檢驗科凝血功能檢測操作規(guī)范演講人：日期:目錄/CONTENTS2樣本處理流程3檢測方法執(zhí)行4質(zhì)量控制措施5結(jié)果分析與報告6安全與維護規(guī)范1操作前準備操作前準備PART01儀器校準流程嚴格按照制造商提供的校準程序進行操作，使用標準品驗證凝血分析儀的準確性，確保PT（凝血酶原時間）、APTT（活化部分凝血活酶時間）等參數(shù)的檢測結(jié)果在允許誤差范圍內(nèi)。設(shè)備校準與預(yù)熱預(yù)熱時間控制凝血分析儀需提前通電預(yù)熱至穩(wěn)定工作溫度，避免因溫度波動導(dǎo)致檢測結(jié)果偏差，預(yù)熱時間通常不低于規(guī)定時長，并記錄預(yù)熱狀態(tài)日志。傳感器與電極維護定期檢查電極靈敏度及傳感器穩(wěn)定性，清潔電極表面殘留物，必要時更換耗材以保證檢測精度。試劑復(fù)溶標準凍干試劑需使用指定稀釋液復(fù)溶，嚴格控制復(fù)溶體積與混勻方式，避免氣泡產(chǎn)生影響試劑活性，復(fù)溶后需靜置規(guī)定時間再使用。儲存條件監(jiān)控試劑應(yīng)避光保存于規(guī)定溫度范圍內(nèi)，開封后標注啟用時間并按照穩(wěn)定性要求限期使用，避免反復(fù)凍融導(dǎo)致效價降低。質(zhì)控品同步處理質(zhì)控品與待測標本需在同一條件下配制與保存，確保質(zhì)控數(shù)據(jù)能真實反映檢測系統(tǒng)的可靠性。試劑配制與保存標本采集規(guī)范使用專用枸櫞酸鈉抗凝管（如藍帽管），嚴格保持血液與抗凝劑的比例為9:1，避免因比例不當(dāng)導(dǎo)致假性結(jié)果異常。采血管選擇與抗凝比例穿刺過程需流暢，避免組織液混入或溶血，采血后立即輕柔顛倒混勻抗凝劑，防止微小血栓形成影響檢測準確性。采血操作要點采集后標本應(yīng)在規(guī)定時間內(nèi)送檢，離心前需平衡至室溫，離心力與時長需符合標準以避免血小板殘留干擾檢測。標本轉(zhuǎn)運與處理樣本處理流程PART02樣本接收與登記電子系統(tǒng)錄入規(guī)范采用條碼掃描與人工復(fù)核結(jié)合的方式錄入樣本信息，確保檢測項目與醫(yī)囑一致，系統(tǒng)自動生成唯一識別碼以避免混淆。異常樣本記錄對溶血、凝血、脂血或量不足的樣本需單獨登記并標注具體異常情況，及時與臨床溝通是否需要重新采集，同時記錄處理意見及后續(xù)操作流程。雙人核對機制接收樣本時需由兩名工作人員同步核對患者信息、樣本標簽及檢測項目，確保信息一致性與完整性，避免因信息錯誤導(dǎo)致檢測結(jié)果偏差。離心分離要求離心速度與時間控制凝血功能檢測樣本需在恒定溫度下以1500-2000×g離心10-15分鐘，確保血漿層與細胞層完全分離，避免血小板殘留影響檢測結(jié)果。01離心管選擇標準使用硅化玻璃或塑料離心管，防止管壁激活凝血因子，同時需檢查離心管密封性，避免離心過程中樣本泄漏或污染。02離心后分裝規(guī)范分離后的血漿需通過無菌吸頭轉(zhuǎn)移至標記清晰的EP管中，避免反復(fù)凍融，分裝后立即檢測或按標準保存條件暫存。03凝血功能檢測需在采血后4小時內(nèi)完成，尤其對APTT、PT等敏感指標，超時可能導(dǎo)致凝血因子降解或激活，影響結(jié)果準確性。檢測窗口期限制若樣本無法及時檢測，需置于2-8℃冷藏保存，最長不超過24小時，并記錄冷藏起止時間，檢測前需再次離心去除潛在微小凝塊。延遲處理應(yīng)對措施對標注“急診”或“危急值”的樣本需開辟綠色通道，30分鐘內(nèi)完成檢測并審核結(jié)果，同步通知臨床科室。危急值樣本優(yōu)先處理樣本時效性控制檢測方法執(zhí)行PART03凝血參數(shù)測定步驟采用標準靜脈穿刺技術(shù)采集全血樣本，立即與抗凝劑（如枸櫞酸鈉）充分混合，避免凝血激活。離心分離血漿后，需在限定時間內(nèi)完成檢測，確保結(jié)果準確性。將血漿與組織因子試劑混合，記錄纖維蛋白形成時間，用于評估外源性凝血途徑功能。需嚴格控制試劑溫度與孵育時間，避免人為誤差。加入激活劑（如白陶土）和鈣離子，監(jiān)測內(nèi)源性凝血途徑狀態(tài)。需定期校準儀器并驗證試劑敏感性，確保檢測靈敏度。通過Clauss法或衍生法測定，需使用標準曲線校準，避免高濃度樣本導(dǎo)致的鉤狀效應(yīng)。樣本采集與預(yù)處理PT（凝血酶原時間）測定APTT（活化部分凝血活酶時間）測定FIB（纖維蛋白原）定量自動化儀器操作儀器啟動與校準每日開機后執(zhí)行光電校準、液路沖洗及質(zhì)控測試，確保光學(xué)系統(tǒng)、加樣針和溫控模塊功能正常。校準需使用廠家提供的標準品，記錄偏差值。結(jié)果審核與傳輸儀器自動標記異常值（如超出線性范圍或凝塊異常），人工復(fù)核后通過LIS系統(tǒng)上傳，確保數(shù)據(jù)可追溯性。樣本加載與試劑管理采用條形碼識別樣本信息，避免人工錄入錯誤。試劑倉需避光保存，定期檢查有效期和開瓶穩(wěn)定性，避免交叉污染。溶血與脂血干擾抗凝劑與血液比例失衡（如抽血不足）會導(dǎo)致鈣離子螯合不完全，需重新采集樣本。高血細胞比容患者需調(diào)整抗凝劑用量?？鼓齽┍壤惓Ｋ幬锔蓴_肝素治療可延長APTT，需采用肝素中和劑或稀釋法消除影響；直接口服抗凝藥（DOACs）可能干擾多種檢測，需結(jié)合臨床用藥史解讀結(jié)果。溶血釋放的細胞內(nèi)物質(zhì)可激活凝血因子，導(dǎo)致PT/APTT縮短；脂血影響光學(xué)檢測，需通過高速離心或稀釋法處理，并在報告中備注。干擾因素處理質(zhì)量控制措施PART04內(nèi)部質(zhì)控實施每日質(zhì)控品檢測使用配套質(zhì)控品進行每日檢測，覆蓋不同濃度水平（正常/異常值），確保儀器、試劑及操作流程的穩(wěn)定性，檢測結(jié)果需在允許范圍內(nèi)波動。030201質(zhì)控規(guī)則應(yīng)用采用Westgard多規(guī)則（如1-3s、2-2s等）分析質(zhì)控數(shù)據(jù)，識別隨機誤差或系統(tǒng)誤差，觸發(fā)報警時需暫停檢測并排查原因（如試劑失效、儀器校準偏差等）。人員操作標準化定期培訓(xùn)操作人員，統(tǒng)一樣本處理、上機操作及結(jié)果判讀標準，減少人為因素導(dǎo)致的檢測變異。外部質(zhì)評參與第三方能力驗證定期參加國家級或國際權(quán)威機構(gòu)組織的凝血功能檢測室間質(zhì)評，比對實驗室間結(jié)果一致性，評估檢測系統(tǒng)的準確性。不合格結(jié)果分析根據(jù)外部質(zhì)評反饋調(diào)整實驗室SOP，確保檢測方法與國際指南（如CLSI）或行業(yè)標準接軌。若外部質(zhì)評結(jié)果超出可接受范圍，需啟動糾正措施（如重新校準儀器、更換試劑批次、優(yōu)化操作流程），并提交整改報告。標準化流程改進質(zhì)控記錄保存電子化存檔系統(tǒng)采用LIS系統(tǒng)自動記錄每日質(zhì)控數(shù)據(jù)，包括檢測時間、操作者、質(zhì)控值、趨勢圖及異常處理措施，確保數(shù)據(jù)可追溯。定期審核機制由質(zhì)量主管每月審核質(zhì)控記錄，評估長期穩(wěn)定性，識別潛在風(fēng)險（如試劑性能衰減），并形成書面報告存檔。合規(guī)性保存期限原始質(zhì)控數(shù)據(jù)、外部質(zhì)評報告及整改記錄需保存至少2年，以備監(jiān)管機構(gòu)審查或?qū)嶒炇艺J證（如ISO15189）之需。結(jié)果分析與報告PART05數(shù)據(jù)處理與復(fù)核數(shù)據(jù)錄入與校對檢驗結(jié)果需通過雙人核對制度錄入信息系統(tǒng)，確保數(shù)值、單位及參考范圍的準確性，避免人工輸入錯誤或儀器傳輸偏差。對臨界值或異常波動數(shù)據(jù)需標記并二次復(fù)核。質(zhì)控數(shù)據(jù)比對將當(dāng)日檢測結(jié)果與室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)、歷史趨勢進行對比分析，排除儀器漂移或試劑批次差異導(dǎo)致的系統(tǒng)性誤差，必要時重新校準或復(fù)測樣本。邏輯性驗證結(jié)合患者臨床信息（如抗凝治療史）判斷結(jié)果合理性，例如APTT延長但PT正?？赡芴崾緝?nèi)源性凝血途徑異常，需與臨床溝通確認。根據(jù)異常程度啟動不同流程，輕度異常（如略超參考范圍）由檢驗醫(yī)師復(fù)核后簽發(fā)；顯著異常（如D-二聚體>10倍上限）需重復(fù)檢測并追溯樣本質(zhì)量，同時聯(lián)系臨床科室預(yù)警。異常結(jié)果處理分級處理機制針對異常結(jié)果需排查溶血、脂血、黃疸等樣本干擾，或肝素污染等體外因素，必要時要求重新采血并備注預(yù)處理要求。干擾因素排查對危及生命的指標（如INR>5.0）立即電話通知臨床，記錄接聽人信息及反饋意見，并在報告中標注“危急值已通報”。危急值報告報告格式標準結(jié)構(gòu)化模板報告需包含患者基本信息、檢測項目、結(jié)果數(shù)值、單位、參考區(qū)間及異常標記（↑/↓），凝血四項需同步顯示圖形化趨勢（如折線圖）。注釋與解釋對異常結(jié)果附加注釋，如“PT延長建議排查維生素K缺乏”等臨床提示；遺傳性凝血病檢測需附分子生物學(xué)結(jié)果解讀。電子簽名與審核報告需經(jīng)授權(quán)人員電子簽名并注明審核時間，支持PDF加密格式輸出，確保數(shù)據(jù)不可篡改且符合電子病歷歸檔要求。安全與維護規(guī)范PART06生物安全防護操作人員需穿戴醫(yī)用防護口罩、護目鏡、一次性手套及隔離衣，避免直接接觸血液或其他潛在感染性物質(zhì)，確保操作過程中的生物安全屏障有效性。個人防護裝備使用實驗臺面及儀器接觸區(qū)域需使用含氯消毒劑或75%乙醇定期擦拭，紫外線照射輔助消毒，降低交叉污染風(fēng)險，尤其是處理高危樣本后的即時消毒程序。操作環(huán)境消毒所有血液樣本需視為潛在傳染源，采用密閉容器轉(zhuǎn)運，離心前檢查試管密封性，避免氣溶膠產(chǎn)生，并嚴格區(qū)分清潔區(qū)與污染區(qū)工作流程。樣本處理規(guī)范廢棄物處置程序01注射器針頭、采血針等銳器必須投入專用防刺穿銳器盒，標注生物危害標識，達到容積3/4時密封移交醫(yī)療廢物處理中心，嚴禁重復(fù)使用或徒手處理。沾血棉球、廢棄標本管等感染性廢物需雙層黃色醫(yī)療垃圾袋封裝，貼生物危害標簽，高溫高壓滅菌后由專業(yè)機構(gòu)集中焚燒，確保無害化處理。凝血檢測中使用的試劑廢液（如枸櫞酸鈉溶液）需按酸堿性質(zhì)分類收集于專用容器，交由有資質(zhì)的環(huán)保單位處理，避免直接排入下水系統(tǒng)。0203銳器分類管理感染性廢物處理化學(xué)廢液回收設(shè)備日常維護每日開機后執(zhí)行光電校準和質(zhì)控