ICS65.020.40

B61DB23

黑龍江省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB23/T2323—2019

軟棗獼猴桃組培快繁育苗技術(shù)規(guī)程

2019-03-19發(fā)布2019-04-18實(shí)施

黑龍江省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB23/T2323—2019

前言

本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)GB/T1.1—2009的編寫規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)由黑龍江省林業(yè)和草原局提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：黑龍江省林業(yè)科學(xué)研究所、黑龍江省林業(yè)監(jiān)測規(guī)劃院。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：田新華、李京、周偉政、張玲、盧慧穎、李艷霞、張妍妍、張建瑛、姜天瑞、

溫愛亭、李念森、黃俊杰、毛洪波、于臘梅、于曉杰、韓賢波、白吉福、徐英華。

I

DB23/T2323—2019

軟棗獼猴桃組培快繁育苗技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了軟棗獼猴桃（ActinidiaargutaPlaneh.）組培快繁育苗技術(shù)的儀器設(shè)備、

環(huán)境和設(shè)備消毒、培養(yǎng)基制備、外植體培養(yǎng)、煉苗與移栽、生產(chǎn)檔案。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于軟棗獼猴桃組培快繁育苗。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適

用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T6001育苗技術(shù)規(guī)程

LY/T1882林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程

DB23/T1589藍(lán)靛果種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程

3儀器設(shè)備

應(yīng)符合DB23/T1589的規(guī)定。

4環(huán)境和設(shè)備消毒

4.1接種室消毒

接種前用紫外燈照射30min。

4.2培養(yǎng)室消毒

每周用臭氧消毒40min。

4.3超凈工作臺的消毒

接種前用紫外燈照射30min并用70％酒精擦拭臺面，定期清洗超凈工作臺過濾膜。

4.4接種器具的消毒

使用前將槍式鑷子、解剖剪、培養(yǎng)皿、解剖刀進(jìn)行高溫蒸汽消毒；接種過程中采用酒精

燈灼燒消毒。

5培養(yǎng)基制備

5.1母液配制

按照LY/T1882的規(guī)定執(zhí)行。

5.2培養(yǎng)基配制

1

DB23/T2323—2019

按照LY/T1882的規(guī)定執(zhí)行。

誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基+6-BA0.5mg/L+ZT1.0mg/L；繼代增殖培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基+6-BA

1.0mg/L+ZT0.5mg/L；生根培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基+IBA0.2mg/L。

5.3培養(yǎng)基滅菌

采用高壓蒸汽滅菌，在壓力0.105MPa、溫度121℃條件下滅菌20min。鍋內(nèi)的滅菌物

以不超過鍋容量的3/4為宜。

5.4培養(yǎng)基保存

滅菌后的培養(yǎng)基放入接種室，常溫條件下宜在7d內(nèi)使用，2℃～4℃條件下14d內(nèi)使用。

培養(yǎng)基應(yīng)保存于潔凈環(huán)境中，避免陽光直射。

6外植體培養(yǎng)

6.1外植體的選擇

選擇生長健壯、無病的植株作為采樣母株，剪取當(dāng)年生的半木質(zhì)化的莖段作為外植體，

采樣時間宜選擇晴天或露水干后。

6.2外植體滅菌

先將外植體用洗滌劑作表面清洗，再將外植體用流水沖洗30min后，將外植體放入消毒

瓶中。把裝有外植體的消毒瓶放入超凈工作臺，打開消毒瓶倒入0.1%升汞并搖晃，浸泡消

毒3min取出，用無菌水沖洗5次；再用無菌水浸泡40min，用無菌濾紙吸干外植體表面的水

分。

6.3外植體接種與誘導(dǎo)培養(yǎng)

將培養(yǎng)瓶的封口膜取下，瓶口在酒精燈外焰上旋轉(zhuǎn)灼燒消毒。槍式鑷子在酒精燈上灼燒

消毒并冷卻后，將表面消毒后的外植體用手術(shù)剪刀剪去兩端，剪取長約1.0cm左右的帶有

單個腋芽的莖段接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基。每個培養(yǎng)瓶放3個外植體，接種后蓋上封口膜，并標(biāo)注

日期。培養(yǎng)35d后進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)。

6.4繼代增殖培養(yǎng)

外植體經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)生成叢生芽，轉(zhuǎn)接至繼代增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)。培養(yǎng)35d后再進(jìn)行繼

代增殖培養(yǎng)。

6.5生根培養(yǎng)

選取培養(yǎng)瓶中長度1.5cm～2.0cm生長健壯的芽接種至生根培養(yǎng)基中，組培苗生長過

程中在基部會出現(xiàn)淺綠色嫩根，培養(yǎng)35d后平均生根數(shù)3條以上，根長在1.0cm以上即

可煉苗。

6.6組培苗培養(yǎng)條件

培養(yǎng)室的溫度控制在24±2℃，相對空氣濕度控制在70%～80%，光照強(qiáng)度為2000

Lux～3000Lux，光照時間為12h/d。

7煉苗與移栽

2

DB23/T2323—2019

7.1組培苗煉苗

將裝組培苗的培養(yǎng)瓶從培養(yǎng)架上輕輕取下，迅速轉(zhuǎn)移到日光溫室中，自然散射光下煉

苗，溫度控制在20℃～25℃，每天中午在培養(yǎng)瓶周圍噴灑霧水，封口煉苗3d～5d。

封口煉苗后打開瓶口，向瓶內(nèi)注入超過培養(yǎng)基表面0.5cm高的自來水，溫度控制在20

℃～25℃，煉苗1d～2d后即可移栽。

7.2移栽

用手指或鑷子輕輕取出組培苗，用清水洗去苗基部的培養(yǎng)基，速蘸0.5%高錳酸鉀溶

液消毒，移栽至裝有黑壤土和粗河沙（混合比例為2：1）的混合基質(zhì)的育苗盤中。育苗盤

規(guī)格為35cm×50cm，育苗盤四壁高度不能低于7cm，裝入育苗盤中的基質(zhì)厚度不應(yīng)小于5cm

。

7.3移栽苗管理

育苗期保持育苗基質(zhì)見干見濕，育苗水分管理按照GB/T6001的規(guī)定執(zhí)行。溫室空氣

濕度應(yīng)保持6