章末達(dá)標(biāo)驗(yàn)收(一)無菌操作技術(shù)實(shí)踐(時(shí)間：60分鐘滿分：100分)一、選擇題(共25小題，每小題2分，共50分)1．產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)菌落的細(xì)菌其最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()A．一個(gè)細(xì)菌、液體培養(yǎng)基B．許多細(xì)菌、液體培養(yǎng)基C．一個(gè)細(xì)菌、固體培養(yǎng)基D．許多細(xì)菌、固體培養(yǎng)基2．采用干熱滅菌、灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌、紫外線照射等幾種方法，可分別殺死哪些部位的雜菌()A．接種環(huán)、吸管、培養(yǎng)基、接種室B．吸管、接種環(huán)、培養(yǎng)基、接種箱C．培養(yǎng)基、吸管、接種環(huán)、接種箱D．培養(yǎng)皿、吸管、培養(yǎng)基、雙手3．下列關(guān)于消毒和滅菌的說法，不正確的是()A．滅菌是指殺死環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B．消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同的C．接種環(huán)用灼燒的方法滅菌D．常用消毒方法有煮沸法、紫外線法、化學(xué)藥品法4．用高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)可以形成愈傷組織。下列敘述不正確的是()A．該愈傷組織是細(xì)胞經(jīng)過脫分化和分裂形成的B．該愈傷組織的細(xì)胞沒有全能性C．該愈傷組織是由排列疏松的薄壁細(xì)胞組成的D．該愈傷組織可以形成具有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)5．有關(guān)植物組織培養(yǎng)過程中的細(xì)胞脫分化的說法，不正確的是()A．已經(jīng)分化的細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞的過程B．已經(jīng)分化的細(xì)胞轉(zhuǎn)變成為具有分生能力的薄壁細(xì)胞，進(jìn)而形成植物的愈傷組織的過程C．離體的植物組織在一定的培養(yǎng)條件下分化出根和芽的過程D．離體的植物組織在脫分化形成愈傷組織的過程中必須經(jīng)過有關(guān)激素的誘導(dǎo)6．當(dāng)先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果是()A．有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化B．細(xì)胞既分裂，又分化C．分化頻率提高D．有利于細(xì)胞分化，但不分裂7．生物科學(xué)研究是在實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上進(jìn)行的，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．顯微鏡是生物學(xué)研究的重要工具之一，胡克就是利用自己研制的顯微鏡發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞B．肺炎球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)都證明了DNA是生物的遺傳物質(zhì)C．袁隆平培育的雜交水稻是偶然在田間發(fā)現(xiàn)并擴(kuò)大生產(chǎn)得到的D．生物科學(xué)與其他學(xué)科如物理學(xué)和化學(xué)的研究有密切的關(guān)系8．關(guān)于用涂布平板法培養(yǎng)和計(jì)數(shù)土壤中僅以尿素為氮源的微生物的實(shí)驗(yàn)，以下操作不正確的是()A．需制備系列濃度梯度的土壤懸液B．所選用的培養(yǎng)基中，尿素為唯一氮源C．接種時(shí)從濃度最低的土壤懸液開始，每個(gè)濃度設(shè)置3個(gè)重復(fù)D．涂布平板上形成的每個(gè)菌落，都是由樣品中的單個(gè)個(gè)體形成的9．用平板劃線法或涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)()①可以用相同的培養(yǎng)基②都需要使用接種環(huán)進(jìn)行接種③都需要在火焰旁進(jìn)行接種④都可以用來計(jì)數(shù)活菌A．①② B．③④C．①③ D．②④10．在農(nóng)田土壤的表層自生固氮菌較多。將用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可將自生固氮菌與其他細(xì)菌分開，對(duì)培養(yǎng)基的要求是()①加抗生素②不加抗生素③加氮素④不加氮素⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦37℃恒溫箱中培養(yǎng)⑧28～30℃溫度下培養(yǎng)A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦11．某同學(xué)用稀釋度為105的土壤稀釋液，分別取0.1mL涂布在四個(gè)平板上，適當(dāng)培養(yǎng)后四個(gè)平板上生長的菌落數(shù)分別為86、90、94、350，那么每克樣品中的活菌數(shù)約為()A．9×105 B．1.55×108C．9×107 D．1.55×10712．焦化廠活性污泥中富含難降解的有機(jī)物苯甲酰肼，是當(dāng)前焦化行業(yè)環(huán)保治理的難點(diǎn)。某同學(xué)通過查閱資料發(fā)現(xiàn)可通過微生物降解方法處理焦化廠污染物。下列有關(guān)分析錯(cuò)誤的是()A．應(yīng)該從農(nóng)田土壤中篩選目的菌B．配制以苯甲酰肼作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選C．利用平板劃線法可以對(duì)初步篩選出的目的菌進(jìn)行純化D．逐步提高培養(yǎng)基中苯甲酰肼的濃度可以得到能高效降解污染物的優(yōu)質(zhì)菌株13．通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長，在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制細(xì)菌和放線菌的生長，在培養(yǎng)基中加入10%酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分離出()A．大腸桿菌 B．霉菌C．放線菌 D．固氮細(xì)菌14．下面為植物組織培養(yǎng)過程的示意圖：①eq\o(→,\s\up7(脫分化))②eq\o(→,\s\up7(再分化))③→④對(duì)上圖的下列敘述，錯(cuò)誤的是()A．將①經(jīng)脫分化培養(yǎng)成②時(shí)，再植上人造種皮即可獲得人造種子B．植物組織培養(yǎng)所依據(jù)的生物學(xué)原理為細(xì)胞的全能性C．③→④過程指植物的營養(yǎng)生長和生殖生長階段D．②→③的再分化過程中，誘導(dǎo)②生根的激素為生長素15．下列實(shí)例中能體現(xiàn)出細(xì)胞全能性的是()①胡蘿卜單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)成可育的植株②受精卵形成種子的過程③用煙草組織培養(yǎng)的單個(gè)組織培養(yǎng)出了可育的完整植株④由種子發(fā)育成植株A．①③④ B．①③C．②③ D．①②③16．配制的培養(yǎng)基成分是：纖維素粉、NaNO3、Na2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、酵母浸膏、水解酪素。該培養(yǎng)基能使下面哪種微生物大量繁殖()A．酵母菌 B．自生固氮菌C．各種細(xì)菌 D．纖維素分解菌17．某同學(xué)用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基進(jìn)行大腸桿菌純化培養(yǎng)。下列說法錯(cuò)誤的是()A．蛋白胨可為大腸桿菌的生長提供氮源和維生素等營養(yǎng)B．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基需經(jīng)高壓蒸汽滅菌后調(diào)節(jié)pHC．倒平板操作中，待平板冷卻凝固后將平板倒過來放置D．大腸桿菌純化培養(yǎng)可以采用平板劃線法或涂布平板法18．某學(xué)者欲研究被石油污染過的土壤中的細(xì)菌數(shù)并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列有關(guān)操作錯(cuò)誤的是()A．利用平板劃線法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)B．利用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選能分解石油的細(xì)菌C．采用涂布平板法分離菌種D．稱取土壤和稀釋土壤溶液時(shí)應(yīng)在火焰旁19．(江蘇高考)某種極具觀賞價(jià)值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植，可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量優(yōu)質(zhì)苗，下列技術(shù)中不能選用的是()A．利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗B．采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗C．采集幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上D．采用幼葉、莖尖等部位的組織進(jìn)行組織培養(yǎng)20．下圖為將胡蘿卜的離體組織在一定條件下培育形成試管苗的過程示意圖。有關(guān)敘述正確的是()A．①②過程中都會(huì)發(fā)生細(xì)胞的增殖和分化B．利用此過程獲得的試管苗可能為雜合子C．此過程依據(jù)的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性D．在利用單倍體育種法培育優(yōu)質(zhì)小麥的過程中，不經(jīng)過愈傷組織階段21．對(duì)無菌操作轉(zhuǎn)接培養(yǎng)物的敘述中，正確的是()①接種環(huán)在火焰上灼燒滅菌②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞③打開棉塞的試管口通過火焰④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液，蘸取一環(huán)菌液轉(zhuǎn)移到一裝有無菌培養(yǎng)基的試管中⑤將試管口塞上棉塞⑥接種環(huán)進(jìn)行滅菌A．①②④⑤⑥ B．①②③④⑤C．①②③④⑤⑥ D．①②③④22．抗生素可由微生物產(chǎn)生，具有抑菌作用，能在瓊脂培養(yǎng)基中擴(kuò)散。在篩選產(chǎn)生抗生素的菌種時(shí)，先在瓊脂培養(yǎng)基平板上劃線接種一種從土壤中獲得的甲菌，在27℃下培養(yǎng)3d，形成菌落。然后接種乙、丙、丁三種致病菌(如下圖a)，繼續(xù)在同樣條件下培養(yǎng)3d，結(jié)果如下圖b。分析結(jié)果，得出的結(jié)論是()①甲菌產(chǎn)生了抗生素②丁菌的生長被丙菌產(chǎn)生的抗生素抑制③乙菌的生長被甲菌產(chǎn)生的抗生素抑制④丙菌產(chǎn)生的抗生素抑制了乙菌的生長A．①③ B．①④C．②③ D．②④23．甲、乙、丙是三種微生物，下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長繁殖；甲能在Ⅰ中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，而甲和丙都不能。下列說法正確的是()培養(yǎng)基粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40．5g蔗糖10g(NH4)2SO40．4gH2O100mLMgSO49．25gCaCl20．5gⅠ＋＋＋＋－＋＋＋Ⅱ＋＋＋－＋＋＋＋Ⅲ＋＋＋＋＋＋＋＋注：“＋”表示培養(yǎng)基中加入了這種物質(zhì)，“－”表示培養(yǎng)基中沒有加入這種物質(zhì)。A．甲、乙、丙都是異養(yǎng)型微生物B．甲、乙都是自養(yǎng)型微生物，丙是異養(yǎng)型微生物C．甲是異養(yǎng)型微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)型微生物D．甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)型微生物，丙是異養(yǎng)型微生物24．某組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的愈傷組織被真菌嚴(yán)重污染，為查找污染原因設(shè)計(jì)了四個(gè)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)條件除圖示外其他均相同。下列各圖表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果，據(jù)圖不能得出的初步結(jié)論是()A．污染主要不是培養(yǎng)基滅菌時(shí)間短造成的B．污染不可能來源于組織培養(yǎng)所用的離體組織C．調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH不能解決污染問題D．調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度不能解決污染問題25．下表資料表明在各種培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長情況，(S、C、M)為簡單培養(yǎng)基，U、V、X、Y、Z代表加入培養(yǎng)基的不同物質(zhì)，問哪一種物質(zhì)細(xì)菌不能合成()培養(yǎng)基S、C、MV＋ZU＋YZ＋XV＋YU＋XY＋Z生長狀態(tài)－＋－＋－＋注：表中“＋”表示能生長，“－”表示不能生長。A．U B．VC．Y D．Z二、非選擇題(共50分)26．(12分)耐高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選了能高效產(chǎn)生耐高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示：(1)從用途上來說，Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，僅以淀粉作為________源；從物理狀態(tài)上來說，Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時(shí)一般加入________作為凝固劑。(2)進(jìn)行①過程的目的是________；②過程所使用的接種方法是________法。(3)Ⅰ、Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是________________；一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用__________________法滅菌。(4)部分嗜熱菌在Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基上生長時(shí)可釋放淀粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈，應(yīng)挑出透明圈________(填“大”或“小”)的菌落，接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上。(5)下圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請(qǐng)分析接種的具體方法。獲得圖A效果的接種方法是________，獲得圖B效果的接種方法是________。一同學(xué)用涂布平板法純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是________________________，應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此現(xiàn)象？______________________________________________________________________________。27．(9分)(浙江高考)幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下：eq\x(配制培養(yǎng)基)→eq\x(滅菌、倒平板)→eq\x(X)→eq\x(培養(yǎng))→eq\x(觀察)請(qǐng)回答：(1)在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有________，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會(huì)出現(xiàn)________色環(huán)帶。(2)下列對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是________滅菌。A．高壓蒸汽 B．紫外燈照射C．70%酒精浸泡 D．過濾(3)步驟X表示________。在無菌條件下操作時(shí)，先將菌液稀釋，然后將菌液________到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得________菌落。(4)在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置并放在_______中。若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致_____________。(5)臨床上用14C呼氣試驗(yàn)檢測人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將14C標(biāo)記的________分解為NH3和14CO2。28．(11分)將基因型為AaBb的水稻(具有24條染色體)的葉肉細(xì)胞通過無菌操作接入含有營養(yǎng)成分全面的培養(yǎng)基的試管中，在一定條件下培養(yǎng)形成試管幼苗，其過程如下圖所示：eq\x(\a\al(水稻的某,種細(xì)胞))eq\o(→,\s\up7([1]))eq\x(\a\al(愈傷,組織))eq\o(→,\s\up7([2]))eq\x([3])→eq\x([4])(1)圖中的[1]過程為__________，圖中的[2]過程為__________。(2)在形成愈傷組織的過程中，細(xì)胞必須不斷地從培養(yǎng)基中獲得__________、__________和小分子有機(jī)物等營養(yǎng)物質(zhì)。(3)如果[4]是無病毒植株，則“水稻的某種細(xì)胞”應(yīng)選用__________或__________細(xì)胞，這種繁殖方式實(shí)際上是___________，培養(yǎng)成的植株的基因型為________________________。(4)如果某種細(xì)胞選用的是水稻花粉細(xì)胞，則[4]稱為__________植株，基因型可能是________________________________________________________________________，植株特點(diǎn)為___________________________________________________________，需用______________處理，使其恢復(fù)正常體細(xì)胞染色體數(shù)，對(duì)應(yīng)的基因型為________________________________________________________________________。29．(11分)(新課標(biāo)全國卷)請(qǐng)回答：(1)植物微型繁殖技術(shù)屬于植物組織培養(yǎng)的范疇。該技術(shù)可以保持品種的________，繁殖種苗的速度_________________________________________________________________。離體的葉肉細(xì)胞在適宜的條件下培養(yǎng)，最終能夠形成完整的植株，說明該葉肉細(xì)胞具有該植物的全部____________。(2)把試管苗轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基上時(shí)，需要在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行，其原因是避免________的污染。(3)微型繁殖過程中，適宜濃度的生長素單獨(dú)使用可誘導(dǎo)試管苗________，而與________配比適宜時(shí)可促進(jìn)芽的增殖。若要抑制試管苗的生長，促使愈傷組織產(chǎn)生和生長，需要使用的生長調(diào)節(jié)劑是________(填“脫落酸”或“2,4-D”)。(4)將某植物試管苗培養(yǎng)在含不同濃度蔗糖的培養(yǎng)基上一段時(shí)間后，單株鮮重和光合作用強(qiáng)度的變化如下圖。據(jù)圖分析，隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加，光合作用強(qiáng)度的變化趨勢(shì)是________，單株鮮重的變化趨勢(shì)是________。據(jù)圖判斷，培養(yǎng)基中不含蔗糖時(shí)，試管苗光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物的量________(填“能”或“不能”)滿足自身最佳生長的需要。(5)據(jù)圖推測，若要在誘導(dǎo)試管苗生根的過程中提高其光合作用能力，應(yīng)________(填“降低”或“增加”)培養(yǎng)基中蔗糖濃度，以便提高試管苗的自養(yǎng)能力。30．(7分)在探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量變化的實(shí)驗(yàn)中，需利用計(jì)數(shù)板對(duì)微生物細(xì)胞進(jìn)行直接計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)板是一個(gè)特制的可在顯微鏡下觀察的玻片，樣品就滴在計(jì)數(shù)室內(nèi)。計(jì)數(shù)室由25×16＝400個(gè)小室組成，容納液體總體積為0.1mm3。某同學(xué)操作時(shí)將1mL酵母菌樣品加99mL無菌水稀釋。用無菌吸管吸取少許使其自行滲入計(jì)數(shù)室，蓋上蓋玻片并用濾紙吸去多余菌液，進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)。(1)在實(shí)驗(yàn)中，某同學(xué)的部分實(shí)驗(yàn)操作過程是這樣的：①從靜置試管中吸取酵母菌培養(yǎng)液加入計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)，并記錄數(shù)據(jù)；②把酵母菌培養(yǎng)液放置在冰箱中；③第7d再取樣計(jì)數(shù)，記錄數(shù)據(jù)，統(tǒng)計(jì)分析繪成曲線。請(qǐng)糾正該同學(xué)實(shí)驗(yàn)操作中的3處錯(cuò)誤：Ⅰ._______________________________________________________________________。Ⅱ._______________________________________________________________________。Ⅲ._______________________________________________________________________。(2)在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)該對(duì)計(jì)數(shù)板、吸管等器具進(jìn)行________處理。(3)如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)采取的措施是_____________________。(4)如果觀察到如圖所示a、b、c、d、e5個(gè)大格共80個(gè)小室內(nèi)共有酵母菌48個(gè)，則上述1mL酵母菌樣品中約有酵母菌________個(gè)；要獲得較為準(zhǔn)確的數(shù)值，減少誤差，你認(rèn)為該怎么做？________________________________________________________________。答案1．選C在固體培養(yǎng)基上由一個(gè)細(xì)菌繁殖而來的子細(xì)菌群體叫菌落。2．選B培養(yǎng)基適合用高壓蒸汽滅菌，接種環(huán)使用灼燒滅菌，吸管使用干熱滅菌，接種箱使用紫外線照射進(jìn)行消毒。3．選B消毒僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物，而滅菌是殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子，故二者的實(shí)質(zhì)不同。4．選B植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性。植物細(xì)胞只有在脫離了植物體，在一定的外部因素的作用下，細(xì)胞經(jīng)脫分化和分裂形成愈傷組織，才能表現(xiàn)出全能性，由愈傷組織分化形成胚狀體或叢芽，從而形成新的植物體。5．選C離體的植物組織或細(xì)胞在一定的培養(yǎng)條件下，先脫分化形成植物的愈傷組織，才可以再分化出根和芽，形成完整的植株。而分化出根和芽的過程屬于再分化。6．選B細(xì)胞分裂素和生長素的使用順序不同，培養(yǎng)的結(jié)果不同。先使用生長素，再使用細(xì)胞分裂素，有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，細(xì)胞既分裂又分化；兩者同時(shí)使用，細(xì)胞分化頻率提高。7．選C胡克用自己研制的顯微鏡發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞。肺炎球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)都證明了DNA是遺傳物質(zhì)。袁隆平培育的雜交水稻是在發(fā)現(xiàn)了雄性不育株的基礎(chǔ)上進(jìn)行無數(shù)次實(shí)驗(yàn)得到的，但雄性不育株并不是雜交水稻。物理學(xué)和化學(xué)可以為生物學(xué)提供一些借鑒和幫助。8．選D由于待測樣品往往不易完全分散成單個(gè)個(gè)體，長成的菌落，也有可能來源于樣品中的2～3個(gè)或更多個(gè)個(gè)體。9．選C平板劃線法或涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基；平板劃線法使用接種環(huán)進(jìn)行操作，而涂布平板法使用玻璃刮鏟進(jìn)行操作；純化時(shí)，要進(jìn)行無菌操作，需要在火焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基；平板劃線法一般用于分離而不是計(jì)數(shù)。10．選C自生固氮菌有固氮功能，因此培養(yǎng)基中不需要加氮素；細(xì)菌對(duì)抗生素敏感，因此，不能加抗生素；自生固氮菌是異養(yǎng)型的，應(yīng)加葡萄糖；其生長繁殖的適宜溫度是28～30℃。11．選C菌落數(shù)在30～300為有效數(shù)據(jù)，因此每克樣品中的活菌數(shù)＝(C÷V)×M＝(eq\f(86＋90＋94,3)÷0.1)×105＝9×107。12．選A焦化廠活性污泥中富含難降解的有機(jī)物苯甲酰肼，應(yīng)從焦化廠活性污泥中篩選能降解苯甲酰肼的細(xì)菌。13．選A固氮微生物的生長不需要從培養(yǎng)基上獲得氮源，可在缺乏氮源的培養(yǎng)基上正常生長；加入青霉素的培養(yǎng)基上不能生長細(xì)菌和放線菌，則可收獲霉菌；加入酚的培養(yǎng)基使細(xì)菌和霉菌不能正常生長，而放線菌卻能利用酚作原料合成自身產(chǎn)物。14．選A人工種子是由通過植物組織培養(yǎng)將離體的植物組織培養(yǎng)成的具有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)③包裹上人造種皮制成的，而不是由愈傷組織②包上人造種皮形成的。15．選B細(xì)胞全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。其中①和③都是屬于由分化的細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)形成可育的植株，體現(xiàn)了細(xì)胞全能性。受精卵形成種子，但沒有發(fā)育成完整個(gè)體。由種子發(fā)育成的植株實(shí)質(zhì)上是由種子中的胚(新植物體的幼體)發(fā)育而來的。16．選D該培養(yǎng)基的有機(jī)營養(yǎng)成分里面含碳的營養(yǎng)物質(zhì)是纖維素，不能分解利用纖維素的微生物不能在該培養(yǎng)基上生長，所以屬于選擇培養(yǎng)基。17．選B蛋白胨為天然成分，能為大腸桿菌提供氮源和維生素等營養(yǎng)；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基應(yīng)先調(diào)節(jié)pH再進(jìn)行高壓蒸汽滅菌；倒平板操作中，待平板冷卻凝固后將平板倒過來放置，可以防止冷凝水滴落培養(yǎng)基上造成污染；大腸桿菌純化培養(yǎng)可以采用平板劃線法或涂布平板法，而且后者還可以用于計(jì)數(shù)。18．選A平板劃線法能對(duì)細(xì)菌分離純化但不能計(jì)數(shù)，通常將被石油污染過的土壤浸出液稀釋后，采用涂布平板法分離分解石油的細(xì)菌菌種，并對(duì)菌種進(jìn)行計(jì)數(shù)；篩選能分解石油的細(xì)菌只能利用以石油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基；稱取土壤和稀釋土壤溶液過程中的每一步都要在火焰旁操作。19．選B利用扦插、嫁接的方法都能快速繁殖，且保持親代的優(yōu)良性狀；花粉粒為雄配子，由于在減數(shù)分裂過程中等位基因分離，其單倍體植株不一定能保持親代的優(yōu)良性狀，并且由于單倍體高度不育，也不宜推廣種植；用植物的體細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，可快速繁殖且保持親本優(yōu)良性狀。20．選B①過程中發(fā)生了脫分化和增殖，②過程中發(fā)生了再分化和增殖；若該胡蘿卜為雜合子時(shí)，培養(yǎng)成的植株就是雜合子；植物組織培養(yǎng)中利用的原理是植物細(xì)胞的全能性；在利用單倍體育種法培育優(yōu)質(zhì)小麥的過程中，有兩種途徑，其中一種是先形成愈傷組織，再誘導(dǎo)分化為植株。21．選C在無菌操作轉(zhuǎn)接培養(yǎng)物的過程中，剛開始應(yīng)灼燒接種環(huán)進(jìn)行滅菌，在操作過程中應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行，轉(zhuǎn)接完成后還應(yīng)對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，以防止培養(yǎng)物擴(kuò)散到環(huán)境中。22．選A由圖可得出，乙、丙、丁三種致病菌不會(huì)產(chǎn)生抗生素，否則靠近乙、丙、丁的甲菌落不能生長。從圖b來看，乙菌的生長被抑制，最可能的原因是甲菌產(chǎn)生了抗生素，此種抗生素只能抑制乙菌的生長，而對(duì)丙、丁兩種致病菌沒有影響。23．選DⅠ中缺少N，Ⅱ中缺少有機(jī)物，Ⅲ中營養(yǎng)全面。N是微生物生長的必需元素，每一種微生物正常生長都需要N，但自己能夠固氮的微生物可以生活在無氮培養(yǎng)基中。甲能在Ⅰ中生長繁殖，而乙、丙都不以，說明甲是能夠固氮的微生物。乙能在Ⅱ中生長繁殖，而甲、丙不能，說明乙不需要培養(yǎng)基為它的正常生命活動(dòng)提供能源物質(zhì)，則乙為自養(yǎng)型微生物，甲、丙都為異養(yǎng)型微生物。24．選Ba、c、d圖解所示的信息是隨培養(yǎng)基滅菌時(shí)間、培養(yǎng)基pH和培養(yǎng)溫度的增加，污染率在90%上下波動(dòng)，說明污染源不是這三方面的原因；而b圖解中隨外植體消毒時(shí)間的延長，污染率急劇下降，因而，該曲線表明組織培養(yǎng)所用的離體組織是污染的主要原因。25．選C從表中可以看出，凡是能生長的均有Y，而不能生長的均無Y。因此，Y是細(xì)菌不能合成的物質(zhì)。26．解析：(1)篩選特定微生物的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。淀粉酶能催化淀粉分解，故篩選能高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌要以淀粉為唯一碳源。采用平板劃線法接種的是固體培養(yǎng)基，通常用瓊脂作為凝固劑。(2)①、②過程為將樣品稀釋后用涂布平板法接種。(3)制備培養(yǎng)基時(shí)先調(diào)pH后滅菌，培養(yǎng)基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。(4)嗜熱菌可產(chǎn)生淀粉酶以分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍出現(xiàn)透明圈，透明圈越大，說明該嗜熱菌分解淀粉的能力越強(qiáng)。(5)純化培養(yǎng)中接種方法有平板劃線法和涂布平板法，前一種方法形成的菌落分布較均勻，后一種方法形成的菌落分布不均勻，先劃線的部分菌落密集甚至相連，后劃線的部分菌落分布稀疏。涂布平板時(shí)如菌液濃度過高會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基上菌落連成一片，無法分離，操作時(shí)應(yīng)適當(dāng)增大稀釋倍數(shù)。答案：(1)選擇(唯一)碳瓊脂(2)稀釋涂布平板(3)先調(diào)節(jié)pH，后滅菌高壓蒸汽滅菌(4)大(5)涂布平板法平板劃線法菌液濃度過高增大稀釋倍數(shù)(或培養(yǎng)過程被雜菌污染嚴(yán)格無菌操作)27．解析：(1)幽門螺桿菌(Hp)含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)Hp，由于尿素經(jīng)脲酶的降解可產(chǎn)生堿性的NH3，NH3能使培養(yǎng)基中的酚紅由紅黃色變成紅色，故菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿素加熱會(huì)分解，對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌最好用G6玻璃砂漏斗過濾。(3)微生物的分離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基→滅菌、倒平板→接種→培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上。(4)微生物培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無法形成單菌落。(5)幽門螺桿菌能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2，故臨床上常用14C呼氣試驗(yàn)檢測人體內(nèi)幽門螺桿菌的存在。答案：(1)脲酶紅(2)D(3)接種涂布單(4)恒溫培養(yǎng)箱無法形成單菌落(5)尿素28．解析：(1)植物組織培養(yǎng)的基本過程為：外植體eq\o(→,\s\up7(脫分化))愈傷組織eq\o(→,\s\up7(再分化))根、芽→植物體。(2)在形成愈傷組織的過程中，細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用，