ICS65.020.21

CCSB30

15

內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)

DB15/T1060—2024

代替DB15/T1060—2016

野生食用菌菌種制作技術(shù)規(guī)程

Regulationofstrainmanufactureforwildediblefungi

2024-07-31發(fā)布2024-08-31實(shí)施

內(nèi)蒙古自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB15/T1060—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件代替DB15/T1060—2016《野生菌菌種制作技術(shù)規(guī)程》，與DB15/T1060—2016相比，除結(jié)構(gòu)

調(diào)整和編輯性改動(dòng)外，主要技術(shù)變化如下：

a)更改了范圍要求（見(jiàn)第1章，2016版第1章）；

b)更改了母種培養(yǎng)基要求（見(jiàn)5.1，2016版5.1）；

c)增加了母種檢測(cè)要求（見(jiàn)5.4）；

d)更改了母種培養(yǎng)要求（見(jiàn)5.6，2016版5.5）；

e)更改了原種、栽培種培養(yǎng)基要求（見(jiàn)6.1，2016版6.1）；

f)更改了原種、栽培種培養(yǎng)要求（見(jiàn)6.1.5，2016版6.1.5）；

g)更改了原種、栽培種貯存要求（見(jiàn)6.1.6，2016版6.1.6）；

h)更改了母種、原種、栽培種感官要求（見(jiàn)7.1.1、7.1.2、7.1.3，2016版7.1.1、7.1.2、7.1.3）；

i)更改了入庫(kù)要求（見(jiàn)7.2，2016版7.2）；

j)刪除了留樣要求（見(jiàn)2016版7.3）。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧廳提出。

本文件由內(nèi)需古自區(qū)果蔬標(biāo)準(zhǔn)化技木委會(huì)（SAM/TC25）歸口。

本文件起草單位：內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院、杭錦旗農(nóng)牧技術(shù)推廣中心。

本文件主要起草人：孫國(guó)琴、李亞嬌、王海燕、于傳宗、龐杰、王永、王宇勝、烏仁塔娜、楊景杰、

李炳華、李松樹(shù)葉、海旭冉、張雪梅、狄潔增、趙宏宇、劉曉蕊。

本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：

——2016年首次發(fā)布為DB15/T1060—2016；

——本次為第一次修訂。

I

DB15/T1060—2024

野生食用菌菌種制作技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了野生菌食用菌的菌種生產(chǎn)要求、母種生產(chǎn)、原種和栽培種生產(chǎn)、檢驗(yàn)、入庫(kù)等技術(shù)流

程要點(diǎn)。

本文件適用于蒙古口蘑、白鱗蘑菇、蘑菇、田野蘑菇、大肥蘑菇、大白樁菇、香杏麗蘑、花臉香蘑

可食用野生菌母種、原種和栽培種菌種制作要求。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

NY/T1731食用菌菌種良好作業(yè)規(guī)范

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

野生食用菌wildediblefungi

能夠形成大型肉質(zhì)或膠質(zhì)的子實(shí)體或菌核類(lèi)組織并能供人們食用或藥用的一類(lèi)大型真菌。

菌種spawn

生長(zhǎng)在適宜基質(zhì)上具結(jié)實(shí)性的菌絲培養(yǎng)物，包括母種、原種和栽培種。

母種stockculture

經(jīng)分離、雜交、誘變等各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，以玻璃

試管和培養(yǎng)皿為培養(yǎng)容器和使用單位，也稱(chēng)為一級(jí)種、試管種。

原種pre-culturespawn

由母種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，也稱(chēng)為二級(jí)種。

1

DB15/T1060—2024

栽培種spawn

由原種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，栽培種只能用于栽培，不可再次擴(kuò)大繁殖菌種，也

稱(chēng)為三級(jí)種。

固體菌種solidspawn

以富含木質(zhì)素、纖維素和淀粉等天然有機(jī)物為主要原料，添加適量的有機(jī)氮源和無(wú)機(jī)鹽類(lèi)，具有一

定水分含量的培養(yǎng)基培養(yǎng)的純菌絲體。

4菌種生產(chǎn)要求

場(chǎng)地

總體要求交通運(yùn)輸便利，地勢(shì)較高，通風(fēng)良好，有充足的水源和電源，排水通暢，遠(yuǎn)離污染源。

廠(chǎng)房

菌種生產(chǎn)廠(chǎng)房要求有各自隔離的攤曬場(chǎng)、原材料庫(kù)、配料分裝庫(kù)。配套有配料室、攪拌室、裝袋（瓶）

室、滅菌室、冷卻室、接種室、培養(yǎng)室（通風(fēng)好，有紗窗）、菌種檢測(cè)室及菌種冷藏庫(kù)等各環(huán)節(jié)的設(shè)施。

冷卻室、接種室，培養(yǎng)室都要有凈化設(shè)施。菌種生產(chǎn)廠(chǎng)房條件符合NY/T1731規(guī)定。

生產(chǎn)設(shè)備

菌種生產(chǎn)需要粉碎機(jī)、電子秤、攪拌機(jī)、裝袋（瓶）機(jī)、高壓滅菌鍋或常壓滅菌鍋、離子凈化器、

超凈工作臺(tái)或接種箱、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)架、搖床、冰箱、顯微鏡等設(shè)備。菌種生產(chǎn)設(shè)備條件符合NY/T

1731規(guī)定。

5母種生產(chǎn)

培養(yǎng)基

馬鈴薯200g加水1200ml煮沸20min，濾液定容至1000ml，加入葡萄糖10g、蔗糖10g、蛋白胨

1.6g、酵母粉1.6g、硫酸鎂（MgSO4）0.5g、磷酸二氫鉀（KH2PO4）1g、瓊脂粉8g～10g，pH自然；

麥粒100g加水1200ml煮沸20min，濾液定容至1000ml，加入葡萄糖10g、蔗糖10g、蛋白胨5

g、硫酸鎂（MgSO4）0.5g、磷酸二氫鉀（KH2PO4）1g、瓊脂粉8g～10g，pH自然；

馬鈴薯200g加水600ml煮沸20min，濾液定容至500ml；麥麩100g加水600ml煮沸20min，濾液

定容至500ml，二者混合，加入葡萄糖10g、蔗糖10g、蛋白胨2g、硫酸鎂（MgSO4）0.5g、磷酸二氫

鉀（KH2PO4）1g、瓊脂粉8g～10g，pH自然。

容器

試管選用18mm×180mm或者20mm×200mm；培養(yǎng)皿選用直徑7cm～9cm玻璃培養(yǎng)皿或一次性塑

料培養(yǎng)皿。

分裝和滅菌

5.3.1試管分裝和滅菌

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DB15/T1060—2024

分裝培養(yǎng)基至試管1/4處，用棉塞或硅膠塞子封閉試管口，每5支試管為1把，牛皮紙包棉塞，橡皮

筋扎緊，棉塞向上放置。棉塞應(yīng)采用梳棉，不能使用脫脂棉。在121℃～122℃（0.11MPa～0.12MPa）

下恒溫滅菌25min。

降溫至（65±5）℃時(shí)取出試管，在空氣清潔的室內(nèi)擺斜面，斜面長(zhǎng)度不超過(guò)試管長(zhǎng)度的2/3。自然

降溫凝固后成斜面。

5.3.2培養(yǎng)皿分裝和滅菌

培養(yǎng)基裝入300ml～500ml三角瓶至刻度的2/3處，用帶濾膜的封口膜封口后滅菌。培養(yǎng)皿用報(bào)紙

包好，放入滅菌鍋。121℃～122℃（0.11MPa～0.12MPa）恒溫滅菌25min。

降溫至（65±5）℃時(shí)，在超凈工作臺(tái)內(nèi)將三角瓶中的培養(yǎng)基分裝至培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)基占培養(yǎng)皿高

度的1/3～1/2。

檢測(cè)

抽取3%～5%滅菌后的試管和培養(yǎng)皿，在28℃下培養(yǎng)48h，無(wú)微生物長(zhǎng)出為滅菌合格。

接種

超凈工作臺(tái)或接種箱內(nèi)紫外燈照射30min后吹風(fēng)，之后用75%酒精進(jìn)行表面消毒。接菌過(guò)程嚴(yán)格執(zhí)

行無(wú)菌操作，接種后及時(shí)貼好標(biāo)簽并做好記錄。

將3mm～5mm菌塊接種在培養(yǎng)皿或試管培養(yǎng)基的中部。培養(yǎng)皿用石臘膜密封。

培養(yǎng)

在通風(fēng)避光、20℃～30℃下培養(yǎng)。

接種后每隔2d～3d檢驗(yàn)一次，剔除菌種未活、污染和生長(zhǎng)不良的不合格培養(yǎng)物。

菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)培養(yǎng)基表面即可使用。

6原料、栽培種生產(chǎn)

固體菌種

6.1.1培養(yǎng)基

糧食培養(yǎng)基：谷粒、麥?；蛴衩琢?0%，檸條粉、棉籽殼、玉米芯粉或豆秸粉9%，石膏1%，水分含

量（60±2）%，石灰水調(diào)節(jié)pH7.5～pH8.5。

組合培養(yǎng)基：檸條粉80%，麩皮19%，石膏1%，水分含量（60±2）%，石灰調(diào)節(jié)pH7.5～pH8.5；

檸條粉60%，玉米芯20%，麩皮19%，石膏1%，水分含量（60±2）%，石灰調(diào)節(jié)pH7.5～pH8.5；

麥粒60%，檸條粉20%，麩皮19%，石膏1%，水分含量（60±2）%，石灰調(diào)節(jié)pH7.5～pH8.5；

檸條粉60%，玉米芯20%，麩子19%，石膏1%，水分含量（60±2）%，石灰水調(diào)節(jié)pH7.5～pH8.5。

6.1.2容器

原種選用耐126℃高溫、有透氣膜封口的透明瓶子，或選用（12～17）cm×（22～24）cm×（0.04～

0.05）mm的聚丙烯塑料袋。

栽培種選用（15～17）cm×24cm×（0.04～0.05）mm的聚丙烯塑料袋。

6.1.3裝袋（瓶）

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DB15/T1060—2024

采用裝袋（瓶）機(jī)或人工進(jìn)行裝袋（瓶），人工裝袋（瓶）需用打孔器在袋口處打孔，孔直徑1cm～

1.5cm深度為8cm～12cm，每袋（瓶）裝培養(yǎng)基500g～600g。塑料袋用無(wú)棉蓋體套環(huán)封口。培養(yǎng)基

質(zhì)裝袋（瓶）后4h內(nèi)進(jìn)行滅菌。

6.1.4滅菌

高壓滅菌：組合培養(yǎng)基在121℃～122℃（0.11MPa～0.12MPa）下滅菌2h；糧食培養(yǎng)基在121℃～

122℃（0.11MPa～0.12MPa）下滅菌2.5h。

常壓滅菌：在3h之內(nèi)使溫度升至100℃，恒溫保持100℃10h～12h。

6.1.5接種

超凈工作臺(tái)或接種箱內(nèi)接種。每個(gè)原種袋（瓶）接入2cm～3cm大小母種1～2塊；每個(gè)栽培種袋接

入原種量不應(yīng)少于15g。

每批接種應(yīng)為單一品種，如中途換品種時(shí)采用75%酒精對(duì)超凈工作臺(tái)或接種箱及接種工具進(jìn)行表面

擦拭消毒。

6.1.6培養(yǎng)

通風(fēng)避光、21℃～27℃下培養(yǎng)。

6.1.7貯存

原種和栽培種0℃～4℃下貯存，貯存期不超過(guò)50d。

7檢驗(yàn)、入庫(kù)

檢驗(yàn)

7.1.1母種感官要求

野生食用菌母種感官要求見(jiàn)表1。

表1野生食用菌母種感官要求

項(xiàng)目要求

容器完整、無(wú)損、潔凈

棉塞或無(wú)棉蓋體干燥、整潔、松緊適度、能滿(mǎn)足透氣和過(guò)濾要求

菌絲生長(zhǎng)量長(zhǎng)滿(mǎn)斜面或培養(yǎng)皿

菌絲體特征潔白、平整、無(wú)角變

菌種外觀(guān)菌絲體分泌物無(wú)

菌落邊緣整齊

雜菌菌落無(wú)

斜面背面外觀(guān)培養(yǎng)基不干縮，顏色均勻，無(wú)暗斑、無(wú)色素

7.1.2原種感官要求

野生食用菌原種感官要求見(jiàn)表2。

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DB15/T1060—2024

表2野生食用菌原種感官要求

項(xiàng)目要求

容器完整、無(wú)損、無(wú)裂紋、潔凈

棉塞或無(wú)棉蓋體干燥、整潔、松緊適度、能滿(mǎn)足透氣和濾菌要求

培養(yǎng)基上表面距瓶（袋）口的距離（50±5）mm

菌絲生長(zhǎng)量長(zhǎng)滿(mǎn)容器

菌絲體特征潔白濃密、生長(zhǎng)旺健、整齊

培養(yǎng)物表面菌絲體生長(zhǎng)均勻、無(wú)高溫抑制線(xiàn)

菌種外觀(guān)培養(yǎng)基及菌絲體緊貼瓶壁、無(wú)干縮

菌絲分泌物無(wú)

雜菌菌落無(wú)

子實(shí)體原基無(wú)

7.1.3栽培種感官要求

野生食用菌栽培種感官要求見(jiàn)表3。

表3野生食用菌栽培種感官要求

項(xiàng)目要求

容器完整、無(wú)損、無(wú)裂紋、潔凈

棉塞或無(wú)棉蓋體