ICSCCS65.020.30B4353IDB53/T1167.3—2023本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件是DB53/T1167《異種移植醫(yī)用供體豬》的第3部分。DB53/T1167已經(jīng)發(fā)布了以下部分：——第1部分：遺傳質(zhì)量控制；——第2部分：微生物學和寄生蟲學等級及監(jiān)測；——第3部分：病理學診斷規(guī)范；——第4部分：環(huán)境及設(shè)施。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由云南農(nóng)業(yè)大學提出。本文件由云南省農(nóng)業(yè)標準化技術(shù)委員會（YNTC07）歸口。本文件起草單位：云南農(nóng)業(yè)大學。本文件主要起草人：魏紅江、趙紅業(yè)、王配、趙恒、成文敏、王嬌祥、楊暢。DB53/T1167.3—2023“異種器官移植”即將人類以外物種的器官移植到人體內(nèi)，延續(xù)人的生命，被認為是解決人類器官短缺最為有效的方法之一。異種移植醫(yī)用供體豬與人類器官結(jié)構(gòu)大小、生理生化、解剖特征接近，生長周期較短，繁殖能力高，涉及倫理學障礙相對較少，易于利用基因編輯技術(shù)克服異種器官移植免疫排斥反應，可被大規(guī)模生產(chǎn)等優(yōu)點，自上世紀90年代開始被認為是異種器官移植最理想的供體。為了對異種移植醫(yī)用供體豬生產(chǎn)進行指導和規(guī)范化生產(chǎn)，編制并發(fā)布DB53/T1167《異種移植醫(yī)用供體豬》地方標準，從遺傳質(zhì)量控制、微生物學和寄生蟲學等級及監(jiān)測、病理學診斷規(guī)范、環(huán)境及設(shè)施等環(huán)節(jié)指導和規(guī)范異種移植醫(yī)用供體豬生產(chǎn)，可讓從事異種移植醫(yī)用供體豬生產(chǎn)相關(guān)人員按標準化和規(guī)范化程序開展異種移植醫(yī)用供體豬養(yǎng)殖，帶動異種移植醫(yī)用供體豬規(guī)范化、標準化和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，利于大健康產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新發(fā)展和惠及末期器官衰竭患者。DB53/T1167由四個部分構(gòu)成?！?部分：遺傳質(zhì)量控制。目的在于確立異種移植醫(yī)用供體豬的命名、繁殖和遺傳質(zhì)量監(jiān)測?！?部分：微生物學和寄生蟲學等級及監(jiān)測。目的在于確立異種移植醫(yī)用供體豬微生物學和寄生蟲學的等級分類、檢測規(guī)則、檢測程序和指標、檢測方法、結(jié)果判定和判定結(jié)論等技術(shù)要求?！?部分：病理學診斷規(guī)范。目的在于確立異種移植醫(yī)用供體豬的病理學檢查的內(nèi)容和方法，包括檢查規(guī)則、檢查程序、臨床病理學檢查、解剖病理學檢查、病理學診斷報告和檢查結(jié)論等方面的技術(shù)要求?！?部分：環(huán)境及設(shè)施。目的在于確立異種移植醫(yī)用供體豬對設(shè)施、環(huán)境條件的技術(shù)要求，環(huán)境條件及設(shè)施設(shè)計、施工、工程驗收及經(jīng)常性監(jiān)督管理，同時規(guī)定了對飲水和籠具的要求。DB53/T1167.3—20235異種移植醫(yī)用供體豬第3部分：病理學診斷規(guī)范本部分規(guī)定了異種移植醫(yī)用供體豬的病理學檢查的內(nèi)容和方法，包括檢查規(guī)則、檢查程序、臨床病理學檢查、解剖病理學檢查、病理學診斷報告和檢查結(jié)論等技術(shù)要求。本部分適用于異種移植醫(yī)用供體豬的病理學診斷。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運輸技術(shù)規(guī)范DB53/T802.4實驗小型豬第4部分：病理學診斷規(guī)范3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1異種移植醫(yī)用供體豬Medicalgradedonorpigforxenotransplantation選擇遺傳背景明確的人工培育的實驗豬只，利用基因編輯技術(shù)，針對異種移植后移植物在受體體內(nèi)不同階段的免疫排斥反應，選擇可以引起超急性/急性免疫排斥，以及參與調(diào)節(jié)補體系統(tǒng)、凝血功能，控制感染等的關(guān)鍵基因（以下簡稱“異種移植關(guān)鍵基因”）加以修飾，制備適合不同細胞、組織和器官的異種移植醫(yī)用供體豬，用于醫(yī)用異種移植供體、科學研究、教學、生產(chǎn)和質(zhì)量控制鑒定以及其他科學實驗的基因編輯豬。3.2清潔級異種移植醫(yī)用供體豬Medicalgradeclean（CL）donorpigforxenotransplantation除不攜帶所規(guī)定的人畜共患病病原和動物烈性傳染病病原外，也不攜帶所規(guī)定的對豬只危害大和對科學研究干擾大的病原的異種移植醫(yī)用供體豬。3.3無指定病原體級異種移植醫(yī)用供體豬Medicalgradedesignatedpathogenfree（DPF）donorpig除清潔級異種移植醫(yī)用供體豬應排除的病原外，不攜帶世界衛(wèi)生組織（WorldHealthOrganization,WHO）指定供體動物應排除的潛在感染或條件致病和感染性人畜共患病病原，其組織及器官未來可移植到人體的異種移植醫(yī)用供體豬。6DB53/T1167.3—20233.4無菌級異種移植醫(yī)用供體豬Medicalgradegermfree(GF）donorpigforxenotransplantation無可檢出的任何微生物和寄生蟲的異種移植醫(yī)用供體豬。臨床病理學Clinicalpathology用化學、微生物學、血液學和分子生物學的方法對體液（血液和尿液）和組織等進行實驗室分析，從而對疾病進行診斷的醫(yī)學學科。解剖病理學Anatomicalpathology通過肉眼、顯微鏡、化學的、免疫學的和分子的方法對整體、器官和組織的形態(tài)進行檢查從而對疾病做出診斷的醫(yī)學學科。4檢查規(guī)則4,1檢查頻率4.1.1清潔級異種移植醫(yī)用供體豬每3個月臨床病理學檢測至少檢查一次，解剖病理學檢測每年至少檢查一次。4.1.2無特定病原體級異種移植醫(yī)用供體豬每半年臨床病理學檢測至少檢查一次，解剖病理學檢測每隔一年至少檢查一次。4.1.3無菌級異種移植醫(yī)用供體豬每年臨床病理學檢測至少檢查一次，解剖病理學檢測每隔一年至少檢查一次。4.2抽樣要求4.2.1異種移植醫(yī)用供體豬應按等級分類要求進行抽樣檢查。根據(jù)群體大小，抽樣數(shù)量見表1。4.2.2異種移植前，每頭用于異種移植的供體豬均進行臨床病理學檢查。4.2.3異種移植后，每頭用于異種移植的供體豬均進行解剖病理學檢查。表1抽樣數(shù)量N＜100N≥5005檢查程序檢查程序見圖1。DB53/T1167.3—20237圖1異種移植醫(yī)用供體豬病理學檢查程序6外觀檢查檢查異種移植醫(yī)用供體豬的精神狀態(tài)、被毛、皮膚、天然孔、營養(yǎng)狀況、運動狀態(tài)、采食情況和呼吸狀態(tài)等。7臨床病理學檢查7.1.1采血時間采血前應禁食8h～20h，宜縮短禁食時間。7.1.2采血量采血量應滿足檢查需求。7.1.3血樣處理7.1.3.1用于血液生物化學檢查的樣品室溫靜置30min～60min，之后3000rpm離心5min，取血清用于檢測；若靜置后不能及時處理，則應確保冷鏈運輸直至離心。7.1.3.2用于血液生物化學檢查的血清樣品密封、避光儲存，室溫條件下不超過12h，4℃條件下不超過24h。7.2檢查指標和參考值血液生物化學項目及指標正常值參考范圍見附錄A。7.3結(jié)果判定DB53/T1167.3—20238發(fā)現(xiàn)指標存在顯著性異常并結(jié)合臨床情況進行判斷。8解剖病理學檢查8.1.1基本程序基本程序如下：a)體表檢查；b)皮下檢查；c)剖開腹腔做一般視檢；d)取出腹腔臟器并檢查；e)取出骨盆腔臟器并檢查；f)剖開胸腔作一般視檢；g)取出胸腔臟器并檢查；h)取出口腔和頸部器官并檢查；i)剖開顱腔，取出頭部器官并檢查；j)剖開脊椎管，取出脊髓并檢查；k)肌肉、關(guān)節(jié)和淋巴結(jié)檢查；l)骨和骨髓檢查。8.1.2檢查內(nèi)容8.1.2.1被皮系統(tǒng)被毛、皮膚、皮下脂肪。8.1.2.2呼吸系統(tǒng)鼻腔、肺、氣管和支氣管。8.1.2.3循環(huán)系統(tǒng)心包、心包液和心臟、主動脈、肝門部位的血管。8.1.2.4消化系統(tǒng)口腔、食管、胃、腸道（十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸、直腸）、肝臟、膽管、膽囊、8.1.2.5泌尿系統(tǒng)腎臟、膀胱。8.1.2.6生殖系統(tǒng)睪丸、附睪、前列腺、精囊腺、卵巢、輸卵管、子宮、陰道、乳腺。8.1.2.7免疫系統(tǒng)胸腺、體表淋巴結(jié)、肺門淋巴結(jié)、脾臟和脾門淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)。DB53/T1167.3—202398.1.2.8神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)大腦、小腦、腦干、垂體、腎上腺、甲狀腺、甲狀旁腺。8.1.2.9骨骼與肌肉系統(tǒng)肌肉、關(guān)節(jié)、骨、骨髓。8.2組織病理學檢查8.2.1檢查內(nèi)容對心、肝、脾、肺、腎、胃、腸、睪丸/卵巢等主要器官，大體解剖檢查發(fā)現(xiàn)異常的組織器官，以及根據(jù)實驗目的需要檢查的組織器官進行組織病理學檢查。8.2.2組織取材組織標本取材規(guī)范參見DB53/T802.4。8.2.3病理組織制片常規(guī)石蠟切片，伊紅-蘇木精染色，必要時應用免疫組織化學或特殊染色等方法進行染色。8.2.4閱片及診斷由病理師或病理學專業(yè)技術(shù)人員完成。8.3結(jié)果判定解剖病理學檢查結(jié)果分為四個等級，分別為未見異常、輕微異常、輕度異常和明顯異常，判定標準a)未見異常：未發(fā)現(xiàn)病理形態(tài)學異常變化；b)輕微異常：發(fā)現(xiàn)輕微的病理形態(tài)學變化，推測動物仍然能夠表現(xiàn)正常的生理功能；c)輕度異常：發(fā)現(xiàn)輕度的病理形態(tài)學變化，推測動物正常生理功能已經(jīng)出現(xiàn)偏差；d)明顯異常：有明顯的病理形態(tài)學變化，推測動物出現(xiàn)生理功能障礙。9病理學診斷報告9.1診斷報告書要求病理學診斷報告書應使用規(guī)范的病理學術(shù)語及診斷標準，表述準確，條理清晰，具有時效性、真實性、科學性。9.2診斷報告內(nèi)容診斷報告內(nèi)容包括：a)背景信息：送檢單位、動物來源、動物編號、品種/品系、性別、年齡、體重、標本取材部位、固定方法等；b)臨床病理學診斷：檢查所用儀器，外觀檢查描述（未進行解剖病理學檢查時），血液生物化學檢測指標、檢測結(jié)果及正常值參考范圍，臨床病理學診斷結(jié)果等。如外觀發(fā)現(xiàn)有異常變化，應附有相應的圖片；DB53/T1167.3—2023c)解剖病理學診斷：檢查所用儀器，外觀檢查描述，大體解剖病理變化描述，組織切片病理變化描述，解剖病理學診斷結(jié)果等。如發(fā)現(xiàn)有異常變化，應附有相應的圖片；d)結(jié)論與討論：給出病理診斷結(jié)論，若出現(xiàn)病變則需對可能的原因進行分析討論，必要時附參考文獻。9.3診斷報告確認診斷報告應由病理師或病理學專業(yè)技術(shù)人員出具并簽字。診斷結(jié)果如有爭議則可進行同行評議。10檢查結(jié)論10.1臨床病理學檢查和解剖病理學檢查未見異常或輕微異常時，判定合格。否則判定為不合格。10.2臨床病理學與解剖病理