈舍、場(chǎng)地、車輛、道路、墻面、環(huán)境等，選用5％來(lái)蘇爾或2％燒堿溶液等有效消毒劑噴灑

消毒；

——金屬設(shè)施、飼養(yǎng)工具可在密閉環(huán)境中，用過(guò)氧乙酸熏蒸消毒；

——污染的飼料、飼草、墊料采取深埋發(fā)酵處理或焚燒處理；

——糞便、污水在發(fā)酵池密封發(fā)酵處理。

5

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AA

附錄A

（規(guī)范性）

檢測(cè)牦牛衣原體病qPCR方法的引物和探針序列

表A.1給出了檢測(cè)牦牛衣原體病qPCR方法的引物和探針序列。

表A.1檢測(cè)牦牛衣原體病qPCR方法的引物和探針序列

引物名稱引物序列

上游引物GCA-ACT-GAC-ACT-AAG-TCG-GCT-ACA

下游引物ACA-AGC-ATG-TTC-AAT-CGA-TAA-GAG-A

探針FAM-TAA-ATA-CCA-CGA-ATG-GCA-AGT-TGG-TTT-AGC-G-TAMRA

6

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BB

附錄B

（規(guī)范性）

qPCR反應(yīng)體系

表B.1給出了qPCR反應(yīng)體系。

表B.1qPCR反應(yīng)體系

組分1個(gè)檢測(cè)體系的加入量

SuperScriptⅢRT/PlatinumTaqMix0.5μL

2XReactionMix12.5μL

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