(12)發(fā)明專利(10)授權(quán)公告號CN106860492B(65)同一申請的已公布的文獻(xiàn)號(73)專利權(quán)人杭州福斯特應(yīng)用材料股份有限公司地址311300浙江省杭州市臨安市錦北街A61K36/60(2006.01)郭孟璧等.工業(yè)大麻酚類化合物HPLC分析卷(第3期),182-185頁.常穎等.大麻概況及其氣相分析方法綜述.《刑事技術(shù)》.2011,第2011年卷(第1期),35-38.道福斯特街8號(72)發(fā)明人李大偉鄧偉周光大林建華(74)專利代理機(jī)構(gòu)杭州求是專利事務(wù)所有限公司33200代理人邱啟旺審查員郭潔(54)發(fā)明名稱一種大麻酚類化合物的制備方法本發(fā)明公開了一種大麻酚類化合物的制備粉碎，置于具有攪拌功能的超聲波提取裝置中，加入弱極性或非極性有機(jī)溶劑和弱酸，超聲波輔劑，獲得工業(yè)大麻提取物的浸膏，采用強(qiáng)極性有劑，得到工業(yè)大麻提取物的初級品，再在初級品液中緩慢加入酸溶液，分離，得到富含大麻酚類化合物的工業(yè)大麻提取物產(chǎn)品。該方法提取效率21.一種大麻酚類化合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：(1)篩選工業(yè)大麻植物材料，所述工業(yè)大麻植物材料包括工業(yè)大麻花葉、種子或者果實(shí)材料，70～140℃烘干至含水量低于5wt%,粉碎，避光保存；然后將粉碎材料置于具有攪拌功能的超聲波提取裝置中，加入工業(yè)大麻植物材料2～20倍質(zhì)量的弱極性或非極性有機(jī)溶劑，再加入相當(dāng)于弱極性或非極性有機(jī)溶劑添加質(zhì)量的0.1～2%的弱酸，超聲波頻率20~40KHz,超聲波功率100～2000W,20～100℃下超聲波輔助提取0.1～5h,過濾，獲得工業(yè)大麻提取物濾液，在濾液中加入相當(dāng)于工業(yè)大麻植物材料0.01～0.8倍質(zhì)量的活性炭，吸附脫色(2)加入強(qiáng)極性有機(jī)溶劑充分溶解浸膏，冷凍至-20±10℃下封存24～60h,過濾，除去不溶物，蒸干溶劑，得到工業(yè)大麻提取物的初級品，再在初級品中邊攪拌，邊加入強(qiáng)堿溶液至pH為9～12,將大麻酚類化合物轉(zhuǎn)化為酚鹽形式，離心，過濾，除去不溶物，在濾液中加入弱酸至pH為2～5,將酚鹽轉(zhuǎn)化為游離的大麻酚類化合物，并從溶液中析出，分離，得到富含大麻酚類化合物的工業(yè)大麻提取物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大麻酚類化合物的制備方法，其特征在于：所述弱極性或3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大麻酚類化合物的制備方法，其特征在于：所述弱酸選自4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大麻酚類化合物的制備方法，其特征在于：所述的具有攪拌功能的超聲波提取裝置為浴槽式超聲波發(fā)生器或采用探頭式超聲波發(fā)生裝置，超聲波頻率為40KHz,超聲波功率為800W,40～70℃下超聲波輔助提取50min。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大麻酚類化合物的制備方法，其特征在于：所述活性炭的加入量為工業(yè)大麻植物材料0.5倍質(zhì)量。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大麻酚類化合物的制備方法，其特征在于：所述吸附脫色過程采用水浴控制溫度，且水浴溫度為50～100℃,吸附脫色時間為10～80min。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大麻酚類化合物的制備方法，其特征在于：所述強(qiáng)極性有機(jī)溶劑選自C1～C5的醇，且加入量相當(dāng)于工業(yè)大麻提取物浸膏2～10倍質(zhì)量。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大麻酚類化合物的制備方法，其特征在于：所述的強(qiáng)堿溶3技術(shù)領(lǐng)域[0001]本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥材料制備技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種大麻酚類化合物的高效制背景技術(shù)[0002]大麻屬一年生草本植物，俗稱線麻、漢麻和火麻。大麻在我國至少有6000多年的歷蒙和新疆等地。由于大麻中含有一種致幻物質(zhì)四氫大麻酚(THC),易被不法分子用來提煉毒品，造成社會危害，所以很多國家對該植物的使用做出了相應(yīng)的規(guī)定。[0003]20世紀(jì)90年代，歐盟根據(jù)大麻植株花葉干物質(zhì)中四氫大麻酚(THC)含量高低，將大麻分為藥用型(THC>0.5%)、中間型(0.3%<THC<0.5%)和纖維型(THC<0.3%)。其中，將THC含量低于0.3%的大麻稱作工業(yè)大麻，可以進(jìn)行規(guī)?；N植與工業(yè)化利用。從上個世紀(jì)90年代起，以歐美為代表的發(fā)達(dá)國家均致力于開發(fā)和利用低毒工業(yè)大麻。鑒于低毒工業(yè)大麻的多種用途，我國相關(guān)的部分省份如云南、黑龍江等地正在逐漸解除對工業(yè)大麻的限制，培育出了具有自主知識產(chǎn)權(quán)的低毒工業(yè)大麻品種，在國家禁毒委和地方禁毒部門與合工業(yè)大麻。[0004]工業(yè)大麻渾身是寶，具有較高的應(yīng)用價(jià)值，工業(yè)大麻植物可用于開發(fā)無毒涂料、上光劑、潤滑油、柴油、化妝品、肥皂、香波、浴波和動物蛋白飼料等，目前全世界已開發(fā)出25000多種大麻產(chǎn)品，大麻及其制品被廣泛地應(yīng)用于人們生活及工、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。大麻營養(yǎng)成分豐富，含有20～25%的蛋白質(zhì)，20～30%的碳水化合物和10～15%的可溶性纖維；含有體必需的多聚不飽和脂肪酸。[0005]大麻酚類化合物是一類萜烯酚類化合物，研究證實(shí)，工業(yè)大麻植株中含有多種大麻酚類化合物，現(xiàn)已分離得到70多種以上，其中主要的大麻酚類化合物有大麻二酚、大麻[0006]治療癲癇是大麻酚類化合物的重要用途之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)道，癲癇是全球最常見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病之一，目前全世界約有5000萬癲癇患者，在美國約有300萬例患者，在中國大約有1000萬例癲癇患者，占全國總?cè)丝诘?.7%。目前癲癇的治療方法主要包括西醫(yī)療法和中醫(yī)療法，西醫(yī)療法包括藥物治療、手術(shù)治療、神經(jīng)調(diào)控治療等，但是長期服用會4并不明顯，而且大約有30%的患者使用市售抗癲癇藥物無法控制病情。[0007]英國GW制藥公司是全球開發(fā)并上市首個含有大麻二酚等大麻酚類化合物的工業(yè)大麻提取物處方藥的公司，主要用于治療嬰兒嚴(yán)重肌陣攣性癲癇和治療多發(fā)性硬化癥引起了日本、中國大陸及香港)、中東(除了以色列)和非洲等國家的上市權(quán)。[0008]目前用于工業(yè)大麻植株比如工業(yè)大麻花葉的提取方法主要是超臨界二氧化碳萃取法(MullerA.SupercriticalCOzextractionofcannabidiolfromcannabisplantmaterial[P]力和溫度下，超臨界二氧化碳對某些天然產(chǎn)物活性物質(zhì)溶解能力的不同，把高沸點(diǎn)、低揮發(fā)度、易熱解的物質(zhì)在其沸點(diǎn)溫度以下萃取出來。超臨界二氧化碳萃取技術(shù)是近幾十年發(fā)展和不破壞提取物中的活性成分等特點(diǎn)。但是超臨界二氧化碳萃取技術(shù)所用的設(shè)備是高壓設(shè)備，該工藝技術(shù)要求較高，設(shè)備一次性投資較大，對設(shè)備以及整個管路系統(tǒng)的耐壓性能要求較高，而且對于成分復(fù)雜、極性較高，分子量較大的混合物，必須使用夾帶劑或者在較高的壓力和溫度下進(jìn)行。目前大多集中在小規(guī)模生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)室研究高附加值的產(chǎn)品的應(yīng)用，工業(yè)化特別是大規(guī)模生產(chǎn)中的應(yīng)用比較少。[0009]含有大麻二酚等活性成分的大麻酚類化合物的純化方法，目前主要集中在采用色譜填料層析、洗脫純化的方法。色譜純化的方法雖然產(chǎn)品的純度非常高，但是對于工業(yè)化生產(chǎn)物難以進(jìn)行有效控制，工序不太穩(wěn)定，規(guī)?；a(chǎn)的成本比較高。發(fā)明內(nèi)容[0010]本發(fā)明在針對現(xiàn)有技術(shù)如工業(yè)化制備成本高、技術(shù)難度大等不足的基礎(chǔ)上，提供了一種一種大麻酚類化合物的制備方法，本發(fā)明適宜規(guī)?；⒑啽愀咝a(chǎn)。[0011]本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：一種大麻酚類化合物的制備方法，包括如下步驟：[0012](1)篩選工業(yè)大麻植物材料，所述工業(yè)大麻植物材料包括工業(yè)大麻花葉、種子或者果實(shí)材料，70～140℃烘干至含水量低于5wt%,粉碎，避光保存；然后將粉碎材料置于具有攪拌功能的超聲波提取裝置中，加入工業(yè)大麻植物材料2～20倍質(zhì)量的弱極性或非極性有機(jī)溶劑，再加入相當(dāng)于弱極性或非極性有機(jī)溶劑添加質(zhì)量的0.1～2%的弱酸，超聲波頻率20～40KHz,超聲波功率100～2000W,20～100℃下超聲波輔助提取0.1～5h,過濾，獲得工業(yè)大麻提取物濾液，在濾液中加入相當(dāng)于工業(yè)大麻植物材料0.01～0.8倍質(zhì)量的活性炭，吸附脫色10～80min,過濾，蒸干溶劑，獲得工業(yè)大麻提取物的浸膏；[0013](2)加入強(qiáng)極性有機(jī)溶劑充分溶解浸膏，冷凍至-20+10℃下封存24～60h,過濾，除去不溶物，蒸干溶劑，得到工業(yè)大麻提取物的初級品，再在初級品中邊攪拌，邊加入強(qiáng)堿溶液至pH為9～12,將大麻酚類化合物轉(zhuǎn)化為酚鹽形式，離心，過濾，除去不溶物，在濾液中加入弱酸至pH為2～5,將酚鹽轉(zhuǎn)化為游離的大麻酚類化合物，并從溶液中析出，分離，得到富含大麻酚類化合物的工業(yè)大麻提取物。5[0016]進(jìn)一步地：所述的具有攪拌功能的超聲波提取裝置，可以為浴槽式超聲波發(fā)生器，也可以采用探頭式超聲波發(fā)生裝置，超聲波頻率優(yōu)選為40KHz,超聲波功率優(yōu)選為800W,優(yōu)選40～70℃下超聲波輔助提取50min。[0017]進(jìn)一步地：所述活性炭的加入量優(yōu)選為工業(yè)大麻植物材料0.5倍質(zhì)量。[0018]進(jìn)一步地：所述吸附脫色過程可以采用水浴控制溫度，且水浴溫度為50～100℃,吸附脫色時間為10～80min。[0019]進(jìn)一步地：所述強(qiáng)極性有機(jī)溶劑選自C1～C5的醇，且加入量相當(dāng)于工業(yè)大麻提取物浸膏2～10倍質(zhì)量。[0021]本發(fā)明的有益效果如下：[0022]1、易于工業(yè)化實(shí)現(xiàn)。本發(fā)明使用常規(guī)易得的有機(jī)溶劑，而且提取過程中采用超聲波加以輔助強(qiáng)化，超聲波強(qiáng)化提取與有機(jī)溶劑循環(huán)提取相結(jié)合，相對于目前已有的方法而短50%以上，提取率一般能提高5%～10%,溶劑消耗減少10%～20%,且有效成分不易破壞。本發(fā)明在較低溫度和較短時間內(nèi)實(shí)現(xiàn)對工業(yè)大麻提取物中的大麻二酚等大麻酚類化合物進(jìn)行超聲波輔助提取分離，能耗低，保證了大麻酚類化合物的結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，不需使用特殊高溫高壓設(shè)備，提高了原料和設(shè)備利用率；[0024]3、提取效果好。采用非極性或者弱極性有機(jī)溶劑提取粉碎的植株原料，強(qiáng)極性有機(jī)溶劑溶解中間的浸膏產(chǎn)品，強(qiáng)極性和弱極性溶劑相結(jié)合，協(xié)調(diào)使用，既可以對產(chǎn)品進(jìn)行有[0025]4、產(chǎn)品品質(zhì)穩(wěn)定。本發(fā)明在工業(yè)大麻植株原料提取過程中，利用特定頻率的超聲波的空化作用，使有機(jī)溶劑在更緩和的條件下，快速滲透到工業(yè)大麻植物細(xì)胞的細(xì)胞壁內(nèi)，使大麻二酚等活性成分更充分快速地溶解分散到有機(jī)溶劑中，保證活性成分的品質(zhì)穩(wěn)定；蠟脂、甘油酯、胡蘿卜素類、類黃酮類等，如果不及時去除，有時會嚴(yán)重?fù)p害最終產(chǎn)品的品質(zhì)，使得產(chǎn)品無法快速結(jié)晶形成粉末、吸濕性增強(qiáng)，產(chǎn)品應(yīng)用過程中，添加到藥物等終端產(chǎn)品中，會導(dǎo)致終端產(chǎn)品的保質(zhì)期變短，品質(zhì)變差，影響使用效果。相對于目前已有的純化技術(shù)而言，本發(fā)明采用添加合適比例的活性炭、冷凍過濾、強(qiáng)弱極性有機(jī)溶劑搭配的方法去除具體實(shí)施方式[0028]取1kg工業(yè)大麻植物原料火麻仁，脫殼，在100℃下烘干至含水量低于5%,超微粉6碎，加入2L弱極性有機(jī)溶劑己烷，再加入100mL乙酸，在40℃溫度下超聲波輔助提取50min,過濾，濾液中加入50g活性炭，在60℃水浴溫度下攪拌吸附30min,過工業(yè)大麻提取物的粗浸膏，再加入1000mL無水乙醇溶解粗浸膏，冷凍至-20℃下，封存40h,過濾，低壓回收溶劑，得到工業(yè)大麻提取物初級品，在初級品中緩慢加入濃度為15%的NaOH拌，至pH=3,分離，70℃蒸餾去除水分等溶劑，得到富含大麻酚類化合物的工業(yè)大麻提取物產(chǎn)品10.91g。[0029]實(shí)施例2[0030]取1kg工業(yè)大麻植物原料火麻仁，脫殼，在100℃下烘干至含水量低于5%,超微粉碎，加入20L弱極性有機(jī)溶劑己烷，再加入100mL乙酸，在40℃溫度下超聲波輔助提取40min,過濾，濾液中加入60g活性炭，在60℃水浴溫度下攪拌吸附30min,過工業(yè)大麻提取物的粗浸膏，再加入1000mL無水乙醇溶解粗浸膏，冷凍至-20℃下，封存40h,過濾，低壓回收溶劑，得到工業(yè)大麻提取物初級品，在初級品中緩慢加入濃度為15%的NaOH拌，至pH=3,分離，70℃蒸餾去除水分等溶劑，得到富含大麻酚類化合物的工業(yè)大麻提取物產(chǎn)品12.12g。[0031]實(shí)施例3[0032]取1kg工業(yè)大麻植物原料火麻仁，脫殼，在100℃下烘干至含水量低于5%,超微粉碎，加入6L弱極性有機(jī)溶劑己烷，再加入100mL乙酸，在40℃溫度下超聲波輔助提取30min,過濾，濾液中加入70g活性炭，在60℃水浴溫度下攪拌吸附30min,過工業(yè)大麻提取物的粗浸膏，再加入1000mL無水乙醇溶解粗浸膏，冷凍至-20℃下，封存40h,過濾，低壓回收溶劑，得到工業(yè)大麻提取物初級品，在初級品中緩慢加入濃度為15%的NaOH拌，至pH=3,分離，70℃蒸餾去除水分等溶劑，得到富含大麻酚類化合物的工業(yè)大麻提取物產(chǎn)品10.47g。[0033]實(shí)施例4[0034]取1kg工業(yè)大麻植物原料火麻仁，脫殼，在100℃下烘干至含水量低于5%,超微粉碎，加入6L弱極性有機(jī)溶劑石油醚，再加入100mL乙酸，在40℃溫度下超聲波輔助提取40min,過濾，濾液中加入60g活性炭，在60℃水浴溫度下攪拌吸附30min,過濾，低壓回收溶存40h,過濾，低壓回收溶劑，得到工業(yè)大麻提取物初級品，在初級品中緩慢加入濃度為15%溶液，攪拌，至pH=3,分離，70℃蒸餾去除水分等溶劑，得到富含大麻酚類化合物的工業(yè)大麻提取物產(chǎn)品10.99g。[0035]實(shí)施例5[0036]取1kg工業(yè)大麻植物原料火麻仁，脫殼，在100℃下烘干至含水量低于5%,超微粉碎，加入6L弱極性有機(jī)溶劑乙醚，再加入100mL乙酸，在40℃溫度下超聲波輔助提取50min,過濾，濾液中加入50g活性炭，在60℃水浴溫度下攪拌吸附30min,過工業(yè)大麻提取物的粗浸膏，再加入1000mL無水乙醇溶解粗浸膏，冷凍至-20℃下，封存40h,7過濾，低壓回收溶劑，得到工業(yè)大麻提取物初級品，在初級品中緩慢加入濃度為15%的NaOH拌，至pH=3,分離，70℃蒸餾去除水分等溶劑，得到富含大麻酚類化合物的工業(yè)大麻提取物產(chǎn)品10.05g。[0037]實(shí)施例6[0038]取1kg工業(yè)大麻植物原料火麻仁，脫殼，在100℃下烘干至含水量低于5%,超微粉碎，加入6L弱極性有機(jī)溶劑己烷，再加入100mL乙酸，在40℃溫度下超聲波輔助提取300min,過濾，濾液中加入50g活性炭，在60℃水浴溫度下攪拌吸附40min,過工業(yè)大麻提取物的粗浸膏，再加入1000mL無水甲醇溶解粗浸膏，冷凍至-20℃下，封存40h,過濾，低壓回收溶劑，得到工業(yè)大麻提取物初級品，在初級品中緩慢加入濃度為15%的NaOH拌，至pH=3,分離，70℃蒸餾去除水分等溶劑，得到富含大麻酚類化合物的工業(yè)大麻提取物產(chǎn)品10.78g。[0039]實(shí)施例7[0040]取1kg工業(yè)大麻植物原料火麻仁，脫殼，在100℃下烘干至含水量低于5%,超微粉碎，加入6L弱極性有機(jī)溶劑己烷，再加入100mL乙酸，在40℃溫度下超聲波輔助提取10min,過濾，濾液中加入50g活性炭，在60℃水浴溫度下攪拌吸附50min,過濾，低壓回收溶劑，得到工業(yè)大麻提取物的粗浸膏，再加入1000mL無水甲醇溶解粗浸膏，冷凍至-20℃下，封存40h,過濾，低壓回收溶劑，得到工業(yè)大麻提取物初級品，在初級品中緩慢加入濃度為15%的NaOH拌，至pH=3,分離，70℃蒸餾去除水分等溶劑，得到富含大麻酚類化合物的工業(yè)大麻提取物產(chǎn)品10.56g。[0041]實(shí)施例8[0042]取1kg工業(yè)大麻植物原料火麻仁，脫殼，在100℃下烘干至含水量低于5%,超微粉碎，加入6L弱極性有機(jī)溶劑