ICS65.020.20

CCSB05DB2327

黑龍江省大興安嶺地方標準

DB2327/T048-2022

大球蓋菇菌種生產(chǎn)及林地栽培技術(shù)規(guī)程

2022-05-27發(fā)布2022-07-01實施

大興安嶺地區(qū)行政公署市場監(jiān)督管理局發(fā)布

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前言

本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)

定起草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。

本文件由大興安嶺林業(yè)集團公司綠色產(chǎn)業(yè)發(fā)展處提出。

本文件起草單位：黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所、松嶺區(qū)延軍食用菌協(xié)會。

本文件主要起草人：倪淑君、吳延軍、何樹友、高傳宇、張海峰、劉凱。

I

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大球蓋菇菌種生產(chǎn)及林地栽培技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了大球蓋菇菌種生產(chǎn)中的術(shù)語和定義、各級菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程和菌種質(zhì)量標準；規(guī)

定了大球蓋菇林地生產(chǎn)的場地選擇、栽培模式、種植管理和采收。

本文件適用于大興安嶺地區(qū)大球蓋菇菌種生產(chǎn)及林地栽培。

2規(guī)范性引用文件

下列文件的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文

件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）

適用于本文件。

GB/T4789.28食品安全國家標準、食品微生物學(xué)檢驗、培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求

GB/T5009.60食品包裝用聚乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯成型品衛(wèi)生標準的分析方法

GB/T12728食用菌術(shù)語

NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語和定義

GB/T12728、NY/T528界定的術(shù)語和定義適用于本文件。為了便于使用，以下重復(fù)列出了一些

術(shù)語和定義。

3.1母種

經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，也稱一級種、試

管種。

3.2原種

由母種擴繁培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，也稱二級種。

3.3栽培種

由原種擴繁培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。栽培種只能用于栽培，不可再次擴大繁殖菌種，

也稱三級種。

3.4培養(yǎng)基

各級菌種菌絲生長所需營養(yǎng)物質(zhì)的液體或固體混合物。

3.5擴繁

將菌種從一種培養(yǎng)物移接到另外的培養(yǎng)物中擴大培養(yǎng)的過程。

3.6接種

將菌種移接在培養(yǎng)基物中的方法。

3.7森林郁密度

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即林地樹冠垂直投影面積與林地面積之比，以十分數(shù)表示。

3.8種菇

組織分離制作母種所用的大球蓋菇子實體。

4菌種生產(chǎn)

4.1母種生產(chǎn)

4.1.1母種生產(chǎn)流程

母種的生產(chǎn)流程：培養(yǎng)基配制→培養(yǎng)基滅菌→組織分離→培養(yǎng)→轉(zhuǎn)管純化培養(yǎng)→母種。

4.1.2培養(yǎng)基配置

制作菌種所用的培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量應(yīng)符合GB/T4789.28要求。母種培養(yǎng)基參考配方有：

a)麥芽糖酵母瓊脂培養(yǎng)基(MYA)大豆蛋白胨(豆胨)1g、酵母2g、麥芽糖20g、瓊脂20g，加水

至1000ml；b)馬鈴薯葡萄糖酵母瓊脂培養(yǎng)基(PDYA)馬鈴薯300g(加水1500ml，煮20分鐘，

用濾汁)、酵母2g、豆胨1g、葡萄糖10g、瓊脂20g，加水至1000ml；c)燕麥粉麥芽糖酵母

瓊脂培養(yǎng)基(DMYA)燕麥粉80g、麥芽糖10g、酵母2g、瓊脂20g，加水至1000ml。

上述3種配方中如不加瓊脂，即可作為液體培養(yǎng)基。以上培養(yǎng)基需按常規(guī)配制、分裝、

滅菌、接種和培養(yǎng)。

4.1.3容器

使用玻璃試管、棉塞或硅膠塞。試管以18mm×180mm或20mm×200mm規(guī)格為宜，棉塞要

使用梳棉，硅膠塞要使用透氣硅膠塞。

4.1.4滅菌

采用高壓滅菌，壓力0.11Mpa～0.12Mpa，溫度121℃，滅菌30min。

4.1.5組織分離

可以采用組織分離法獲得母種。在超凈工作臺內(nèi)，同時放入0.1%氯化汞、無菌水、PDA

斜面和解剖刀等工具。選擇當(dāng)年人工栽培的優(yōu)質(zhì)子實體進行組織分離。標準為外形均勻、菌柄

潔白、子實體健壯。將種菇用清水洗凈，酒精擦拭表面，刮取種菇菌柄和菌蓋交界處的內(nèi)在組

織，接入平皿或試管斜面內(nèi)，放入23℃～26℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待菌絲萌發(fā)長至近1cm時，

挑取菌絲純化、鏡檢。

4.1.6擴大培養(yǎng)

選擇菌絲健壯、生長旺盛、無老化、無感染雜菌的母種試管，在接種箱或超凈工作臺內(nèi)，

用接種鉤挑取母種培養(yǎng)基上菌絲立即接入到另一支試管培養(yǎng)基中央，塞緊棉塞。接種完畢后，

將試管放于19℃～23℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。每支母種試管可擴大繁殖100支～150支新管。

4.1.7保存

將已長滿白色菌絲的試管，放入1℃～4℃冰箱中保存。

4.1.8活化再用

保存的菌種在使用前，需先將菌種置于適溫下，讓其活化，然后及時使用轉(zhuǎn)管，否則不

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易成活。

4.2原種生產(chǎn)

4.2.1基質(zhì)配方

基質(zhì)參考配方有，a)小麥或大麥88％、米糠或麥麩10%、石膏或碳酸鈣1%、生石灰1%、

含水量65%；b）小麥25％、稻草64％，麥麩10％、石膏粉1%、含水量65％～70％；c)雜

木屑83%、米糠或麥麩15%、石膏或碳酸鈣1%、生石灰1%，含水量70%。

4.2.2培養(yǎng)袋

采用規(guī)格為16.0cm×33.0cm的折角標準優(yōu)質(zhì)薄聚乙烯袋，質(zhì)量標準符合GB/T5009.60

要求。

4.2.3裝料和滅菌

裝料要實，松緊適度，上下均勻一致，四周無空隙，料面壓實。袋口無空隙，松緊、高

度適當(dāng)。

采用高壓滅菌123℃（0.12Mpa），1.5h～2.0h；常壓滅菌時，在3h之內(nèi)使滅菌鍋溫度

達到100℃，保持100℃8h～9h。

4.2.4冷卻

搬進冷卻室內(nèi)，溫度降至24℃以下備用。

4.2.5接種

使用接種箱、超凈工作臺等配合酒精燈在無菌室中進行無菌操作。將母種接種到原種培

養(yǎng)，每支試管接種原種4袋～6袋。

4.2.6培養(yǎng)

將接種后的菌袋立即放入溫度控制在17℃～21℃、相對濕度50%～55%的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)。

培養(yǎng)7d～12d后檢查有無雜菌并及時剔除，在整個培養(yǎng)過程中檢查2次～3次，直到菌絲長

到袋底，備用。

4.2.7保存

放入8℃～10℃儲存室內(nèi)，在衛(wèi)生、干燥、無光環(huán)境下保存。

4.3栽培種生產(chǎn)

4.3.1常用配方

可根據(jù)當(dāng)?shù)刭Y源條件配比選用，原料要求粉碎，木屑要發(fā)酵3個月以上。常用參考配方

有，a)玉米芯53%、玉米秸稈40%、麥麩5%、生石灰1%、石膏1%；b）玉米芯53%、干牛糞

25%、木屑10%、麥草或玉米秸10%，生石灰1%，石膏1%。

4.3.2培養(yǎng)袋

選用材質(zhì)均勻、袋料親和力好的折角標準優(yōu)質(zhì)薄聚乙烯袋，規(guī)格16.5cm×35.0cm、16.5cm

×37.0cm為宜，菌袋質(zhì)量標準符合GB/T5009.60要求。

4.3.3裝料和滅菌

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操作要求同4.2.3。

4.3.4接種

選擇菌絲色白、均勻、生長有力、無雜菌的原種作為接種材料。每個栽培袋接種原種25g。

4.3.5培養(yǎng)

接種后,菌袋整齊排放在干燥清潔的培養(yǎng)室內(nèi)，溫度一般控制在17℃～21℃，空氣相對

濕度50%。7d～12d后檢查有無雜菌，之后每隔15d檢查一次，直至菌絲長到袋底，備用。

4.3.6保存

長滿菌絲的菌袋放置在8℃～10℃、衛(wèi)生干燥、無光條件下保存。

4.4菌種質(zhì)量標準

4.4.1母種

菌絲潔白、均勻、平貼培養(yǎng)基生長，菌絲邊緣整齊，無雜菌菌落，培養(yǎng)基無干縮，有菌菇清香

味。

4.4.2原種

菌絲長滿，生長健壯，邊緣整齊，無雜菌。

4.4.3栽培種

菌絲潔白健壯，長滿菌袋，無任何雜菌污染。

5林地栽培

5.1場地選擇

野外種植場地，選擇在針葉林、闊葉林、混交林均可，林密度0.45～0.65。若林密度低于0.4

時，需要穴狀種植并搭配林下經(jīng)濟作物種植以達到遮陰保濕的需要。應(yīng)選擇土質(zhì)疏松，通透性強

的土壤，pH值適宜范圍為在5.5～7.0。

5.2栽培模式

5.2.1種植時間

大興安嶺地區(qū)大球蓋菇野外林地種植以每年的5、6兩個月為最佳種植期。

5.2.2菌袋處理

用5%石灰水溶液擦洗菌袋表面，進行菌袋表面消毒。

5.2.3種植方式

選擇森林郁密度在50%～55%的林地進行種植，下挖深30cm，40cm×40cm的栽培穴。大球蓋菇

種植密度不宜過高，應(yīng)合理控制菌種量，每穴2～4袋菌種。以栽培區(qū)腐殖土層厚度作為依據(jù)，確

定不同種植方式。厚度低于20cm，應(yīng)用切片式多邊形種植；厚度在20cm～30cm，可采用橫向分半

等方式種植；厚度在30cm以上的，采用整體連線方式種植。

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5.3種植管理

在菌絲生長階段，栽培料上應(yīng)覆蓋3～5cm土層，呈龜背狀