第50講動物細(xì)胞工程高考總復(fù)習(xí)優(yōu)化設(shè)計GAOKAOZONGFUXIYOUHUASHEJI2025素養(yǎng)目標(biāo)考點一動物細(xì)胞培養(yǎng)夯實基礎(chǔ)?精研教材1.動物細(xì)胞培養(yǎng)的地位動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞核移植、

等。

動物細(xì)胞融合2.動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件

血清培養(yǎng)液36.5±0.57.2~7.4維持培養(yǎng)液的pH3.動物細(xì)胞培養(yǎng)(1)生長特點①細(xì)胞貼壁:將細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)瓶內(nèi),置于適宜環(huán)境中培養(yǎng),懸液中分散的細(xì)胞很快就

上,稱為細(xì)胞貼壁。

②接觸抑制:當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面

時,細(xì)胞

的現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。

貼附在瓶壁相互接觸停止分裂增殖(2)過程

胰蛋白膠原蛋白單個細(xì)胞細(xì)胞懸液原代懸浮貼壁分裂受阻或停止傳代培養(yǎng)4.干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用(1)概念:干細(xì)胞是一類具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞,與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)密切相關(guān)。(2)三種干細(xì)胞比較

骨髓任何一種類型成體神經(jīng)干細(xì)胞特定的細(xì)胞或組織胚胎干細(xì)胞教材深挖1.[選擇性必修3第44頁正文]“在使用合成培養(yǎng)基時,通常需要加入血清等一些天然成分?！毖逯泻心男┐龠M(jìn)細(xì)胞代謝和生長的物質(zhì)?提示

蛋白質(zhì)、氨基酸、未知的促生長因子等。2.[選擇性必修3第44頁“旁欄思考”]進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)時常用胰蛋白酶分散細(xì)胞,這說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么?不能用胃蛋白酶的原因是什么?提示

蛋白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜pH為1.5左右,而動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4,胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性。3.[選擇性必修3第45頁正文]動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,用胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理組織塊,使組織分散成單個細(xì)胞的目的是什么?提示

使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸,保證細(xì)胞所需氧氣和營養(yǎng)的供應(yīng);保證細(xì)胞內(nèi)代謝物及時排出。4.[選擇性必修3第46頁“相關(guān)信息”延伸思考]科學(xué)家已嘗試采用多種方法來制備iPS細(xì)胞:借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中,直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來的,后來發(fā)現(xiàn)已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞。鏈高考·前掛后連(1)用胰蛋白酶將囊胚內(nèi)細(xì)胞團的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細(xì)胞。[2020·江蘇卷](

)(2)胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。[2020·江蘇卷](

)(3)動物細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的。[2010·浙江卷](

)(4)自體干細(xì)胞移植通常不會引起免疫排斥反應(yīng)。[2012·天津卷](

)(5)胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)能增殖但不能被誘導(dǎo)分化。[2012·天津卷](

)(6)造血干細(xì)胞具有分化出多種血細(xì)胞的能力,可用于治療白血病。[2012·天津卷](

)(7)動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動物的培育。[2011·江蘇卷](

)×√×√×√√透析重難?精準(zhǔn)突破動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較

練思維·考教銜接[根據(jù)2013山東卷、2016全國Ⅱ卷、2014福建卷、2015安徽卷、2014全國Ⅰ卷、2020全國Ⅰ卷情境設(shè)計]科學(xué)家通過誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞去分化獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞),繼而利用iPS細(xì)胞培育出與黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠,流程如下:(1)從黑鼠體內(nèi)獲得體細(xì)胞后,對其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為

,培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長至充滿培養(yǎng)皿底時停止分裂,這種現(xiàn)象稱為

。經(jīng)過多次傳代后,供體細(xì)胞中

的穩(wěn)定性會降低,因此,選材時必須關(guān)注傳代次數(shù)。

(2)小鼠胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)可由囊胚的分離培養(yǎng)獲得

,iPS細(xì)胞與ES細(xì)胞同樣具有發(fā)育的全能性,有望在對人類iPS細(xì)胞進(jìn)行定向

后用于疾病的細(xì)胞治療?？蒲腥藛T利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到

期時,可從其內(nèi)細(xì)胞團分離出ES細(xì)胞。

原代培養(yǎng)接觸抑制遺傳物質(zhì)內(nèi)細(xì)胞團細(xì)胞誘導(dǎo)分化囊胚(3)采用胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆,理論上可獲得無限個轉(zhuǎn)基因黑鼠,這是因為

。

(4)細(xì)胞融合實驗完成后,未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是

。

(5)寫出以黑鼠的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實驗步驟:

。取小鼠甲的脾臟剪碎,用胰蛋白酶處理使其分散成單個細(xì)胞,加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液整合有目的基因的成纖維細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)不能無限增殖考向探究?素養(yǎng)提升考向一

結(jié)合動物細(xì)胞培養(yǎng),考查生命觀念1.(多選)Vero細(xì)胞系來源于非洲綠猴腎上皮細(xì)胞,具有無限分裂和貼壁生長的特性。將新冠病毒接種到Vero細(xì)胞后,經(jīng)Vero細(xì)胞培養(yǎng)、新冠病毒滅活及提純,可制成新冠病毒滅活疫苗。下列敘述錯誤的是(

)A.Vero細(xì)胞可作為新冠病毒大量繁殖的“培養(yǎng)基”B.向Vero細(xì)胞培養(yǎng)液中加入適量干擾素可防止雜菌污染C.分瓶前需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的Vero細(xì)胞D.每傳代1次,培養(yǎng)瓶中的Vero細(xì)胞分裂1次BD解析

病毒必須寄生在活細(xì)胞內(nèi),因此Vero細(xì)胞可作為新冠病毒大量繁殖的“培養(yǎng)基”,A項正確;向Vero細(xì)胞培養(yǎng)液中加入適量抗生素可防止雜菌污染,而干擾素是抗病毒的,B項錯誤;胰蛋白酶可使組織細(xì)胞分散成單個細(xì)胞,因此分瓶前需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的Vero細(xì)胞,以進(jìn)行傳代培養(yǎng),C項正確;當(dāng)細(xì)胞發(fā)生接觸抑制時需要進(jìn)行傳代培養(yǎng),每傳代1次,培養(yǎng)瓶中的Vero細(xì)胞分裂不止1次,D項錯誤?？枷蚨?/p>

結(jié)合干細(xì)胞的培養(yǎng)及應(yīng)用,考查社會責(zé)任2.某學(xué)術(shù)期刊發(fā)表論文稱,利用人類多能干細(xì)胞培養(yǎng)的皮膚類器官在培養(yǎng)4~5個月后,形成了多層皮膚組織,包含毛囊、皮脂腺和神經(jīng)元回路,是迄今最逼真的人皮膚類器官。下列相關(guān)敘述正確的是(

)A.多能干細(xì)胞形成多層皮膚組織的過程中,遺傳物質(zhì)通常會發(fā)生改變B.多能干細(xì)胞培養(yǎng)形成多層皮膚組織,說明動物的體細(xì)胞具有全能性C.給燒傷病人移植自身多能干細(xì)胞培養(yǎng)成的皮膚類器官可減弱免疫排斥反應(yīng)D.該項研究結(jié)果表明多能干細(xì)胞可以分化成為人體內(nèi)所需的各種組織和器官C解析

多能干細(xì)胞形成多層皮膚組織的過程中,遺傳物質(zhì)并未發(fā)生改變,只發(fā)生了基因的選擇性表達(dá),A項錯誤;多能干細(xì)胞培養(yǎng)形成多層皮膚組織,未分化成其他各種細(xì)胞或發(fā)育成完整個體,不能體現(xiàn)動物體細(xì)胞的全能性,B項錯誤;研究結(jié)果表明,多能干細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)能形成多層皮膚組織,包含毛囊、皮脂腺和神經(jīng)元回路,但不能說明其能分化成人體內(nèi)的各種組織和器官,D項錯誤。3.Rag基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞?？蒲腥藛T通過誘導(dǎo)Rag基因缺失小鼠的體細(xì)胞獲得誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞),然后將Rag基因?qū)雐PS細(xì)胞并誘導(dǎo)使其分化為造血干細(xì)胞,再移植到Rag基因缺失小鼠體內(nèi)進(jìn)行治療。下列分析錯誤的是(

)A.誘導(dǎo)獲得iPS細(xì)胞時需要在體細(xì)胞中表達(dá)一些關(guān)鍵基因B.培養(yǎng)iPS細(xì)胞時需提供95%空氣和5%CO2的混合氣體環(huán)境C.利用顯微注射技術(shù)可以將Rag基因直接注入iPS細(xì)胞D.利用iPS細(xì)胞進(jìn)行治療存在導(dǎo)致小鼠發(fā)生腫瘤的風(fēng)險C解析

直接注射基因容易導(dǎo)致基因丟失,一般需要將Rag基因和載體連接形成重組DNA分子,再將其顯微注射到iPS細(xì)胞內(nèi),C項錯誤?？键c二動物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體夯實基礎(chǔ)?精研教材1.動物細(xì)胞融合技術(shù)

PEG融合電融合一定的流動性有性雜交2.單克隆抗體(1)原理:一種B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體,B淋巴細(xì)胞在體外

無限增殖;骨髓瘤細(xì)胞能

;B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到

細(xì)胞,既能無限增殖,又能產(chǎn)生特異性抗體。

不能無限增殖雜交瘤(2)制備過程

B淋巴細(xì)胞選擇培養(yǎng)基雜交瘤細(xì)胞(3)優(yōu)點①能準(zhǔn)確地識別

的細(xì)微差異。

②與特定

發(fā)生特異性結(jié)合。

③可以大量制備。(4)應(yīng)用①作為診斷試劑,可與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可大量制備。②用于治療疾病和

,形成抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC),實現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的

殺傷。

抗原抗原運載藥物選擇性教材深挖1.[選擇性必修3第48頁“相關(guān)信息”]滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去

,但并不破壞病原體的

。滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合與病毒和細(xì)胞所含的

有關(guān)。

感染能力抗原結(jié)構(gòu)糖蛋白2.[選擇性必修3第50頁“思考·討論”]抗體—藥物偶聯(lián)物(antibody-drug

conjugate,ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機制如下圖所示。ADC的作用機制示意圖(1)ADC的抗體的作用是

。

提示

在生物體內(nèi)與特定目標(biāo)細(xì)胞或組織相結(jié)合,具有導(dǎo)向作用(2)除了細(xì)胞毒素,還有哪些物質(zhì)理論上可以作為ADC中偶聯(lián)的藥物?提示

化學(xué)藥物、抗癌藥物等。(3)單克隆抗體診斷試劑盒和ADC在臨床應(yīng)用上各具有什么優(yōu)勢?提示

單克隆抗體診斷試劑盒具有特異性強、靈敏度高、可大量制備的優(yōu)勢。ADC在臨床上用于治療癌癥或其他疾病,具有療效高、毒副作用小的優(yōu)勢。鏈高考·前掛后連(1)有的病毒經(jīng)滅活處理后,可用于細(xì)胞工程中介導(dǎo)動物細(xì)胞的融合。[2020·浙江卷](

)(2)雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)。[2019·江蘇卷](

)(3)融合細(xì)胞c將同時表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因。[2018·江蘇卷](

)(4)產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素-8抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選必須通過分子檢測。[2014·天津卷](

)(5)細(xì)胞融合時使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成。[2013·重慶卷](

)(6)雜交瘤細(xì)胞經(jīng)篩選培養(yǎng)能獲得分泌特異性抗體的細(xì)胞群。[2013·重慶卷](

)√√×√×√透析重難?精準(zhǔn)突破1.植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較

比較項目植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動性、植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞增殖融合前處理除去細(xì)胞壁使細(xì)胞分散開相關(guān)酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶和膠原蛋白酶比較項目植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合誘導(dǎo)方法物理法:電融合法、離心法等;化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等聚乙二醇(PEG)融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法等結(jié)果雜種植株雜交細(xì)胞應(yīng)用培育植物新品種等主要用于制備單克隆抗體意義突破遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,打破了生殖隔離,擴展了雜交的親本組合2.血清抗體與單克隆抗體的比較

名稱產(chǎn)生特點血清抗體由漿細(xì)胞分泌一般從血清中分離,產(chǎn)量低、純度低、特異性差單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞分泌特異性強、靈敏度高、能大量制備練思維·考教銜接[根據(jù)2020全國Ⅰ卷、2014全國Ⅰ卷、2022浙江卷情境設(shè)計]為研制抗病毒A的單克隆抗體,某同學(xué)以小鼠甲為實驗材料設(shè)計了以下實驗流程?；卮鹣铝袉栴}。(1)上述實驗前必須給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是

。(2)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于

,使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是

。圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是

。

(3)細(xì)胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有

,體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是

。誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞選擇培養(yǎng)基只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞細(xì)胞融合是隨機的,且融合率達(dá)不到100%(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖,可采用的方法有

(答出2點即可)。

將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖;將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)

考向探究?素養(yǎng)提升考向

結(jié)合單克隆抗體及其應(yīng)用,考查科學(xué)探究1.(2024·山西聯(lián)考)人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤細(xì)胞分泌的一種糖蛋白。研究人員利用HCG免疫健康小鼠,制備了用于早孕診斷的HCG單克隆抗體。下列有關(guān)敘述錯誤的是(

)A.早孕診斷的原理是單克隆抗體與HCG特異性結(jié)合B.與一般的血清抗體相比,單克隆抗體的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高、可大量制備C.制備單克隆抗體的過程中有兩次篩選,第二次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞D.單克隆抗體的制備過程中主要運用的細(xì)胞工程技術(shù)包括動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞融合C解析

單克隆抗體的特異性強、靈敏度高,可以與HCG特異性結(jié)合,依據(jù)該原理,可用作早孕診斷,A項正確;一般的血清抗體針對性不強,與一般的血清抗體相比,單克隆抗體的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高、可大量制備,B項正確;對雜交細(xì)胞一般要進(jìn)行兩次篩選,第一次篩選是用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選獲得雜交瘤細(xì)胞,第二次篩選的方法為專一抗體陽性檢測和克隆化培養(yǎng),最終獲得的雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生特異性抗體,又能無限增殖,C項錯誤;動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ),動物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的用途是制備單克隆抗體,D項正確。2.(2023·河北廊坊模擬)抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)通過采用特定技術(shù)將具有生物活性的小分子藥物連接到能特異性識別腫瘤細(xì)胞的單克隆抗體上,實現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。ADC的結(jié)構(gòu)及其發(fā)揮作用的機理如圖所示,下列有關(guān)說法錯誤的是(

)A.單克隆抗體制備過程中通常將免疫后得到的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合B.用96孔板培養(yǎng)和多次篩選雜交瘤細(xì)胞后,在體外大規(guī)模培養(yǎng)可獲得單克隆抗體C.ADC通過抗體與細(xì)胞膜上的受體特異性結(jié)合,以主動運輸?shù)姆绞竭M(jìn)入腫瘤細(xì)胞D.ADC在腫瘤細(xì)胞里被溶酶體裂解,釋放藥物,使腫瘤細(xì)胞死亡C解析

ADC通過胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞,溶酶體使其裂解,釋放藥物,實現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷,C項錯誤?？键c三動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物夯實基礎(chǔ)?精研教材1.動物體細(xì)胞核移植和克隆動物

屬于無性繁殖(1)原理

,即動物細(xì)胞核中具有該種動物全套的遺傳信息。

(2)類型細(xì)胞核的全能性動物胚胎細(xì)胞分化程度低(3)涉及技術(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、

、核移植技術(shù)、

等。其中,核移植是核心技術(shù)。

動物細(xì)胞融合技術(shù)胚胎移植技術(shù)(4)過程

10代以內(nèi)的2.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景及存在的問題

遺傳改良生物反應(yīng)器轉(zhuǎn)基因克隆動物胚胎干細(xì)胞非常低健康遺傳和生理缺陷教材深挖1.[選擇性必修3第52頁“相關(guān)信息”]減數(shù)分裂Ⅱ中期(MⅡ期)卵母細(xì)胞中的“核”其實是

。文中所說的“去核”是去除該復(fù)合物。

2.[選擇性必修3第54頁“思考·討論”](1)體細(xì)胞核移植技術(shù)中必須先去掉受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的原因是

。

(2)通過體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物,不是對體細(xì)胞供體動物進(jìn)行了100%的復(fù)制,原因是

。

克隆動物絕大部分DNA來自供體細(xì)胞核,但核外還有少部分DNA(如線粒體DNA)來自受體卵母細(xì)胞紡錘體—染色體復(fù)合物保證核移植動物的核遺傳物質(zhì)全部來自供體細(xì)胞3.[選擇性必修3第54頁“相關(guān)信息”]目前動物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是

。也有人采用梯度離心、

短時間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下去核或使其中的

。

鏈高考·前掛后連(1)在克隆哺乳動物過程中,通常作為核移植受體細(xì)胞的是去核的次級卵母細(xì)胞。[2020·天津卷](

)(2)體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體。[2011·江蘇卷](

)顯微操作法紫外線DNA變性√×透析重難?精準(zhǔn)突破1.動物細(xì)胞培養(yǎng)與動物體細(xì)胞核移植的比較

2.細(xì)胞工程的各種技術(shù)手段及其原理總結(jié)

練思維·考教銜接[根據(jù)2018全國Ⅲ卷、2016全國Ⅱ卷、2014福建卷、2015安徽卷、2013山東卷情境設(shè)計]2018年《細(xì)胞》期刊報道,中國科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對非人靈長類動物進(jìn)行克隆,獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”?；卮鹣铝袉栴}。(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程,核移植是指

。

在核移植之前,必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核,目的是

;去核時常采用

法,受體應(yīng)選用

期的卵母細(xì)胞。

(2)哺乳動物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動物的難度

(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植,其原因是

。

將動物一個細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個已去核的卵母細(xì)胞保證核遺傳物質(zhì)來自供體細(xì)胞顯微操作去核MⅡ小于胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性相對容易(3)圖中A表示正常細(xì)胞核,染色體數(shù)為2n,則其性染色體的組成可為

。通過核移植方法獲得的克隆猴,與核供體相比,克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目

(填“減半”“加倍”或“不變”)。在哺乳動物核移植的過程中,若分別以雌性個體和雄性個體的體細(xì)胞作為核供體,通常,所得到的兩個克隆動物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目

(填“相同”或“不相同”),性染色體組合

(填“相同”或“不相同”)。

(4)與克隆羊“多莉”培養(yǎng)成功一樣,兩只克隆猴——“中中”和“華華”的成功獲得也證明了

。

XX或XY不變相同不相同已經(jīng)分化的動物體細(xì)胞核具有全能性考向探究?素養(yǎng)提升考向

結(jié)合動物細(xì)胞核移植,考查社會責(zé)任1.(2023·山東聊城聯(lián)考)“中中”和“華華”是兩只在我國出生的克隆獼猴,它們也是國際上首例利用體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得的非人靈長類動物。如圖表示培育“中中”和“華華”的流程。下列相關(guān)敘述正確的是(

)A.圖示過程中利用的技術(shù)有核移植和干細(xì)胞移植技術(shù)等B.這兩只克隆獼猴是由同一受精卵發(fā)育而成的雙胞胎C.融合細(xì)胞的培養(yǎng)過程需要無菌、無毒的環(huán)境和營養(yǎng)等條件D.利用A猴的胚胎干細(xì)胞核移植獲得克隆獼猴的難度更大些C解析

圖示過程包括核移植和胚胎移植等技術(shù),沒有干細(xì)胞移植技術(shù),A項錯誤;這兩只克隆獼猴是通過核移植、胚胎移植產(chǎn)生的,B項錯誤;胚胎干細(xì)胞的全能性比體細(xì)胞的全能性高,所以利用A猴的胚胎干細(xì)胞核移植獲得克隆獼猴的難度要小些,D項錯誤。2.(2024·湖北襄陽統(tǒng)考)科學(xué)家以小鼠胎兒成纖維細(xì)胞作供體,移植到去核卵母細(xì)胞中,通過滅活的病毒介導(dǎo)融合,激活培養(yǎng)9~12h后把形成的原核再移入一個去核的受精卵中獲得克隆小鼠,該過程運用了連續(xù)核移植法,下列相關(guān)敘述錯誤的是(

)A.對卵母細(xì)胞去核處理一般選擇在MⅡ期進(jìn)行B.培養(yǎng)細(xì)胞時通常需要在培養(yǎng)液中添加血清等一些天然成分C.采用成纖維細(xì)胞核移植方法成活率低于采用胚胎細(xì)胞核移植D.克隆小鼠的性狀由成纖維細(xì)胞核的基因與去核卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的基因決定D解析

對卵母細(xì)胞去核處理一般選擇在MⅡ期進(jìn)行,A項正確;培養(yǎng)細(xì)胞時通常需要在培養(yǎng)液中添加血清等一些天然成分,B項正確;胚胎細(xì)胞分化程度低,全能性容易體現(xiàn),胚胎細(xì)胞核移植的成活率高于采用成纖維細(xì)胞核移植,C項正確;據(jù)題干信息分析,成纖維細(xì)胞是整個導(dǎo)入去核的卵母細(xì)胞,再將形成的原核移入去核的另一個受精卵中,因此其性狀受成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核基因和去核的受精卵細(xì)胞質(zhì)基因共同控制,同時還受外界環(huán)境的影響,D項錯誤。真題演練?領(lǐng)悟考情角度1動物細(xì)胞培養(yǎng)1.(2023·海南卷)某團隊通過多代細(xì)胞培養(yǎng),將小鼠胚胎干細(xì)胞的Y染色體去除,獲得XO胚胎干細(xì)胞,再經(jīng)過一系列處理,使之轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞。下列有關(guān)敘述錯誤的是(

)A.營養(yǎng)供應(yīng)充足時,傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞不會發(fā)生接觸抑制B.獲得XO胚胎干細(xì)胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異C.XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過程發(fā)生了細(xì)胞分化D.若某瀕危哺乳動物僅存雄性個體,可用該方法獲得有功能的卵母細(xì)胞用于繁育A解析

營養(yǎng)供應(yīng)充足時,傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞也會發(fā)生接觸抑制,A項錯誤;XO胚胎干細(xì)胞中丟失了Y染色體,因而該細(xì)胞的獲得過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異,XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過程中細(xì)胞的功能發(fā)生了特化,因而發(fā)生了細(xì)胞分化,B、C兩項正確;若某瀕危哺乳動物僅存雄性個體,可用該方法獲得有功能的卵母細(xì)胞,進(jìn)而用于繁育,實現(xiàn)瀕危物種的保護(hù),D項正確。2.(2022·湖北卷)某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長緩慢,其原因不可能的是(

)A.實驗材料取自小鼠胚胎的腦組織B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封C.血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性A解析

小鼠胚胎的腦組織中含有豐富的原代神經(jīng)元,細(xì)胞增殖能力強,不會造成生長緩慢,A項符合題意;培養(yǎng)瓶瓶口密封會使培養(yǎng)液中缺氧,影響細(xì)胞有氧呼吸,造成供能不足,可能使細(xì)胞生長緩慢,B項不符合題意;血清經(jīng)過高溫處理后,其中活性成分變性,失去原有功能,細(xì)胞生存環(huán)境嚴(yán)重惡化,可能使細(xì)胞生長緩慢,C項不符合題意;小鼠內(nèi)環(huán)境為弱堿性,所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性,不適合細(xì)胞生存,可能造成細(xì)胞生長緩慢,D項不符合題意。角度2單克隆抗體的制備3.(2022·山東卷)如圖所示,將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子,在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體,簡稱雙抗。下列說法錯誤的是(

)A.雙抗可同時與2種抗原結(jié)合B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細(xì)胞C.篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原D.同時注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞D解析

雙抗同時含有抗體1、2的部分結(jié)構(gòu),可與2種抗原結(jié)合,A項正確。根據(jù)抗體與抗原特異性結(jié)合的特點,利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細(xì)胞,B項正確。篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原,才能刺激機體產(chǎn)生2種B淋巴細(xì)胞,進(jìn)而產(chǎn)生2種抗體,而不是刺激B淋巴細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞,C項正確,D項錯誤。4.(2023·湖北卷節(jié)選)某病毒對動物養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴(yán)重。我國學(xué)者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體,以期快速檢測該病毒,其主要技術(shù)路線如圖所示?；卮鹣铝袉栴}。(1)與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合前,已免疫的脾細(xì)胞(含漿細(xì)胞)

(填“需要”或“不需要”)通過原代培養(yǎng)擴大細(xì)胞數(shù)量;添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合,該過程中PEG對細(xì)胞膜的作用是

。

(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中,常使用特定的選擇培養(yǎng)基(如HAT培養(yǎng)基),該培養(yǎng)基對

和

生長具有抑制作用。

(3)單克隆抗體篩選中,將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交,其目的是

。不需要使細(xì)胞接觸處的脂質(zhì)分子重新排布,打開細(xì)胞膜,使細(xì)胞發(fā)生融合未融合的親本細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞通過抗體檢測呈陽性來獲得分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞解析

(1)漿細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞,已失去分裂能力,不能通過原代培養(yǎng)擴大細(xì)胞數(shù)量。脂溶性物質(zhì)PEG可使細(xì)胞接觸處的脂質(zhì)分子重新排布,打開細(xì)胞膜,使細(xì)胞發(fā)生融合。(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中,用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,在該培養(yǎng)基上,未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都