選修3考前回歸問(wèn)題導(dǎo)學(xué)

原創(chuàng)：

高中生物那點(diǎn)事兒

4天前

選修3《現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題》

專(zhuān)題1

基因工程

1．基因工程又叫？其原理是什么？用于育種時(shí)有何優(yōu)點(diǎn)？

2．不同生物的DNA能拼接的原因是什么？轉(zhuǎn)基因能在受體細(xì)胞中表達(dá)是因?yàn)槭裁矗?/p>

3．“分子手術(shù)刀”是指什么？簡(jiǎn)稱(chēng)？在基因工程中用于？該酶主要從哪獲得？作用部位是哪里？該酶識(shí)別的序列長(zhǎng)度是多少？切割的結(jié)果是什么？限制酶在選擇的時(shí)候有什么依據(jù)？為何通常用兩種限制酶同時(shí)切割目的基因和運(yùn)載體？

4．“分子縫合針”是指什么？作用是什么？可以分為哪兩類(lèi)？作用部位是哪里？作用有何特點(diǎn)？DNA聚合酶有何作用？

5．“分子運(yùn)輸車(chē)”是指什么？常用的運(yùn)載體有哪些？什么是質(zhì)粒？質(zhì)粒需具備什么條件才能充當(dāng)“分子運(yùn)輸車(chē)”？天然的質(zhì)粒能直接做運(yùn)載體嗎？

6．基因工程的基本操作程序主要包括哪四個(gè)步驟？核心步驟是哪一步？

7．什么是目的基因？試舉例。獲得方法有哪3種？

8．什么是基因文庫(kù)？什么是基因組文庫(kù)？什么是cDNA文庫(kù)？cDNA文庫(kù)與基因組文庫(kù)有什么區(qū)別？如何從基因文庫(kù)中獲取目的基因？（什么是基因庫(kù)？）

9．PCR的中文名稱(chēng)是什么？原理？應(yīng)用的前提？需要的條件有？PCR過(guò)程需要解旋酶嗎？模板鏈解旋所需能量是由ATP提供的嗎？PCR大致過(guò)程經(jīng)過(guò)哪3步？每一步的溫度要求一樣嗎？擴(kuò)增的結(jié)果是？PCR用于提取目的基因時(shí)，循環(huán)幾次能得到等長(zhǎng)的目的基因片段？循環(huán)n次可以得到等長(zhǎng)的目的基因片段多少個(gè)？PCR在選擇引物時(shí)有什么要求？循環(huán)n次，需要加入某種引物多少個(gè)？

10．什么樣的目的基因適合用化學(xué)方法合成？

11．一個(gè)完整的基因表達(dá)載體應(yīng)該包括哪些元件？分別有什么作用？畫(huà)出示意圖并標(biāo)注。（什么是起始密碼子？什么是終止密碼子？）

12．什么是轉(zhuǎn)化？轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞常用方法有哪些？分別適用于什么植物？有何優(yōu)缺點(diǎn)？

13．轉(zhuǎn)化動(dòng)物細(xì)胞一般用什么方法？通常選用什么細(xì)胞作為受體細(xì)胞？

14．轉(zhuǎn)化微生物細(xì)胞一般采用什么方法？選擇大腸桿菌作為受體細(xì)胞有何優(yōu)勢(shì)？如何使大腸桿菌處于感受態(tài)？

15．目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是什么？如何檢測(cè)？以什么作為探針？如何檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA？檢測(cè)目的基因是否翻譯成了蛋白質(zhì)用什么方法？

16．除了分子水平的檢測(cè)，有時(shí)還要進(jìn)行什么水平的檢測(cè)？例如？

17．植物基因工程有哪些應(yīng)用？試舉例說(shuō)明。

18．動(dòng)物基因工程有哪些應(yīng)用？試舉例說(shuō)明。

19．基因工程獲得的藥物有哪些？試舉例說(shuō)明。

20．什么是基因治療？要去除或改造缺陷基因嗎？該方法是治療什么疾病最有效的手段？一般有哪兩種方法？

21．蛋白質(zhì)工程崛起的緣由是什么？

22．蛋白質(zhì)工程的目標(biāo)是什么？基本途徑是？畫(huà)出流程圖。蛋白質(zhì)工程為何被稱(chēng)為第二代基因工程？有何應(yīng)用實(shí)例？

專(zhuān)題2細(xì)胞工程

1．什么是細(xì)胞工程？根據(jù)操作對(duì)象不同，可分為哪兩類(lèi)？

2．什么是脫分化？愈傷組織的細(xì)胞有什么特點(diǎn)？

3．植物組織培養(yǎng)的大致過(guò)程是什么？基本原理是什么？

4．什么是全能性？細(xì)胞為何具有全能性？是不是所有細(xì)胞都具有全能性？未離體的組織細(xì)胞不能表現(xiàn)全能性的原因是什么？

5．“胡蘿卜組織培養(yǎng)”要無(wú)菌操作的目的是什么？切取含有形成層部分的原因是什么？

6．植物組織培養(yǎng)的基本條件有哪些？

7．植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基一般含有哪些成分？對(duì)培養(yǎng)條件有何要求？一定要避光培養(yǎng)嗎？植物組織培養(yǎng)過(guò)程中需要換培養(yǎng)基嗎？生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例不同如何影響愈傷組織分化？

8．什么是植物體細(xì)胞雜交？基本原理是什么？屬于哪種變異類(lèi)型？有何優(yōu)點(diǎn)？實(shí)例？

9．什么是原生質(zhì)體？如何獲得？如何判斷原生質(zhì)體制備是否成功？誘導(dǎo)融合一般采用什么方法？誘導(dǎo)融合成功的標(biāo)志是？如何判斷雜種細(xì)胞是否再生細(xì)胞壁？（什么是原生質(zhì)層？）

10．微型繁殖采用的是什么技術(shù)？有哪些特點(diǎn)？

11．作物脫毒一般選用什么部分的細(xì)胞？原因是什么？（抗毒苗是用什么育種方法獲得的？）

12．人工種子的組成是什么？能用原生質(zhì)體或愈傷組織制作人工種子嗎？人工種皮一般含有哪些成分？人工種子有哪些優(yōu)點(diǎn)？

13．單倍體育種通常經(jīng)過(guò)哪2個(gè)關(guān)鍵步驟？其原理是什么？有何優(yōu)點(diǎn)？

14．突變體如何獲得的？如何加以利用？

15．細(xì)胞產(chǎn)物的獲得需要將外植體培養(yǎng)成植株嗎？實(shí)例？

16．什么是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)？基本原理是什么？

17．將成塊動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞的方法是什么？用胃蛋白酶來(lái)達(dá)到分散目的嗎？酶解的消化過(guò)程需要控制時(shí)間嗎？分散成單個(gè)細(xì)胞的目的是什么？

18．什么是細(xì)胞貼壁？對(duì)培養(yǎng)器具有何要求？

19．什么是接觸抑制？如何解除？癌細(xì)胞有接觸抑制嗎？為什么？

20．什么是原代培養(yǎng)？什么是傳代培養(yǎng)？細(xì)胞分裂一次就一代嗎？細(xì)胞傳至10-50代左右時(shí)可能會(huì)發(fā)生什么變化？

21．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)如何創(chuàng)設(shè)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境？對(duì)營(yíng)養(yǎng)有何特殊要求？對(duì)溫度和pH有何要求？對(duì)氣體環(huán)境有何要求？

22．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有何實(shí)際應(yīng)用？

23．什么是動(dòng)物核移植？有哪兩各類(lèi)型？哪種更容易？基本原理是什么？克隆動(dòng)物屬于無(wú)性還是有性繁殖？有何優(yōu)點(diǎn)？是對(duì)供體100%的復(fù)制嗎？

24．動(dòng)物體細(xì)胞核移植的大致過(guò)程是怎樣的？供體細(xì)胞一般選用傳代10代以?xún)?nèi)的原因是什么？選擇幼齡動(dòng)物的原因是什么？受體細(xì)胞一般選擇什么細(xì)胞？有何優(yōu)點(diǎn)？受體細(xì)胞去核的目的是什么？

25．體細(xì)胞核移植技術(shù)有哪些應(yīng)用？試舉例。還存在哪些問(wèn)題？

26．什么是動(dòng)物細(xì)胞融合？最常用的誘導(dǎo)劑是什么？基本原理是什么？大致過(guò)程是怎樣的？融合的動(dòng)物細(xì)胞能發(fā)育成完整個(gè)體嗎？

27．單克隆抗體制備過(guò)程中小鼠需作何處理？目的是什么？細(xì)胞兩兩融合的結(jié)果有幾種？?jī)纱魏Y選的目的分別是什么？獲得抗體的方法有哪兩種？

28．雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是什么?有何應(yīng)用？專(zhuān)題3胚胎工程

1．什么是胚胎工程？包括哪些常用技術(shù)？

2．哺乳動(dòng)物精子的發(fā)生場(chǎng)所是哪里？雄性動(dòng)物的生殖細(xì)胞的增殖時(shí)期是什么時(shí)候？精子的發(fā)生過(guò)程大體經(jīng)過(guò)哪3個(gè)階段？成熟精子的各部分是由什么分化而來(lái)？

3．卵子的發(fā)生場(chǎng)所是哪里？卵原細(xì)胞從何即開(kāi)始增殖?減數(shù)第一次分裂在什么時(shí)候完成的?減數(shù)第二次分裂是在什么時(shí)候完成的?兩次分裂是連續(xù)的嗎?判斷卵子是否受精的標(biāo)志是什么？為什么一般只看到兩個(gè)極體？

4．一個(gè)卵泡中能形成幾個(gè)成熟的卵子?排卵是指卵子從卵泡中排出,還是指卵泡從卵巢中排出?剛排出的卵是成熟的卵子嗎?它在母體的什么部位與精子受精?

5．什么是受精作用?包括哪兩個(gè)階段?場(chǎng)所是哪里?

6．受精前精子要作何準(zhǔn)備?卵子要做何準(zhǔn)備?畫(huà)出一個(gè)具備受精能力的卵母細(xì)胞示意圖。

7．防止多精入卵的兩道屏障分別是什么？受精作用的實(shí)質(zhì)是什么?完成的標(biāo)志是什么?

8．受精卵的分裂方式是什么？什么是卵裂期？其特點(diǎn)是什么？什么是桑椹胚？桑椹胚的細(xì)胞屬于什么細(xì)胞？胚胎細(xì)胞在什么時(shí)期開(kāi)始分化？構(gòu)成囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層細(xì)胞分別會(huì)發(fā)育成什么？什么是孵化？原腸胚已經(jīng)有了什么分化？細(xì)胞分化在什么時(shí)期達(dá)到最大限度？

1．試管牛是有性生殖還是無(wú)性生殖？克隆動(dòng)物呢？

2．卵母細(xì)胞的采集哪3種方法？采集的卵母細(xì)胞能直接與獲能的精子受精嗎？

3．精子的采集方法有哪3種？采集的精子需作何處理？有哪兩種方法？分別適用于什么動(dòng)物？

4．體外受精需要在什么溶液中進(jìn)行？大致過(guò)程是怎樣的？

5．哺乳動(dòng)物胚胎的培養(yǎng)液一般含有什么成分？（六菜一湯）

1．什么是胚胎移植？可供移植的胚胎有哪些來(lái)源？該過(guò)程誰(shuí)是供體？誰(shuí)是受體？胚胎移植實(shí)際上是個(gè)什么過(guò)程？其實(shí)質(zhì)是什么？胚胎工程的最后一道“工序”是？

2．胚胎移植的優(yōu)勢(shì)是什么？生理學(xué)基礎(chǔ)包括哪4個(gè)方面內(nèi)容？

3．牛胚胎移植過(guò)程對(duì)供體和受體分別有何要求？需要對(duì)供體和受體作何處理？該過(guò)程用到的激素是什么？為了獲得更多的早期胚胎還需要對(duì)供體作何處理？用到的激素是什么？什么是沖卵？胚胎的保存需要什么條件？

4．什么是胚胎分割？胚胎分割技術(shù)屬于無(wú)性繁殖還是有性繁殖？什么樣的胚胎適合進(jìn)行胚胎分割？囊胚階段的胚胎要進(jìn)行分割要特別注意什么？鑒定性別取哪部分的細(xì)胞？滋養(yǎng)層也需要均等分割嗎？

5．胚胎干細(xì)胞的來(lái)源有哪些？胚胎干細(xì)胞在形態(tài)和功能上分別有何特性？有何應(yīng)用？

6．一般胚胎發(fā)育到什么程度可供移植？人的胚胎一般在哪個(gè)發(fā)育階段移植？

專(zhuān)題4生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題

1．面對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利和弊，我們的正確做法是什么？

2．對(duì)待克隆人，我國(guó)政府的態(tài)度是什么？什么是設(shè)計(jì)試管嬰兒？

3．我國(guó)政府對(duì)待生物武器的態(tài)度是什么？

專(zhuān)題5生態(tài)工程

1．生態(tài)工程的目的是什么？生態(tài)工程的優(yōu)點(diǎn)是什么？

2．生態(tài)工程所遵循的基本原理有哪些？試舉例說(shuō)明?！舅母缢讲亍窟x修3問(wèn)題導(dǎo)學(xué)答案版

原創(chuàng)：

秦四哥

高中生物那點(diǎn)事兒

今天

選修3《現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題》

專(zhuān)題1

基因工程

1.1DNA重組技術(shù)的基本工具

1.基因工程又叫DNA重組技術(shù)，原理是基因重組。優(yōu)點(diǎn)是可以打破物種界限，定向改造生物的性狀。

2.不同生物的DNA能拼接的原因是DNA都是雙螺旋結(jié)構(gòu)、都由四種脫氧核苷酸組成。轉(zhuǎn)基因能在受體細(xì)胞中表達(dá)是因?yàn)榈厍蛏系乃猩飵缀豕灿猛惶走z傳密碼子。

3.“分子手術(shù)刀”是指限制性核酸內(nèi)切酶，簡(jiǎn)稱(chēng)限制酶。在基因工程中用于切割目的基因和運(yùn)載體。該酶主要從原核生物中獲得。作用部位是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。該酶識(shí)別的序列長(zhǎng)度是4、5、6、8個(gè)核苷酸，切割的結(jié)果是產(chǎn)生平末端或黏性末端。

4.

“分子縫合針”是指DNA連接酶，作用是連接雙鏈DNA片段?？梢苑譃镋·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶兩類(lèi)，前者只能連接黏性末端，后者能連接黏性末端和平末端。作用部位是磷酸二酯鍵。DNA聚合酶的作用是將脫氧核苷酸聚合成DNA長(zhǎng)鏈。

5.

“分子運(yùn)輸車(chē)”是指運(yùn)載體，常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等。質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外的，并具有自我復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。作為載體的質(zhì)粒應(yīng)該具備的條件：①能在受體細(xì)胞中自我復(fù)制，穩(wěn)定保存；②有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)，便于插入目的基因；③具有某些標(biāo)記基因，便于篩選；④必須是安全的，不會(huì)對(duì)受體細(xì)胞有害。

1.2基因工程的基本操作程序

1.基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟：①獲取目的基因；②構(gòu)建表達(dá)載體（核心）；③導(dǎo)入受體細(xì)胞；④目的基因檢測(cè)與鑒定。

2.目的基因主要是編碼蛋白質(zhì)的基因，如，與生物抗逆性相關(guān)的基因、與優(yōu)良品質(zhì)相關(guān)的基因。獲得方法有：①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲取目的基因；②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因；③用化學(xué)方法直接人工合成。

3.將含有某種生物不同基因的許多DNA片段，導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因，稱(chēng)為基因文庫(kù)。若包含了一種生物的所有基因，這種基因文庫(kù)叫做基因組文庫(kù)；若只包含了一種生物的一部分基因，這種基因文庫(kù)叫做部分基因文庫(kù)，如cDNA文庫(kù)?？梢愿鶕?jù)目的基因的有關(guān)信息，如基因的核苷酸序列、基因的功能等特性從基因文庫(kù)中獲取目的基因。（基因庫(kù)是一個(gè)種群中所有個(gè)體所含有的全部基因）。

4.

PCR的中文名稱(chēng)是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，原理是DNA復(fù)制。應(yīng)用的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。需要的條件：熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）、模板、4種脫氧核苷酸、2種引物。大致過(guò)程經(jīng)過(guò)變性→復(fù)性→延伸3個(gè)步驟。擴(kuò)增的結(jié)果是目的基因呈指數(shù)形式擴(kuò)增（約為2n，其中n為擴(kuò)增循環(huán)次數(shù)）。

5.基因比較小，核苷酸序列已知，可以通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成。

6.一個(gè)完整的基因表達(dá)載體應(yīng)該包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因。啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。終止子也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停下來(lái)。標(biāo)記基因的作用是便于重組載體的鑒定和選擇。（起始密碼子是指mRNA上的3個(gè)堿基，作為翻譯的起點(diǎn)；終止密碼子是翻譯的終點(diǎn)）

7.目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)客中，稱(chēng)為轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞常用的方法：①農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：適用于雙子葉植物、裸子植物和少數(shù)單子葉植物，比較經(jīng)濟(jì)有效。②基因槍法：適用于單子葉植物，但成本較高。③花粉管通道法：適用于被子植物，比較簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)。

8.轉(zhuǎn)化動(dòng)物細(xì)胞一般用顯微注射法，常用受精卵作為受體細(xì)胞。

9.轉(zhuǎn)化微生物細(xì)胞一般受用感受態(tài)法：用Ca2+（一般用CaCl2溶液）處理微生物，使細(xì)胞處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中的DNA分子的生理狀態(tài)。選用大腸桿菌作為受體是因?yàn)槠浞敝晨?、為單?xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少。

10.目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因。檢測(cè)方法是DNA分子雜交，通常選用單鏈的DNA作為探針。檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA的方法是DNA-RNA分子雜交。檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)的方法是抗原-抗體雜交。

11.除了分子水平的檢測(cè)，有時(shí)還要進(jìn)行個(gè)體水平的檢測(cè)，例如，轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉還需要做抗蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)。

1.3基因工程的應(yīng)用

1.植物基因工程的應(yīng)用實(shí)例有：①抗蟲(chóng)；②抗??；③抗逆；④改良品質(zhì)。

2.動(dòng)物基因工程的應(yīng)用實(shí)例有：①提高生長(zhǎng)速度；②改良品質(zhì)；③生產(chǎn)藥物；④作器官供體。

3.基因工程獲得的藥物有：胰島素、白細(xì)胞介素、干擾素、乙肝疫苗等。（干擾素是白細(xì)胞產(chǎn)生的一種糖蛋白）。

4.基因治療是把正常人的基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療疾病的目的，這是治療遺傳病的最有效的手段。分為兩類(lèi)：①體外基因治療：在體外完成轉(zhuǎn)基因再輸入患者體內(nèi)；②體內(nèi)基因治療：直接向人體組織細(xì)胞中轉(zhuǎn)移基因。

1.4蛋白質(zhì)工程的崛起

1.蛋白質(zhì)工程崛起的緣由是：基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)，這些天然蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能符合特定物種生存的需要，卻不一定完全符合人類(lèi)生產(chǎn)和生活的需要。

2.蛋白質(zhì)工程的目標(biāo)是根據(jù)人們對(duì)蛋白質(zhì)功能的特定需求，對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)。它的基因途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）。蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿(mǎn)足人類(lèi)生產(chǎn)和生活的需求。蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來(lái)的第二代基因工程。應(yīng)用實(shí)例：速效型胰島素、蛋白質(zhì)電子原件等。專(zhuān)題2細(xì)胞工程

2.1植物細(xì)胞工程

1.細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法，通過(guò)細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上的操作，按照人的意愿改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門(mén)綜合科學(xué)技術(shù)。根據(jù)操作對(duì)象不同，可以分為植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞工程。

2.脫分化是已經(jīng)分化的細(xì)胞失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過(guò)程。愈傷組織細(xì)胞特點(diǎn)：細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則，高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。

3.植物組織培養(yǎng)就是在無(wú)菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。大致過(guò)程：外植體經(jīng)脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體或叢芽，再經(jīng)生長(zhǎng)成為完整植株?；驹硎侵参锛?xì)胞的全能性。

4.細(xì)胞的全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。理論上具有某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞都具有全能性。未離體的組織細(xì)胞不能表現(xiàn)全能性的原因是基因進(jìn)行了選擇性表達(dá)。

5.

“胡蘿卜組織培養(yǎng)”要無(wú)菌操作的目的是防止雜菌與培養(yǎng)物爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)，雜菌產(chǎn)生的有害物質(zhì)會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)物死亡。切取胡蘿卜塊時(shí)強(qiáng)調(diào)要切取含有形成層部分，原因是這部分容易誘導(dǎo)形成愈傷組織。

6.植物組織培養(yǎng)的基本條件有離體、無(wú)菌、一定的營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH、光照等。

7.植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基一般含有無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分、激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）、瓊脂四部分。還要注意控制好溫度、pH、光照（誘導(dǎo)愈傷組織一般要避光）等。

8.植物體細(xì)胞雜交就是將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)?；驹硎羌?xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。屬于染色體（數(shù)目）變異。優(yōu)點(diǎn)是可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。實(shí)例有白菜-甘藍(lán)、胡蘿卜-羊角芹等。

9.原生質(zhì)體是指去掉細(xì)胞壁的植物細(xì)胞。獲得方法是用纖維素酶和果膠酶處理。去壁時(shí)應(yīng)該在等滲或高滲溶液中進(jìn)行，防止原生質(zhì)體吸水漲破。誘導(dǎo)融合的方法一般有兩類(lèi)：①物理方法：離心、振動(dòng)、電擊等；②化學(xué)方法：用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑。誘導(dǎo)成功的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生細(xì)胞壁（可通過(guò)觀察雜種細(xì)胞是否會(huì)吸水漲破來(lái)判斷成功與否）。

10.微型繁殖采用的是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，優(yōu)點(diǎn)有高效性、可以保持親本的優(yōu)良特性。

11.作物脫毒一般選用植物的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，原因是該部分可能不帶病毒。（抗毒苗是通過(guò)基因工程獲得的）。

12.人工種子是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子。人工種皮一般含有適量養(yǎng)分、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)碳源、農(nóng)藥、抗生素、有益菌、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等。人工種子的優(yōu)點(diǎn)有①可以完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性；②不受季節(jié)、氣候和地域限制；③可以方便地貯藏和運(yùn)輸。

13.單倍體育種的2個(gè)關(guān)鍵步驟：①花藥離體培養(yǎng)（獲得單倍體）；②人工誘導(dǎo)染色體加倍（使單倍體可育）。其原理是染色體（數(shù)目）變異。優(yōu)點(diǎn)是可以明顯縮短育種年限（一般得到是純合體）。

14.在作物育種中，可以對(duì)植物的愈傷組織進(jìn)行化學(xué)或物理的誘變處理，促使其發(fā)生突變，再通過(guò)分化形成植物，從這些植物中篩選出高抗、高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的突變體，就可以培育成新品種。

15.細(xì)胞產(chǎn)物的獲得一般需要將外植體培養(yǎng)到愈傷組織階段即可，不需要培養(yǎng)成植株。實(shí)例有人參皂甙、紫草素等。

2.2動(dòng)物細(xì)胞工程

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是從動(dòng)物機(jī)體取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖?；驹硎羌?xì)胞增殖。

2.將成塊動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞的方法是用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。目的是解除細(xì)胞間的接觸抑制，還有利于細(xì)胞從培養(yǎng)液中獲得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

3.懸液中分散的細(xì)胞很快會(huì)貼附在瓶壁上，稱(chēng)為細(xì)胞貼壁。這要求培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無(wú)毒，易于貼附。

4.當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞的接觸抑制。解除方法是用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。癌細(xì)胞沒(méi)有接觸抑制，是由癌細(xì)胞表面糖蛋白減少所致。

5.人們通常將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱(chēng)為原代培養(yǎng)，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)稱(chēng)為傳代培養(yǎng)。一般來(lái)說(shuō)，細(xì)胞在傳到10~50代左右時(shí)，增殖會(huì)逐漸緩慢，以至于完全停止，部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化。目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以?xún)?nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。

6.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理、培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素、定期更換培養(yǎng)液。②營(yíng)養(yǎng)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，特別要加入血清、血漿等一些天然成分。③溫度和pH：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜，pH為7.2~7.4。④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2（CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH）。

7.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用實(shí)例：①獲得生物制品：如病毒疫苗、干擾素等；②檢測(cè)有毒物質(zhì)；③用于生理、病理、藥理研究。

8.動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植兩種類(lèi)型。由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程序低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易。基本原理是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。克隆動(dòng)物屬于無(wú)性繁殖，優(yōu)點(diǎn)是可以保持供體親本的優(yōu)良特性?？寺?dòng)物并不是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物100%的復(fù)制，因?yàn)楹送膺€有少量DNA，另外，后代個(gè)體的表現(xiàn)還受環(huán)境影響。

9.動(dòng)物體細(xì)胞核移植：供體細(xì)胞一般選用傳代10代以?xún)?nèi)的，是因?yàn)?0代以?xún)?nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型。一般選擇幼齡動(dòng)物的、分化程度低的組織細(xì)胞作為供體更易于培養(yǎng)。受體細(xì)胞一般選擇MII期的卵母細(xì)胞（因?yàn)镸II期卵母細(xì)胞核的位置靠近第一極體，用微型吸管可一并吸出細(xì)胞核與第一極體；卵母細(xì)胞中含有核全能性表達(dá)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)）。

10.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用實(shí)例：加速家畜遺傳改良進(jìn)程、保護(hù)瀕危物種、作為生物反應(yīng)器、作為器官移植供體等。存在的問(wèn)題有：成功率仍然比較低，克隆動(dòng)物還存在健康問(wèn)題。

11.動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng)細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程?；驹硎羌?xì)胞膜的流動(dòng)性。優(yōu)點(diǎn)是突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。誘導(dǎo)融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒、電激等。

12.單克隆抗體制備過(guò)程中小鼠需作免疫處理，目的是讓其體內(nèi)形成相應(yīng)的效應(yīng)B細(xì)胞。細(xì)胞兩兩融合的結(jié)果有3種：B-B、瘤-瘤、雜交瘤。需要兩次篩選：第一次篩選是為了獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選是為了獲得能產(chǎn)生單一性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

13.雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能產(chǎn)生抗體又能無(wú)限增殖。單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可能大量制備。具體應(yīng)用有：①作為診斷試劑：如“早早孕診斷試劑盒”，具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。②用于治療疾病和運(yùn)載藥物：如“生物導(dǎo)彈”，借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用。專(zhuān)題3胚胎工程

3.1體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育

1.胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)，如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。

2.哺乳動(dòng)物精子的發(fā)生場(chǎng)所是睪丸，雄性動(dòng)物生殖細(xì)胞的增殖時(shí)期是從初情期（相當(dāng)于人的青春期）開(kāi)始直到生殖機(jī)能衰退。精子的發(fā)生過(guò)程大體經(jīng)過(guò)3個(gè)階段：①第一階段：精原細(xì)胞經(jīng)過(guò)數(shù)次有絲分裂，產(chǎn)生大量的精原細(xì)胞，部分形成初級(jí)精母細(xì)胞；②第二階段：初級(jí)精母細(xì)胞連續(xù)進(jìn)行兩次細(xì)胞分裂形成精細(xì)胞；③第三階段：精細(xì)胞變形成為精子。細(xì)胞核變?yōu)榫宇^的主要部分，高爾基體發(fā)育為頭部的頂體，中心體演變?yōu)榫拥奈?，線(xiàn)粒體聚集在尾的基部形成線(xiàn)粒體鞘，細(xì)胞內(nèi)的其他物質(zhì)濃縮為球狀叫做原生質(zhì)滴。

3.卵子的發(fā)生是在雌性動(dòng)物的卵巢內(nèi)完成的。卵原細(xì)胞從動(dòng)物的胚胎性別分化以后（胎兒期），即開(kāi)始通過(guò)有絲分裂增殖。減數(shù)第一次分裂是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的，減數(shù)第二次分裂是在精子和卵子結(jié)合的過(guò)程中完成的。兩次分裂是不連續(xù)的。

4.一個(gè)卵泡中能形成一個(gè)成熟的卵子。排卵是指卵子從卵泡中排出。剛排出的卵不是成熟的卵子，它在母體的輸卵管內(nèi)與精子受精。

5.受精是精子與卵子結(jié)合形成合子（即受精卵）的過(guò)程，它包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段。自然條件下，受精是在雌性輸卵管內(nèi)完成的。

6.受精前精子要獲能，卵子要達(dá)到減數(shù)第二次分裂的中期。

7.防止多精入卵的兩道屏障：①透明帶反應(yīng)：在精子觸及卵黃膜的瞬間，會(huì)產(chǎn)生阻止后來(lái)的精子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)；②卵細(xì)胞膜反應(yīng)：精子入卵后，卵細(xì)胞膜會(huì)立即發(fā)生一種生理反應(yīng)，拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)。受精作用的實(shí)質(zhì)是精子的核與卵細(xì)胞的核相融合的過(guò)程。完成的標(biāo)志是在卵黃膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個(gè)極體（第一極體一般不再繼續(xù)分裂）。

8.受精卵的分裂方式是有絲分裂。胚胎發(fā)育的早期有一段時(shí)間是在透明帶內(nèi)進(jìn)行的，稱(chēng)為卵裂期。其特點(diǎn)是：細(xì)胞分裂方式為有絲分裂，細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，但胚胎的總體積并不增加，或略有縮小。當(dāng)胚胎細(xì)胞數(shù)目達(dá)到32個(gè)左右時(shí)，形似桑椹，叫做桑椹胚，這一階段前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細(xì)胞。胚胎細(xì)胞在囊胚期開(kāi)始出現(xiàn)分化。構(gòu)成囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織，滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤(pán)。囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大，會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎從其中伸展出來(lái)，這一過(guò)程叫做孵化。原腸胚已經(jīng)有了胚層的分化，此時(shí)期細(xì)胞分化達(dá)到最大限度。

3.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng)

1.試管牛是有性生殖，克隆動(dòng)物屬于無(wú)性繁殖。

2.卵母細(xì)胞采集的3種方法：①?gòu)妮斅压苤袥_取卵子；②從屠宰母畜的卵巢中采集；③直接從活體動(dòng)物卵巢中吸取。只有從輸卵管中采集的卵母細(xì)胞能直接與獲能的精子受精。

3.精子采集的3種方法：①假陰道法；②手握法；③電刺激法。采集的精子需進(jìn)行獲能處理，兩種方法：①培養(yǎng)法：對(duì)于嚙齒動(dòng)物、家兔和豬等，用人工配制的獲能液中；②化學(xué)誘導(dǎo)法：對(duì)于牛、羊等，用一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中。

4.體外受精需要在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿伞?/p>

5.哺乳動(dòng)物胚胎的培養(yǎng)液一般含有無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等（六菜一湯）。不同動(dòng)物胚胎移植的時(shí)間不同：人的體外受精胚胎可在8~16個(gè)細(xì)胞階段移植，牛、羊一般要培養(yǎng)到桑椹胚階段或囊胚階段才進(jìn)行移植，小鼠和家兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可在更早的階段移植。

3.3胚胎工程的應(yīng)用及前景

1.胚胎移植是指將雌性動(dòng)物體內(nèi)的早期胚胎，或者通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。提供胚胎的個(gè)體稱(chēng)為供體（包括提供卵細(xì)胞的雌性個(gè)體和提供精子的雄性個(gè)體），接受胚胎的個(gè)體叫受體。胚胎移植實(shí)際上是生產(chǎn)胚胎的供