2025年超星爾雅學(xué)習(xí)通《遺傳工程原理與應(yīng)用》考試備考題庫(kù)及答案解析就讀院校：________姓名：________考場(chǎng)號(hào)：________考生號(hào)：________一、選擇題1.遺傳工程的核心技術(shù)是（）A.基因測(cè)序B.基因克隆C.基因檢測(cè)D.基因編輯答案：B解析：基因克隆是遺傳工程的基礎(chǔ)和核心技術(shù)，通過(guò)復(fù)制特定基因片段，實(shí)現(xiàn)基因的擴(kuò)增和轉(zhuǎn)移。基因測(cè)序主要用于確定基因序列，基因檢測(cè)是分析基因表達(dá)或變異，基因編輯是精確修改基因序列的技術(shù)。2.下列哪項(xiàng)不是基因工程的工具酶？（）A.限制性?xún)?nèi)切酶B.DNA連接酶C.DNA聚合酶D.RNA聚合酶答案：D解析：限制性?xún)?nèi)切酶和DNA連接酶是基因工程中常用的工具酶，分別用于切割和連接DNA片段。DNA聚合酶主要用于DNA復(fù)制，而RNA聚合酶是轉(zhuǎn)錄過(guò)程中的酶，不屬于基因工程操作的主要工具酶。3.基因載體必須具備的條件不包括（）A.能夠自我復(fù)制B.具有選擇標(biāo)記C.能夠穩(wěn)定表達(dá)外源基因D.具有較高的分子量答案：D解析：基因載體必須能夠自我復(fù)制以保證外源基因的擴(kuò)增，具有選擇標(biāo)記以便篩選轉(zhuǎn)化成功的細(xì)胞，能夠穩(wěn)定表達(dá)外源基因。分子量高低不是必須的條件，關(guān)鍵在于功能特性。4.下列哪種生物是大腸桿菌常用的宿主細(xì)胞？（）A.酵母菌B.真菌C.大腸桿菌D.噬菌體答案：C解析：大腸桿菌是最常用的基因工程宿主細(xì)胞，具有生長(zhǎng)快、操作簡(jiǎn)便、遺傳背景清晰等優(yōu)點(diǎn)。酵母菌和真菌雖然也可用作宿主，但不如大腸桿菌普遍。噬菌體是病毒，不能作為宿主細(xì)胞。5.PCR技術(shù)的核心原理是（）A.基因重組B.基因測(cè)序C.基因擴(kuò)增D.基因編輯答案：C解析：PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是通過(guò)模擬體內(nèi)DNA復(fù)制過(guò)程，在體外特異性擴(kuò)增特定DNA片段的方法?；蛑亟M是將不同來(lái)源的基因組合，基因測(cè)序是確定DNA序列，基因編輯是修改基因序列。6.基因槍法中，常用的轟擊顆粒是（）A.金粉B.鎢粉C.鋁粉D.銅粉答案：A解析：基因槍法是將DNA包裹在惰性顆粒（如金粉或鎢粉）上，通過(guò)高壓氣體將顆粒轟擊到細(xì)胞中。金粉和鎢粉都是常用材料，但金粉因生物相容性好、易分散而更常用。7.基因工程中，用于檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞的標(biāo)記基因是（）A.抗生素抗性基因B.熒光標(biāo)記基因C.發(fā)光標(biāo)記基因D.選擇標(biāo)記基因答案：D解析：選擇標(biāo)記基因用于篩選成功導(dǎo)入外源基因的細(xì)胞，最常用的是抗生素抗性基因。熒光或發(fā)光標(biāo)記主要用于可視化觀察，不屬于篩選功能。8.下列哪種方法不屬于基因工程的應(yīng)用領(lǐng)域？（）A.轉(zhuǎn)基因作物B.基因診斷C.基因治療D.基因測(cè)序答案：D解析：轉(zhuǎn)基因作物、基因診斷和基因治療都是基因工程的重要應(yīng)用?；驕y(cè)序是基因工程的基礎(chǔ)技術(shù)，而非應(yīng)用領(lǐng)域。9.限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別的DNA序列通常是（）A.任意序列B.長(zhǎng)度為100bp的序列C.特定的回文序列D.隨機(jī)分布的序列答案：C解析：限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別DNA上的特定回文序列，并在識(shí)別位點(diǎn)切割DNA。這種序列具有對(duì)稱(chēng)性，是酶識(shí)別的關(guān)鍵特征。10.基因編輯技術(shù)CRISPR-Cas9的中文含義是（）A.人工合成基因B.基因序列識(shí)別系統(tǒng)C.基因剪切定位系統(tǒng)D.基因擴(kuò)增系統(tǒng)答案：C解析：CRISPR-Cas9是“ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats-associatedprotein9”的縮寫(xiě)，意為“間隔短回文重復(fù)序列相關(guān)蛋白9”，是基因編輯系統(tǒng)。11.下列哪種載體不適合在原核生物中表達(dá)真核生物基因？（）A.質(zhì)粒B.噬菌體C.病毒載體D.cosmids答案：B解析：質(zhì)粒、病毒載體和cosmids都是可以在原核生物中使用的基因載體。噬菌體主要作為工具酶或載體在真核生物研究中使用，其生命周期和表達(dá)機(jī)制與原核生物差異較大，不適合直接在原核生物中高效表達(dá)真核生物基因。12.基因測(cè)序技術(shù)中，Sanger法的基本原理是（）A.DNA雜交B.DNA復(fù)制C.DNA鏈終止D.DNA降解答案：C解析：Sanger測(cè)序法（鏈終止法）通過(guò)摻入帶有不同熒光標(biāo)記的dideoxynucleotides（ddNTPs）終止DNA鏈延伸，生成一系列不同長(zhǎng)度的片段，通過(guò)電泳分離后檢測(cè)熒光信號(hào)確定序列。13.下列哪種酶用于連接粘性末端DNA片段？（）A.限制性?xún)?nèi)切酶B.DNA連接酶C.DNA聚合酶D.RNA聚合酶答案：B解析：DNA連接酶用于連接DNA片段的磷酸二酯鍵。限制性?xún)?nèi)切酶用于切割DNA，DNA聚合酶用于合成DNA，RNA聚合酶用于合成RNA。14.基因槍法中，需要將DNA包裹在（）A.質(zhì)粒中B.蛋白質(zhì)中C.惰性顆粒中D.mRNA中答案：C解析：基因槍法是將DNA片段包裹在金粉、鎢粉等惰性顆粒表面，利用高壓氣體將顆粒轟擊入細(xì)胞。DNA本身需要被載體（如質(zhì)粒）攜帶，但直接與顆粒結(jié)合的是惰性材料。15.基因診斷的主要依據(jù)是（）A.基因表達(dá)水平B.基因序列變異C.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)異常D.細(xì)胞形態(tài)改變答案：B解析：基因診斷是利用分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)個(gè)體基因序列的變異（如點(diǎn)突變、缺失、插入等），以判斷其是否攜帶致病基因或具有特定遺傳背景?；虮磉_(dá)水平、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)改變可能是基因變異的結(jié)果，但不是基因診斷的直接依據(jù)。16.下列哪種屬于基因治療的策略？（）A.基因敲除B.基因增補(bǔ)C.基因沉默D.基因測(cè)序答案：B解析：基因治療旨在糾正或補(bǔ)償基因缺陷或異常?；蛟鲅a(bǔ)是將正常基因?qū)肴毕菁?xì)胞以替代或修復(fù)缺陷基因。基因敲除是去除特定基因，基因沉默是抑制基因表達(dá)，基因測(cè)序是檢測(cè)基因信息，均不屬于治療策略本身。17.限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別的序列通常是（）A.隨機(jī)序列B.長(zhǎng)度為100bp的序列C.特定的回文序列D.任意對(duì)稱(chēng)序列答案：C解析：絕大多數(shù)限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別特定的DNA回文序列，即序列正讀與反讀相同。這是酶識(shí)別和切割位點(diǎn)的基礎(chǔ)。18.PCR技術(shù)中，需要設(shè)計(jì)特定的引物，其作用是（）A.切割DNAB.合成RNAC.擴(kuò)增DNA片段D.合成蛋白質(zhì)答案：C解析：PCR技術(shù)需要兩種引物，分別與待擴(kuò)增DNA片段的兩端互補(bǔ)結(jié)合，作為DNA聚合酶的起始位點(diǎn)，從而特異性地?cái)U(kuò)增該片段。19.基因工程中，轉(zhuǎn)化是指（）A.基因復(fù)制B.基因轉(zhuǎn)移C.基因表達(dá)D.基因編輯答案：B解析：轉(zhuǎn)化是指外源遺傳物質(zhì)（如DNA）進(jìn)入宿主細(xì)胞的過(guò)程。基因復(fù)制是DNA自我復(fù)制，基因表達(dá)是DNA信息轉(zhuǎn)錄翻譯成蛋白質(zhì)，基因編輯是精確修改基因序列。20.下列哪種方法不屬于基因克隆的步驟？（）A.提取DNAB.設(shè)計(jì)引物C.構(gòu)建表達(dá)載體D.基因測(cè)序答案：B解析：基因克隆的主要步驟包括提取目的基因（或其片段）、構(gòu)建表達(dá)載體（將目的基因插入載體）、轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞、篩選陽(yáng)性克隆和擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物主要用于PCR擴(kuò)增或測(cè)序，不是克隆本身的核心步驟。二、多選題1.基因工程常用的工具酶包括（）A.限制性?xún)?nèi)切酶B.DNA連接酶C.DNA聚合酶D.RNA聚合酶E.轉(zhuǎn)錄酶答案：ABC解析：基因工程的核心技術(shù)依賴(lài)于幾類(lèi)關(guān)鍵酶。限制性?xún)?nèi)切酶用于切割DNA，獲得目的基因片段。DNA連接酶用于將目的基因與載體連接，構(gòu)建重組DNA分子。DNA聚合酶在PCR等技術(shù)中用于合成DNA。RNA聚合酶和轉(zhuǎn)錄酶是參與基因表達(dá)的酶，不屬于基因工程操作的主要工具酶。2.基因載體的主要功能有（）A.運(yùn)輸外源基因進(jìn)入宿主細(xì)胞B.確保外源基因在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定復(fù)制C.表達(dá)外源基因D.提供選擇標(biāo)記E.保護(hù)外源基因不被降解答案：ABCD解析：基因載體作為分子工具，其首要功能是攜帶外源基因進(jìn)入宿主細(xì)胞（A）。為了便于篩選和鑒定，通常攜帶選擇標(biāo)記基因（如抗生素抗性基因），使轉(zhuǎn)化成功的細(xì)胞能夠存活或被篩選（D）。同時(shí)，載體需要具備自我復(fù)制的能力，以保證外源基因的擴(kuò)增（B）。部分載體還能調(diào)控外源基因的表達(dá)（C）。載體本身也能提供一定的結(jié)構(gòu)保護(hù)，但主要功能集中在運(yùn)輸、復(fù)制和表達(dá)調(diào)控等方面。3.PCR技術(shù)需要哪些基本組分？（）A.模板DNAB.引物C.DNA聚合酶D.dNTPs（脫氧核糖核苷三磷酸）E.緩沖液答案：ABCDE解析：PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）的特異性擴(kuò)增需要多種組分協(xié)同作用。模板DNA是擴(kuò)增的藍(lán)本（A）。一對(duì)引物用于確定擴(kuò)增的起始位點(diǎn)，并作為DNA聚合酶的結(jié)合起始點(diǎn)（B）。耐高溫的DNA聚合酶（如Taq酶）負(fù)責(zé)在引物3'-端延伸DNA鏈（C）。dNTPs是合成新DNA鏈的原料（D）。緩沖液提供必要的pH和離子環(huán)境，維持反應(yīng)體系穩(wěn)定（E）。4.基因診斷的常用技術(shù)包括（）A.基因測(cè)序B.PCR-ELISAC.基因芯片D.SouthernblottingE.Westernblotting答案：ABCD解析：基因診斷旨在檢測(cè)個(gè)體基因的特定變異或表達(dá)狀態(tài)。基因測(cè)序可以直接讀取基因序列，確定是否存在變異（A）。PCR-ELISA結(jié)合PCR的特異性和ELISA的定量檢測(cè)，可用于檢測(cè)基因片段或其表達(dá)產(chǎn)物（B）?；蛐酒梢酝瑫r(shí)檢測(cè)大量基因的序列或表達(dá)信息（C）。Southernblotting是經(jīng)典的檢測(cè)DNA片段雜交的技術(shù)，可用于基因診斷（D）。Westernblotting檢測(cè)的是蛋白質(zhì)，雖然與基因表達(dá)相關(guān)，但通常不直接作為基因診斷的主要技術(shù)（E）。5.基因治療中，常用的載體系統(tǒng)有（）A.病毒載體B.質(zhì)粒載體C.噬菌體載體D.cosmidsE.合成載體答案：ABDE解析：將治療基因遞送入靶細(xì)胞的載體是基因治療的關(guān)鍵。病毒載體利用病毒的自然感染能力，可高效轉(zhuǎn)導(dǎo)基因（A）。質(zhì)粒載體是原核或真核表達(dá)中常用的非病毒載體（B）。cosmids是結(jié)合了質(zhì)粒和噬菌體特性的載體，可攜帶較大片段DNA（D）。合成載體是指通過(guò)化學(xué)方法人工合成的、具有載體功能的分子，如基于脂質(zhì)或核酸酶的載體（E）。噬菌體載體雖然存在，但不如病毒和質(zhì)粒載體常用（C）。6.限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別的DNA序列通常具有（）A.特異性B.回文結(jié)構(gòu)C.保守性D.變異性強(qiáng)E.長(zhǎng)度通常較長(zhǎng)答案：ABC解析：限制性?xún)?nèi)切酶具有高度的特異性，每個(gè)酶識(shí)別特定的DNA序列（A）。絕大多數(shù)識(shí)別序列是回文結(jié)構(gòu)，即序列正讀與反讀相同（B）。這些識(shí)別位點(diǎn)在自然界中往往具有保守性，以保證宿主基因組的穩(wěn)定（C）。限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別的序列長(zhǎng)度通常較短，一般只有6-8個(gè)核苷酸（E錯(cuò)誤）。序列特異性高意味著識(shí)別位點(diǎn)相對(duì)保守，變異性強(qiáng)則不利于其發(fā)揮功能（D錯(cuò)誤）。7.基因槍法中，影響轟擊效率的因素有（）A.顆粒的類(lèi)型和大小B.顆粒的DNA負(fù)載量C.高壓氣體的壓力D.靶細(xì)胞的類(lèi)型和狀態(tài)E.介導(dǎo)劑的使用答案：ABCDE解析：基因槍法的效果受多種因素影響。顆粒的類(lèi)型（如金粉、鎢粉）和大小影響其在細(xì)胞中的存留和傳遞效率（A）。顆粒上攜帶的DNA量（負(fù)載量）影響轉(zhuǎn)染后的基因表達(dá)（B）。高壓氣體的壓力決定了顆粒的初始速度和穿透力（C）。靶細(xì)胞的類(lèi)型、生理狀態(tài)（如分裂期）和表面特性都會(huì)影響其接收效率（D）。使用介導(dǎo)劑（如聚乙二醇）可以保護(hù)DNA，提高轉(zhuǎn)染效率（E）。8.基因克隆的主要步驟包括（）A.提取目的基因B.設(shè)計(jì)引物C.構(gòu)建表達(dá)載體D.轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞E.篩選和鑒定克隆答案：ACDE解析：基因克隆是一個(gè)系統(tǒng)化的過(guò)程。首先需要獲得目的基因片段（A），然后將其插入到合適的載體（如質(zhì)粒）中構(gòu)建成重組載體（C）。將重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞（如細(xì)菌）的過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)化（D）。最后，需要通過(guò)選擇標(biāo)記篩選出成功轉(zhuǎn)化的細(xì)胞，并進(jìn)行進(jìn)一步的鑒定，以確認(rèn)目的基因已成功克隆（E）。設(shè)計(jì)引物主要用于PCR等擴(kuò)增技術(shù)，是獲取目的基因的常用手段之一，但不是克隆本身的核心步驟（B）。9.基因診斷的目的是（）A.識(shí)別攜帶特定基因變異的個(gè)體B.預(yù)測(cè)遺傳病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)C.檢測(cè)腫瘤相關(guān)基因突變D.評(píng)估環(huán)境因素對(duì)基因表達(dá)的影響E.確定個(gè)體基因型答案：ABCE解析：基因診斷的核心在于利用分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)個(gè)體基因?qū)用娴男畔?。這包括識(shí)別攜帶可能導(dǎo)致疾病（如遺傳?。┑奶囟ɑ蜃儺惖膫€(gè)體（A），從而進(jìn)行遺傳風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)（B）。檢測(cè)與腫瘤發(fā)生相關(guān)的基因突變，用于腫瘤的早期診斷、分型或指導(dǎo)治療（C）。確定個(gè)體的基因型（E），例如進(jìn)行藥物基因組學(xué)指導(dǎo)的個(gè)體化用藥。評(píng)估環(huán)境因素對(duì)基因表達(dá)的影響（D）更多屬于表觀遺傳學(xué)或環(huán)境遺傳學(xué)研究范疇，雖然與基因有關(guān)，但通常不是基因診斷的主要直接目的。10.基因工程的安全性問(wèn)題包括（）A.基因逃逸B.基因突變C.基因轉(zhuǎn)移D.倫理問(wèn)題E.環(huán)境影響答案：ACDE解析：基因工程在帶來(lái)巨大潛力的同時(shí)，也伴隨著一系列安全性問(wèn)題。外源基因可能通過(guò)某種途徑從實(shí)驗(yàn)環(huán)境中逃逸出來(lái)（A），造成非預(yù)期的影響?；蚬こ碳夹g(shù)本身或應(yīng)用過(guò)程可能引發(fā)基因突變（B），包括宿主細(xì)胞或目標(biāo)生物的基因改變。外源基因可能在不同生物間發(fā)生水平轉(zhuǎn)移（C），引發(fā)生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)?；蚬こ痰膽?yīng)用涉及復(fù)雜的倫理問(wèn)題，需要社會(huì)共同探討和規(guī)范（D）?；蚋脑焐锟赡軐?duì)生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生未知或不可逆轉(zhuǎn)的影響，如影響生物多樣性等（E）。11.基因工程中，用于檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞的標(biāo)記基因有（）A.抗生素抗性基因B.熒光標(biāo)記基因C.發(fā)光標(biāo)記基因D.選擇標(biāo)記基因E.報(bào)告基因答案：ADE解析：標(biāo)記基因在基因工程中主要用于篩選成功轉(zhuǎn)化的細(xì)胞。選擇標(biāo)記基因（D）是核心功能，抗生素抗性基因（A）是其中最常用的類(lèi)型。報(bào)告基因（E）如β-半乳糖苷酶基因，可以通過(guò)顏色反應(yīng)等直觀指示轉(zhuǎn)化是否成功，也屬于廣義上的標(biāo)記。熒光或發(fā)光標(biāo)記基因（B、C）主要用于可視化觀察，雖然也能指示轉(zhuǎn)化，但主要目的不是篩選，而是監(jiān)測(cè)。12.PCR技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)包括（）A.特異性高B.敏感度高C.操作簡(jiǎn)便D.擴(kuò)增速度快E.條件要求嚴(yán)格答案：ABCD解析：PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)具有許多顯著優(yōu)點(diǎn)。利用特異性引物，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)目的DNA片段的特異性擴(kuò)增（A）。該技術(shù)非常敏感，可以檢測(cè)到極微量的模板DNA（B）?；静僮鞑襟E相對(duì)簡(jiǎn)單，易于掌握和自動(dòng)化（C）。在一個(gè)反應(yīng)管中，可以在較短時(shí)間內(nèi)（通常幾小時(shí)內(nèi)）完成大量DNA的擴(kuò)增（D）。PCR的條件（如溫度、緩沖液成分）相對(duì)成熟且有一定范圍，并非要求嚴(yán)格到難以操作（E錯(cuò)誤）。13.基因治療中，直接向體內(nèi)遞送基因載體的方法有（）A.注射法B.病毒感染C.基因槍法D.導(dǎo)電離子電穿孔E.病毒載體答案：ACD解析：將基因載體直接遞送入靶組織或細(xì)胞的方法有多種。注射法，包括肌肉注射、靜脈注射、直接注射到特定器官等（A）。物理方法如基因槍法利用高壓將顆粒轟擊入細(xì)胞（C）。電穿孔利用電場(chǎng)暫時(shí)形成細(xì)胞膜通道，幫助外源DNA進(jìn)入細(xì)胞（D）。選項(xiàng)B和E描述的是利用病毒作為載體進(jìn)行遞送，病毒本身是載體，遞送過(guò)程通常通過(guò)感染實(shí)現(xiàn)，與直接注射、基因槍或電穿孔等方法有所區(qū)別。雖然病毒載體最終是將基因遞送到體內(nèi)，但方法本身是病毒感染。14.限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別的序列通常具有（）A.特異性B.回文結(jié)構(gòu)C.保守性D.變異性強(qiáng)E.長(zhǎng)度通常較短答案：ABCE解析：限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)具有高度特異性（A），絕大多數(shù)是回文結(jié)構(gòu)（B），這意味著其正向和反向互補(bǔ)序列相同。這些識(shí)別位點(diǎn)在生物進(jìn)化過(guò)程中傾向于保持保守性（C），以確保宿主基因組的穩(wěn)定性。識(shí)別序列的長(zhǎng)度通常較短，一般為6-8個(gè)核苷酸（E）。酶的特異性決定了識(shí)別序列的保守性，高度特異性的酶通常識(shí)別的序列變異性不強(qiáng)（D錯(cuò)誤）。15.基因克隆的步驟包括（）A.提取DNAB.設(shè)計(jì)引物C.構(gòu)建表達(dá)載體D.轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞E.篩選和鑒定克隆答案：ACDE解析：基因克隆是一個(gè)系統(tǒng)化的過(guò)程。首先需要獲得目的基因片段（A），然后將其插入到合適的載體（如質(zhì)粒）中構(gòu)建成重組載體（C）。將重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞（如細(xì)菌）的過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)化（D）。最后，需要通過(guò)選擇標(biāo)記篩選出成功轉(zhuǎn)化的細(xì)胞，并進(jìn)行進(jìn)一步的鑒定，以確認(rèn)目的基因已成功克隆（E）。設(shè)計(jì)引物主要用于PCR等擴(kuò)增技術(shù)，是獲取目的基因的常用手段之一，但不是克隆本身的核心步驟（B）。16.基因診斷的常用技術(shù)包括（）A.基因測(cè)序B.PCR-ELISAC.基因芯片D.SouthernblottingE.Westernblotting答案：ABCD解析：基因診斷旨在檢測(cè)個(gè)體基因的特定變異或表達(dá)狀態(tài)。基因測(cè)序可以直接讀取基因序列，確定是否存在變異（A）。PCR-ELISA結(jié)合PCR的特異性和ELISA的定量檢測(cè)，可用于檢測(cè)基因片段或其表達(dá)產(chǎn)物（B）。基因芯片可以同時(shí)檢測(cè)大量基因的序列或表達(dá)信息（C）。Southernblotting是經(jīng)典的檢測(cè)DNA片段雜交的技術(shù)，可用于基因診斷（D）。Westernblotting檢測(cè)的是蛋白質(zhì)，雖然與基因表達(dá)相關(guān)，但通常不直接作為基因診斷的主要技術(shù)（E）。17.基因治療中，常用的載體系統(tǒng)有（）A.病毒載體B.質(zhì)粒載體C.噬菌體載體D.cosmidsE.合成載體答案：ABDE解析：將治療基因遞送入靶細(xì)胞的載體是基因治療的關(guān)鍵。病毒載體利用病毒的自然感染能力，可高效轉(zhuǎn)導(dǎo)基因（A）。質(zhì)粒載體是原核或真核表達(dá)中常用的非病毒載體（B）。cosmids是結(jié)合了質(zhì)粒和噬菌體特性的載體，可攜帶較大片段DNA（D）。合成載體是指通過(guò)化學(xué)方法人工合成的、具有載體功能的分子，如基于脂質(zhì)或核酸酶的載體（E）。噬菌體載體雖然存在，但不如病毒和質(zhì)粒載體常用（C）。18.PCR技術(shù)需要哪些基本組分？（）A.模板DNAB.引物C.DNA聚合酶D.dNTPs（脫氧核糖核苷三磷酸）E.緩沖液答案：ABCDE解析：PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）的特異性擴(kuò)增需要多種組分協(xié)同作用。模板DNA是擴(kuò)增的藍(lán)本（A）。一對(duì)引物用于確定擴(kuò)增的起始位點(diǎn)，并作為DNA聚合酶的結(jié)合起始點(diǎn)（B）。耐高溫的DNA聚合酶（如Taq酶）負(fù)責(zé)在引物3'-端延伸DNA鏈（C）。dNTPs是合成新DNA鏈的原料（D）。緩沖液提供必要的pH和離子環(huán)境，維持反應(yīng)體系穩(wěn)定（E）。19.基因槍法中，影響轟擊效率的因素有（）A.顆粒的類(lèi)型和大小B.顆粒的DNA負(fù)載量C.高壓氣體的壓力D.靶細(xì)胞的類(lèi)型和狀態(tài)E.介導(dǎo)劑的使用答案：ABCDE解析：基因槍法的效果受多種因素影響。顆粒的類(lèi)型（如金粉、鎢粉）和大小影響其在細(xì)胞中的存留和傳遞效率（A）。顆粒上攜帶的DNA量（負(fù)載量）影響轉(zhuǎn)染后的基因表達(dá)（B）。高壓氣體的壓力決定了顆粒的初始速度和穿透力（C）。靶細(xì)胞的類(lèi)型、生理狀態(tài)（如分裂期）和表面特性都會(huì)影響其接收效率（D）。使用介導(dǎo)劑（如聚乙二醇）可以保護(hù)DNA，提高轉(zhuǎn)染效率（E）。20.基因工程的安全性問(wèn)題包括（）A.基因逃逸B.基因突變C.基因轉(zhuǎn)移D.倫理問(wèn)題E.環(huán)境影響答案：ACDE解析：基因工程在帶來(lái)巨大潛力的同時(shí)，也伴隨著一系列安全性問(wèn)題。外源基因可能通過(guò)某種途徑從實(shí)驗(yàn)環(huán)境中逃逸出來(lái)（A），造成非預(yù)期的影響?；蚬こ碳夹g(shù)本身或應(yīng)用過(guò)程可能引發(fā)基因突變（B），包括宿主細(xì)胞或目標(biāo)生物的基因改變。外源基因可能在不同生物間發(fā)生水平轉(zhuǎn)移（C），引發(fā)生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。基因工程的應(yīng)用涉及復(fù)雜的倫理問(wèn)題，需要社會(huì)共同探討和規(guī)范（D）。基因改造生物可能對(duì)生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生未知或不可逆轉(zhuǎn)的影響，如影響生物多樣性等（E）。三、判斷題1.PCR技術(shù)只能用于擴(kuò)增DNA片段，不能用于RNA的擴(kuò)增。（）答案：錯(cuò)誤解析：PCR技術(shù)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）的核心是利用DNA聚合酶在引物指導(dǎo)下合成新的DNA鏈。雖然最初的PCR是針對(duì)DNA設(shè)計(jì)的，但通過(guò)使用逆轉(zhuǎn)錄酶將RNA模板逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，就可以實(shí)現(xiàn)對(duì)RNA片段的擴(kuò)增，這種技術(shù)稱(chēng)為RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄PCR）。因此，PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增DNA，也可以通過(guò)RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增RNA。2.基因治療就是將外源正?；?qū)氩∽兗?xì)胞，以糾正或補(bǔ)償缺陷基因的功能。（）答案：正確解析：基因治療的核心策略之一就是將外源的正常功能基因?qū)氲接谢蛉毕莸募?xì)胞中，目的是替換掉有缺陷的基因、修復(fù)或糾正缺陷基因的功能，從而治療遺傳病或某些acquired（獲得性）疾病。這包括基因增補(bǔ)、基因修正、基因沉默等多種具體技術(shù)途徑，但核心目標(biāo)都是通過(guò)引入正常基因來(lái)達(dá)到治療目的。3.限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別的DNA序列一定是回文結(jié)構(gòu)。（）答案：錯(cuò)誤解析：絕大多數(shù)限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別的是DNA上的回文序列，即序列的正向閱讀與反向互補(bǔ)閱讀相同。這是限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)的典型特征，因?yàn)樗ＷC了酶在雙鏈DNA上兩個(gè)鏈的識(shí)別位點(diǎn)都能識(shí)別并結(jié)合。然而，也存在極少數(shù)例外情況，即有些限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別的非回文序列。因此，說(shuō)“一定”是回文結(jié)構(gòu)并不完全準(zhǔn)確。4.質(zhì)粒是原核生物中常見(jiàn)的染色體外遺傳物質(zhì)，它可以自我復(fù)制。（）答案：正確解析：質(zhì)粒是存在于許多原核生物（如細(xì)菌）細(xì)胞質(zhì)中，獨(dú)立于染色體DNA之外的可自我復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子。它們通常攜帶一些非必需但有利于生存的基因，如抗生素抗性基因、性菌毛基因等。質(zhì)粒的自我復(fù)制能力是其作為基因工程載體的重要基礎(chǔ)。5.基因槍法是一種常用的體外DNA檢測(cè)技術(shù)。（）答案：錯(cuò)誤解析：基因槍法是一種將外源DNA直接導(dǎo)入細(xì)胞或組織內(nèi)的物理方法，常用于植物遺傳轉(zhuǎn)化，也用于動(dòng)物細(xì)胞和微生物。它主要用于基因的“遞送”或“轉(zhuǎn)移”，而不是用于“檢測(cè)”已存在于樣本中的DNA。體外DNA檢測(cè)技術(shù)通常指PCR、核酸雜交、基因測(cè)序等分子生物學(xué)方法。6.基因診斷只能檢測(cè)遺傳病。（）答案：錯(cuò)誤解析：基因診斷的應(yīng)用范圍非常廣泛，不僅限于檢測(cè)遺傳病。它還可以用于檢測(cè)腫瘤相關(guān)基因的突變、傳染病病原體的基因、藥物基因組學(xué)以指導(dǎo)個(gè)體化用藥、評(píng)估環(huán)境因素與基因的交互作用、進(jìn)行親子鑒定、產(chǎn)前篩查等。因此，將基因診斷的應(yīng)用僅限于遺傳病是不全面的。7.DNA連接酶可以在DNA鏈的任何位置連接斷裂的磷酸二酯鍵。（）答案：錯(cuò)誤解析：DNA連接酶的作用是催化DNA鏈之間或DNA鏈與RNA鏈之間斷裂的磷酸二酯鍵的形成。雖然它可以在雙鏈DNA斷裂處連接兩個(gè)互補(bǔ)的鏈，但在某些情況下存在限制。例如，它不能連接不配對(duì)的堿基對(duì)形成的鏈，也不能修復(fù)DNA鏈末端的懸突（overhangs）或缺口（gaps），除非有額外的酶（如DNA末端轉(zhuǎn)移酶、DNA連接酶I）參與修飾。8.基因治療是將正常的基因片段導(dǎo)入到患者細(xì)胞內(nèi)，以替換掉有缺陷的基因。（）答案：錯(cuò)誤解析：基因治療的方法多樣，包括基因增補(bǔ)（將正?；?qū)爰?xì)胞以提供缺失的功能）、基因修正（直接修復(fù)缺陷基因）、基因沉默（抑制異?；虮磉_(dá)）等。將正?；蚱螌?dǎo)入以“替換掉”有缺陷的基因是一種可能的策略（稱(chēng)為基因修正），但這并非唯一方法，也不是所有基因治療都旨在物理替換。更常見(jiàn)的是通過(guò)增補(bǔ)或修正來(lái)恢復(fù)功能。9.PCR技術(shù)的特異性主要取決于DNA聚合酶的選擇。（）答案：錯(cuò)誤解析：PCR技術(shù)的特異性主要取決于所使用的引物（primers）的序列特異性。引物必須與模板DNA的特定區(qū)域精確匹配才能結(jié)合并啟動(dòng)擴(kuò)增。雖然DNA聚合酶的特異性（如對(duì)錯(cuò)配核苷酸的容忍度）也會(huì)影響最終結(jié)果，但決定PCR特異性的是引物的設(shè)計(jì)。選擇高特異性的引物是獲得準(zhǔn)確PCR結(jié)果的關(guān)鍵。10.基因槍法使用的顆粒必須帶有目的基因。（）答案：正確解析：基因槍法的核心原理是將外源遺傳物質(zhì)（通常是DNA片