臨床前動物安評的管理

臨床前動物安評的具體內(nèi)容和要求3

CRO的質(zhì)量管理

1臨床前動物安評相關法規(guī)

4

文件管理

內(nèi)容提要221、

臨床前動物安評相關法規(guī)3臨床前動物安評試驗的目的：臨床試驗前動物安評試驗，即非臨床研究

，主要是通過相關動物模型來考察產(chǎn)品的安全性和有效性，以及臨床相關參數(shù)的確定

，預測其在人群中使用時可能出現(xiàn)的不良事件，

降低臨床試驗受試者和臨床使用者承擔的風險

，并為臨床試驗方案的制定提供依據(jù)。4臨床前動物安評實驗的目的提前發(fā)現(xiàn)潛在安全性問題通過動物安評試驗

，可以在疫苗開發(fā)早期階段發(fā)現(xiàn)潛在的安全性問題，并及時調(diào)整或規(guī)避，避免后期進入臨床試驗階段才發(fā)現(xiàn)問題，導致時間和資源的浪費。為臨床試驗提供重要依據(jù)疫苗的非臨床研究可以為臨床試驗的免疫程序、免疫劑量、免疫應答時間及持續(xù)時間等提供參考依據(jù)。疫苗注冊審批的重要依據(jù)在疫苗上市審批過程中，非臨床研究數(shù)據(jù)是關鍵的參考依據(jù)之一，它可以幫助監(jiān)管機構(gòu)評估疫苗的安全性和有效性，確保疫苗的質(zhì)量和安全性。疫苗的有效性通過非臨床研究

，通過免疫原性和攻毒保護力試驗，可以考察疫苗的有效性，疫苗有效性的評估。5臨床前動物安評實驗的重要性機構(gòu)標題頒布時間WHO疫苗非臨床評估指南2005年WHO疫苗佐劑和佐劑疫苗的非臨床評價指南2013年EMA疫苗臨床前藥理和毒理學測試指導說明1995

年EMA人用疫苗佐劑指南2005年美國食品藥品管理局行業(yè)指南：傳染病適應癥的預防性和治療性疫苗發(fā)展毒性研究的考慮因素2006年6國外相關法規(guī)7l

《預防用生物制品臨床前安全性評價技術審

評一般原則》l

《聯(lián)合疫苗臨床前和臨床研究技術指導原則》l

《預防用疫苗臨床前研究技術指導原則》l

《藥物安全藥理學研究技術指導原則》l

《藥物單次給藥毒性研究技術指導原則》l

《藥物重復給藥毒性研究技術指導原則》l

《藥物非臨床安全性評價供試品檢測要求的

Q&A》l

《藥物毒代動力學研究技術指導原則》l

《藥物免疫原性研究技術指導原則》l

《基于動物法則的藥物研究技術指導原則

（試行）

》n

《中華人民共和國藥品管理法》n

《中華人民共和國藥品管理法實施條例》n

《藥品注冊管理辦法》n

《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》n

《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范認證管理辦法》n

《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范檢查要點和判定原則》（2023年第7號）國內(nèi)相關法規(guī)8相關法規(guī)1.非臨床試驗的階段性要求，可參考ICH

M3

，S6

，S9指導原則。2.CTD非臨床資料內(nèi)容：n

模塊

2：

2.4非臨床綜述：綜合分析試驗結(jié)果的臨床相關性、與藥品質(zhì)量方面的關聯(lián)以及對藥物安全使用的提示。

2.6非臨床文字總結(jié)和列表總結(jié)：是對非臨床藥理學、藥動學、毒理學試驗內(nèi)容和結(jié)果的逐項總結(jié)，包括文字總結(jié)和列表總結(jié)，提供非臨床數(shù)據(jù)全面真實概況。n

模塊4：包含所有的非臨床研究報告，是具體的基礎性信息。9ICH相關法規(guī)2、

臨床前動物安評的具體內(nèi)容和要求10程老非臨床與其他研究的關系藥學臨床非臨床藥學影響因素：病毒滴度或純度、雜質(zhì)、理化特性、劑型；明確受試物信息，關注非臨床研究受試物能否代表臨床受

試物，若有變更，需要闡明產(chǎn)品質(zhì)量一致性。藥理與毒理建立在藥學的基礎上，藥理通常先于毒理研究，毒理設計必須依據(jù)藥效劑量藥理毒理必須了解擬臨床

用藥情況，依據(jù)臨床需要，配合進行研究，為臨床提

供必不可少的依據(jù)12安評批的制備檢測方法的建立CRO選擇與確定方案設計非臨床稽查進展溝通問題處理總結(jié)報告溝通準備工作非臨床試驗總結(jié)報告具體內(nèi)容文檔審查歸檔13程第一步：明確自身的需求第二步：明確CRO完成的任務范圍和目標第三步：候選3家左右CRO名單理想的CRO：按時提供有質(zhì)量的實驗結(jié)果，并有合理的服務價格，能嚴格執(zhí)行國家法規(guī)、GLP及SOP，及時發(fā)現(xiàn)問題和解決問題，定期匯報工作進度。第四步：CRO評估與確定公司組織結(jié)構(gòu)圖、項目團隊項目經(jīng)理及人員資質(zhì)情況團隊在該領域的經(jīng)驗、項目管理情況文件管理情況，是否有健全的文件管理體系？設備管理情況，是否有符合GLP要求的設備管理體系數(shù)據(jù)管理情況，是否符合GLP

要求？是否有統(tǒng)計分析能力？重點是人員資質(zhì)，應簽署清晰規(guī)范明確雙方責任的合同。CRO的選擇與確定n

把握藥理毒理評價的系統(tǒng)性n

充分暴露毒性n

具體問題具體分析n

執(zhí)行GLP（藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范）n

把握非臨床安全性評價的一般考慮n

理解法規(guī)附件相關要求的科學和管理背景n

理解技術指導原則相關要求的科學背景n

結(jié)合品種特點具體分析14非臨床評價基本原則u生物制品具有明顯的質(zhì)量控制特點和生物學特點，這是確立該類產(chǎn)品非臨床安全性評價特殊性的基礎。在非臨床試驗中應遵循具體品種具體分析的原則。應滿足毒理學研究目的的要求，并結(jié)合具體臨床適應癥特點評價其對臨床開發(fā)的價值。n

生物制品安全性擔憂的性質(zhì)和來源；n

受試物的質(zhì)量要求；n

相關動物種屬/模型的選擇；n

動物數(shù)量/給藥劑量的確定；n

產(chǎn)品的生物活性和免疫原性/毒性等特征15非臨床評價的主要考慮n

科學的，“case-by-case”

的設計思路n

通過藥理作用來選擇相關動物n

可采用一種動物n

免疫原性非常重要n

生殖毒性通常不要求n

遺傳毒性通常不要求n

代謝研究通常不要求n

致癌性試驗通常不要求免疫原性研究攻毒保護力試驗急性毒性長期毒性16藥理研究毒理研究疫苗非臨床研究具體內(nèi)容非臨床研究n

藥理試驗是研究藥物治療范圍內(nèi)或治療范圍以上劑量時，潛在的不期望出現(xiàn)的對生理功能的不良影響。該試驗可以單獨設計,也可以并入毒性試驗的設

計中去。n

毒性試驗包括單次給藥、重復給藥的毒性試驗、免疫毒性試驗、安全藥理學試驗（往往伴隨進行）、各種刺激試驗及特殊毒性試驗等。單次給藥能反映系統(tǒng)或/和局部的毒性與劑量的關系,也可為長期毒性試驗劑量選擇提供依據(jù)。設計此試驗時應參考安全藥理學的有關試驗參數(shù)。17疫苗非臨床研究具體內(nèi)容受試疫苗的質(zhì)量要求：n

應采用能充分代表臨床試驗擬用樣品和/或上市樣品質(zhì)量和安全性的樣品；n

應采用工藝路線及關鍵工藝參數(shù)確定后的工藝制備，一般應為中試或中試

以上規(guī)模的樣品，否則應有充分的理由；n

應注明非臨床試驗樣品的名稱、來源、批號、含量（或規(guī)格）、保存條件、有效期及配制方法等，并提供質(zhì)量檢驗報告；n

試驗中所用對照樣品和/或佐劑應標明名稱、標準、批號、有效期、規(guī)格

及生產(chǎn)單位

18非臨床試驗樣品的質(zhì)量要求免疫劑量文獻資料查詢；試驗摸索；按體表面積劑量呼應：成人劑量←→動物劑量應與臨床相同，如確有困難，也可選用其他給藥途徑進行試驗，但應說明原因免疫途徑選擇相關動物最快捷、有效的方法就是參考國內(nèi)外的有關文獻,其次需要經(jīng)體外試驗篩選相關動物模型。結(jié)合抗體和中和抗體的檢測方法；抗原排毒檢測方法；取樣和檢測方法應驗證19盡量反映量效和／或時效關系

，支持臨床免疫程序的研究藥理研究設計的主要考慮選擇動物免疫程序檢測方法疫苗毒性研究中使用的動物模型的注意事項包括：動物模型的相關性免疫（免疫原性）反應的證明用于檢測免疫介導作用或內(nèi)在毒性的模型的敏感性歷史控制數(shù)據(jù)庫對特定物種/菌株的價值以及療效與臨床安全性數(shù)據(jù)的一致性疫苗是一類復雜多樣的生物產(chǎn)品

，

其中疫苗制劑不是最終的觸發(fā)成分

，

而免疫系統(tǒng)的要素是效應器。

因此

，

必須進行疫苗非臨床安全性研究

，

以評估疫苗的固有毒性

，

雜質(zhì)

，污染物或賦形劑的毒性

，

由于制劑成分相互作用引起的毒性以及與免疫反應相關的毒性。20選擇動物種屬/模型的注意事項nnlllln疫苗的非臨床評價時要選擇相關的動物種屬進行。疫苗的生物活性往往具有種屬和/或組織特異性，采用相關種屬進行非臨床研究有助于闡明其藥理學和毒理學特征；n選擇相關動物最快捷、有效的方法就是參考國內(nèi)外的有關文獻，

其次需要經(jīng)體外試驗篩選相關動物模型。n理想動物l

對受試物生物轉(zhuǎn)化與人體相近l

對受試物敏感l(wèi)

已有大量歷史對照數(shù)據(jù)l

來源、品系、遺傳背景清楚，符合等級要求,有動物質(zhì)量合格證l

創(chuàng)新藥一般2種以上，雌雄各半。生物制品多用大鼠和猴（種屬特異性可特殊）21動物種屬/模型的選擇單次給藥毒性試驗目的意義：

了解藥品急性毒性強度

計算藥品相對毒性參數(shù)

為臨床毒副反應監(jiān)護提供參考依據(jù)

為長期毒性、蓄積性毒性和特殊毒性試驗選擇劑量提供依據(jù)

其它方面（其他試驗、臨床研究）22毒理研究-單次給藥毒性試驗LD50試驗：指動物單次給藥后引起50％動物死亡的劑量。

LD50值的意義是：

LD50越小表示藥物的急性毒性越大。

動物：小鼠、大鼠等

動物與分組：一般5組；每組10只；雌、雄各半；試驗前禁食。

給藥途徑：臨床給藥途徑

陰性對照組

觀察14天

，進行大體解剖觀察

，如有改變-病理檢查

判斷安全范圍23毒理研究-單次給藥毒性試驗最大耐受量試驗（MTD）：指動物單次大劑量給藥或在24小時內(nèi)接受多次大劑量受試藥物后

，動物在短期內(nèi)出現(xiàn)的與藥物相關的毒性反應

，但是又不引起動物死亡的最大劑量

動物：小鼠、大鼠、犬等

動物數(shù)：小動物20只；大動物4只；雌、雄各半；試驗前動物應注意禁食

給藥途徑：臨床給藥途徑

陰性對照組

觀察14天

，進行大體解剖觀察

，如有改變

-病理檢查

判斷安全范圍24毒理研究對于新的疫苗

，

一般申請臨床試驗時需提供至少一種相關動物種屬的比臨床擬定接種次數(shù)多1次的重復給藥毒性試驗完整數(shù)據(jù)。一般根據(jù)不同種屬的免疫原性研究及保護力試驗結(jié)果確定相關的動物種屬。根據(jù)動物的免疫應答特征

，

疫苗一般給藥間隔為2-3周

，

以評價疫苗最大免疫應答下的毒性特征。重復給藥毒性試驗的免疫程序應與擬定臨床免疫程序相同

，符合疫苗免疫后產(chǎn)生抗體的過程

，

能充分暴露高抗體水平下的毒性。以評估毒性的可逆性和延遲毒性。

若疫苗含有新佐劑，如mRNA疫苗可能涉及新的遞送系統(tǒng)，

可伴隨重復給藥毒性試驗開展安全性重復給藥毒性試驗：是評價疫苗進入臨床試驗的關鍵性安全試驗。25恢復期一般觀察至末次給藥后2-3周。應根據(jù)疫苗特征及給藥期間的毒性表現(xiàn)

，適當延長恢復期，研究，或提供可支持疫苗佐劑用量的單獨的安全性證據(jù)。nnnnn毒理研究n

免疫原性試驗設計：

采用可進行統(tǒng)計學分析的動物數(shù)量開展試驗是藥效學研究的基本要求。

試驗中的免疫途徑和免疫劑次應模擬臨床擬定免疫途徑和免疫程序。

在多種動物種屬中評價受試物的免疫原性，

既可觀察有效性，也可為重復給藥毒性試驗提供

動物種屬選擇的依據(jù)。

對于伴隨在重復給藥毒性試驗中的免疫原性研究多用于提示毒性劑量下是否達到最大免疫反

應，或評價毒性反應的劑量相關性。n

佐劑

疫苗處方中加入佐劑以增強免疫原性，降低抗原使用量。含佐劑疫苗一般會比較疫苗原液與含佐劑制劑的免疫原性，闡明添加佐劑的必要性。

佐劑用量需開展研究

，或以符合《中國藥典》三部(2015版）

限度加入佐劑劑量。26藥理研究n

攻毒保護力試驗設計：

采用可進行統(tǒng)計學分析的動物數(shù)量開展試驗是藥效學研究的基本要求。

試驗中的免疫劑次應模擬臨床擬定免疫程序。

應根據(jù)疫苗免疫應答特征選擇最佳攻毒時間。

動物末次免疫后進行攻毒的間隔時間短

，

會導致疫苗不能充分誘導免疫應答。

應根據(jù)疫苗免疫應答特點和動物毒性表現(xiàn)等設計攻毒后的觀察時間

，

專家討論認為：

一般攻毒后至少7d達到病毒復制和組織損傷高峰。

有效性研究中每個單獨的試驗均應提供完整報告，

包括試驗時間、試驗機構(gòu)、

受試物信息、

具體試驗方案（分組、

動物只數(shù)、給藥方案等）、

試驗結(jié)果及相對應的具體研究數(shù)據(jù)。27藥理研究3、

CRO的質(zhì)量管理28可能會對CRO產(chǎn)生過度的依賴，會失去對部分某些研究的判斷和分析，不能進行系

統(tǒng)性評估。缺乏共同的遠景和目標，CRO不愿意去做為確保項目成功的必要的工作。失去對CRO的控制，經(jīng)常出現(xiàn)質(zhì)量問題和留下風險問題合同不完全，CRO的研究人員沒有把時間和精力花在該項目上，導致項目延期29對于非臨床CRO，我們面臨哪些風險?來自CRO的風險30制定明確的應急方案有效的評估?

建立合適的標準；?

收集材料和數(shù)據(jù)，客觀、及時的評價研究效果，最好能夠量化。確立共享觀念?留一些空間給CRO對業(yè)務需求變化做出及時的

反應。?留一部分資金作

為項目成功通過

IND注冊再付款

的資金。制定合適的監(jiān)督評估頻率?

根據(jù)進度和目標制定監(jiān)督和稽查

計劃制定交流與溝通的計劃?

定期的月報告?

偏差、變更的及

時溝通；條款，賦予CRO單方面終止合作的權利，規(guī)定終止研究和繼續(xù)研

究時的不同支付。?

對CRO采取相應的行動，比如CRO挪用項目資金，可以終止合同，并擁有研究CRO的合同管理出來成果的產(chǎn)權。?

設計適當?shù)慕K止《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范檢查要點和判定原則》

中檢查要點包括：l

GLP認證申請機構(gòu)或者GLP機構(gòu)的組織機構(gòu)和人員l

質(zhì)量保證l

設施l

實驗系統(tǒng)l

儀器設備和實驗材料l

受試物和對照品l

標準操作規(guī)程（SOP）l

研究工作的實施l

資料檔案l

計算機化系統(tǒng)等方面31CRO的質(zhì)量管理非臨床試驗試驗運行CRO的質(zhì)量管理硬件設施基礎條件軟件設施供試品和對照品管理實驗動物管理實驗數(shù)據(jù)管理SOP管理檔案管理法律法規(guī)遵從：從質(zhì)量協(xié)議中規(guī)定確保CRO在非臨床試驗中遵守《藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》等法律法規(guī)和動物倫理要求，包括國家和地區(qū)的法律、食品藥品監(jiān)管機構(gòu)的規(guī)定以及倫理委員會的要求等。制定對CRO質(zhì)量管理文件：制定保證非臨床質(zhì)量的管理文件，

明確工作職責、流程、操作規(guī)范和程序要求等。例如，

CRO選擇與評估、

非臨床試驗監(jiān)督和稽查、

試驗藥物管理、數(shù)據(jù)管理、安全監(jiān)測和偏差變更管理等。培訓和教育：必要的培訓和教育確保CRO的員工了解并能夠遵守合規(guī)要求監(jiān)督和稽查：

定期對CRO的合規(guī)情況進行監(jiān)督和稽查。包括文件和記錄的核查、試驗過程的監(jiān)督、數(shù)據(jù)的驗證等。確保試驗的合規(guī)性和數(shù)據(jù)的完整性。及時風險評估

，采取相應的措施進行管理和控制。建立風險評估和管理工具，

以及應急預案，確保試驗按照計劃進行并減少不利事件的發(fā)生。33CRO的質(zhì)量管理1.2.3.4.5.4、

文件管理34n

1.委托第三方合作組織進行非臨床研究，需要委托合同、質(zhì)量協(xié)議；n

2.藥品交接記錄；n

3.樣品歸還和銷毀記錄；n

4.免疫原性試驗研究方案、研究報告；n

5.攻毒保護力試驗研究方案、研究報告；n

6.單次給藥試驗研究方案、研究報告；n

7.重復多次給藥試驗研究方案、研究報告；n

其他試驗相關的文件，如其他試驗方案、記錄、報告；偏差變更管理文件。35非臨床試驗文件藥效學試驗資料整理存在問題，包括（但不限于）以下情況：（1）受試物不全或缺少受試物信息，如未明確受試物批號；（2）試驗過程描述不全，如觀察時間、檢測方法描述不全，無法評價試驗過程控制

是否合理；（3）試驗方法描述不全，如進行了行為學或組織病理學評分，未提供評分標準及其

相應依據(jù)