ICS11.220

B41

DB1303

秦皇島市地方標準

DB1303/T286—2020

豬傳染性胸膜肺炎防治技術(shù)規(guī)程

2020-11-25發(fā)布2020-11-28實施

秦皇島市市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB1303/T286—2020

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由河北科技師范學院提出。

本文件由秦皇島市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局歸口。

本文件起草單位：河北科技師范學院。

本文件主要起草人：芮萍、張珍珍，關(guān)景林，宋濤、葉云鵬、嚴世杰、焦桂華、馬增軍、劉謝榮。

I

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豬傳染性胸膜肺炎防治技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了豬傳染性胸膜肺炎的術(shù)語和定義、診斷和防治措施。

本文件適用于秦皇島地區(qū)生豬飼養(yǎng)場（戶）和動物診療單位對豬傳染性胸膜肺炎的診斷和防治。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T17824.2規(guī)模豬場生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

NY/T537豬放線桿菌胸膜肺炎診斷技術(shù)

NY5030無公害食品生豬飼養(yǎng)獸藥使用準則

NY5031無公害食品生豬飼養(yǎng)獸醫(yī)防疫準則

SN/T1447豬傳染性胸膜肺炎檢疫技術(shù)規(guī)范

《中華人民共和國獸藥典》

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4診斷

4.1病原

胸膜肺炎放線桿菌為巴氏桿菌科放線桿菌屬，革蘭氏陰性小球桿菌，有莢膜和鞭毛。根據(jù)莢膜多糖

和LPS的抗原性差異，目前將APP分為15個血清型，其中血清1型和5型又分為1a、1b及5a、5b兩個亞型。

根據(jù)對輔酶Ⅰ（NAD）的依賴性，又分為生物Ⅰ型和Ⅱ型，Ⅰ型依賴NAD，包括1～12及15型，Ⅱ型不依

賴NAD，包括13、14型。其中血清1、5、9和11型的毒力最強，3和6型毒力低。

流行特點

4.1.1發(fā)病日齡

各種年齡豬均易感，其中6周齡至6月齡的豬較多發(fā)，但以3月齡仔豬最為易感。

4.1.2發(fā)病季節(jié)

一年四季均可發(fā)生，但夏末秋初或冬末春初時較易發(fā)生。

4.1.3傳染源

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病豬和亞臨床感染帶菌豬。

4.1.4傳播途徑

傳播途徑主要包括：

——直接接觸或短距離的飛沫傳播；

——遠距離可通過污染的工具和飼養(yǎng)人員的衣服、靴子以及漂浮于空氣中的氣溶膠傳播；

——小嚙齒類動物和鳥也可能傳播此病；

——引種使不同豬群間傳播；

——飼養(yǎng)環(huán)境突然改變、豬群的轉(zhuǎn)移或混群、擁擠或長途運輸、通風不良、濕度過高、氣溫驟變等

應激因素，均可引起本病發(fā)生或加速疾病傳播。

4.2臨床癥狀

4.2.1最急性型主要表現(xiàn)為：

——發(fā)病突然，體溫高達41.5℃，精神沉郁；

——呼吸困難，血液循環(huán)衰竭，在鼻、耳、腿和軀體末稍表現(xiàn)發(fā)紺，很快死亡；

——有的病例看不到任何臨床癥狀，突然死亡，通常于口腔和鼻孔流出大量的血色分泌物。

4.2.2急性型主要表現(xiàn)為：

——呼吸髙度困難，張口呼吸，嚴重腹式呼吸，呈犬坐姿勢，體溫可達40.5～41℃，表現(xiàn)精神沉

郁，拒食；

——死亡前鼻孔流出大量帶血泡沫狀液體。

4.2.3慢性型主要表現(xiàn)為：

——在急性癥狀消失之后，往往轉(zhuǎn)成亞急性或慢性型。此期很少有發(fā)熱或者不發(fā)熱；

——見咳嗽、喘氣，運動時更加明顯，生長不良。

4.2.4其他表現(xiàn)為：

——流產(chǎn)，尤以SPF豬群多見；

——胸膜肺炎放線桿菌3型菌株感染多為慢性型經(jīng)過，且并發(fā)關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎及不同部位的膿腫。

4.3病理剖檢特征

4.3.1本病的病變僅出現(xiàn)在胸腔的組織器官。肺炎病變大多為雙側(cè)性、局灶性，病變在膈葉為主，往往

涉及心葉和間葉，病變部與健部界限清楚。

4.3.2最急性型病理剖檢特征為：

——以泛發(fā)性纖維素性出血性胸膜肺炎病變?yōu)橹饕卣鳎?/p>

——有敗血癥變化，肺臟嚴重充血、出血，呈暗紅色，膨大；

——肺病變組織脆弱易碎，往往切面不整，流出大量血色液體，胸腔中有大量的血色液體。

4.3.3急性型病理剖檢特征為：

——肺臟嚴重出血，呈暗紅色，腫脹實變，肺臟切面迅速滲出血液；

——氣管和支氣管充滿泡沫樣血色黏液分泌物，胸腔中有血色液體。

4.3.4慢性型病理剖檢特征為：

——最常見在膈葉上有大小不等的壞死結(jié)節(jié)，周圍包有結(jié)締組織形成的厚包囊，壞死結(jié)節(jié)有的在肺

內(nèi)部，有的突出于肺表面；

——剖檢見嚴重的心包炎，心內(nèi)膜有出血點。肺臟表面覆蓋纖維素性滲出物，或者與胸壁粘連，或

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者肺臟表面和實質(zhì)有膿性病灶。

4.4病原學診斷

4.4.1病料采集

病料采集方式如下：

a)活體病料采集：用棉拭子伸入鼻腔采集分泌物，放入無菌試管中立即送回實驗室；

b)死后病料采集：無菌采集具有典型病變的肺組織、胸水、鼻及氣管滲出物，立即接種培養(yǎng)基或

送回實驗室；

c)樣品運送：采集的樣品，應在4℃條件下，24h內(nèi)送回實驗室。

4.4.2涂片鏡檢

涂片作常規(guī)革蘭氏染色鏡檢，APP為革蘭氏染色陰性，兩極著染略深的小球桿菌或纖細桿菌。繼代

培養(yǎng)中呈明顯多形態(tài)，幼齡培養(yǎng)物中偶有成絲狀。

4.4.3細菌分離培養(yǎng)

無菌將病料接種到TSA++培養(yǎng)基，置于5%CO2環(huán)境37℃培養(yǎng)18～24h（燭缸培養(yǎng)亦可），觀察細菌

的生長情況。分離菌在TSA++培養(yǎng)基平板上長出圓形、表面光滑、灰白色半透明的水珠樣菌落。

4.4.4CAMP（第一次出現(xiàn)，應寫全程，或者是在縮略語中表明）試驗

用金黃色葡萄球菌在7%鮮血瓊脂平板中央劃一條直的接種線，然后在線的兩側(cè)距離3mm～5mm處垂

直劃線接種每個待檢培養(yǎng)物，37℃培養(yǎng)18h～24h，兩種細菌交界處形成箭頭狀的溶血區(qū)為CAMP試驗陽

性。

4.5血清學診斷

4.5.1ELISA試驗

用針對ApxIV毒素建立的ELISA鑒別診斷試劑盒，具體試驗方法按試劑盒說明書操作。

4.5.2改良補體結(jié)合試驗

操作程序參照NY/T537-2002進行。

4.6PCR診斷

4.6.1引物

參考BosséJT等設(shè)計的APPApxIV通用檢測引物，上游引物5＇-TTATCCGAACTTTGGTTTAGCC-3＇，

下游引物5＇-CATATTTGATAAAACCATCCGTC-3＇。擴增目的片段長度為418bp。

4.6.2模板制備

挑取APP單菌落于20μL滅菌生理鹽水中，在旋窩震蕩儀上輕徑混勻后作為PCR反應模板。

4.6.3PCR擴增體系

反應總體積為15μL，其中2×TaqmasterMix7.5μL，10μmol/L上、下游引物各1μL，DNA模板

2.0μL，滅菌雙蒸水3.5μL。

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4.6.4PCR反應程序

95℃5min，95℃30s，55℃30s，72℃45s，30個循環(huán)，72℃5min。取6μLPCR擴增產(chǎn)物，

置于1%瓊脂糖凝膠中80V電泳25min檢測。

5防治

5.1加強生物安全措施

堅持自繁自養(yǎng)、全進全出及“兩點式”或“三點式”飼養(yǎng)方式，如需引進公豬或后備母豬時，應進

行血清學檢測，避免引進陽性種豬，做好引種及豬群轉(zhuǎn)出隔離。嚴格控制場內(nèi)外人員出入；車輛應專車

專用，徹底消毒；豬舍及環(huán)境應定期消毒，每次消毒要全面、徹底、不留死角，保證藥物濃度和藥物作

用時間。

5.2加強飼養(yǎng)管理

按GB/T17824.2執(zhí)行，減少斷奶后混群和轉(zhuǎn)欄的頻率，盡可能做到保育階段的全進全出；注意豬

群密度合理、豬舍良好通風；減少人員串欄引起的交叉?zhèn)鞑ァ?/p>

5.3免疫預防

疫苗接種是生產(chǎn)中控制豬傳染性胸膜肺炎的有效手段。根據(jù)本地區(qū)流行菌株的血清型，選擇多價滅

活疫苗進行免疫。

5.4藥物防治

5.4.1對于發(fā)病的豬場，最好分離致病菌，通過藥敏試驗篩選敏感藥物，有針對性進行防治。

5.4.2在治療過程中所有藥物的使用應符合NY