ICS71.040.01CCSG0443植物中氮、磷的測定連續(xù)流動分析儀法Determinationofnitrogenandphosphorusinplants—ContinousflowanalyzerDB43/T2139—2021I前言 Ⅲ 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14方法原理 1 16干擾消除 27儀器和設備 28樣品 29分析步驟 310分析結(jié)果的表述 4 4附錄A（資料性）連續(xù)流動分析儀測定植物中氮、磷含量試劑流路圖 5本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由湖南省市場監(jiān)督管理局提出并歸口。本文件起草單位：中國科學院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所、湖南省計量檢測研究院。本文件主要起草人：王久榮、張麗萍、袁紅朝、賀珍、耿梅梅、劉楠、肖克、李婭、王理、鄧順乾。1植物中氮、磷的測定連續(xù)流動分析儀法本文件規(guī)定了植物樣品經(jīng)過硫酸-過氧化氫消解，連續(xù)流動分析儀法測定氮、磷的方法。本文件適用于植物樣品中氮、磷的測定。本文件方法的線性范圍為氮：0～40.0mg/L，磷：0～4.00mg/L。當稱樣量為0.2g，定容體積為100mL時，方法的檢出限為氮：22.6mg/kg，磷：20.4mg/kg；測定下限為2規(guī)范性引用文件GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法LY/T1228森林土壤氮的測定LY/T1232森林土壤磷的測定LY/T1267森林植物（包括森林枯枝落葉層）樣品的采集與制備3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4方法原理植物中氮、磷多以有機結(jié)合態(tài)存在，樣品經(jīng)硫酸-過氧化氫消解，有機物被氧化分解，使樣品中的有機氮轉(zhuǎn)化為無機銨鹽，有機磷轉(zhuǎn)化成無機磷酸鹽，用同一份消解液同時測定氮（NH4+-N）、磷（PO43--P）的含量。氮（NH4+-N）的測定：在硝普鈉作為催化劑條件下，消解液中無機銨鹽在堿性環(huán)境下與水楊酸鈉及次氯酸鈉反應生成藍色化合物，在660nm波長下用比色法測定。磷（PO43--P）的測定：以酒石酸銻鉀作為催化劑，消解液中磷酸鹽在酸性環(huán)境下和鉬酸銨及抗壞血酸反應生成磷鉬藍化合物，在660nm或880nm波長下用比色法測定。5試劑除非另有說明，所用水應符合GB/T6682規(guī)定的二級水要求，所用試劑均為分析純試劑。5.1硫酸（H2SO4，ρ=1.84g/mL）。5.2過氧化氫（H2O2，w=30。5.3月桂醇聚氧乙烯醚（Brij-35，w=22潤滑劑）。5.4十二烷基磺酸鈉（SDS，潤滑劑）。2DB43/T2139—20215.5緩沖溶液：分別稱取35.80g十二水合磷酸氫二鈉（Na2HPO4?12H2O）、50.00g酒石酸鉀鈉（NaKC4H4O6）完全溶于約600mL水中，再加入29.30g氫氧化鈉（NaOH）于溶液中，待完全溶解后，用水定容至1000mL，加2mL月桂醇聚氧乙烯醚（5.3）混勻，常溫保存，可穩(wěn)定2周。5.6水楊酸鈉-硝普鈉溶液：稱取4.00g水楊酸鈉（C7H5O3Na）溶于約60mL水中，再溶解0.10g亞硝基鐵氰化鈉（Na2Fe(CN)5NO?2H2O，別名硝普鈉用水定容至100mL，避光保存，可穩(wěn)定2周。5.7次氯酸鈉溶液：取4.0mL有效氯含量不低于10％的次氯酸鈉（NaClO）溶液，用水定容至100mL，現(xiàn)配現(xiàn)用。5.8緩沖溶液A：稱取5.00g氯化鈉（NaCl）溶于約600mL水中，緩慢加入12.0mL硫酸（5.1混勻冷卻后，再加2.00g十二烷基磺酸鈉（5.4）于溶液中，完全溶解后，用水定容至1000mL，常溫保存，可穩(wěn)定2周。5.9緩沖溶液B：取14.0mL硫酸（5.1）小心加入約800mL水中，冷卻至室溫后，加2.00g十二烷基磺酸鈉（5.4）于溶液中，完全溶解后，用水定容至1000mL，常溫保存，可穩(wěn)定2周。5.10鉬酸銨-酒石酸銻鉀溶液：稱取0.62g四水合鉬酸銨（(NH4)6Mo7O24?4H2O）和0.0170g半水合酒石酸銻鉀（K(SbO)C4H4K2O6?1/2H2O）溶解于約80mL水中，用水定容至100mL，避光保存，可穩(wěn)定2個月。5.11抗壞血酸溶液：稱取1.50g抗壞血酸（C6H8O6）溶于水，用水定容至100mL，避光保存，現(xiàn)配現(xiàn)用。5.12吸樣器沖洗液：量取50.0mL硫酸（5.1）緩慢沿內(nèi)壁加入盛有約800mL水的燒杯中，攪勻冷卻，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用水定容。5.13氮（NH4+-N）標準儲備液（1000mg/L購買國家有證氨氮標準溶液或按照LY/T1228規(guī)定的方法配制，室溫可保存18個月。5.14磷（PO43--P）標準儲備液（1000mg/L購買國家有證磷元素標準溶液或按照LY/T1232規(guī)定的方法配制，室溫可保存24個月。5.15磷（PO43--P）工作液（100mg/L準確量取適量磷標準儲備液（5.14用吸樣器沖洗液（5.12）稀釋10倍制備，室溫可保存6個月。6干擾消除6.1標準系列溶液與樣品待測溶液酸度應保持一致，以減少待測溶液酸度對測定結(jié)果產(chǎn)生的干擾。6.2潤滑劑（5.3、5.4）對測定結(jié)果穩(wěn)定性有影響，應保證所配含有潤滑劑的溶液（5.5、5.8、5.9）在使用期間為澄清透亮溶液。7儀器和設備7.1樣品粉碎設備。7.4高溫消解儀（溫度需達400℃,可控溫度在±5℃)。7.5連續(xù)流動分析儀，配置660nm的濾光片（僅測磷可選配880nm的濾光片）。8樣品8.1植物樣品的采集與保存DB43/T2139—20213植物樣品的采集和保存應符合LY/T1267的規(guī)定。8.2植物樣品的制備植物樣品的制備應符合LY/T1267的規(guī)定。9分析步驟9.1待測液的制備稱取均勻植物干樣0.1g～0.5g（精確到0.0001g）于50mL消煮管內(nèi)，加5～10滴水潤濕；或稱取新鮮試樣1g～5g（精確到0.0001g）于50mL消煮管。在消煮管內(nèi)加入5.00mL硫酸（5.1搖勻，加蓋小漏斗，冷消化過夜后置于高溫消解儀上，升溫至200℃加熱消解20min，再升溫至300℃繼續(xù)消解，消解期間適當搖動消煮管，硫酸回流至管口三分之一處，繼續(xù)加熱至固體物消失成為棕褐色溶液（無炭粒取下消煮管冷卻至室溫；加入約1mL過氧化氫（5.2搖勻，110℃加熱5min，370℃加熱10min～15min，取下消煮管冷卻至室溫；再次加入10滴過氧化氫（5.2搖勻，110℃加熱5min，370℃加熱10min～15min；如此反復（過氧化氫用量逐漸減少）至溶液呈無色或清亮后于370℃繼續(xù)消解20min～30min，以除盡多余的過氧化氫。消解完畢，取下消煮管冷卻，用水反復多次將消解液全部轉(zhuǎn)移到100mL容量瓶中，冷卻至室溫后定容搖勻，用無磷濾紙過濾或放置澄清即得待測液。待測液含硫酸的體積分數(shù)約為5％。9.2待測空白液的制備不加入植物試樣，按照與待測液的制備（9.1）相同的步驟進行待測空白溶液的制備。9.3儀器設置與調(diào)試參照儀器使用說明書，按照植物氮、磷試劑流路圖（見附錄A，圖A.1、圖A.2）連接樣品和試劑流路，優(yōu)化儀器操作條件，使待測指標的響應增益值達到分析要求，編輯測定方法、選擇合適的測樣速率、清洗比。9.4標準曲線混合標準溶液的配制：準確量取氮標準儲備液（5.13）和磷標準工作液（5.15）0.000mL、0.100mL、0.500mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL于100mL容量瓶中，分別加入50mL水后，再加入5.00mL硫酸（5.1搖勻冷卻，用水定容至100mL，制備成含氮0.000mg/L、1.00mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、30.0mg/L、40.0mg/L和含磷0.000mg/L、0.100mg/L、0.500mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、3.00mg/L、4.00mg/L的混合標準系列溶液。取適量上述標準系列，分別置于樣品杯中，由連續(xù)流動分析儀按方法程序依次從高濃度到低濃度取樣測定。以測定相應指標信號值為縱坐標，質(zhì)量濃度為橫坐標，繪制標準曲線。9.5待測液的測定9.5.1取待測空白液（9.2）、待測液（9.1）適量（約8mL）按順序放入樣品盤中，按照9.3準備好的儀器條件，待基線穩(wěn)定后依次測定標準系列溶液、空白液和待測液。超出測定范圍的待測液，用吸樣器沖洗液（5.12）稀釋。9.5.2每批樣品應帶一個中間校核點，中間校核點測定值與標準曲線相應點濃度的相對誤差應不超DB43/T2139—202149.5.3儀器校正，每隔10個樣次插入一個基線校正，每隔20個樣次插入一個漂移校正，消除試劑與儀器的漂移誤差。10分析結(jié)果的表述試樣中待測指標X（氮或磷）的含量W（X按式（1）計算：W(X)=………………（1）W(X)——試樣中待測指標X（氮或磷）含量，單位為克每一百克（g/100gci——試樣溶液中待測指標質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（mg/L）；c0——空白溶液中待測指標質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（mg/Lt——試樣溶液稀釋倍數(shù)；m——試樣稱取質(zhì)量，單位為克（g）；V——試樣消解液定容體積，單位為毫升（mL）；10000——待測指