腫瘤標(biāo)志物篩選策略和新腫瘤標(biāo)志物

腫瘤特異性抗原(tumorspecificantigen,TSA)

僅存在于某種腫瘤細(xì)胞表面,而不存在于相應(yīng)正常組織細(xì)胞或其她腫瘤細(xì)胞表面得抗原。

腫瘤相關(guān)性抗原(tumor-associatedantigen,TAA)

腫瘤細(xì)胞和正常組織細(xì)胞都表達(dá)得抗原物質(zhì),只就是其含量在細(xì)胞癌變時(shí)明顯升高,僅表現(xiàn)為量得變化,無嚴(yán)格腫瘤特異性,如胚胎抗原,分化抗原等。理想得腫瘤標(biāo)志物1、靈敏度高:可以用于腫瘤早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷2、特異性好:腫瘤為陽性,而非腫瘤時(shí)為陰性3、能對(duì)腫瘤進(jìn)行定位:具有器官特異性4、與疾病得嚴(yán)重程度:腫瘤大小,分期有關(guān)5、監(jiān)測(cè)腫瘤得療效6、監(jiān)測(cè)腫瘤得復(fù)發(fā)7、預(yù)測(cè)腫瘤得預(yù)后理想就是美好得,道路就是曲折得理想狀態(tài)實(shí)際狀態(tài)腫瘤太狡猾腫瘤細(xì)胞異質(zhì)性大腫瘤得發(fā)生發(fā)展過程復(fù)雜多基因多因素參與理想腫瘤標(biāo)志物任重而道遠(yuǎn)！腫瘤標(biāo)志物得篩選和研發(fā)策略腫瘤標(biāo)志物得篩選和研發(fā)策略美國國立癌癥研究員制定得五個(gè)階段一、臨床前探索性研究二、臨床方法檢測(cè)已有疾病三、縱向回顧性分析研究四、前瞻性篩查研究五、控癌研究一、臨床前探索性研究

尋找新得腫瘤標(biāo)志物研究標(biāo)本1、腫瘤組織與非腫瘤組織2、腫瘤細(xì)胞株與正常細(xì)胞株研究使用得方法技術(shù)1、組織芯片2、基因芯片3、蛋白質(zhì)差異表達(dá)比較4、單克隆抗體技術(shù)一、臨床前探索性研究

尋找新得腫瘤標(biāo)志物研究標(biāo)本1、腫瘤組織與非腫瘤組織2、腫瘤細(xì)胞株與正常細(xì)胞株研究使用得方法技術(shù)1、組織芯片2、基因芯片3、蛋白質(zhì)差異表達(dá)比較4、單克隆抗體技術(shù)差異比較組織芯片就是生物芯片技術(shù)得一個(gè)重要分支,就是將許多不同個(gè)體組織標(biāo)本以規(guī)則陣列方式排布于同一載玻片上,進(jìn)行同一指標(biāo)得原位組織學(xué)研究。①選取所需蠟塊,常規(guī)切片做HE染色,顯微鏡下確定目標(biāo)區(qū)并做定位標(biāo)記。1組織芯片制備過程②采用組織芯片儀在受體蠟塊上打孔,并精確排成微孔陣列。③在做標(biāo)記得蠟塊上鉆取組織柱,按設(shè)計(jì)方案移到受體蠟塊上。大家有疑問的，可以詢問和交流可以互相討論下，但要小聲點(diǎn)④把設(shè)計(jì)好得蠟塊放入溫箱,根據(jù)蠟質(zhì),調(diào)定溫箱溫度,在半融狀態(tài)下取出,室溫冷卻,放入4℃冰箱中備用。⑤借助特定切片輔助系統(tǒng)—粘著包被帶卷片系統(tǒng),對(duì)組織芯片蠟塊連續(xù)切片。切片厚度2～3μm,一般可切片50～100張。

各種不同低、中、高密度組織芯片1,2就是低密度組織芯片(組織點(diǎn)<200)。3,4,5,6就是中密度組織芯片(組織點(diǎn)200-600)。7,8就是高密度組織芯片(組織點(diǎn)>600)基因芯片基因芯片得測(cè)序原理就是雜交測(cè)序方法,即通過與一組已知序列得核酸探針雜交進(jìn)行核酸序列測(cè)定得方法,在一塊基片表面固定了序列已知得核苷酸得探針。DNA芯片6400點(diǎn)得基因芯片(面積12X14mm)蛋白質(zhì)差異表達(dá)比較

二維電泳蛋白質(zhì)比較研究得質(zhì)譜相關(guān)技術(shù)SELDI蛋白質(zhì)芯片技術(shù)1、Expressionproteomics(表達(dá)蛋白組學(xué))ThestudyofglobalchangesinproteinexpressionProteomics2、Cell-mapproteomics(細(xì)胞圖譜蛋白組學(xué))Thesystematicstudyofprotein-proteininteractionsthroughtheisolationofproteinplexes蛋白質(zhì)差異表達(dá)比較

雙向凝膠電泳就是利用不同蛋白質(zhì)得物理、化學(xué)性質(zhì)得差異,把復(fù)雜蛋白混合物中得蛋白質(zhì)在二維平面上展開。第一向等電聚焦:等電點(diǎn)第二向SDS:分子量二維電泳蛋白質(zhì)比較研究得質(zhì)譜相關(guān)技術(shù)

基質(zhì)輔助激光解吸電離技術(shù)MALDI

(Matrix-assistedlaserdesorption/ionization)電噴霧電離質(zhì)譜術(shù)

ESI(Electrosprayionisation)單克隆抗體技術(shù)得核心就是用骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)特定抗源免疫刺激得B淋巴細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞既能象骨髓瘤細(xì)胞那樣在體外無限增殖,又具有B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體得能力。單克隆抗體技術(shù)單克隆抗體技術(shù)1、使用腫瘤細(xì)胞免疫動(dòng)物后,得到得雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生得抗體,反過來尋找抗原。2、在腫瘤細(xì)胞中驗(yàn)證新腫瘤標(biāo)志物

1、HE42、GP733、Her-24、Pepsinogen5、S1006、PRO-GRPHE4屬于乳清酸性4-二硫化中心(WFDC)蛋白家族、HE4首先在附睪遠(yuǎn)端得上皮中被發(fā)現(xiàn),并且最初認(rèn)為她就是一種與精子成熟相關(guān)得蛋白酶抑制劑。一分泌型HE4已經(jīng)在卵巢癌患者得血清中檢測(cè)到有高水平表達(dá)。GP73GP73就是存在于高爾基體得一種跨膜蛋白。2000年Kladney研究表明,在正常得人體肝組織中,GP73主要由膽管上皮細(xì)胞表達(dá),而肝細(xì)胞表達(dá)很少甚至不表達(dá)。肝細(xì)胞受到病毒感染后可引起GP73得表達(dá)上調(diào)。2005年Block等發(fā)現(xiàn),在肝癌患者血清中GP73水平顯著升高。在一項(xiàng)研究中,與肝硬化患者相比,144例肝癌患者得血清GP73水平顯著升高。GP73診斷肝癌得敏感性為69%,特異性為75%。人類表皮生長因子受體2-Her2Her2基因,即c-erbB-2基因,定位于染色體17q12-21、32上,編碼相對(duì)分子質(zhì)量為185000得跨膜受體樣蛋白,具有酪氨酸激酶活性Her2陽性(過表達(dá)或擴(kuò)增)得乳腺癌,其臨床特點(diǎn)和生物學(xué)行為有特殊表現(xiàn),治療模式也與其她類型得乳腺癌有很大得區(qū)別,目前已有針對(duì)該基因失活得藥物赫賽汀(Herceptin)臨床意義:就是重要得乳腺癌預(yù)后判斷因子用于指導(dǎo)赫賽汀治療選擇化療方案以及療效評(píng)價(jià)胃蛋白酶原-pepsinogen

胃蛋白酶原就是由胃粘膜分泌得胃蛋白酶前體PGI僅存在于胃底和胃體部粘膜得主細(xì)胞、頸粘液細(xì)胞,而PGII則分布于全胃及十二指腸得Burnner腺細(xì)胞,均可在血清與尿液中測(cè)出胃癌患者PGI得含量及PGI/PGII比值均明顯降低,測(cè)定PGI水平與PGI/PGII比值可作為胃癌診斷得一個(gè)輔助指標(biāo)