2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科1血小板相容性輸注及血小板抗體檢測項目的臨床應用陳秉宇浙江省人民醫(yī)院輸血科2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科2血小板相容性輸注及血小板抗體檢測項目的臨床應用第一部分血小板相容性輸注第二部分血小板抗體檢測項目的臨床應用2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科3第一部分血小板相容性輸注（一）血小板介紹（二）血小板功能（三）血小板抗原（四）血小板輸注目的和指征（五）血小板臨床應用的一般原則（六）我國血小板的臨床需求（七）血小板輸注無效2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科4血小板相容性輸注（一）血小板介紹血小板只見于哺乳動物體內(nèi),是重要的血液細胞，無細胞核，有胞膜，直徑約為2~5μm，呈兩面微凸的圓盤狀,循環(huán)血中含量一般為100~300×109個/L。（二）血小板功能促進止血和凝血促進血塊收縮維持血管內(nèi)皮的完整性

2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科5（三）血小板抗原

1分類：血小板相關抗原：

﹡存在血小板表面

﹡與其他細胞或組織共有的抗原

﹡又稱血小板非特異性抗原或血小板共有抗原

﹡主要是ABO血型系統(tǒng)抗原和HLA血型系統(tǒng)抗原

血小板特異性抗原（HPA）2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科62ABO血型系統(tǒng)抗原：

◆為A抗原和B抗原

◆抗原量較紅細胞少

◆輸ABO血型不合的血小板可使血小板壽命縮短。

故我國《臨床輸血技術規(guī)范》附件一：成分輸血指南—血小板：要求血小板輸注需交叉配合試驗，要求ABO相合，一次足量輸注。

2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科7附：ABO不合血小板輸注

1英國血液學標準委員會頒布的《血小板輸血指南》中建議：在ABO同型血小板無法供應時，可接受ABO不同型的血小板；將O型血小板用于其他血型患者時，應作抗體檢測，并確定不含有高效價的抗A和抗B。

BrJHaematol，2003，122(1)：10-23.2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科8ABO不合血小板輸注：2研究認為：ABO同型輸注療效最好，ABO次側(cè)不相容次之，然后是ABO主側(cè)不相容。3研究認為：與ABO不同型輸注組比較，同型輸注組的CCI或回收率明顯升高；僅對患者首次血小板輸注效果比較，ABO相容性對輸注效果并無顯著影響；但對隨后繼續(xù)輸注的療效比較時發(fā)現(xiàn)，ABO相容組的CCI顯著高于不相容組。

理論認為：對于那些無需長期輸注的患者，尤其是手術患者，可以不必考慮ABO不相容性對血小板輸注效果的影響。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科93血小板表面存在Lewis、I、i和P等紅細胞血型系統(tǒng)抗原。

故應注意紅細胞不完全抗體對血小板輸注的影響。血小板表面不存在Rh、Duffy、Kell、Kidd和Lutheran等血型系統(tǒng)抗原。

2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科10

附

Rh陰性患者的血小板輸注：

1次輸注>200mL的RhD陽性紅細胞懸液，有大約85%的RhD陰性受血者可產(chǎn)生抗一D。將RhD陽性紅細胞輸注給RhD陰性受試者。每次50μl

，每周1次，連續(xù)6周，15人中有4人產(chǎn)生免疫。

低至30μl的紅細胞輸入量仍可引起RhD抗原免疫2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科11附

Rh陰性患者的血小板輸注：英國血液學標準委員會頒布的《血小板輸血指南》建議：

1)應盡可能輸注RhD陰性的血小板，尤其是還未到絕經(jīng)期的婦女；

2)有生育能力的女性患者輸注RhD陽性血小板，建議同時作抗D預防性注射；

3)血液病患者，若為男性或已沒有生育能力的女性，接受RhD陽性血小板時沒必要進行抗D預防性注射。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科124血小板表面的HLA抗原系統(tǒng)

◆血小板表面存在HLA-A、HLA-B和HLA-C位點等Ⅰ類抗原。一部分是血小板固有，一部分是從血漿中吸附。

◆未發(fā)現(xiàn)血小板表面存在HLA-DR、HLA-DP和HLA-DQ等Ⅱ類抗原。

◆但是經(jīng)過細胞因子的刺激，在血小板表面能產(chǎn)生HLA-DR抗原2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科135血小板特異性抗原人類血小板抗原（Humanplateletantigen,HPA）是位于血小板膜糖蛋白（glycoprotein，GP）上。

至今，已確定了24個血小板特異性抗體，其中有12個（6對）為雙等位基因表達，分別是，HPA-1、HPA-2、HPA-3、HPA-4、HPA-5、HPA-15，目前研究已經(jīng)開展到HPA-17。

2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科14（四）血小板輸注目的和指征：

各種原因引起的血小板數(shù)量減少或功能異常伴有出血傾向或表現(xiàn)

建議：輸注血小板應個體化2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科15（五）血小板臨床應用的一般原則

1內(nèi)科原則：

◆<5×109/L時，應立即輸注

◆

10～50×109/L時，視病情而定，可考慮輸注

◆

>50×109/L時，一般不需輸注《臨床輸血技術規(guī)范》附件四：內(nèi)科輸血指南2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科162手術及創(chuàng)傷

◆

<50×109/L時，應考慮輸注。

◆

50～100×109/L時，應根據(jù)是否有自發(fā)性出血或傷口滲血決定。

◆

>100×109/L時，可以不輸。如術中出現(xiàn)不可控滲血，確定血小板功能低下，輸血小板不受上述限制?！杜R床輸血技術規(guī)范》附件三：手術及創(chuàng)傷輸血指南2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科17（六）我國血小板的臨床需求：血小板十分緊缺，遠遠不能滿足臨床需求。中國許多省實現(xiàn)血小板預約制。血小板“盲輸”現(xiàn)象極其普遍，存在嚴重的血液資源浪費。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科18（七）血小板輸注無效

1原因

◆免疫性因素：約占20%，包括HLA抗體、血小板HPA抗體、血小板自身抗體、同種抗體、ABO抗體等。

◆非免疫性：約占80%，脾腫大、骨髓移植、DIC、抗菌素、出血、發(fā)熱等，同時與輸注的血小板質(zhì)量也有關。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科19

2免疫因素：

1）ABO血型系統(tǒng)抗體：抗A、抗B可以縮短血小板壽命，有時也是引起PTR的原因。

2）紅細胞不完全抗體：部分紅細胞不完全抗體有時也是引起PTR的原因。

3）HLA抗體

◆是引起免疫性PTR的主要原因。

◆白細胞的污染是產(chǎn)生HLA抗體的主要原因，僅血小板上的HLA-I類抗原不足以引發(fā)抗體產(chǎn)生。

◆在輸注未去除白細胞的血液的病人中，30～100%可產(chǎn)生HLA抗體。

2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科204）HPA抗體

◆

HPA抗體多與HLA抗體同時存在。

◆在輸注去白細胞的紅細胞和血小板的病人中，HPA抗體產(chǎn)生概率僅為1.5%。

◆

HPA-1是白人中最多見的血小板特異性抗體，多為IgG型。

防范和解決的方法：輸注去白細胞的紅細胞和血小板；血小板基因配型；血小板血清學配型2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科21

3對策◆PTR

往往涉及眾多因素。◆如果是自身抗體，可以考慮用激素、免疫抑制劑、IVIg、血漿置換等治療?！魬⒁馑幬镄钥贵w引起的PTR，停用某種藥物或換藥是首選?！魬⒁庖蜓“遒|(zhì)量問題而引起的輸注無效。◆應注意因血小板消耗增加而致的輸注無效（如發(fā)熱、DIC等），縮短輸注間隔時間比增加輸注量更為重要?！魬⒁馄⒛[大引起的輸注無效，應以增加輸注量為主。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科22

3對策

◆建立血小板供者庫，篩選基因型相容的供者血小板?！粞“寤蚺湫汀！糨斪⒀“逯斑M行血小板血清學配型?！粞“蹇贵w篩選是一種較為切實可行的方法。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科23六大方面一血小板抗體的簡介二開展血小板抗體檢測的目的和意義三血小板抗體檢測技術的簡述四我院開展血小板抗體檢測的簡況五如何應對血小板抗體檢測陽性患者的體會六血小板抗體檢測技術的應用拓展第二部分血小板抗體檢測項目的臨床應用2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科24一血小板抗體的簡介（一）血小板抗體的內(nèi)涵：（二）目前我省開展的情況：（三）三點思考：（四）我們的觀點：2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科25一血小板抗體的簡介（一）血小板抗體的內(nèi)涵：1白細胞特異性和組織相容性抗體：

1）針對HLA-Ⅰ類抗原（HLA-A、HLA-B抗原和少量HLA-C抗原）的

HLA-Ⅰ類抗體。

2）物價收費目錄：編碼—260000016；項目名稱—白細胞特異性和組織相容性抗體檢測；浙江省物價—90元/次。

3）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍：無限定支付范圍；甲乙分類—甲類。2血小板特異性和組織相容性抗體：

1）針對血小板特異性抗原（HPA抗原）的HPA抗體。

2）物價收費目錄：編碼—260000017；項目名稱—血小板特異性和組織相容性抗體檢測；浙江省物價—90元/次。

3）現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍—限列入支付范圍的器官移植；甲乙分類—甲類。參考文件：《浙江省基本醫(yī)療保險醫(yī)療服務項目名稱》，浙江省勞動和社會保障廳，2005年版，第65頁?！墩憬♂t(yī)療服務價格手冊》（修訂版），浙江省物價局、浙江省衛(wèi)生廳，2010年12月版，第44頁。

2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科26一血小板抗體的簡介（二）目前我省級開展的情況：

1）血小板抗體檢測試劑注冊時間：國家藥監(jiān)局，

2011年4月3日。

2）我院率先開展：2011年5月26日；關注和準備時間約

10年。

3）浙江省人民醫(yī)院、浙一醫(yī)院、浙二醫(yī)院、邵逸夫醫(yī)院、浙江省中醫(yī)院、浙江醫(yī)院、寧波一院、寧波二院等28家醫(yī)院相繼開展。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科27一血小板抗體的簡介（三）三點思考：思考1：血小板特異性和組織相容性抗體：現(xiàn)醫(yī)保限定支付范圍—限列入支付范圍的器官移植，合理？思考2：有關血型與配血的收費和醫(yī)保限定支付范圍的話語權？（在許多地區(qū)，行家是弱勢群體，外行主宰話語權）（據(jù)實地了解，浙江省血型與配血的收費是上海的1/3，江西1/3，且也遠低于中國的西部地區(qū)，合理？）思考3：社會在進步，醫(yī)學在發(fā)展，管理部門和管理者的理念是否應該更新和創(chuàng)新(如血小板的輸注）？以適應社會和醫(yī)學發(fā)展的需要。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科28一血小板抗體的簡介（四）我們的觀點：

1患者和醫(yī)院的輸血安全重于泰山，安全也是效益！

2輸注血小板是臨床治療的重要手段，今后必將有更大發(fā)展。

3大行何不做小微？2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科29二開展血小板抗體檢測的目的和意義

關于血小板抗體檢測項目的說明（2011-11-21）院醫(yī)保辦：因血小板抗體引起的臨床問題和疾病已引起全社會的嚴重關注，成為臨床亟待解決的問題。血小板抗體檢測（或篩選）包括白細胞特異性和組織相容性抗體和血小板特異性和組織相容性抗體。血小板抗體是引起臨床非溶血性發(fā)熱性輸血反應的最主要原因，非溶血性發(fā)熱性輸血反應是臨床很常見的輸血不良反應，文獻報道輸注紅細胞為2～6%，輸注血小板為20～30%，多次輸血患者高達27％～63％，而非溶血性發(fā)熱性輸血反應與血小板抗體密切相關，是影響臨床安全輸血的嚴重因素。血小板抗體的檢測對于預防和減少非溶血性發(fā)熱性輸血反應非常有意義。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科30二開展開展血小板抗體檢測的目的和意義

血小板抗體是臨床引起免疫性血小板輸注無效的最主要原因，文獻報道20～80%多次輸血的患者出現(xiàn)免疫性血小板輸注無效，血小板輸注無效會導致昂貴的血液和醫(yī)療資源的極大浪費，同時給患者造成較大的經(jīng)濟損失和身體損害。血小板抗體的檢測是臨床診斷和治療與血小板抗體有關的疾病的重要依據(jù)。鑒于血小板抗體對臨床的重要價值，為此該項目得到今年11月1日衛(wèi)生廳質(zhì)量檢查組的充分肯定。目前我省兄弟醫(yī)院已相繼開展。輸血科

2011年11月22日2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科31三血小板抗體檢測技術的簡述（一）原理（二）試劑組成（三）實驗前準備（四）操作2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科32三血小板抗體檢測技術的簡述

（一）原理

1、基于固相紅細胞粘附實驗（SPRCA）原理。

2、反應板中已包被抗血小板單克隆抗體，血小板懸液經(jīng)離心洗滌后可在反應孔底部形成血小板單層。

3、加入血清或血漿，在孔中經(jīng)過孵育后，若該血清或血漿中含有血小板抗體，則該抗體與反應孔中的血小板單層結(jié)合，未結(jié)合的成分通過洗滌被去除。

4、加入抗人IgG及人IgG致敏紅細胞（指示紅細胞），經(jīng)離心后指示紅細胞通過抗人IgG的橋連與血小板單層上的血小板抗體結(jié)合，因此陽性反應為指示紅細胞平鋪在反應孔底部表面。而陰性反應為指示紅細胞在離心力的作用下聚集于反應孔底部中央。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科33三血小板抗體檢測技術的簡述（二）試劑組成1低離子溶液（L.I.M）2反應版：在加入干燥劑的自封袋中密封保存；保存溫度為2～8℃。325*濃縮洗滌液4抗人IgG5陽性對照6陰性對照7指示紅細胞2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科34（三）實驗前準備（7）1所有試劑平衡至室溫。225*濃縮洗滌液：使用前用蒸餾水以1：24稀釋成洗滌工作液。3血小板抗體篩檢細胞：

1）為多人份O型健康者血小板，經(jīng)冷凍干燥制成。

2）使用前每支加生理鹽水500μl，室溫（18～25℃）靜置5分鐘

3）溶解后的濃度為100±20×109個/L4）使用前應充分溶解和混勻

5）溶解后室溫可保存24小時，但不可4℃保存4指示紅細胞：

1）指示紅細胞的表面已致敏人IgG抗體

2）使用前平衡至室溫（18～25℃）

3）加樣時應充分搖勻

4）若指示紅細胞出現(xiàn)溶血、細菌污染、過期則不能使用

5）加樣時沒有充分搖勻或離心不充分，可導致假陽性結(jié)果

三血小板抗體檢測技術的簡述2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科355制備血小板懸液：

1）抗體檢測采用3人份等比例混合O型血小板懸液

2）機采血小板需用生理鹽水進行5-10倍稀釋后混合

3）血小板懸液濃度約為50～150×109個/L4）當天采血8小時內(nèi)EDTA或枸櫞酸鈉抗凝血經(jīng)200g離心10分鐘后，取上層2/3富血小板血漿(PRP)可直接使用

5）交叉配血直接采用供者血小板

6）血小板懸液應貯存于塑料容器中，室溫可保存24小時，但不可4℃保存6待檢樣本：血清或血漿樣本應新鮮，3000rpm離心5min以去除析出的纖維蛋白及其它有形成份，取上清進行檢測。7打開水浴箱，將濕盒平衡至37℃。（三）實驗前準備（7）三血小板抗體檢測技術的簡述2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科36（四）操作1依據(jù)檢測量取出反應板條，標記陽性對照、陰性對照及待檢樣品孔，未使用的板條應封好儲存于配有干燥劑的試劑盒中。2向反應孔中加入1滴（50μl）上述血小板懸液，輕搖反應板10秒鐘，使反應孔中的保護劑充分溶解。3用平板離心機將反應板以50g（650rpm）離心5分鐘，使血小板固定在微孔底部表面。4倒出反應孔中的液體，并用滴管滴加洗滌工作液清洗3次，洗滌過程中應輕搖微孔板，然后再輕輕甩掉洗滌液。最后一次洗滌后將反應板倒置于吸水紙上輕輕吸干殘余液體（切勿拍打）。5立即向每個反應孔中加入2滴（100μl）低離子溶液，并向相應孔中加入1滴(50μl)待檢者樣本、陽性對照及陰性對照。低離子溶液將由紫色變?yōu)樘焖{或青綠色，如仍為紫色可能漏加樣本。三血小板抗體檢測技術的簡述2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科37（四）操作6用封口膠將反應孔封好，輕搖微孔板混勻后置于濕盒中，37℃水浴孵育30分鐘。7按步驟5.4洗滌反應板5次。8立即加入1滴（50μl）抗人IgG試劑及1滴（50μl）指示細胞，輕搖混勻。9將反應板以200g（1300rpm）離心5分鐘。將待檢孔與對照孔的結(jié)果進行比較，判讀結(jié)果。10結(jié)果判定

10.1陽性或弱陽性結(jié)果：指示細胞在反應孔底部平鋪形成細胞層為陽性；若指示細胞只結(jié)合到部分孔底，并且結(jié)合的區(qū)域比陰性對照大為弱陽性。表明待檢者血清或血漿中含有血小板抗體。

10.2陰性結(jié)果：指示細胞在反應孔底部中央形成細胞聚集。表明待檢者血清或血漿中不含血小板抗體。三血小板抗體檢測技術的簡述2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科38

附血小板抗體檢測簡易操作程序

一、準備工作：1、試劑復溫；2、濕盒在水浴箱中平衡至37℃；3、配制洗滌工作液（蒸餾水；1：24）；4、制備血小板懸液（加生理鹽水500μl）；5、待檢樣本3000rpm離心5min。二、操作步驟：6、標記反應板條；7、加血小板懸液1滴（50μl），輕搖反應板10秒鐘；8、平板離心機50g（650rpm）離心5分鐘；9、洗滌3次；10、加低離子溶液2滴（100μl）；11、加待檢者樣本、陽性對照及陰性對照1滴(50μl)；12、封孔，輕搖反應板10秒鐘，濕盒中37℃水浴孵育30分鐘；13、洗滌5次；14、加抗人IgG試劑1滴（50μl）；15、加指示細胞1滴（50μl），輕搖反應板10秒鐘；16、平板離心機200g（1300rpm）離心5分鐘；17、判讀結(jié)果。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科39四我院開展血小板抗體檢測的簡況1、2011年6月1日—2012年6月31日共計檢測8578人次，月平均檢測715人次，平均月增加收入118772元，社會效益非常明顯。2、血小板抗體檢測總陽性率為11.75%。3、反復輸血的血液病患者的血小板抗體陽性率為26.37%。4、有妊娠史婦女（≥3次）的血小板抗體陽性率19.28%。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科40四我院開展血小板抗體檢測的簡況2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科41四我院開展血小板抗體檢測的簡況2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科42四我院開展血小板抗體檢測的簡況2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科43四我院開展血小板抗體檢測的簡況2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科442025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科452025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科462025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科472025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科482025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科492025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科502025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科51五如何應對血小板抗體檢測陽性患者的體會

抗HLA抗體、抗血小板抗體檢查結(jié)果（日本）癥狀報告數(shù)抗HLA抗體抗血小板抗體蕁麻疹37828/326(8.6%)5/296(1.7%)過敏反應373/36(8.3%)1/33(3.0%)過敏性休克11112/104(11.5%)2/96(2.1%)血壓降低290/25(0.0%)0/23(0.0%)呼吸困難4611/43(25.6%)3/38(2.4%)發(fā)熱反應15444/139(31.7%)9/115(7.9%)其它335/31(16.1%)2/26(7.7%)總計788103/704(14.6%)22/627(3.65)2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科52五如何應對血小板抗體檢測陽性患者的體會（一）輸注紅細胞懸液：1、我們研究認為：血小板抗體檢測陽性患者的非溶血性發(fā)熱反應明顯高于血小板抗體檢測陰性患者；血小板抗體檢測陽性患者經(jīng)干預后非溶血性發(fā)熱反應明顯下降。2、干預措施：

1）建議使用去白的紅細胞（血庫型或床旁型白細胞濾器）

2）可以使用洗滌的紅細胞

3）使用藥物

4）配血報告的“備注”欄注明：“請防范FNHTR等”。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科53五如何應對血小板抗體檢測陽性患者的體會（二）輸注血漿：

1）輸血性急性肺損傷(transfusionrelatedacutelunginjury，TRALI)：

文獻報道，輸血后發(fā)生的一系列嚴重呼吸窘迫病,其80%病例輸入的血液中含有血小板抗體。研究已經(jīng)證實：血小板抗體是引起TRALI的重要因素之一。上海市血液中心楊穎教授認為中國免疫性TRALI發(fā)病雖少，但嚴重型較多。

2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科54

不同國家TRALI發(fā)生\死亡率五如何應對血小板抗體檢測陽性患者的體會2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科55五如何應對血小板抗體檢測陽性患者的體會2）僅輸注血漿患者的比例：每個醫(yī)院的功能、理念、管理的差異性。我院輸注血漿患者的比例：僅輸注血漿患者的比例為3.7%3）對于特殊患者，檢測患者、供者血液的血小板抗體是可行的、必要的，目的是進一步保證輸血安全。2025/12/8浙江省人民醫(yī)院輸血科56五如何應對血小板抗體檢測陽性患者的體會（三）輸注血小板1.輸注血小板是提高患者血小板計數(shù)，改善臨床出血癥狀最為快速、有效的方法和手段。2.輸注血小板并不是每次都能達到滿意效果，研究已經(jīng)證明反復多次隨機輸注血小板的患者，體內(nèi)極易產(chǎn)生血小板抗體，引起血小板輸注無效。HLA和HPA抗體是引起免疫性血小板輸注無效的主要原因，其中HPA抗體可引起嚴重血小板同種免疫反應。3文獻報道，臨床血小板輸注無效發(fā)生率為30%～70%，其中免疫因素引起的血小板輸注無效約