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文檔簡(jiǎn)介

ICS65.020.20

CCSB39

DB42

湖北省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB42/T2447—2025

天麻栽培用蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

CodeofpracticeforproductionofArmillariamelleastrainsusedin

Gastrodiaelatacultivation

2025-11-07發(fā)布2026-01-07實(shí)施

湖北省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB42/T2447—2025

目次

前言................................................................................III

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語(yǔ)和定義.........................................................................1

4生產(chǎn)條件...........................................................................2

5菌種類型...........................................................................2

6固體原種生產(chǎn)固體栽培種.............................................................2

7液體原種生產(chǎn)固體栽培種.............................................................4

8菌種質(zhì)量...........................................................................6

9生產(chǎn)檔案...........................................................................6

10標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施及評(píng)價(jià)....................................................................6

附錄A(資料性)蜜環(huán)菌菌種培養(yǎng)基配方.................................................8

附錄B(資料性)蜜環(huán)菌菌種感官要求...................................................9

附錄C(資料性)蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)檔案..................................................10

附錄D(資料性)湖北省地方標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施信息及意見(jiàn)反饋表..................................11

參考文獻(xiàn).............................................................................12

I

DB42/T2447—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。

本文件由宜昌市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院提出。

本文件由湖北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳歸口。

本文件起草單位:宜昌市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院、湖北省農(nóng)科院經(jīng)濟(jì)作物研究所、三峽大學(xué)、湖北森源生

態(tài)科技有限責(zé)任公司、五峰博翎種業(yè)有限公司、宜昌銀罡桑蠶科技股份有限公司

本文件主要起草人:申露露、李克彬、劉世玲、周剛、夏輝、馮德品、張順凱、朱紅、焦海濤、朱

仲龍、王卓仁、沈祥陵、劉陽(yáng)、桑子陽(yáng)、溫鑫、史高睿、曾媛。

本文件實(shí)施應(yīng)用中的疑問(wèn),可咨詢湖北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳,聯(lián)系電話郵箱:

hbsnab@126.com;或者宜昌市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,聯(lián)系電話郵箱:52074193@。

對(duì)本文件的有關(guān)修改意見(jiàn)建議請(qǐng)反饋至湖北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳,聯(lián)系電話郵箱:

hbsnab@126.com;或者湖北省市場(chǎng)監(jiān)督管理局,聯(lián)系電話郵箱:hb_zlc@163.com。

III

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天麻栽培用蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了天麻[GastrodiaelataBlume]栽培用蜜環(huán)菌[Armillariamellea(Vahl)P.Kumm.]

菌種的生產(chǎn)條件、液體菌種生產(chǎn)技術(shù)、固體菌種生產(chǎn)技術(shù)、菌種質(zhì)量等。

本文件適用于湖北省天麻栽培用蜜環(huán)菌菌種的生產(chǎn),其他生態(tài)條件類似區(qū)域可參照?qǐng)?zhí)行。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本

文件。

GB/T12728食用菌術(shù)語(yǔ)

GB/T37671金針菇菌種

NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

NY/T1742食用菌菌種通用技術(shù)要求

3術(shù)語(yǔ)和定義

GB/T12728及GB/T37671界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

天麻栽培用蜜環(huán)菌ArmillariamelleausedinGastrodiaelatacultivation

為天麻塊莖生長(zhǎng)提供基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)的共生真菌,隸屬擔(dān)子菌門(Basidiomycota)、傘菌綱

(Agaricomycetes)、傘菌目(Agaricales)、泡頭菌科(Physalacriaceae)、蜜環(huán)菌屬(Armillaria)。

固體菌種solidspawn

生長(zhǎng)在固體培養(yǎng)料上的菌種。

[來(lái)源:GB/T12728-2006,2.5.31]

液體菌種liquidspawn

培養(yǎng)基為液體狀態(tài)的菌種。

[來(lái)源:GB/T12728-2006,2.5.30]

母種stockculture

經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物,也稱一級(jí)種、試管種。

[來(lái)源:GB/T12728-2006,2.5.7]

原種motherspawn

由母種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物,也稱二級(jí)種。

[來(lái)源:GB/T12728-2006,2.5.8]

1

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栽培種spawn

由原種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物,也稱三級(jí)種。

[來(lái)源:GB/T12728-2006,2.5.9]

搖瓶液體菌種liquidspawnculturingbyshakerflask

由母種移植到液體培養(yǎng)基中在搖床上恒溫震蕩擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。

[來(lái)源:GB/T37671-2019,3.13]

發(fā)酵罐液體菌種liquidspawnculturingbyfermentationtank

由搖瓶液體菌種移植到發(fā)酵罐液體培養(yǎng)基中恒溫培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。

[來(lái)源:GB/T37671-2019,3.14]

4生產(chǎn)條件

人員條件

按照《湖北省食用菌菌種管理辦法》的規(guī)定,配備熟悉菌種生產(chǎn)和設(shè)備設(shè)施的操作、掌握蜜環(huán)菌菌

種基礎(chǔ)知識(shí)及生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程的菌種生產(chǎn)專業(yè)技術(shù)人員。

場(chǎng)地選擇

生產(chǎn)場(chǎng)地選擇及其周邊環(huán)境衛(wèi)生應(yīng)符合NY/T528的規(guī)定。

廠房要求

廠房設(shè)置與布局符合NY/T528要求。

生產(chǎn)設(shè)備與設(shè)施

設(shè)備與設(shè)施符合NY/T528要求。

5菌種類型

根據(jù)來(lái)源、繁殖代數(shù)與生產(chǎn)目的分為母種、原種、栽培種。

根據(jù)菌種基質(zhì)形態(tài)分為固體菌種和液體菌種。

6固體原種生產(chǎn)固體栽培種

生產(chǎn)流程圖

固體原種生產(chǎn)固體栽培種工藝流程見(jiàn)圖1。

2

DB42/T2447—2025

圖1固體原種生產(chǎn)固體栽培種工藝流程

品種選擇

使用傳代穩(wěn)定、品質(zhì)優(yōu)良、產(chǎn)量高、抗逆性強(qiáng)的蜜環(huán)菌品種。

母種制備

配方見(jiàn)附錄A,符合NY/T528要求。

固體原種生產(chǎn)

6.4.1原料要求

選擇滿足蜜環(huán)菌菌種生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)需求的原料,符合NY/T1742要求。

6.4.2培養(yǎng)基制備

配方見(jiàn)附錄A。按照生產(chǎn)數(shù)量和配方中各原輔材料的比例稱重,加水充分混合均勻。

6.4.3裝袋(瓶)

配料完成后及時(shí)裝袋(瓶)滅菌。裝袋松緊適中,袋(瓶)口清理干凈并扎緊,無(wú)破損漏氣。宜采

用機(jī)械裝袋和扎口。菌袋宜選用聚丙烯17cm×33cm折角封口袋。菌種瓶與所用設(shè)備相匹配。

6.4.4滅菌

采用常壓或高壓蒸汽滅菌。常壓滅菌時(shí)一般溫度達(dá)100℃保持12h~16h。微高壓滅菌時(shí)一般在0.11

Mpa、116℃左右,保持4h~6h。

6.4.5冷卻

將滅菌后的袋料運(yùn)送至消毒過(guò)的冷卻室或接種室,冷卻至25℃以下后即可接種。

6.4.6接種

使用試管母種進(jìn)行接種,做好接種室及接種設(shè)備的消毒工作。

3

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6.4.7培養(yǎng)條件

22℃±2℃避光恒溫培養(yǎng)。

6.4.8清理雜菌

接種15d后第一次清雜,菌絲長(zhǎng)滿菌袋2/3時(shí)第二次清雜,菌絲長(zhǎng)滿后打包運(yùn)輸前第三次清雜。

6.4.9培養(yǎng)時(shí)間

培養(yǎng)40d~60d。

固體栽培種生產(chǎn)

與本文件6.4固體原種生產(chǎn)流程相同,其中制備培養(yǎng)基配方詳見(jiàn)附錄B。

7液體原種生產(chǎn)固體栽培種

生產(chǎn)流程圖

液體原種生產(chǎn)固體栽培種工藝流程見(jiàn)圖2。

注1:發(fā)酵罐液體原種生產(chǎn);

注2:固體栽培種生產(chǎn)。

圖2液體原種生產(chǎn)固體栽培種工藝流程

4

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品種選擇

使用傳代穩(wěn)定、品質(zhì)優(yōu)良、產(chǎn)量高、抗逆性強(qiáng)的蜜環(huán)菌品種。

母種制備

見(jiàn)本文件6.3。

搖瓶液體菌種制備

7.4.1容器標(biāo)準(zhǔn)

采用1000ml的錐形瓶,錐形瓶應(yīng)保持清潔、干燥。

7.4.2裝液量

按照錐形瓶容積的40%~60%裝量系數(shù)裝液,使用帶有透氣功能的封口膜封口。

7.4.3搖瓶液體菌種培養(yǎng)基配方

配方見(jiàn)附錄A

7.4.4滅菌

高壓蒸汽滅菌,在121℃,0.11MPa~0.12MPa壓力下,維持30min。

7.4.5接種

待滅菌后裝有培養(yǎng)基的錐形瓶冷卻至25℃以下,在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行接種。每瓶接入直徑0.5cm活

化好的平板母種3塊~5塊。

7.4.6培養(yǎng)

將接種后的錐形瓶放入搖床進(jìn)行避光振蕩培養(yǎng),保持溫度22℃~24℃,轉(zhuǎn)速150r/min~170r/min,

培養(yǎng)7d~9d。

發(fā)酵罐液體原種生產(chǎn)

7.5.1生產(chǎn)前的檢查及清洗

發(fā)酵罐在使用之前要進(jìn)行徹底的清洗,除去罐內(nèi)的污物。洗罐水由罐底排污管道排出。清洗的標(biāo)準(zhǔn)

為罐內(nèi)壁無(wú)懸掛物,無(wú)殘留菌球,排放的水清澈無(wú)污物。清洗完畢后,檢查發(fā)酵罐的各個(gè)部件和控制系

統(tǒng)及氣密性,合格后方能開(kāi)始工作。

7.5.2生產(chǎn)線空消

生產(chǎn)線在初次使用、長(zhǎng)期未使用、上一次發(fā)酵生產(chǎn)出現(xiàn)污染雜菌或者更換生產(chǎn)品種時(shí),應(yīng)清洗干凈

并進(jìn)行空消滅菌。將蒸汽通入生產(chǎn)線所有設(shè)備和管道,對(duì)發(fā)酵罐以及各路閥門、管道及相關(guān)附件進(jìn)行徹

底滅菌,蒸汽壓力為0.1MPa~0.15MPa、溫度121℃~124℃、滅菌30min~40min。

7.5.3液體菌種培養(yǎng)基配制

配方見(jiàn)附錄A。

7.5.4投料與定容

5

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將配置好的培養(yǎng)基通過(guò)充氣壓力將培養(yǎng)料壓入到發(fā)酵罐內(nèi),用水定容至發(fā)酵罐罐體容量的60%,最

后加入0.06%消泡劑,通過(guò)壓縮空氣通氣攪拌2min~3min,混合均勻。

7.5.5發(fā)酵罐實(shí)消

通入蒸汽對(duì)發(fā)酵罐及其罐內(nèi)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓滅菌,保持罐內(nèi)溫度121℃,維持60min。

7.5.6冷卻

打開(kāi)排氣線路開(kāi)關(guān)自動(dòng)降壓至罐內(nèi)壓力為0.03Mpa左右時(shí),打開(kāi)進(jìn)氣閥門攪拌;先打開(kāi)自來(lái)水進(jìn)入

夾層冷卻至30℃后,再連接打開(kāi)恒溫循環(huán)水進(jìn)、出開(kāi)關(guān),繼續(xù)降溫,直至降溫至該品種適宜的培養(yǎng)溫

度。維持壓力平穩(wěn),防止罐壓回零。

7.5.7接種

發(fā)酵罐接種口處放置帶有手柄的接種火焰圈,蘸上95%的酒精,套在接種口上點(diǎn)燃火焰圈,在火焰

上方打開(kāi)搖瓶液體菌種瓶塞,用火焰灼燒瓶口30s~40s,打開(kāi)發(fā)酵罐上的接種口蓋,將搖瓶液體菌種

快速倒入發(fā)酵罐中,迅速蓋好并擰緊接種口,開(kāi)始發(fā)酵生產(chǎn)。

7.5.8培養(yǎng)條件

發(fā)酵罐溫度保持在22℃~24℃,發(fā)酵罐罐內(nèi)壓力保持在0.03MPa。

7.5.9培養(yǎng)時(shí)間

培養(yǎng)時(shí)間為6d~8d。

7.5.10放罐指標(biāo)

經(jīng)鏡檢和其他理化指標(biāo)等方法檢驗(yàn)質(zhì)量合格,符合本文件8.2.3規(guī)定要求即可放罐接種。

固體栽培種生產(chǎn)

除接種,其他步驟同本文件6.5固體栽培種生產(chǎn)。

接種:在接種區(qū)用接種器將液體菌種注入,每袋(瓶)接種量為50ml~80ml。移至發(fā)菌室培養(yǎng)。

8菌種質(zhì)量

見(jiàn)附錄B。

9生產(chǎn)檔案

建立生產(chǎn)檔案,對(duì)蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)過(guò)程、包裝及流向進(jìn)行詳細(xì)記錄,具體參見(jiàn)附錄C。原始記錄至

少保存2年。

10標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施及評(píng)價(jià)

通過(guò)各級(jí)食用菌協(xié)會(huì)和龍頭企業(yè)、合作社進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)推廣應(yīng)用,加快標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施。積極利用網(wǎng)絡(luò)媒

體、技術(shù)培訓(xùn)和現(xiàn)場(chǎng)指導(dǎo)等形式對(duì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行宣貫實(shí)施。相關(guān)示范基地和生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)培訓(xùn)與考

核,切實(shí)按標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行生產(chǎn),實(shí)施質(zhì)量追溯管理。

6

DB42/T2447—2025

本標(biāo)準(zhǔn)主要適用于天麻栽培用蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn),為確保標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施方案的全面性和科學(xué)性,需組織

涉及食用菌生產(chǎn)領(lǐng)域的栽培、加工、管理和科研人員共同制定和修改標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施方案。加強(qiáng)政策扶持引領(lǐng),

積極推動(dòng)現(xiàn)有政策、資金、人才資源為標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施提供保障。

本標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施對(duì)象為天麻栽培用蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)合作社或企業(yè),需增強(qiáng)技術(shù)培訓(xùn)的靈活性,切實(shí)根

據(jù)企業(yè)和農(nóng)戶實(shí)際需求開(kāi)展現(xiàn)場(chǎng)指導(dǎo)、培訓(xùn),及時(shí)跟蹤反饋,促進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)順利實(shí)施。

本標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施落實(shí)了農(nóng)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)的新要求,積極推進(jìn)品種培優(yōu)、品質(zhì)提升、品牌打造和標(biāo)準(zhǔn)

化生產(chǎn),提高湖北省天麻栽培用蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)化水平,促進(jìn)蜜環(huán)菌和天麻產(chǎn)業(yè)規(guī)?;?biāo)準(zhǔn)化、

規(guī)范化發(fā)展,提升產(chǎn)區(qū)定價(jià)權(quán),增加經(jīng)濟(jì)效益。

標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施后,逐條檢查標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施方案的落實(shí)情況,記錄未實(shí)施內(nèi)容的原因。檢查標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施的支持

手段和物質(zhì)條件的落實(shí)情況,做好標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施驗(yàn)證記錄,確保標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施信息采集和反饋渠道暢通,定期整

理和處理收集到的意見(jiàn)和建議。

標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施一定時(shí)間后,對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施方案,從技術(shù)進(jìn)步、質(zhì)量水平提高、客戶滿意度、規(guī)范秩序、

效率提高、節(jié)約費(fèi)用、節(jié)省時(shí)間、履行社會(huì)責(zé)任等方面進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施效果評(píng)價(jià)分析??偨Y(jié)實(shí)施經(jīng)驗(yàn)成效,

梳理存在的薄弱環(huán)節(jié),評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施帶來(lái)的問(wèn)題,為未來(lái)改進(jìn)提供參考。

適時(shí)向湖北省園藝作物標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)和湖北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳反饋情況,提出關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)推廣、修

改、補(bǔ)充、完善或廢止等方面的意見(jiàn)和建議。

標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施信息及意見(jiàn)反饋表詳見(jiàn)附錄D。

7

DB42/T2447—2025

附錄A

(資料性)

蜜環(huán)菌菌種培養(yǎng)基配方

表A.1給出了蜜環(huán)菌母種培養(yǎng)基配方。

表A.1蜜環(huán)菌母種培養(yǎng)基配方表

玉米微粉豆粕微粉葡萄糖磷酸二氫鉀硫酸鎂瓊脂水

5g10g20g1g0.5g20g1000ml

表A.2給出蜜環(huán)菌固體原種培養(yǎng)基配方。

表A.2蜜環(huán)菌固體原種培養(yǎng)基配方表

木屑麩皮白糖石膏棉籽殼豆粕玉米粉

68%20%1%1%/5%5%

58%20%1%1%10%5%5%

表A.3給出蜜環(huán)菌栽培種培養(yǎng)基配方。

表A.3蜜環(huán)菌固體栽培種培養(yǎng)基配方表

木屑麩皮白糖石膏棉籽殼玉米粉

78%20%1%1%//

68%20%1%1%10%/

78%/1%1%10%10%

表A.4給出蜜環(huán)菌液體菌種培養(yǎng)基配方。

表A.4蜜環(huán)菌液體菌種培養(yǎng)基配方表

豆粕玉米粉葡萄糖硫酸鎂磷酸二氫鉀纖維素鈉消泡劑

1.50%0.50%2.00%0.10%1.00%0.40%0.06%

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附錄B

(資料性)

蜜環(huán)菌菌種感官要求

表B.1、B.2、B.3分別給出了不同菌種感官指標(biāo)要求。

表B.1母種感官要求

項(xiàng)目要求

接種塊大小3mm3-5mm3

菌絲生長(zhǎng)量菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)基

菌絲特征菌絲前期白色、濃密、短絨毛狀,后期形成褐色菌皮

分泌物無(wú)

霉菌與細(xì)菌菌落無(wú)

斜面背面外觀培養(yǎng)基不干縮,顏色均勻、無(wú)暗斑

氣味有蜜環(huán)菌菌種特有的香味,無(wú)酸、臭、霉等異味

表B.2液體菌種感官指標(biāo)要求

項(xiàng)目要求檢驗(yàn)方法

色澤菌絲體灰白色,濾液棕黃,清澈透亮肉眼觀察

菌液外觀形態(tài)有大量刺球狀、絮狀、片狀菌絲體,分布均勻肉眼觀察

雜菌菌絲無(wú)肉眼觀察,檢測(cè)

氣味有蜜環(huán)菌菌種特有的香味,無(wú)酸、臭、霉、甜等異味鼻嗅

表B.3固體原種及栽培種感官要求

項(xiàng)目要求

菌絲生長(zhǎng)量長(zhǎng)滿容器

瓶裝菌絲淺黃白色,瓶口部稍有黑褐色菌皮;袋裝菌種淺黃白色至黑

菌絲特征

褐色。生長(zhǎng)均勻一致

培養(yǎng)基及菌絲體緊貼容器壁,無(wú)干縮、變軟

表面分泌物有少量無(wú)色或淺黃色水珠

拮抗現(xiàn)象無(wú)

雜菌菌落無(wú)

螨蟲無(wú)

氣味有蜜環(huán)菌菌種特有的香味,無(wú)酸、臭、霉等異味

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附錄C

(資料性)

蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)檔案

表C.1、C.2分別給出了蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)情況及出庫(kù)記錄相關(guān)信息。

表C.1蜜環(huán)菌菌種生產(chǎn)情況記錄表

日期菌種編號(hào)生產(chǎn)活動(dòng)內(nèi)容投入品內(nèi)容使用量使用設(shè)備操作人技術(shù)負(fù)責(zé)人

表C.2蜜環(huán)菌栽培種出庫(kù)記錄表

批次號(hào)菌種編號(hào)出庫(kù)日期數(shù)量采購(gòu)方備注

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