疫苗菌毒種培育工崗位職業(yè)健康、安全、環(huán)保技術(shù)規(guī)程文件名稱：疫苗菌毒種培育工崗位職業(yè)健康、安全、環(huán)保技術(shù)規(guī)程編制部門：綜合辦公室編制時(shí)間：2025年類別：兩級(jí)管理標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)：審核人：版本記錄：第一版批準(zhǔn)人：一、總則

本規(guī)程適用于疫苗菌毒種培育崗位的職業(yè)健康、安全、環(huán)保工作。引用標(biāo)準(zhǔn)包括《疫苗生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》、《職業(yè)健康監(jiān)護(hù)技術(shù)規(guī)范》等。目的在于確保疫苗菌毒種培育過(guò)程中的職業(yè)健康、安全、環(huán)保，提高工作效率，保障產(chǎn)品質(zhì)量。

二、技術(shù)要求

1.技術(shù)參數(shù)：

-溫濕度控制：培養(yǎng)箱溫度應(yīng)精確控制在設(shè)定溫度范圍內(nèi)，濕度應(yīng)控制在相對(duì)濕度范圍內(nèi)。

-氣壓控制：實(shí)驗(yàn)室氣壓應(yīng)保持穩(wěn)定，避免劇烈波動(dòng)。

-氧氣濃度：無(wú)菌操作區(qū)域氧氣濃度應(yīng)保持在21%±2%。

-滅菌條件：菌毒種接種及培養(yǎng)過(guò)程需采用無(wú)菌操作，確保無(wú)菌環(huán)境。

2.標(biāo)準(zhǔn)要求：

-菌毒種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：符合國(guó)家相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，如純度、活力、無(wú)污染等。

-安全標(biāo)準(zhǔn)：操作人員需嚴(yán)格遵守職業(yè)健康安全標(biāo)準(zhǔn)，如穿戴防護(hù)用品、避免直接接觸等。

3.設(shè)備規(guī)格：

-培養(yǎng)箱：具備精確的溫度、濕度、氧氣濃度控制功能，容量適應(yīng)菌毒種培育需求。

-滅菌器：具備高壓蒸汽滅菌功能，確保無(wú)菌操作。

-生物安全柜：符合生物安全柜相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，保證操作人員及環(huán)境安全。

-鏡頭顯微鏡：具備高清晰度，滿足菌毒種觀察需求。

-無(wú)菌操作臺(tái)：具備良好的無(wú)菌環(huán)境，便于菌毒種接種及培養(yǎng)。

三、操作程序

1.準(zhǔn)備工作：

-確認(rèn)菌毒種來(lái)源及質(zhì)量，檢查培養(yǎng)箱、滅菌器等設(shè)備狀態(tài)。

-檢查實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，確保符合無(wú)菌操作要求。

-準(zhǔn)備無(wú)菌操作臺(tái)、無(wú)菌工具、培養(yǎng)基等所需物品。

2.滅菌處理：

-使用高壓蒸汽滅菌器對(duì)培養(yǎng)箱、無(wú)菌工具、培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。

-確保滅菌徹底，無(wú)殘留細(xì)菌或病毒。

3.無(wú)菌操作：

-操作人員穿戴無(wú)菌防護(hù)服、手套、口罩等。

-在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行菌毒種接種，遵循無(wú)菌操作原則。

4.培養(yǎng)過(guò)程：

-將接種后的菌毒種放入培養(yǎng)箱，設(shè)定適宜的溫度和濕度。

-定期觀察菌毒種生長(zhǎng)情況，記錄數(shù)據(jù)。

5.結(jié)果檢查：

-觀察菌毒種生長(zhǎng)情況，確保符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

-如有異常，及時(shí)調(diào)整培養(yǎng)條件，必要時(shí)重新接種。

6.安全處理：

-操作結(jié)束后，及時(shí)清理工作臺(tái)面，避免交叉污染。

-處理廢棄菌毒種和培養(yǎng)基，按照環(huán)保要求進(jìn)行無(wú)害化處理。

7.記錄保存：

-詳細(xì)記錄菌毒種培育過(guò)程中的各項(xiàng)數(shù)據(jù)，包括溫度、濕度、接種時(shí)間等。

-按照規(guī)定保存記錄，以備查閱。

四、設(shè)備狀態(tài)與性能

1.培養(yǎng)箱：

-技術(shù)狀態(tài)：確保培養(yǎng)箱內(nèi)部清潔無(wú)塵，溫濕度控制精確，氧氣濃度穩(wěn)定。

-性能指標(biāo)：溫度波動(dòng)小于±0.5℃，濕度波動(dòng)小于±5%，氧氣濃度波動(dòng)小于±1%。

2.滅菌器：

-技術(shù)狀態(tài)：檢查滅菌器工作壓力、溫度等參數(shù)是否正常，確保滅菌效果。

-性能指標(biāo)：滅菌溫度可達(dá)121℃，壓力達(dá)到0.1MPa以上，確保高效滅菌。

3.生物安全柜：

-技術(shù)狀態(tài)：安全柜的空氣過(guò)濾效率需達(dá)到H14級(jí)別，操作面板功能正常。

-性能指標(biāo)：空氣過(guò)濾效率不低于99.99%，操作面板反應(yīng)靈敏，報(bào)警系統(tǒng)準(zhǔn)確。

4.鏡頭顯微鏡：

-技術(shù)狀態(tài)：顯微鏡鏡頭清晰，無(wú)劃痕，調(diào)焦系統(tǒng)順暢。

-性能指標(biāo)：放大倍數(shù)可達(dá)1000倍，分辨率達(dá)到0.2微米，滿足菌毒種觀察需求。

5.無(wú)菌操作臺(tái)：

-技術(shù)狀態(tài)：操作臺(tái)表面平整，無(wú)裂縫，臺(tái)面材料耐腐蝕、易清潔。

-性能指標(biāo)：表面細(xì)菌菌落總數(shù)小于10CFU/25cm2，無(wú)霉菌生長(zhǎng)。

6.其他設(shè)備：

-定期檢查所有設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)記錄，確保設(shè)備處于最佳工作狀態(tài)。

-根據(jù)設(shè)備制造商的推薦，進(jìn)行必要的校準(zhǔn)和維修，以保證設(shè)備性能穩(wěn)定可靠。

五、測(cè)試與校準(zhǔn)

1.測(cè)試方法：

-培養(yǎng)箱：定期使用標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)進(jìn)行溫度測(cè)試，確保溫度控制準(zhǔn)確。

-滅菌器：使用壓力計(jì)和溫度計(jì)進(jìn)行壓力和溫度的測(cè)試，驗(yàn)證滅菌效果。

-生物安全柜：使用微生物檢測(cè)方法，如生物指示劑，檢查安全柜的空氣過(guò)濾效率。

-顯微鏡：通過(guò)測(cè)試顯微鏡的分辨率和放大倍數(shù)，確保其性能符合要求。

-無(wú)菌操作臺(tái)：使用生物指示劑進(jìn)行表面無(wú)菌性測(cè)試。

2.校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)：

-培養(yǎng)箱：參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)箱技術(shù)條件》進(jìn)行校準(zhǔn)。

-滅菌器：參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《醫(yī)用滅菌器技術(shù)要求》進(jìn)行校準(zhǔn)。

-生物安全柜：參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《生物安全柜技術(shù)要求》進(jìn)行校準(zhǔn)。

-顯微鏡：參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《光學(xué)顯微鏡技術(shù)條件》進(jìn)行校準(zhǔn)。

-無(wú)菌操作臺(tái)：參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《無(wú)菌操作臺(tái)技術(shù)要求》進(jìn)行校準(zhǔn)。

3.調(diào)整與維護(hù)：

-根據(jù)測(cè)試結(jié)果，對(duì)設(shè)備進(jìn)行必要的調(diào)整，確保其性能符合標(biāo)準(zhǔn)。

-定期進(jìn)行設(shè)備維護(hù)，包括清潔、潤(rùn)滑、更換磨損部件等。

-記錄所有測(cè)試和校準(zhǔn)的結(jié)果，以及相應(yīng)的調(diào)整和維護(hù)措施。

-對(duì)測(cè)試和校準(zhǔn)的設(shè)備進(jìn)行標(biāo)識(shí)，確保其狀態(tài)清晰可見(jiàn)。

-對(duì)于不符合標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)備，應(yīng)立即停止使用，并報(bào)告給相關(guān)部門進(jìn)行修理或更換。

六、操作姿勢(shì)與安全

1.操作姿勢(shì)：

-姿勢(shì)保持自然，身體重心穩(wěn)定，避免長(zhǎng)時(shí)間保持同一姿勢(shì)。

-手臂和手腕放松，避免過(guò)度用力或彎曲。

-保持良好的背部支撐，避免長(zhǎng)時(shí)間站立或彎腰。

-使用符合人體工程學(xué)的工具和設(shè)備，減少疲勞。

2.安全要求：

-操作前穿戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備，如防護(hù)服、手套、護(hù)目鏡等。

-在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行操作，確保無(wú)菌操作區(qū)域的安全性。

-避免直接接觸菌毒種或其培養(yǎng)物，防止感染。

-操作過(guò)程中注意個(gè)人衛(wèi)生，勤洗手，避免交叉污染。

-使用銳器時(shí)應(yīng)特別小心，避免割傷。

-定期接受職業(yè)健康檢查，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并處理健康問(wèn)題。

-遵守實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)程，熟悉緊急情況下的應(yīng)急措施。

-在操作過(guò)程中保持警惕，注意觀察設(shè)備運(yùn)行狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)異常立即停機(jī)檢查。

-操作結(jié)束后，對(duì)工作區(qū)域進(jìn)行徹底清潔和消毒。

七、注意事項(xiàng)

1.菌毒種管理：嚴(yán)格遵循菌毒種的管理規(guī)定，不得隨意轉(zhuǎn)移或丟棄。

2.無(wú)菌操作：確保所有操作都在無(wú)菌條件下進(jìn)行，避免污染。

3.安全防護(hù)：操作人員必須穿戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)用品，如防護(hù)服、手套、護(hù)目鏡等。

4.設(shè)備維護(hù)：定期檢查和維護(hù)設(shè)備，確保其正常運(yùn)行。

5.溫濕度控制：培養(yǎng)箱等設(shè)備的溫濕度需嚴(yán)格控制，避免影響菌毒種生長(zhǎng)。

6.滅菌處理：對(duì)接種后的菌毒種及培養(yǎng)物進(jìn)行徹底滅菌，防止交叉污染。

7.操作記錄：詳細(xì)記錄操作過(guò)程、設(shè)備狀態(tài)、菌毒種生長(zhǎng)情況等，以便追溯和分析。

8.緊急情況：熟悉實(shí)驗(yàn)室緊急情況下的應(yīng)對(duì)措施，如火災(zāi)、泄漏等。

9.職業(yè)健康：關(guān)注操作人員的職業(yè)健康，定期進(jìn)行健康檢查。

10.環(huán)保要求：廢棄菌毒種及培養(yǎng)物按照環(huán)保要求進(jìn)行處理，不得隨意丟棄。

11.人員培訓(xùn)：操作人員需接受專業(yè)培訓(xùn)，掌握相關(guān)技術(shù)知識(shí)和安全操作規(guī)程。

12.實(shí)驗(yàn)室環(huán)境：保持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境整潔，定期通風(fēng)，減少有害氣體和微生物的濃度。

13.食品安全：避免將食品帶入實(shí)驗(yàn)室，防止交叉污染。

14.保密規(guī)定：對(duì)菌毒種等敏感信息進(jìn)行保密，防止泄露。

八、后續(xù)工作

1.數(shù)據(jù)記錄：詳細(xì)記錄菌毒種培育過(guò)程中的所有數(shù)據(jù)，包括溫度、濕度、接種時(shí)間、生長(zhǎng)情況等，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和完整性。

2.質(zhì)量監(jiān)控：定期對(duì)培育的菌毒種進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)，包括純度、活力、無(wú)菌性等，確保產(chǎn)品質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn)。

3.設(shè)備維護(hù)：對(duì)培養(yǎng)箱、滅菌器等設(shè)備進(jìn)行定期檢查和維護(hù)，確保設(shè)備處于良好狀態(tài)。

4.培養(yǎng)基更換：根據(jù)菌毒種生長(zhǎng)情況，定期更換培養(yǎng)基，保持培養(yǎng)環(huán)境的適宜性。

5.廢棄物處理：按照環(huán)保規(guī)定，妥善處理廢棄菌毒種、培養(yǎng)基和防護(hù)用品。

6.文件歸檔：將所有操作記錄、測(cè)試報(bào)告、設(shè)備維護(hù)記錄等文件進(jìn)行歸檔，以便查閱和追溯。

7.培訓(xùn)與交流：組織操作人員參與相關(guān)培訓(xùn)，提升技術(shù)水平，并與其他部門或機(jī)構(gòu)進(jìn)行技術(shù)交流。

8.評(píng)估與改進(jìn)：定期對(duì)菌毒種培育工作進(jìn)行評(píng)估，根據(jù)評(píng)估結(jié)果進(jìn)行必要的改進(jìn)，以提高工作效率和質(zhì)量。

九、故障處理

1.故障診斷：

-檢查設(shè)備外觀是否有損壞或異常跡象。

-讀取設(shè)備自帶的故障代碼或報(bào)警信息。

-分析設(shè)備運(yùn)行日志，查找異常操作或異常情況。

-確定故障可能的原因，如電源問(wèn)題、機(jī)械損壞、軟件錯(cuò)誤等。

2.故障處理步驟：

-立即停止操作，避免故障擴(kuò)大或造成人員傷害。

-根據(jù)故障原因，采取相應(yīng)的應(yīng)急措施，如斷電、隔離故障部件等。

-聯(lián)系設(shè)備供應(yīng)商或?qū)I(yè)維修人員，尋求技術(shù)支持。

-如果可能，進(jìn)行初步的現(xiàn)場(chǎng)維修或更換故障部件。

-完成維修后，重新啟動(dòng)設(shè)備，進(jìn)行測(cè)試以確保故障已排除。

3.備用方案：

-制定備用設(shè)備或替代流程，以應(yīng)對(duì)關(guān)鍵設(shè)備故障。

-培訓(xùn)操作人員熟悉備用設(shè)備和流程的使用。

4.故障記錄：

-詳細(xì)記錄故障現(xiàn)象、處理過(guò)程和結(jié)果，以便后續(xù)分析和改進(jìn)。

-定期審查故障記錄，總結(jié)故障原因，預(yù)防類似故障的再次發(fā)生。

十、附則

1.參考和引用的資料：

-《疫苗生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（GB29490-2013）

-《職業(yè)健康監(jiān)護(hù)技術(shù)規(guī)范》（GBZ188-2014）

-《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB194