動(dòng)物實(shí)驗(yàn)計(jì)劃書撰寫說明1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)計(jì)劃書審查流程申請(qǐng)人應(yīng)于計(jì)劃執(zhí)行日前30日(含以上)在線送交動(dòng)物實(shí)驗(yàn)計(jì)劃書至IACUC秘書信箱申請(qǐng)。(申請(qǐng)人與單位主管需先簽名)◎若使用微生物、放射線、化學(xué)（毒化物及致癌藥物）需通過環(huán)境保護(hù)暨安全衛(wèi)生中心同意。該案審查通過該案審查復(fù)審(需4個(gè)工作日)

該案審查不通過該案退回撤案初審需7個(gè)工作日退回給申請(qǐng)人進(jìn)行修改(修正處請(qǐng)改紅色粗體字)后再送審該案審查通過該案審查不通過通知送紙本檔至本委員會(huì)(動(dòng)物中心)核章完成后通知申請(qǐng)人領(lǐng)回2計(jì)劃書撰寫精神及原則替代Replacement使用較低等或無脊椎生物替代使用體外試驗(yàn)?zāi)Ｊ教娲褂梅巧镄栽囼?yàn)替代(eg.計(jì)算機(jī)模擬,…)減量Reduction使用合理可行的最少動(dòng)物量進(jìn)行實(shí)驗(yàn)參考文獻(xiàn)，避免使用過量動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析，使用合適動(dòng)物量以達(dá)到科學(xué)顯著性進(jìn)行新的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)或試驗(yàn)前，得先進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)避免重復(fù)不必要的實(shí)驗(yàn)使用非侵入性觀察技術(shù)或基因改造動(dòng)物精致化Refinement使用降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的壓力、窘迫與疼痛的方式(更)適合該動(dòng)物且可行的飼養(yǎng)環(huán)境與條件(更)專業(yè)合理的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理技術(shù)(更)純熟的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)(更)專業(yè)、精確且可行的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與執(zhí)行3

xx成功大學(xué)

收件編號(hào)：

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物照護(hù)與使用委員會(huì)審查同意書AffidavitofApprovalofAnimalUseProtocolNationalChengKungUniversity

同意書編號(hào)(IACUCApprovalNo)：__________________計(jì)劃主持人：呂OO

職

稱：教授單

位：

O系

飼養(yǎng)地點(diǎn)：

應(yīng)用地點(diǎn)：

醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心/醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心計(jì)劃名稱：

本「動(dòng)物實(shí)驗(yàn)計(jì)劃書」業(yè)經(jīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物照護(hù)與使用委員會(huì)□實(shí)質(zhì)□形式審查通過。本計(jì)劃預(yù)定飼養(yǎng)應(yīng)用之動(dòng)物如下：

動(dòng)物種類(品系)

動(dòng)物總量/計(jì)劃年數(shù)

飼養(yǎng)及應(yīng)用期間

mice(C57BL/6)

120只/1年2014年12月1日至2015年11月31日

王OO

教授

OO系

醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心

醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物OOOOOOOO研究

Rat/Sprague-Dawley

300只/2年2016年1月1日至2017年12月31日Mice/BALB/c

90只/2年

2016年1月1日至2017年12月31日Mice(C57BL/6)

120只/2年

2016年1月1日至2017年12月31日格式改成公元，且執(zhí)行日期不可早于送審日期。填寫動(dòng)物品系正確名稱，Ex：Balb/C->BALB/c飼養(yǎng)/應(yīng)用地點(diǎn)請(qǐng)分開填寫確認(rèn)最新版本第一頁計(jì)劃名稱與第二頁計(jì)劃名稱前后不符4xx成功大學(xué)

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)計(jì)劃書(AnimalUseProtocol)Version105.2TheanimaluseprotocollistedbelowhasbeenreviewedandapprovedbytheInstitutionalAnimalCareandUseCommittee(IACUC).

ProtocolTitle:______________________________________________________IACUCApprovalNo：

PeriodofProtocol:ValidFrom:_____________To:_____________(mm/dd/yyyy)PrincipleInvestigator(PI):____________________________________________

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物照護(hù)與使用委員會(huì)召集人：______________日期：___________IACUCChairman:_______________________________Date:____________

(重要文件，請(qǐng)勿遺失)

OOOOOOOOOOOO

1/1/2017

12/31/2018

OOOPeriodofProtocol:mm/dd/yyyy(月/日/年)56動(dòng)物實(shí)驗(yàn)計(jì)劃書一、基本資料申請(qǐng)人名稱王OO職

稱教授單位OO

系實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心聯(lián)絡(luò)人李OO電話1234計(jì)劃/課程/試驗(yàn)名稱

類

別醫(yī)學(xué)研究類

經(jīng)費(fèi)來源科技部執(zhí)行期限

2017年1月1日

至

2018年12月31日核準(zhǔn)編號(hào)

二、負(fù)責(zé)進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之相關(guān)人員資料

姓

名職

稱參與實(shí)驗(yàn)期限實(shí)驗(yàn)技術(shù)經(jīng)驗(yàn)1王OO教授

2017年1月1日~

2018年12月31日5/小鼠保定、采血、管喂、動(dòng)物外科手術(shù)50例以上2李OO研究助理

2017年1月1日

~2018年12月31日5/小鼠保定、采血、管喂、動(dòng)物外科手術(shù)50例以上3陳OO碩士班研究生2017年1月1日~2018年12月31日5/小鼠保定、采血、管喂、動(dòng)物外科手術(shù)50例以上4

選擇一個(gè)項(xiàng)目。按一下這里以輸入日期。~按一下這里以輸入日期。

5

選擇一個(gè)項(xiàng)目。按一下這里以輸入日期。~按一下這里以輸入日期。

參與動(dòng)物所有人員，如人員異動(dòng)應(yīng)辦理變更申請(qǐng)確認(rèn)最新版本xx成功大學(xué)

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)計(jì)劃書(AnimalUseProtocol)Version105.2三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物需求

動(dòng)物品系a動(dòng)物總數(shù)b/計(jì)劃年數(shù)動(dòng)物來源c飼養(yǎng)地點(diǎn)是否需繁殖1Rat/Sprague-Dawley300只/

2年動(dòng)物中心動(dòng)物中心。否2Mice/BALB/c90只/2年動(dòng)物中心動(dòng)物中心。否3Mice(C57BL/6)120只/2年動(dòng)物中心動(dòng)物中心否4/5/注a：保育類野生動(dòng)物請(qǐng)加注，并另依野生動(dòng)物保育法相關(guān)規(guī)定辦理。注b：動(dòng)物總數(shù)(A)=實(shí)驗(yàn)使用數(shù)量(B)+未使用數(shù)量(C)。如未繁殖，則(A)=(B)注c：自野外捕捉之動(dòng)物請(qǐng)加注，并另說明來源地區(qū)、隔離檢疫方式及隔離期間；取自民間市場(chǎng)者，必要時(shí)須比照辦理。7需前后一致，需繁殖要再填寫附錄一8?無?有，請(qǐng)注明校外執(zhí)行單位名稱與聯(lián)絡(luò)方式。(例:ＯＯ實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心、Tel、E-mail，以符合農(nóng)委會(huì)查核規(guī)范。)校外單位

Tel/E-mail

聯(lián)絡(luò)人

地

址

如需繁殖「實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(指供作科學(xué)應(yīng)用目的使用者)」，請(qǐng)?zhí)顚懜戒浺?。有無在成大以外動(dòng)物房舍進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)，如飼養(yǎng)場(chǎng)所不是動(dòng)物中心時(shí)，請(qǐng)說明飼養(yǎng)場(chǎng)所之設(shè)備與飼養(yǎng)管理措施。若是托養(yǎng)于所屬機(jī)構(gòu)之外的場(chǎng)所，原則上須提供該場(chǎng)所經(jīng)核準(zhǔn)營(yíng)業(yè)之證明文件。(擇一勾選)如本校11個(gè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房舍或國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心南部設(shè)施…等六、動(dòng)物飼養(yǎng)(擇一勾選)?由動(dòng)物中心專人負(fù)責(zé)

?由實(shí)驗(yàn)室人員負(fù)責(zé)

?由托養(yǎng)場(chǎng)所負(fù)責(zé)※如由實(shí)驗(yàn)室人員負(fù)責(zé)，請(qǐng)說明其對(duì)動(dòng)物飼養(yǎng)之背景與訓(xùn)練?！鲂呐K衰竭是心血管疾病最后高死亡率的原因之一。Doxorubicin，治療癌癥的有效化療藥物，但也有報(bào)告可以誘發(fā)心肌病，最終產(chǎn)生心臟衰竭。利用高劑量Doxorubicin引起心臟衰竭的小鼠是一種常用的動(dòng)物模型來探討治療心衰竭手段,包括：藥物,細(xì)胞,器械或蛋白的作用機(jī)轉(zhuǎn)。在心臟和心肌病的過程中，炎癥反應(yīng)很容易發(fā)生。根據(jù)過去細(xì)胞與老鼠的研究曾經(jīng)報(bào)告，C/EBPδ缺乏可能防止LPS誘導(dǎo)的肺損傷。對(duì)C/EBPδ了心肌細(xì)胞的作用,只限于只有有限的研究資料。在我們現(xiàn)在的研究計(jì)劃中，我們計(jì)劃用在小鼠心臟的Doxorubicin誘導(dǎo)下產(chǎn)生的的慢性炎癥反應(yīng),利用現(xiàn)有的CEBPδ剔除鼠,研究心臟衰竭的病理生理過程中C/EBPδ所扮演的作用。計(jì)劃主持人具有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物操作經(jīng)驗(yàn)，參與研究人員在本研究室工作至少半年以上，除新進(jìn)助理及研究生外，均已參與『實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用者訓(xùn)練課程』并通過考試合格。且均已參加動(dòng)物中心說明會(huì)，充分了解對(duì)動(dòng)物飼育中應(yīng)注意之事項(xiàng)。9七、請(qǐng)簡(jiǎn)述本研究之目的或重要性:說明：目前動(dòng)物中心專人負(fù)責(zé)動(dòng)物飼養(yǎng)區(qū)僅為B1小動(dòng)物室、12樓Clean區(qū)及大鼠H7，故如為其他代養(yǎng)區(qū)均需由實(shí)驗(yàn)室人員負(fù)責(zé)八、請(qǐng)以執(zhí)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)應(yīng)秉持之替代(replace)、減量(reduce)、精致化(refine)3R精神中之替代及減量原則，說明動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物需求、動(dòng)物種別及數(shù)量之必要性。1.活體動(dòng)物試驗(yàn)之必要性，以及選擇此動(dòng)物種別的原因：

2.法源依據(jù)(選擇一項(xiàng))，若無適用法源依據(jù)請(qǐng)務(wù)必填寫第3項(xiàng)參考文獻(xiàn):

3.說明執(zhí)行本實(shí)驗(yàn)相關(guān)參考文獻(xiàn):

10在活體外并無法產(chǎn)生「骨折愈合」的生理現(xiàn)象。選擇小鼠是因?yàn)橄嚓P(guān)探討文獻(xiàn)豐富、其實(shí)驗(yàn)內(nèi)容設(shè)計(jì)及分析方法使用較多種選擇性。最重要的是在此小鼠做出成功的動(dòng)物模式并且有初步結(jié)果。ISO-10993part6:TestsforlocaleffectsafterimplantationISO-10993part10:TestsforirritationandskinsensitizationISO-10993part11:TestsforsystemictoxicityChang,C.-H.,Liang,K.C.,&Yen,C.-T.(2005).Inhibitoryavoidancelearningalteredensembleactivityofamygdaloidneuronsinrats.EuropeanJournalofNeuroscience,21,210-218Liang,K.C.(1999).Pre-orpost-traininginjectionofbuspironeimpairedretentionintheinhibitoryavoidancetask:Involvementofamygdale5-HT1Areceptors.EuropeanJournalofNeuroscience,11,1491-1500.

請(qǐng)說明實(shí)驗(yàn)為何需以活體，如為探討…無法以體外細(xì)胞模式證實(shí)…，故選擇活體動(dòng)物試驗(yàn)；選擇此動(dòng)物種別的原因，如吻合先前研究成果或參考文獻(xiàn)…，或此動(dòng)物品系有其特殊性。法源依據(jù)為因應(yīng)何種法源所需故要施行此實(shí)驗(yàn)之依據(jù)，如無法源依據(jù)直接寫無。4說明動(dòng)物實(shí)驗(yàn)試驗(yàn)設(shè)計(jì)并勾選使用儀器：請(qǐng)?jiān)斒鰧?shí)驗(yàn)動(dòng)物性別、年齡、動(dòng)物分組組數(shù)、每組動(dòng)物只數(shù)、備用動(dòng)物只數(shù)、實(shí)驗(yàn)重復(fù)次數(shù)等，據(jù)以估計(jì)欲使用動(dòng)數(shù)量，必要時(shí)可以計(jì)算式輔助說明。若實(shí)驗(yàn)進(jìn)行動(dòng)物繁殖，應(yīng)注明獲得所需特定基因型動(dòng)物之繁殖率。

★欲將在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心使用的儀器(可復(fù)選，如沒有可不選):

?1.非侵入式3D超音波影像系統(tǒng)?2.微電腦斷層(MicroCT)?3.紅外線熱影像儀

?4.非侵入式熒光造影系統(tǒng)(IVIS)?5.柜型X光機(jī)

?6.生理監(jiān)測(cè)器

?7.干式生化儀?8.血球分析儀?9.硬組織冷凍切片機(jī)?10.八頻道生理監(jiān)測(cè)儀11八、請(qǐng)以執(zhí)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)應(yīng)秉持之替代(replace)、減量(reduce)、精致化(refine)3R精神中之替代及減量原則，說明動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物需求、動(dòng)物種別及數(shù)量之必要性。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)(包含分組、N值及動(dòng)物總量的合理性與必要性，及是否落實(shí)3R精神)125.計(jì)劃各年度動(dòng)物需求：依行政院農(nóng)業(yè)委員會(huì)要求，請(qǐng)?zhí)顚懸韵卤砀?說明:執(zhí)行年度以年度1月至12月為基準(zhǔn)，不可跨年度，依各年度分別寫出預(yù)定使用情形，以利年終統(tǒng)計(jì)報(bào)農(nóng)委會(huì)備查。(ex:2016/08/01-2016/12/31)如有進(jìn)行動(dòng)物繁殖，則(A)=(B)+(C)如未進(jìn)行動(dòng)物繁殖，則(A)=(B)，填寫(A)欄位即可。動(dòng)物品系動(dòng)物種類執(zhí)行年度(起~迄公元年/月/日)動(dòng)物總數(shù)量(A)實(shí)際使用數(shù)量(B)未使用數(shù)量(C)備注Sprague-DawleyRat2017/1~2017/121507575

2018/1~2018/121507575

常見錯(cuò)誤：以學(xué)年填寫13九、請(qǐng)以執(zhí)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)應(yīng)秉持之替代(replace)、減量(reduce)、精致化(refine)3R精神中之精致化原則，說明進(jìn)行之動(dòng)物實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。1.實(shí)驗(yàn)物質(zhì)之投予、采樣方法及其劑量、頻率：

2.動(dòng)物之保定、禁食、禁水、限制行動(dòng)（如代謝籠、跑步機(jī)、行為實(shí)驗(yàn)）的方法及時(shí)間：

實(shí)驗(yàn)物質(zhì)投予的濃度、劑量及方式；采樣(如采血)方式、部位及采集量；投予及采樣頻率…。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程有使用到的動(dòng)物保定設(shè)備或?qū)嶒?yàn)143.麻醉（鎮(zhèn)靜）方法、劑量、投藥、手術(shù)方式與麻醉（手術(shù)）后的照護(hù)：

實(shí)驗(yàn)過程如需麻醉，其麻醉說明，可參考醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心網(wǎng)站或?實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理與使用指南」。另使用Ketamine與barbiturate類等藥品均屬管制藥品，請(qǐng)協(xié)助提供管制藥品使用登記證復(fù)印件供本會(huì)留存。目前已知管制藥品使用登記證系所：細(xì)解所、生化所、生理所、微免所(寄生蟲科)、藥理所、環(huán)醫(yī)所、醫(yī)技系、物治系、行醫(yī)所、臨醫(yī)所、口醫(yī)所、內(nèi)科、外科、泌尿科、骨科部、麻醉部、心臟醫(yī)療器材科學(xué)研究中心、生科系等18系所不活潑活動(dòng)力降低姿勢(shì)異常拱背躁動(dòng)踱步、持續(xù)運(yùn)動(dòng)自殘?zhí)?，咬，抓，摩擦發(fā)出叫聲抓取動(dòng)物時(shí)發(fā)出叫聲出現(xiàn)攻擊性抓取動(dòng)物時(shí)咬人警覺狀試圖逃脫或保護(hù)疼痛的區(qū)域缺乏理毛毛發(fā)粗鋼或油膩顏面色染眼鼻出現(xiàn)紅色分泌物(大鼠)食欲差

體重降低與實(shí)驗(yàn)前相較，體重降低10％以上在嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的行為細(xì)微變化非常重要，可真實(shí)反應(yīng)出這些動(dòng)物的疼痛與焦慮。常見的行為變化如下表：154.如何使動(dòng)物之精神緊迫或疼痛降至最低(例如：使用鎮(zhèn)靜劑或止痛劑、添加環(huán)境豐富化物件等，并依疼痛標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別與實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，描述?dòng)物疼痛處理方式)：

評(píng)估動(dòng)物實(shí)驗(yàn)疼痛級(jí)別，并給予適合之鎮(zhèn)靜止痛劑。單獨(dú)飼養(yǎng)之動(dòng)物應(yīng)給予環(huán)境豐富化物件，如因?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)需求不可給予豐富化物件亦應(yīng)說明其原因。165.實(shí)驗(yàn)(1)預(yù)期結(jié)束之時(shí)機(jī)，以及動(dòng)物出現(xiàn)何種異?；蛲纯喟Y狀時(shí)(2)提前人道終止實(shí)驗(yàn)之時(shí)機(jī)。監(jiān)測(cè)此等異?；蛲纯喟Y狀之頻率與方式應(yīng)一并說明(如手術(shù)后每?jī)扇粘又匾淮?、每日測(cè)量體溫兩次等)。(1)預(yù)期結(jié)束實(shí)驗(yàn)之時(shí)機(jī):

(2)提前人道終止實(shí)驗(yàn)時(shí)機(jī):

★以下為安樂死時(shí)機(jī)與人道終點(diǎn)準(zhǔn)則，請(qǐng)?jiān)旈喓笥诘紫鹿催x。實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物安樂死時(shí)機(jī)及準(zhǔn)則CriteriaforEuthanasiaofAnimalsUsedin

Research&Teaching1體重減輕Weightloss體重減輕，或是動(dòng)物出現(xiàn)惡病質(zhì)或消耗性癥候時(shí)。體重減輕達(dá)20-25％。*非生長(zhǎng)期動(dòng)物體重減輕可依據(jù)動(dòng)物剛進(jìn)動(dòng)物房之體重或平均年齡體重為依據(jù)。

生長(zhǎng)期之動(dòng)物體重或許不會(huì)下降，但若無法正常增重，仍應(yīng)判為體重減輕。2喪失食欲Inappetence小型嚙齒類動(dòng)物完全喪失食欲達(dá)24小時(shí)或食欲不佳（低于正常量之50％）達(dá)3天時(shí)。大動(dòng)物完全喪失食欲達(dá)5天或食欲不佳（低于正常量之50％）達(dá)7天時(shí)。3虛弱（無法進(jìn)食或飲水）Weakness/inabilitytoobtainfeedorwater動(dòng)物在沒有麻醉或鎮(zhèn)靜的狀態(tài)下，長(zhǎng)達(dá)24小時(shí)無法站立或極度勉強(qiáng)才可站立時(shí)。4垂死/瀕死Moribundstate動(dòng)物在沒有麻醉或鎮(zhèn)靜的狀態(tài)下，表現(xiàn)精神抑郁伴隨體溫過低（低于37℃）時(shí)。5感染Infection無論是明顯可知或因體溫升高白血球數(shù)目增加而判斷為感染所致，且在抗生素治療無效并伴隨動(dòng)物全身性不適癥狀出現(xiàn)時(shí)。

出現(xiàn)器官嚴(yán)重喪失功能的臨床癥狀且治療無效，或經(jīng)動(dòng)物中心獸醫(yī)師判斷預(yù)后不佳

時(shí)。如：

1)呼吸系統(tǒng)：呼吸困難、發(fā)紺

2)心血管系統(tǒng)：大失血、已給予一次輸液治療後仍貧血（低於20％）

3)消化系統(tǒng)：嚴(yán)重嘔吐或下痢，消化道阻塞，套疊，腹膜炎，內(nèi)臟摘除手術(shù)

4)泌尿道系統(tǒng)：腎衰竭（BUN,creatinine,uroperitoneum的提升）

5)神經(jīng)系統(tǒng)：中樞神經(jīng)抑制、震顫、癱瘓（其中任一肢或以上）、對(duì)止痛劑治療無效之疼痛

6)肌肉骨骼系統(tǒng)：肌肉受損或骨折使肢體喪失功能（實(shí)驗(yàn)預(yù)期發(fā)生並通過IACUC審核除外）

7)皮膚：無法治癒之傷口、重複性自殘或二級(jí)以上之保溫墊燙傷17★以下為安樂死時(shí)機(jī)與人道終點(diǎn)準(zhǔn)則，請(qǐng)?jiān)旈喓笥诘紫鹿催x。實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物安樂死時(shí)機(jī)及準(zhǔn)則CriteriaforEuthanasiaofAnimalsUsedin

Research&Teaching1體重減輕Weightloss體重減輕，或是動(dòng)物出現(xiàn)惡病質(zhì)或消耗性癥候時(shí)。體重減輕達(dá)20-25％。*非生長(zhǎng)期動(dòng)物體重減輕可依據(jù)動(dòng)物剛進(jìn)動(dòng)物房之體重或平均年齡體重為依據(jù)。

生長(zhǎng)期之動(dòng)物體重或許不會(huì)下降，但若無法正常增重，仍應(yīng)判為體重減輕。2喪失食欲Inappetence小型嚙齒類動(dòng)物完全喪失食欲達(dá)24小時(shí)或食欲不佳（低于正常量之50％）達(dá)3天時(shí)。大動(dòng)物完全喪失食欲達(dá)5天或食欲不佳（低于正常量之50％）達(dá)7天時(shí)。3虛弱（無法進(jìn)食或飲水）Weakness/inabilitytoobtainfeedorwater動(dòng)物在沒有麻醉或鎮(zhèn)靜的狀態(tài)下，長(zhǎng)達(dá)24小時(shí)無法站立或極度勉強(qiáng)才可站立時(shí)。4垂死/瀕死Moribundstate動(dòng)物在沒有麻醉或鎮(zhèn)靜的狀態(tài)下，表現(xiàn)精神抑郁伴隨體溫過低（低于37℃）時(shí)。5感染Infection無論是明顯可知或因體溫升高白血球數(shù)目增加而判斷為感染所致，且在抗生素治療無效并伴隨動(dòng)物全身性不適癥狀出現(xiàn)時(shí)。

出現(xiàn)器官嚴(yán)重喪失功能的臨床癥狀且治療無效，或經(jīng)動(dòng)物中心獸醫(yī)師判斷預(yù)后不佳

時(shí)。如：

1)呼吸系統(tǒng)：呼吸困難、發(fā)紺

2)心血管系統(tǒng)：大失血、已給予一次輸液治療後仍貧血（低於20％）

3)消化系統(tǒng)：嚴(yán)重嘔吐或下痢，消化道阻塞，套疊，腹膜炎，內(nèi)臟摘除手術(shù)

4)泌尿道系統(tǒng)：腎衰竭（BUN,creatinine,uroperitoneum的提升）

5)神經(jīng)系統(tǒng)：中樞神經(jīng)抑制、震顫、癱瘓（其中任一肢或以上）、對(duì)止痛劑治療無效之疼痛

6)肌肉骨骼系統(tǒng)：肌肉受損或骨折使肢體喪失功能（實(shí)驗(yàn)預(yù)期發(fā)生並通過IACUC審核除外）

7)皮膚：無法治癒之傷口、重複性自殘或二級(jí)以上之保溫墊燙傷依實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，動(dòng)物可出現(xiàn)的異?；蛲纯喟Y狀說明何時(shí)須提前人道終止實(shí)驗(yàn)。18體重減輕20-25%，或是動(dòng)物出現(xiàn)惡病質(zhì)或消耗性癥候時(shí)。*非生長(zhǎng)期動(dòng)物體重減輕可依據(jù)動(dòng)物剛進(jìn)動(dòng)物房之體重或平均年齡體重為依據(jù)。

生長(zhǎng)期之動(dòng)物體重或許不會(huì)下降，但若無法正常增重，仍應(yīng)判為體重減輕。小型嚙齒類動(dòng)物完全喪失食欲達(dá)24小時(shí)或食欲不佳（低于正常量之50％）達(dá)3天時(shí)。大動(dòng)物完全喪失食欲達(dá)5天或食欲不佳（低于正常量之50％）達(dá)7天時(shí)。動(dòng)物在沒有麻醉或鎮(zhèn)靜的狀態(tài)下，長(zhǎng)達(dá)24小時(shí)無法站立或極度勉強(qiáng)才可站立時(shí)。動(dòng)物在沒有麻醉或鎮(zhèn)靜的狀態(tài)下，表現(xiàn)精神抑郁伴隨體溫過低（低于37℃）時(shí)。出現(xiàn)器官嚴(yán)重喪失功能的臨床癥狀且治療無效，或經(jīng)動(dòng)物中心獸醫(yī)師判斷預(yù)后不佳時(shí)。如：呼吸系統(tǒng)：呼吸困難、發(fā)紺心血管系統(tǒng)：大失血、已給予一次輸液治療后仍貧血（低于20％）消化系統(tǒng)：嚴(yán)重嘔吐或下痢，消化道阻塞，套疊，腹膜炎，內(nèi)臟摘除手術(shù)泌尿道系統(tǒng)：腎衰竭（BUN,creatinine,uroperitoneum的提升神經(jīng)系統(tǒng)：中樞神經(jīng)抑制、震顫、癱瘓（其中任一肢或以上）、對(duì)止痛劑治療無效之疼痛肌肉骨骼系統(tǒng)：肌肉受損或骨折使肢體喪失功能（實(shí)驗(yàn)預(yù)期發(fā)生并通過IACUC審核除外）皮膚：無法治愈之傷口、重復(fù)性自殘或二級(jí)以上之保溫墊燙傷腫瘤研究之人道終點(diǎn)HumaneEndpointinCancerResearch腫瘤生成終點(diǎn)評(píng)估

TumorigenesisEndpointsAssessment無論自發(fā)性或是實(shí)驗(yàn)接種的腫瘤，均應(yīng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)評(píng)估。當(dāng)動(dòng)物身上發(fā)現(xiàn)腫瘤，每周應(yīng)至少檢查兩次腫瘤生長(zhǎng)情形，兩次檢查的間隔不可超過四天。只要符合下列任一項(xiàng)情況即需將動(dòng)物安樂死。1單一腫瘤的重量超過動(dòng)物體重的10％，或是成年小鼠腫瘤平均直徑超過20mm，或是成年大鼠腫瘤平均直徑超過40mm?；蚰[瘤重量過重

(小鼠腫瘤最大重量為4000

毫克，大鼠腫瘤最大重量為8000

毫克)。2體表腫瘤：腫瘤表面出現(xiàn)潰瘍、壞死或是感染。

觸診腫瘤誘導(dǎo)的疼痛反應(yīng)

(動(dòng)物發(fā)聲，退縮不動(dòng)，或縮回等反應(yīng))。3腹腔腫瘤：腹腔異常擴(kuò)張、呼吸困難。

4顱內(nèi)腫瘤：神經(jīng)癥狀。5因腫瘤影響吃，喝，或走動(dòng)的能力。1920★以下二選一，務(wù)必?fù)褚还催x?！铩跷乙言旈喩鲜觥簞?dòng)物實(shí)驗(yàn)人道終止時(shí)機(jī)及腫瘤研究人道終點(diǎn)』，并完全同意與遵守以上規(guī)定?！铩跷乙言旈喩鲜觥簞?dòng)物實(shí)驗(yàn)人道終止時(shí)機(jī)及腫瘤研究人道終點(diǎn)』并同意上列規(guī)定，但因?qū)嶒?yàn)所需無法執(zhí)行。請(qǐng)?zhí)岢隹茖W(xué)資料或理由，以支持此決定之正當(dāng)性?！菊f明】:

216請(qǐng)說明實(shí)驗(yàn)結(jié)束后動(dòng)物之處置方式(如復(fù)原處置、安樂死、尸體處理方法、轉(zhuǎn)讓…等；若為轉(zhuǎn)讓，請(qǐng)?zhí)峁﹦?dòng)物實(shí)驗(yàn)計(jì)劃書)，依實(shí)驗(yàn)需求勾選以下并說明:?復(fù)原處置(整個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，動(dòng)物復(fù)原處置安養(yǎng)方式說明):(說明):

?轉(zhuǎn)讓:(轉(zhuǎn)讓他人或接受他人轉(zhuǎn)讓，經(jīng)本會(huì)審核通過后，使得執(zhí)行)

?轉(zhuǎn)讓他人動(dòng)物:

(接受人簽章)單位(系所):

聯(lián)絡(luò)電話:

IACUCNo.:

(接受人IACUCNo.)轉(zhuǎn)讓品系:

?接受他人動(dòng)物:

(提供人簽章)單位(系所):

聯(lián)絡(luò)電話:

IACUCNo.:

(提供人IACUCNo.)

轉(zhuǎn)讓品系:

?**安樂死方法:選擇一個(gè)項(xiàng)目。(點(diǎn)選左方擇一，并于以下說明)【說明】:

(如選擇麻醉劑安樂死方式，請(qǐng)以下說明麻醉劑種類、劑量、投與方式)動(dòng)物別麻醉劑種類劑量投與方式(iv,ip,im...)

22**動(dòng)物安樂死建議參考表安樂死方法嚙齒動(dòng)物(<200g)嚙齒動(dòng)物、兔(200g~1kg)兔(1kg-5kg)豬CO2OOXXBarbiturateIV(100mg/kg)OOOOBarbiturateIP(150mg/kg)OOOO先麻醉，后采血(放血)致死OOOO先麻醉，后靜脈注射KCL(1-2meq/kg)OOOO先麻醉，后斷頸OO△X先麻醉，后頸椎脫臼OOXX動(dòng)物清醒中直接頸椎脫臼△XXXO:建議使用之方法

X:不建議使用之方法

△:說明理由并經(jīng)IACUC審核通過后才可使用23■尸體處理方式:

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物安樂死之后，將尸體用紙張包裹好，寫上使用者姓名、單位與日期，集中于動(dòng)物中心尸庫(kù)內(nèi)冷凍并統(tǒng)一焚燒。其他:24十、有無進(jìn)行微生物、放射線、化學(xué)(毒物及致癌藥物）實(shí)驗(yàn)？?

無(不須填寫本項(xiàng))?有(請(qǐng)?zhí)顚懸韵马?xiàng)目，并送至環(huán)安衛(wèi)中心審核)1.?微生物實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?是，?否使用感染性微生物實(shí)驗(yàn)?是，?否以微生物載體改變動(dòng)物基因表達(dá)(需檢附基因重組實(shí)驗(yàn)申請(qǐng)同意書)實(shí)驗(yàn)?是，?否產(chǎn)生感染性微生物(微生物名稱:

，危險(xiǎn)群編號(hào)：

)。培養(yǎng)微生物之實(shí)驗(yàn)室位址及室號(hào):

該實(shí)驗(yàn)室經(jīng)本校認(rèn)定之BSL等級(jí):?BSL-1;?BSL-2實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人簽名:

**「微生物危險(xiǎn)群編號(hào)」請(qǐng)參考環(huán)安衛(wèi)中心首頁>>生物安全及污染管理>>國(guó)科會(huì)基因重組實(shí)驗(yàn)守則附表二B.微生物實(shí)驗(yàn)需在感染室進(jìn)行。如為鼠類感染實(shí)驗(yàn)，感染后之動(dòng)物須飼養(yǎng)于加蓋的鼠籠。C.實(shí)驗(yàn)犧牲之動(dòng)物及污染器材?是，?否依動(dòng)物中心指示收集、焚毀或滅菌?D.若不慎遭受所使用之感染性微生物感染，可減緩感染之藥物名稱:

。請(qǐng)先送環(huán)境保護(hù)暨安全衛(wèi)生中心審核簽章再轉(zhuǎn)成PDF檔寄至本會(huì)申請(qǐng)。252.?放射線物質(zhì)實(shí)驗(yàn)

(使用之核種名稱:

;操作人員姓名:

;操作人員輻安證書或訓(xùn)練班結(jié)業(yè)証書號(hào)碼:

)。經(jīng)放射線物質(zhì)處理之動(dòng)物犧牲后，?是，?否存放在輻安級(jí)冷凍柜，超過該核種六個(gè)半衰期之后，依動(dòng)物中心指示收集、焚毀?3.?化學(xué)實(shí)驗(yàn)(使用含毒、致癌藥物或環(huán)保署列管之毒化物，名稱為

、列管編號(hào)

)。藥物毒性:?劇毒（對(duì)脊椎動(dòng)物的LD50<100ng/kg）;?中等毒性（對(duì)脊椎動(dòng)物的LD50：100-1000ng/kg）;?非劇毒（對(duì)脊椎動(dòng)物的LD50>100g/kg）；?對(duì)脊椎動(dòng)物的LD50不明。經(jīng)化學(xué)物質(zhì)處理之動(dòng)物犧牲后，?是；?否依動(dòng)物中心指示收集、焚毀?生物污染及輻射防護(hù)組(簽章)環(huán)境保護(hù)組(簽章)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)計(jì)劃書(含變更)要先給申請(qǐng)人與單位主管核章。26申請(qǐng)人保證以上所填資料完全屬實(shí)，并確認(rèn)此申請(qǐng)案之執(zhí)行與運(yùn)作符合「動(dòng)物保護(hù)法」及相關(guān)法規(guī)之規(guī)定。

計(jì)劃主持人簽名

公元

年

月

日單位主管簽名

公元

年

月

日動(dòng)物房舍負(fù)責(zé)人簽名

公元

年

月

日

※如果飼養(yǎng)地點(diǎn)在動(dòng)物中心/B1小動(dòng)物室，可以先不用給房舍負(fù)責(zé)人簽名，等到最后通過后，再一并核章。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁殖表(范例)一、請(qǐng)說明本研究計(jì)劃須繁殖動(dòng)物的理由：實(shí)驗(yàn)所使用小鼠為實(shí)驗(yàn)室研發(fā)之特殊冷光品系，需自行繁殖。27附錄一(如有繁殖實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)，請(qǐng)?zhí)顚懕颈怼?二、列舉所有需繁殖的動(dòng)物品種與品系、數(shù)量等：

1.本計(jì)劃書第三項(xiàng)、第八-5項(xiàng)及本表之「動(dòng)物總數(shù)」=所有繁殖動(dòng)物數(shù)量加總；各品系/品種之繁殖動(dòng)物數(shù)=種原數(shù)量+預(yù)估出生子代數(shù)量。

2.「預(yù)估出生子代數(shù)量」指種原所產(chǎn)出之所有基因型子代數(shù)量。

3.「實(shí)際使用子代數(shù)量」指種原所產(chǎn)出之所有基因型子代中，實(shí)驗(yàn)實(shí)際所需之特定基因型子代數(shù)量。28動(dòng)物總數(shù):904

(繁殖動(dòng)物數(shù)量加總；品系/品種繁殖動(dòng)物數(shù)量=種原數(shù)量+預(yù)估出生子代數(shù)量)(例:基因轉(zhuǎn)殖鼠”預(yù)估出生”800只仔數(shù)，種原公/母共40只，總數(shù)為800+40=840只)種原數(shù)量品種/品系(公♂)：

mice/PPARγ+/-

20品種/品系(母♀)：

mice/PPARγC/+

20預(yù)估出生子代數(shù)量：864實(shí)際使用子代數(shù)量:14429三、動(dòng)物繁殖之負(fù)責(zé)單位：1.?

由動(dòng)物中心專人負(fù)責(zé)。2.■

由實(shí)驗(yàn)室人員負(fù)責(zé)，請(qǐng)說明其對(duì)動(dòng)物飼養(yǎng)之背景與訓(xùn)練(如勾選第2項(xiàng)，請(qǐng)說明)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物主要由與王OO教授曾接受美國(guó)及臺(tái)灣實(shí)驗(yàn)動(dòng)物訓(xùn)練并領(lǐng)有受訓(xùn)證明。學(xué)生則接受訓(xùn)練。四、請(qǐng)說明種原動(dòng)物與子代的淘汰策略：種原動(dòng)物：種母于10周齡可與種公交配，依先前經(jīng)驗(yàn)于交配約6個(gè)月后生殖率將開始下降，此時(shí)會(huì)更換種公種母，淘汰的種公種母以CO2安樂死。子代：小鼠DNA可透過PCR確認(rèn)有無PPARγC/-的基因缺失，此品系需以PPARγ+/-與PPARγC/+交配后，以PCR確認(rèn)PPARγC/-基因型之小鼠，機(jī)率為1/4，公母皆可使用，但因此基因型小鼠體型偏小，存活率低，因此需繁殖更多子代以確保所需實(shí)驗(yàn)數(shù)量足夠(預(yù)估占總子代數(shù)量的1/6)。非所需要的小鼠基因型若為PPARγ+/-與PPARγC/+可留為種鼠，其他以CO2進(jìn)行安樂死。五、未使用于實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物之處置方法：■種原：以每分鐘安樂死容器容積的10-30%二氧化碳流速灌注進(jìn)行安樂死■子代：以每分鐘安樂死容器容積的10-30%二氧化碳流速灌注進(jìn)行安樂死30六、是否為基因改造動(dòng)物??

否■

是:請(qǐng)?zhí)顚懴铝袉栴}：(一)請(qǐng)說明動(dòng)物是否有任何特殊表現(xiàn)型或先天性異常??

否■是：請(qǐng)說明：PAPRγC/-小鼠只表現(xiàn)野生型PPARγ的25%，初生小鼠體型較小且死亡率高。(二)是否需特殊照養(yǎng)?■

否?

是：請(qǐng)說明：

(三)請(qǐng)說明篩選基因用采樣方法與采樣時(shí)間：此品系剪取2周齡以內(nèi)的小鼠腳趾抽取DNA后以PCR確認(rèn)基因型。31一、3R原則:■

本實(shí)驗(yàn)計(jì)劃已經(jīng)本人及機(jī)構(gòu)內(nèi)「實(shí)驗(yàn)動(dòng)物照護(hù)及使用委員會(huì)（或小組）」詳實(shí)審查，無其他替代方案。

■

本實(shí)驗(yàn)計(jì)劃已經(jīng)本人及機(jī)構(gòu)內(nèi)「實(shí)驗(yàn)動(dòng)物照護(hù)及使用委員會(huì)（或小組）」詳實(shí)審查，已使用最少數(shù)量動(dòng)物?！?/p>

本實(shí)驗(yàn)計(jì)劃已經(jīng)本人及機(jī)構(gòu)內(nèi)「實(shí)驗(yàn)動(dòng)物照護(hù)及使用委員會(huì)（或小組）」詳實(shí)審查，已做到精致化，或動(dòng)物福利最佳化。包含：■

已考慮并要求執(zhí)行動(dòng)物疼痛評(píng)估■

已考慮并要求執(zhí)行適當(dāng)減輕動(dòng)物痛苦方式（如：■麻醉劑、■止痛劑、■設(shè)定人道安樂死時(shí)機(jī)）?

其他(請(qǐng)說明)：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿動(dòng)物實(shí)驗(yàn)人道管理替代、減量及精致化(3R)說明本研究計(jì)劃涉及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，已考量「替代（Replace）」、「減量（Reduce）」及「精致化（Refine）」之3R精神，將實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)最佳化，并說明如下：附錄二(凡申請(qǐng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)計(jì)劃書，皆須填寫本說明?！笨萍疾坑?jì)劃”請(qǐng)加填寫附錄三)32二、教育訓(xùn)練:為促進(jìn)3R精神之落實(shí)，本研究實(shí)際負(fù)責(zé)進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之相關(guān)人員之教育與訓(xùn)練經(jīng)歷：■

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物人道管理(如有勾選本項(xiàng)，需提出證明文件)■

實(shí)驗(yàn)專業(yè)技術(shù)訓(xùn)練(如有勾選本項(xiàng)，需提出證明文件)■

其他(請(qǐng)說明)：＿＿＿(簡(jiǎn)述參與過哪些實(shí)驗(yàn)動(dòng)物課程，如動(dòng)物中心說明會(huì)。)三、使用動(dòng)物來源:為確保本研究計(jì)劃實(shí)驗(yàn)質(zhì)量與效益，本實(shí)驗(yàn)之動(dòng)物來源為：■

AAALAC認(rèn)證繁殖機(jī)構(gòu)＿國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心、樂斯科＿■

其他繁殖機(jī)構(gòu)＿xx成功大學(xué)臺(tái)南市大學(xué)路1號(hào)(請(qǐng)注明名稱及地址等)＿(請(qǐng)注明名稱及地址等)?

其他（請(qǐng)說明）______________________________________33四、監(jiān)督機(jī)制:為確保實(shí)驗(yàn)質(zhì)量與效益，本研究計(jì)劃相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之監(jiān)督機(jī)制為：■「實(shí)驗(yàn)動(dòng)物照護(hù)及使用委員會(huì)(或小組)」，隸屬機(jī)構(gòu)層級(jí)__校級(jí)_■

召集人職稱__醫(yī)學(xué)院院長(zhǎng)__■

已設(shè)置專責(zé)專職獸醫(yī)師，并參與計(jì)劃審查及動(dòng)物照護(hù)與管理■

計(jì)劃審查已包括外部委員五、行政院農(nóng)業(yè)委員會(huì)最近一次實(shí)地查核本機(jī)構(gòu)「動(dòng)物科學(xué)應(yīng)用」之評(píng)比紀(jì)錄：?優(yōu)、■良、?尚可、?較差，查核年度：103年（請(qǐng)附相關(guān)公文書）六、若行政院農(nóng)業(yè)委員會(huì)最近一次實(shí)地查核本機(jī)構(gòu)「動(dòng)物科學(xué)應(yīng)用」之評(píng)比為「較差」，建議改善事項(xiàng)之改善情形說明如下：（請(qǐng)附佐證資料）

3R填寫說明，最后要附上最近一次農(nóng)委會(huì)查核公文343R說明書(NSCB04表格)說明:如申請(qǐng)”科技部計(jì)劃”，3R說明書請(qǐng)上傳此頁。如非科技部計(jì)劃，可以不用填寫此頁。附錄三(凡申請(qǐng)科技部計(jì)劃，請(qǐng)?zhí)顚懕菊f明。)(一)凡執(zhí)行研究計(jì)劃涉及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)者，請(qǐng)參考「取代(Replace)」、「減量(Reduce)」、及實(shí)驗(yàn)「精致化(Refine)」之實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福祉3R精神，并說明如何在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理3R下做最佳化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

(二)上述實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福祉查檢主要評(píng)估項(xiàng)目如下:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)替代方案評(píng)估:所提研究計(jì)劃是否考量有其他替代方案、考量減量、技術(shù)訓(xùn)練、實(shí)驗(yàn)環(huán)境改善及實(shí)驗(yàn)流程改善等符合動(dòng)物福祉。避免重覆開發(fā)生產(chǎn):所提研究計(jì)劃若涉及基因改造實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，是否已在國(guó)內(nèi)及國(guó)際種原庫(kù)搜尋。如已存在但因不易取得需重新開發(fā)者。開發(fā)完成之基因改造實(shí)驗(yàn)動(dòng)物后續(xù)之維持、寄