ICS13.020.40

CCSB60

34

安徽省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB34/T5227—2025

陸生野生脊椎動(dòng)物種質(zhì)資源樣本采集規(guī)范

Specificationforthecollectionofgermplasmresourcessampleofterrestrialwild

vertebrates

2025-05-06發(fā)布2025-06-06實(shí)施

安徽省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB34/T5227—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。

本文件由黃山學(xué)院提出。

本文件由安徽省林業(yè)局歸口。

本文件起草單位：黃山學(xué)院、安徽省林業(yè)局野生動(dòng)植物保護(hù)處、安徽省野生動(dòng)物疫源疫病監(jiān)測(cè)總站、

安徽揚(yáng)子鱷國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)管理局。

本文件主要起草人：呂順清、吳月龍、劉嵩、于超、邴曉慧、王德青、李偉、姜賀、周永康。

I

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陸生野生脊椎動(dòng)物種質(zhì)資源樣本采集規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了陸生野生脊椎動(dòng)物種質(zhì)資源樣本采集的目標(biāo)與原則、采集對(duì)象、采集許可、采集前準(zhǔn)

備、采集、采集后處置、樣本運(yùn)輸保存。

本文件適用于陸生野生脊椎動(dòng)物（兩棲類、爬行類、鳥類、哺乳類）種質(zhì)資源樣本的采集。

其它類群野生動(dòng)物種質(zhì)資源樣本采集可參照?qǐng)?zhí)行。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

LY/T2359陸生野生動(dòng)物疫源疫病監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范

《中華人民共和國(guó)野生動(dòng)物保護(hù)法》（2022年12月30日）

《中華人民共和國(guó)生物安全法》（2020年10月17日）

《中華人民共和國(guó)自然保護(hù)區(qū)條例》（2017年10月7日）

《陸生野生動(dòng)物疫源疫病監(jiān)測(cè)防控管理辦法》（國(guó)家林業(yè)局令2013第31號(hào)）

《高致病性動(dòng)物病原微生物菌（毒）種或者樣本運(yùn)輸包裝規(guī)范》（農(nóng)業(yè)部公告第503號(hào)）

《國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物名錄》（2021年1月4日）

《有重要生態(tài)、科學(xué)、社會(huì)價(jià)值的陸生野生動(dòng)物名錄》（2023年6月26日）

《安徽省重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物名錄》（2023年2月22日）

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

陸生野生脊椎動(dòng)物terrestrialwildvertebrate

本文件指除了魚類和無脊椎動(dòng)物以外的其他野生動(dòng)物，包括兩棲類、爬行類、鳥類和哺乳類。

種質(zhì)資源樣本germplasmresourcessample

可現(xiàn)場(chǎng)直接采集、包含有個(gè)體全部或部分遺傳信息的生物材料，包括但不限于生物體的細(xì)胞、組織、

器官、整體，無需經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室復(fù)雜程序提取或培養(yǎng)即可長(zhǎng)期保存，用于動(dòng)物學(xué)研究，或用于未來種質(zhì)遺

傳資源的繁育和利用。

DNA提取樣本sampleforDNAextraction

保存質(zhì)量能夠滿足全基因組（包括線粒體基因組）提取的樣本。

RNA提取樣本sampleforRNAextraction

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保存質(zhì)量能夠滿足RNA提取的樣本。

細(xì)胞培養(yǎng)樣本sampleforcellculture

保存質(zhì)量能夠滿足細(xì)胞培養(yǎng)的樣本。

標(biāo)本specimen

樣本采集的動(dòng)物體，包括但不限于活體動(dòng)物、死亡動(dòng)物全部或部分尸體、博物館或機(jī)構(gòu)保存的野生

動(dòng)物標(biāo)本等。

非損傷動(dòng)物樣本采集法Non-invasiveAnimalSampling

在采集動(dòng)物樣本的過程中，不對(duì)動(dòng)物造成傷害或應(yīng)激，不影響其自然行為和生存狀態(tài)的方法。

微損傷動(dòng)物樣本采集法Mini-invasiveAnimalSampling

在采集動(dòng)物樣本的過程中，對(duì)動(dòng)物造成微小傷害或應(yīng)激、不足以影響其自然行為和生存狀態(tài)的方法。

4目標(biāo)與原則

目標(biāo)

規(guī)范陸生野生脊椎動(dòng)物種質(zhì)資源樣本采集，為動(dòng)物種質(zhì)遺傳資源的保存、研究、保護(hù)和利用提供技

術(shù)規(guī)范。

原則

4.2.1合法性原則

樣本采集須符合生物安全管理規(guī)范，取得主管部門許可。到自然保護(hù)區(qū)采集或采集《國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)

野生動(dòng)物名錄》、《有重要生態(tài)、科學(xué)、社會(huì)價(jià)值的陸生野生動(dòng)物名錄》、《安徽省重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物

名錄》中的物種，按照《中華人民共和國(guó)野生動(dòng)物保護(hù)法》、《中華人民共和國(guó)自然保護(hù)區(qū)條例》的規(guī)

定執(zhí)行。

4.2.2科學(xué)性原則

樣本采集須由專業(yè)人員或經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)的人員承擔(dān)，按照技術(shù)規(guī)范操作。

4.2.3安全性原則

樣本采集過程中須注重環(huán)境、人員、動(dòng)物及標(biāo)本等的安全控制。采集和運(yùn)輸有傳染性或人畜共患病

風(fēng)險(xiǎn)的樣本，按照《中華人民共和國(guó)生物安全法》、《陸生野生動(dòng)物疫源疫病監(jiān)測(cè)防控管理辦法》、《高

致病性動(dòng)物病原微生物菌（毒）種或者樣本運(yùn)輸包裝規(guī)范》及LY/T2359的規(guī)定執(zhí)行。

4.2.4動(dòng)物福利原則

盡量減少動(dòng)物及樣本的采集量；活體動(dòng)物應(yīng)優(yōu)先使用非損傷或微損傷采集方式；采集方式應(yīng)減少動(dòng)

物的驚嚇、精神壓力或痛苦；處死動(dòng)物盡可能減輕動(dòng)物的痛苦。

5采集對(duì)象

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陸生野生脊椎動(dòng)物類別

陸生野生脊椎動(dòng)物包括如下四類：

a)兩棲類；

b)爬行類；

c)鳥類；

d)哺乳類。

種質(zhì)資源樣本類別

種質(zhì)資源樣本包括如下四類：

a)動(dòng)物體（活體、尸體、標(biāo)本等）；

b)器官（睪丸、卵巢、心臟等）；

c)組織（皮膚、肌肉、血液等）；

d)細(xì)胞（生殖細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞等）。

6采集許可

樣本采集須取得政府主管部門許可或按照相關(guān)法律法規(guī)執(zhí)行。

7采集前準(zhǔn)備

儀器設(shè)備

主要包括但不限于：交通運(yùn)輸工具（車輛）、車載超低溫冰箱（-80℃）、車載普通冰箱（-20℃）、

顯微鏡、液氮罐等（見附錄A）。

器材器具

主要包括但不限于：解剖刀、手術(shù)剪、鑷子、凍存管、凍存盒、防護(hù)服、工作服、口罩、乳膠手套、

脫脂棉、紗布、急救箱、計(jì)量工具、記錄工具等（見附錄B）。

器材器具須清洗、消毒，分類整齊擺放于專用工具箱中。

藥品試劑

主要包括但不限于：RNA保存液、RNase抑制劑、細(xì)胞培養(yǎng)液、精液稀釋液、乙醇、去離子水、麻

醉劑等（見附錄C）。

藥品試劑須封裝于專用容器中，分類擺放于試劑箱（柜）中。

8采集

信息采集

8.1.1活體或死亡標(biāo)本信息

活體或死亡標(biāo)本信息包括但不限于以下內(nèi)容：

a)標(biāo)本號(hào)（自行命名，但需確保編碼原則統(tǒng)一性、編碼唯一性）；

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b)分類學(xué)信息：中文名、學(xué)名、種下名稱（即亞種名，若有則須添加）、種上名稱（綱、目、

科，中文名和學(xué)名）、鑒定人等；

c)采集地信息：地名（至少描述到村級(jí)行政單元）、地理坐標(biāo)（經(jīng)緯度，采用大地2000坐標(biāo)系）、

海拔（黃海高程）、生境類型、氣候因子（溫度、濕度）等；

d)標(biāo)本信息：采集人（標(biāo)本具體采集人或團(tuán)隊(duì)等）、采集時(shí)間（日期格式保持一致）、采集方式

（直接抓捕、網(wǎng)捕、燈誘、陷阱等）、個(gè)體信息（性別、年齡或發(fā)育階段、健康狀況等）、保

藏單位（保藏單位全稱）等。

信息記錄見附錄D。

8.1.2館藏標(biāo)本信息

標(biāo)本號(hào)、標(biāo)本屬性（正模、配模、副模、地模、普通等）、鑒定人、制作人、制作日期、保藏方式

（浸泡、干制、冰凍等）、實(shí)物狀態(tài)（完整、破損等。非完整標(biāo)本可簡(jiǎn)單描述破損部位）、保藏單位、

聯(lián)系人（包括單位、地址、郵編、電話、電子信箱等）。

8.1.3圖像信息

8.1.3.1圖像信息采集總則

圖像信息采集分門別類進(jìn)行；同一地點(diǎn)或同一次采集的所有圖像保存于同一個(gè)存儲(chǔ)設(shè)備（移動(dòng)硬盤、

U盤），移交給保藏單位，同時(shí)做好備份。

8.1.3.2生境圖像信息

活體或野外死亡標(biāo)本需要拍攝生境圖像，要求盡可能體現(xiàn)采集地地貌、植被、水源等多項(xiàng)信息。每

個(gè)采集地拍攝照片不少于4張（前、后、左、右），分辨率1500萬像素（4896×3264）以上，保存

格式為“jpg”或“tif”格式；拍攝視頻不少于15秒，拍攝內(nèi)容不少于照片部分，分辨率不小于4K

（3840×2160），保持格式為“mov”。

所有生境圖像自行命名，但需確保統(tǒng)一性、唯一性，保存于同一個(gè)文件夾內(nèi)。

8.1.3.3工作圖像信息

工作圖像信息要求體現(xiàn)工作場(chǎng)景、工作方式等。每個(gè)采集地拍攝照片3-4張，照片精度要求在

1000萬（2775×3700）像素值以上，保存格式為“jpg”或“tif”格式；拍攝視頻不少于15秒，拍

攝內(nèi)容不少于照片部分，分辨率不小于4K（3840×2160），保持格式為“mov”。

所有工作圖像自行命名，但需確保統(tǒng)一性、唯一性，保存于同一個(gè)文件夾內(nèi)。

8.1.3.4標(biāo)本圖像信息

所有被采集樣本的個(gè)體（活體、尸體、標(biāo)本）均須拍攝形態(tài)圖像，要求盡可能體現(xiàn)個(gè)體全貌及主要

鑒別特征。擺拍最好在原產(chǎn)地進(jìn)行，盡可能還原其生境，并做好防逃逸措施；拍照前在適當(dāng)位置放置一

個(gè)刻度尺作為個(gè)體大小參考。

每個(gè)個(gè)體拍攝1-3張全身入鏡照片（至少1張含有個(gè)體標(biāo)簽或信息卡）、4張以上局部照片（前、

后、背、側(cè)）、鑒別特征局部特寫照片1-3張，分辨率1500萬像素（4896×3264）以上，保存格式

為“jpg”或“tif”格式；拍攝視頻不少于15秒，拍攝內(nèi)容不少于照片部分，分辨率不小于4K（3840

×2160），保持格式為“mov”。

所有圖像自行命名，但需確保統(tǒng)一性、唯一性，同一個(gè)體的所有圖像保存于同一個(gè)文件夾內(nèi)。

樣本采集

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8.2.1樣本采集總則

8.2.1.1樣本正式采集前，應(yīng)根據(jù)采集需求及條件確定采樣數(shù)量和地點(diǎn)；穿著工作服或防護(hù)服（采集

個(gè)體可能患有高傳染性疾病或不明原因死亡）、乳膠手套、口罩；做好樣本編碼和保存器具（凍存管等）

標(biāo)記；根據(jù)動(dòng)物體、器官、組織、細(xì)胞分門別類進(jìn)行采集；采集器材器具盡量不重復(fù)使用，有必要重復(fù)

使用時(shí)必須規(guī)范清洗、消毒；及時(shí)登記樣本采集相關(guān)信息（見附錄4）。

8.2.1.2動(dòng)物體體采集和器官采集僅適用于小型動(dòng)物（蝌蚪、小型蛙類等），視其體型與凍存管比例

而定；細(xì)胞樣本采集僅適用于兩棲類卵細(xì)胞，且不能用于凍存后復(fù)蘇繁育。

8.2.2動(dòng)物體樣本

動(dòng)物體樣本采集應(yīng)遵循以下流程：

a)活體動(dòng)物應(yīng)采用盡可能減輕動(dòng)物痛苦的方法處死；動(dòng)物尸體須用生理鹽水沖洗干凈；

b)將樣本置于凍存管內(nèi)，直接置于液氮罐中保存。若不具備該條件時(shí)，DNA提取樣本用乙醇保存，

RNA提取樣本用RNA保存液保存，細(xì)胞培養(yǎng)樣本則用細(xì)胞培養(yǎng)液保存。

8.2.3器官樣本

器官樣本采集應(yīng)遵循以下流程：

a)活體動(dòng)物應(yīng)采用盡可能減輕動(dòng)物痛苦的方法處死；

b)用解剖器具（手術(shù)剪、鑷子等）摘取目標(biāo)器官置于凍存管內(nèi)，直接置于液氮罐中保存。若不具

備該條件時(shí)，DNA提取樣本用乙醇保存，RNA提取樣本用RNA保存液保存，細(xì)胞培養(yǎng)樣本則用

細(xì)胞培養(yǎng)液保存。

8.2.4組織樣本

8.2.4.1固態(tài)組織樣本

固態(tài)組織樣本采集應(yīng)遵循以下流程：

a)優(yōu)先選擇非損傷或微損傷方法，死亡個(gè)體優(yōu)先選擇肌肉、內(nèi)臟器官和生殖器官，采樣的同時(shí)應(yīng)

做好備份；

b)樣本置于凍存管內(nèi)，直接置于液氮罐中保存。若不具備該條件時(shí)，DNA提取樣本用乙醇保存，

RNA提取樣本用RNA保存液保存，細(xì)胞培養(yǎng)樣本則用細(xì)胞培養(yǎng)液保存。

8.2.4.2血液樣本

血液樣本采集應(yīng)遵循以下流程：

a)采用全麻或盡可能減輕動(dòng)物痛苦的方法，盡可能不處死動(dòng)物；

b)用抗凝采血管采集動(dòng)物靜脈血或肢、尾端動(dòng)脈血（視動(dòng)物體大小采集0.5-5mL不等）；

c)將采血管上下緩慢顛倒混勻后在2-8℃條件下（冷藏）暫存，并盡快運(yùn)輸至保藏單位；

d)若暫存加運(yùn)輸時(shí)間超過1周，血液樣本須-20℃（冷凍）或更低溫度暫存并盡快運(yùn)輸至保藏單

位。

8.2.4.3精液樣本

精液樣本采集應(yīng)遵循以下流程：

a)挑選健康的雄性成體；

b)哺乳動(dòng)物盡可能使用假臺(tái)畜和人工陰道采集精液；不適用假臺(tái)畜法的動(dòng)物則采用電極刺激或

人工擠出采集精液；

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c)取適量精液涂片，顯微鏡下觀察精子濃度、活力和形態(tài)，以確認(rèn)精液質(zhì)量；

d)根據(jù)精液質(zhì)量，利用精液稀釋液將其稀釋到一定濃度，分裝到加有冷凍保護(hù)劑的凍存管中；

e)將裝有精液的凍存管放入液氮罐中暫存，并盡快運(yùn)輸至保藏單位。

8.2.5細(xì)胞樣本

細(xì)胞樣本采集應(yīng)遵循以下流程：

a)自然排卵或人工擠出采集卵細(xì)胞（包括受精和胚胎細(xì)胞），盡可能不處死動(dòng)物；

b)樣本置于凍存管內(nèi)，直接置于液氮罐中保存。若不具備該條件時(shí)，DNA提取樣本用乙醇保存，

RNA提取樣本用RNA保存液保存，細(xì)胞培養(yǎng)樣本則用細(xì)胞培養(yǎng)液保存。

9采集后處置

樣本采集后處置應(yīng)遵循以下要求：

a)非損傷或微損傷方法采集后的動(dòng)物，須立即原地釋放；

b)使用麻醉方式采集后的動(dòng)物，則需要等待其蘇醒。若動(dòng)物在預(yù)計(jì)時(shí)間內(nèi)沒有蘇醒，則需要注射

麻醉拮抗劑以解除麻醉狀態(tài)。動(dòng)物蘇醒后觀察一定時(shí)間，確認(rèn)其完全恢復(fù)正常后原地釋放；

c)采集前已經(jīng)死亡或處死的動(dòng)物，樣本采集后的部分如果可以做成標(biāo)本的，則需及時(shí)安全運(yùn)輸?shù)?/p>

標(biāo)本制作場(chǎng)所；若不具備任何價(jià)值，則須及時(shí)做焚燒、深埋等無害化處理，以免污染環(huán)境、傳

播疾病。

10樣本運(yùn)輸保存

樣本運(yùn)輸應(yīng)遵循如下要求：

a)樣本采集完成、存放于臨時(shí)保存設(shè)備后，須盡快送到保藏單位進(jìn)行長(zhǎng)期保存；

b)運(yùn)送樣本的車輛，滿足安全需求，樣本保存設(shè)備須完全固定；

c)須有專業(yè)人員跟車，定時(shí)對(duì)樣本保存設(shè)備進(jìn)行檢查，確保設(shè)備運(yùn)行正常；

d)樣本到達(dá)保藏單位，須第一時(shí)間移交，同時(shí)確保移交手續(xù)記錄完整。

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附錄A

（資料性）

儀器設(shè)備表

樣本采集所需儀器設(shè)備名錄（包括但不限于）見表A.1。

表A.1儀器設(shè)備表

儀器設(shè)備名稱數(shù)量備注

運(yùn)輸車輛1-2

-80℃車載冰箱1-2每輛車1臺(tái)

-20℃車載冰箱1-2每輛車1臺(tái)

顯微鏡1根據(jù)需要選定分辨率，用以檢測(cè)精子濃度、活性等

液氮罐若干提前裝好液氮，40L液氮約維持2周

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附錄B

（資料性）

器材器具表

樣本采集所需器材器具名錄（包括但不限于）見表B.1。

表B.1器材器具表

品名數(shù)量備注

手術(shù)服每人1套

防護(hù)服若干人畜共患病防護(hù)需要

乳膠手套若干大、中、小型號(hào)齊全

口罩若干根據(jù)需要確定防護(hù)等級(jí)

手術(shù)刀柄若干可重復(fù)使用，換刀片前用酒精棉球擦拭干凈

無菌手術(shù)刀片若干保證每個(gè)采樣個(gè)體最少1片

每個(gè)取樣部位一套。

剪刀、鑷子若干如不足，更換取樣部位時(shí)可用酒精棉簽、RNAase等擦拭清潔工具

后使用

采血針不少于采樣數(shù)根據(jù)動(dòng)物血管粗細(xì)選擇合適的采血針

已添加抗凝劑。用于DNA提取等目的，選用EDTA抗凝劑；

采血管不少于采樣數(shù)

用于血常規(guī)檢測(cè)等目的，選用肝素抗凝劑

注射器不少于采樣數(shù)用于大型哺乳動(dòng)物的血液采集

試管不少于采樣數(shù)用于精液采集等

提前添加保存試劑（乙醇、RNA保存液、細(xì)胞培養(yǎng)液、精液稀釋液、

凍存管不少于采樣數(shù)

血液抗凝劑等）

凍存盒若干裝凍存管，根據(jù)凍存管選擇相應(yīng)的凍存盒

泡沫盒+干冰若干用于臨時(shí)保存樣本

泡沫盒+冰袋若干如無冰袋，可用冰凍礦泉水代替

標(biāo)簽紙若干

如保存劑是酒精等有機(jī)溶劑，需使用不溶于有機(jī)溶劑的記號(hào)筆或

記號(hào)筆若干

使用標(biāo)簽紙，以免造成字跡模糊

75％酒精棉球若干用于工具、環(huán)境消毒

噴壺若干裝酒精，用于環(huán)境消毒

自封袋若干用于制作酒精棉球或裝潔凈物品

保鮮膜若干墊在桌面，用于盛放樣本，避免污染

醫(yī)療垃圾袋若干用于裝廢棄物

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附錄C

（資料性）

藥品試劑表

樣本采集所需藥品試劑名錄（包括但不限于）見表C.1。

表C.1藥品試劑表

品名數(shù)量備注

麻醉劑若干需要時(shí)用于動(dòng)物麻醉

無水乙醇若干DNA樣本保存，分析純，根據(jù)需要稀釋到相應(yīng)濃度

RNA保存液若干RNA樣本保存

RNase抑制劑若干取RNA樣本時(shí)，擦拭剪刀鑷子，噴灑環(huán)境，以抑制RNA降解

Hank's溶液或HypoThermosolFRS保存液等，用于細(xì)胞培養(yǎng)前在野外保存大塊動(dòng)

細(xì)胞培養(yǎng)液若干

物組織

精液稀釋液若干加有一定比例抗生素、抗氧化劑的Tris液，用以延長(zhǎng)精子壽命。

冷凍保存劑若干保護(hù)精子等在液氮中保存時(shí)免于凍傷

75％酒精若干用于制作酒精棉球和操作面消毒

碘酊或碘伏若干消毒

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附錄D

（資料性）

樣本信息采集表

樣本信息記錄單見表D.1。

表D.1樣本信息采集表

標(biāo)本號(hào)（采集號(hào)）：中文名：