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文檔簡(jiǎn)介
ICS65.020.20
CCSB39
DB42
湖北省地方標(biāo)準(zhǔn)
DB42/T2447—2025
天麻栽培用蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程
CodeofpracticeforproductionofArmillariamelleastrainsusedin
Gastrodiaelatacultivation
2025-11-07發(fā)布2026-01-07實(shí)施
湖北省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布
DB42/T2447—2025
目次
前言................................................................................III
1范圍...............................................................................1
2規(guī)范性引用文件.....................................................................1
3術(shù)語(yǔ)和定義.........................................................................1
4生產(chǎn)條件...........................................................................2
5菌種類型...........................................................................2
6固體原種生產(chǎn)固體栽培種.............................................................2
7液體原種生產(chǎn)固體栽培種.............................................................4
8菌種質(zhì)量...........................................................................6
9生產(chǎn)檔案...........................................................................6
10標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施及評(píng)價(jià)....................................................................6
附錄A(資料性)蜜環(huán)菌菌種培養(yǎng)基配方.................................................8
附錄B(資料性)蜜環(huán)菌菌種感官要求...................................................9
附錄C(資料性)蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)檔案..................................................10
附錄D(資料性)湖北省地方標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施信息及意見(jiàn)反饋表..................................11
參考文獻(xiàn).............................................................................12
I
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前言
本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定
起草。
請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。
本文件由宜昌市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院提出。
本文件由湖北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳歸口。
本文件起草單位:宜昌市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院、湖北省農(nóng)科院經(jīng)濟(jì)作物研究所、三峽大學(xué)、湖北森源生
態(tài)科技有限責(zé)任公司、五峰博翎種業(yè)有限公司、宜昌銀罡桑蠶科技股份有限公司
本文件主要起草人:申露露、李克彬、劉世玲、周剛、夏輝、馮德品、張順凱、朱紅、焦海濤、朱
仲龍、王卓仁、沈祥陵、劉陽(yáng)、桑子陽(yáng)、溫鑫、史高睿、曾媛。
本文件實(shí)施應(yīng)用中的疑問(wèn),可咨詢湖北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳,聯(lián)系電話郵箱:
hbsnab@126.com;或者宜昌市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,聯(lián)系電話郵箱:52074193@。
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III
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天麻栽培用蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程
1范圍
本文件規(guī)定了天麻[GastrodiaelataBlume]栽培用蜜環(huán)菌[Armillariamellea(Vahl)P.Kumm.]
菌種的生產(chǎn)條件、液體菌種生產(chǎn)技術(shù)、固體菌種生產(chǎn)技術(shù)、菌種質(zhì)量等。
本文件適用于湖北省天麻栽培用蜜環(huán)菌菌種的生產(chǎn),其他生態(tài)條件類似區(qū)域可參照?qǐng)?zhí)行。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,
僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本
文件。
GB/T12728食用菌術(shù)語(yǔ)
GB/T37671金針菇菌種
NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程
NY/T1742食用菌菌種通用技術(shù)要求
3術(shù)語(yǔ)和定義
GB/T12728及GB/T37671界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。
天麻栽培用蜜環(huán)菌ArmillariamelleausedinGastrodiaelatacultivation
為天麻塊莖生長(zhǎng)提供基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)的共生真菌,隸屬擔(dān)子菌門(Basidiomycota)、傘菌綱
(Agaricomycetes)、傘菌目(Agaricales)、泡頭菌科(Physalacriaceae)、蜜環(huán)菌屬(Armillaria)。
固體菌種solidspawn
生長(zhǎng)在固體培養(yǎng)料上的菌種。
[來(lái)源:GB/T12728-2006,2.5.31]
液體菌種liquidspawn
培養(yǎng)基為液體狀態(tài)的菌種。
[來(lái)源:GB/T12728-2006,2.5.30]
母種stockculture
經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物,也稱一級(jí)種、試管種。
[來(lái)源:GB/T12728-2006,2.5.7]
原種motherspawn
由母種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物,也稱二級(jí)種。
[來(lái)源:GB/T12728-2006,2.5.8]
1
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栽培種spawn
由原種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物,也稱三級(jí)種。
[來(lái)源:GB/T12728-2006,2.5.9]
搖瓶液體菌種liquidspawnculturingbyshakerflask
由母種移植到液體培養(yǎng)基中在搖床上恒溫震蕩擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。
[來(lái)源:GB/T37671-2019,3.13]
發(fā)酵罐液體菌種liquidspawnculturingbyfermentationtank
由搖瓶液體菌種移植到發(fā)酵罐液體培養(yǎng)基中恒溫培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。
[來(lái)源:GB/T37671-2019,3.14]
4生產(chǎn)條件
人員條件
按照《湖北省食用菌菌種管理辦法》的規(guī)定,配備熟悉菌種生產(chǎn)和設(shè)備設(shè)施的操作、掌握蜜環(huán)菌菌
種基礎(chǔ)知識(shí)及生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程的菌種生產(chǎn)專業(yè)技術(shù)人員。
場(chǎng)地選擇
生產(chǎn)場(chǎng)地選擇及其周邊環(huán)境衛(wèi)生應(yīng)符合NY/T528的規(guī)定。
廠房要求
廠房設(shè)置與布局符合NY/T528要求。
生產(chǎn)設(shè)備與設(shè)施
設(shè)備與設(shè)施符合NY/T528要求。
5菌種類型
根據(jù)來(lái)源、繁殖代數(shù)與生產(chǎn)目的分為母種、原種、栽培種。
根據(jù)菌種基質(zhì)形態(tài)分為固體菌種和液體菌種。
6固體原種生產(chǎn)固體栽培種
生產(chǎn)流程圖
固體原種生產(chǎn)固體栽培種工藝流程見(jiàn)圖1。
2
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圖1固體原種生產(chǎn)固體栽培種工藝流程
品種選擇
使用傳代穩(wěn)定、品質(zhì)優(yōu)良、產(chǎn)量高、抗逆性強(qiáng)的蜜環(huán)菌品種。
母種制備
配方見(jiàn)附錄A,符合NY/T528要求。
固體原種生產(chǎn)
6.4.1原料要求
選擇滿足蜜環(huán)菌菌種生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)需求的原料,符合NY/T1742要求。
6.4.2培養(yǎng)基制備
配方見(jiàn)附錄A。按照生產(chǎn)數(shù)量和配方中各原輔材料的比例稱重,加水充分混合均勻。
6.4.3裝袋(瓶)
配料完成后及時(shí)裝袋(瓶)滅菌。裝袋松緊適中,袋(瓶)口清理干凈并扎緊,無(wú)破損漏氣。宜采
用機(jī)械裝袋和扎口。菌袋宜選用聚丙烯17cm×33cm折角封口袋。菌種瓶與所用設(shè)備相匹配。
6.4.4滅菌
采用常壓或高壓蒸汽滅菌。常壓滅菌時(shí)一般溫度達(dá)100℃保持12h~16h。微高壓滅菌時(shí)一般在0.11
Mpa、116℃左右,保持4h~6h。
6.4.5冷卻
將滅菌后的袋料運(yùn)送至消毒過(guò)的冷卻室或接種室,冷卻至25℃以下后即可接種。
6.4.6接種
使用試管母種進(jìn)行接種,做好接種室及接種設(shè)備的消毒工作。
3
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6.4.7培養(yǎng)條件
22℃±2℃避光恒溫培養(yǎng)。
6.4.8清理雜菌
接種15d后第一次清雜,菌絲長(zhǎng)滿菌袋2/3時(shí)第二次清雜,菌絲長(zhǎng)滿后打包運(yùn)輸前第三次清雜。
6.4.9培養(yǎng)時(shí)間
培養(yǎng)40d~60d。
固體栽培種生產(chǎn)
與本文件6.4固體原種生產(chǎn)流程相同,其中制備培養(yǎng)基配方詳見(jiàn)附錄B。
7液體原種生產(chǎn)固體栽培種
生產(chǎn)流程圖
液體原種生產(chǎn)固體栽培種工藝流程見(jiàn)圖2。
注1:發(fā)酵罐液體原種生產(chǎn);
注2:固體栽培種生產(chǎn)。
圖2液體原種生產(chǎn)固體栽培種工藝流程
4
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品種選擇
使用傳代穩(wěn)定、品質(zhì)優(yōu)良、產(chǎn)量高、抗逆性強(qiáng)的蜜環(huán)菌品種。
母種制備
見(jiàn)本文件6.3。
搖瓶液體菌種制備
7.4.1容器標(biāo)準(zhǔn)
采用1000ml的錐形瓶,錐形瓶應(yīng)保持清潔、干燥。
7.4.2裝液量
按照錐形瓶容積的40%~60%裝量系數(shù)裝液,使用帶有透氣功能的封口膜封口。
7.4.3搖瓶液體菌種培養(yǎng)基配方
配方見(jiàn)附錄A
7.4.4滅菌
高壓蒸汽滅菌,在121℃,0.11MPa~0.12MPa壓力下,維持30min。
7.4.5接種
待滅菌后裝有培養(yǎng)基的錐形瓶冷卻至25℃以下,在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行接種。每瓶接入直徑0.5cm活
化好的平板母種3塊~5塊。
7.4.6培養(yǎng)
將接種后的錐形瓶放入搖床進(jìn)行避光振蕩培養(yǎng),保持溫度22℃~24℃,轉(zhuǎn)速150r/min~170r/min,
培養(yǎng)7d~9d。
發(fā)酵罐液體原種生產(chǎn)
7.5.1生產(chǎn)前的檢查及清洗
發(fā)酵罐在使用之前要進(jìn)行徹底的清洗,除去罐內(nèi)的污物。洗罐水由罐底排污管道排出。清洗的標(biāo)準(zhǔn)
為罐內(nèi)壁無(wú)懸掛物,無(wú)殘留菌球,排放的水清澈無(wú)污物。清洗完畢后,檢查發(fā)酵罐的各個(gè)部件和控制系
統(tǒng)及氣密性,合格后方能開(kāi)始工作。
7.5.2生產(chǎn)線空消
生產(chǎn)線在初次使用、長(zhǎng)期未使用、上一次發(fā)酵生產(chǎn)出現(xiàn)污染雜菌或者更換生產(chǎn)品種時(shí),應(yīng)清洗干凈
并進(jìn)行空消滅菌。將蒸汽通入生產(chǎn)線所有設(shè)備和管道,對(duì)發(fā)酵罐以及各路閥門、管道及相關(guān)附件進(jìn)行徹
底滅菌,蒸汽壓力為0.1MPa~0.15MPa、溫度121℃~124℃、滅菌30min~40min。
7.5.3液體菌種培養(yǎng)基配制
配方見(jiàn)附錄A。
7.5.4投料與定容
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將配置好的培養(yǎng)基通過(guò)充氣壓力將培養(yǎng)料壓入到發(fā)酵罐內(nèi),用水定容至發(fā)酵罐罐體容量的60%,最
后加入0.06%消泡劑,通過(guò)壓縮空氣通氣攪拌2min~3min,混合均勻。
7.5.5發(fā)酵罐實(shí)消
通入蒸汽對(duì)發(fā)酵罐及其罐內(nèi)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓滅菌,保持罐內(nèi)溫度121℃,維持60min。
7.5.6冷卻
打開(kāi)排氣線路開(kāi)關(guān)自動(dòng)降壓至罐內(nèi)壓力為0.03Mpa左右時(shí),打開(kāi)進(jìn)氣閥門攪拌;先打開(kāi)自來(lái)水進(jìn)入
夾層冷卻至30℃后,再連接打開(kāi)恒溫循環(huán)水進(jìn)、出開(kāi)關(guān),繼續(xù)降溫,直至降溫至該品種適宜的培養(yǎng)溫
度。維持壓力平穩(wěn),防止罐壓回零。
7.5.7接種
發(fā)酵罐接種口處放置帶有手柄的接種火焰圈,蘸上95%的酒精,套在接種口上點(diǎn)燃火焰圈,在火焰
上方打開(kāi)搖瓶液體菌種瓶塞,用火焰灼燒瓶口30s~40s,打開(kāi)發(fā)酵罐上的接種口蓋,將搖瓶液體菌種
快速倒入發(fā)酵罐中,迅速蓋好并擰緊接種口,開(kāi)始發(fā)酵生產(chǎn)。
7.5.8培養(yǎng)條件
發(fā)酵罐溫度保持在22℃~24℃,發(fā)酵罐罐內(nèi)壓力保持在0.03MPa。
7.5.9培養(yǎng)時(shí)間
培養(yǎng)時(shí)間為6d~8d。
7.5.10放罐指標(biāo)
經(jīng)鏡檢和其他理化指標(biāo)等方法檢驗(yàn)質(zhì)量合格,符合本文件8.2.3規(guī)定要求即可放罐接種。
固體栽培種生產(chǎn)
除接種,其他步驟同本文件6.5固體栽培種生產(chǎn)。
接種:在接種區(qū)用接種器將液體菌種注入,每袋(瓶)接種量為50ml~80ml。移至發(fā)菌室培養(yǎng)。
8菌種質(zhì)量
見(jiàn)附錄B。
9生產(chǎn)檔案
建立生產(chǎn)檔案,對(duì)蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)過(guò)程、包裝及流向進(jìn)行詳細(xì)記錄,具體參見(jiàn)附錄C。原始記錄至
少保存2年。
10標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施及評(píng)價(jià)
通過(guò)各級(jí)食用菌協(xié)會(huì)和龍頭企業(yè)、合作社進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)推廣應(yīng)用,加快標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施。積極利用網(wǎng)絡(luò)媒
體、技術(shù)培訓(xùn)和現(xiàn)場(chǎng)指導(dǎo)等形式對(duì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行宣貫實(shí)施。相關(guān)示范基地和生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)培訓(xùn)與考
核,切實(shí)按標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行生產(chǎn),實(shí)施質(zhì)量追溯管理。
6
DB42/T2447—2025
本標(biāo)準(zhǔn)主要適用于天麻栽培用蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn),為確保標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施方案的全面性和科學(xué)性,需組織
涉及食用菌生產(chǎn)領(lǐng)域的栽培、加工、管理和科研人員共同制定和修改標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施方案。加強(qiáng)政策扶持引領(lǐng),
積極推動(dòng)現(xiàn)有政策、資金、人才資源為標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施提供保障。
本標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施對(duì)象為天麻栽培用蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)合作社或企業(yè),需增強(qiáng)技術(shù)培訓(xùn)的靈活性,切實(shí)根
據(jù)企業(yè)和農(nóng)戶實(shí)際需求開(kāi)展現(xiàn)場(chǎng)指導(dǎo)、培訓(xùn),及時(shí)跟蹤反饋,促進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)順利實(shí)施。
本標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施落實(shí)了農(nóng)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)的新要求,積極推進(jìn)品種培優(yōu)、品質(zhì)提升、品牌打造和標(biāo)準(zhǔn)
化生產(chǎn),提高湖北省天麻栽培用蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)化水平,促進(jìn)蜜環(huán)菌和天麻產(chǎn)業(yè)規(guī)?;?biāo)準(zhǔn)化、
規(guī)范化發(fā)展,提升產(chǎn)區(qū)定價(jià)權(quán),增加經(jīng)濟(jì)效益。
標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施后,逐條檢查標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施方案的落實(shí)情況,記錄未實(shí)施內(nèi)容的原因。檢查標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施的支持
手段和物質(zhì)條件的落實(shí)情況,做好標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施驗(yàn)證記錄,確保標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施信息采集和反饋渠道暢通,定期整
理和處理收集到的意見(jiàn)和建議。
標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施一定時(shí)間后,對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施方案,從技術(shù)進(jìn)步、質(zhì)量水平提高、客戶滿意度、規(guī)范秩序、
效率提高、節(jié)約費(fèi)用、節(jié)省時(shí)間、履行社會(huì)責(zé)任等方面進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施效果評(píng)價(jià)分析??偨Y(jié)實(shí)施經(jīng)驗(yàn)成效,
梳理存在的薄弱環(huán)節(jié),評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施帶來(lái)的問(wèn)題,為未來(lái)改進(jìn)提供參考。
適時(shí)向湖北省園藝作物標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)和湖北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳反饋情況,提出關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)推廣、修
改、補(bǔ)充、完善或廢止等方面的意見(jiàn)和建議。
標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施信息及意見(jiàn)反饋表詳見(jiàn)附錄D。
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附錄A
(資料性)
蜜環(huán)菌菌種培養(yǎng)基配方
表A.1給出了蜜環(huán)菌母種培養(yǎng)基配方。
表A.1蜜環(huán)菌母種培養(yǎng)基配方表
玉米微粉豆粕微粉葡萄糖磷酸二氫鉀硫酸鎂瓊脂水
5g10g20g1g0.5g20g1000ml
表A.2給出蜜環(huán)菌固體原種培養(yǎng)基配方。
表A.2蜜環(huán)菌固體原種培養(yǎng)基配方表
木屑麩皮白糖石膏棉籽殼豆粕玉米粉
68%20%1%1%/5%5%
58%20%1%1%10%5%5%
表A.3給出蜜環(huán)菌栽培種培養(yǎng)基配方。
表A.3蜜環(huán)菌固體栽培種培養(yǎng)基配方表
木屑麩皮白糖石膏棉籽殼玉米粉
78%20%1%1%//
68%20%1%1%10%/
78%/1%1%10%10%
表A.4給出蜜環(huán)菌液體菌種培養(yǎng)基配方。
表A.4蜜環(huán)菌液體菌種培養(yǎng)基配方表
豆粕玉米粉葡萄糖硫酸鎂磷酸二氫鉀纖維素鈉消泡劑
1.50%0.50%2.00%0.10%1.00%0.40%0.06%
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附錄B
(資料性)
蜜環(huán)菌菌種感官要求
表B.1、B.2、B.3分別給出了不同菌種感官指標(biāo)要求。
表B.1母種感官要求
項(xiàng)目要求
接種塊大小3mm3-5mm3
菌絲生長(zhǎng)量菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)基
菌絲特征菌絲前期白色、濃密、短絨毛狀,后期形成褐色菌皮
分泌物無(wú)
霉菌與細(xì)菌菌落無(wú)
斜面背面外觀培養(yǎng)基不干縮,顏色均勻、無(wú)暗斑
氣味有蜜環(huán)菌菌種特有的香味,無(wú)酸、臭、霉等異味
表B.2液體菌種感官指標(biāo)要求
項(xiàng)目要求檢驗(yàn)方法
色澤菌絲體灰白色,濾液棕黃,清澈透亮肉眼觀察
菌液外觀形態(tài)有大量刺球狀、絮狀、片狀菌絲體,分布均勻肉眼觀察
雜菌菌絲無(wú)肉眼觀察,檢測(cè)
氣味有蜜環(huán)菌菌種特有的香味,無(wú)酸、臭、霉、甜等異味鼻嗅
表B.3固體原種及栽培種感官要求
項(xiàng)目要求
菌絲生長(zhǎng)量長(zhǎng)滿容器
瓶裝菌絲淺黃白色,瓶口部稍有黑褐色菌皮;袋裝菌種淺黃白色至黑
菌絲特征
褐色。生長(zhǎng)均勻一致
培養(yǎng)基及菌絲體緊貼容器壁,無(wú)干縮、變軟
表面分泌物有少量無(wú)色或淺黃色水珠
拮抗現(xiàn)象無(wú)
雜菌菌落無(wú)
螨蟲無(wú)
氣味有蜜環(huán)菌菌種特有的香味,無(wú)酸、臭、霉等異味
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附錄C
(資料性)
蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)檔案
表C.1、C.2分別給出了蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)情況及出庫(kù)記錄相關(guān)信息。
表C.1蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)情況記錄表
日期菌種編號(hào)生產(chǎn)活動(dòng)內(nèi)容投入品內(nèi)容使用量使用設(shè)備操作人技術(shù)負(fù)責(zé)人
表C.2蜜環(huán)菌栽培種出庫(kù)記錄表
批次號(hào)菌種編號(hào)出庫(kù)日期數(shù)量采購(gòu)方備注
10
DB42/T2447—2025
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