(10)授權公告號CN107360958B(21)申請?zhí)?0171078948(22)申請日2017.09.05(65)同一申請的已公布的文獻號(43)申請公布日2017.11.21(73)專利權人中國農業(yè)科學院麻類研究所地址410205湖南省長沙市咸嘉湖西路348號(72)發(fā)明人程超華粟建光唐蜻戴志剛方冬兵文海兵許英楊澤茂高紅劉嬋(74)專利代理機構長沙星耀專利事務所(普通合伙)43205代理人張慧趙靜華A01G31/00(2018.01)(56)對比文件CN1887043A,2007.01.03,說明書第1頁第2段至第6頁第2段.CN105052528A,2015.11.18,說明書第2-27段.CN104604502A,2015.05CN105746120A,2016.07.13,全文.CN102919044A,2013.02.13,全文.CN105961175A,2016.09.28,全文.CN103069949A,2013.05CN101828527A,2010.09審查員覃超(54)發(fā)明名稱一種大麻快速擴繁的方法(57)摘要一種大麻快速擴繁的方法，包括以下實施步驟：(1)種子的消毒；(2)水培培養(yǎng)；(3)大麻苗轉入栽培基質；(4)大麻苗打頂處理；(5)側芽生根等優(yōu)點。采用本方法對大麻種子進行組織培養(yǎng)擴繁，按100天為一周期計算，每株基質苗取腋芽8個，則每粒種子苗可產(chǎn)生擴繁苗約500株，可有效解決優(yōu)良或珍稀大麻品種在短期內的快速繁殖問題，在保證遺傳一致性的情況下，使得優(yōu)良大麻材料得以保存或繁殖，同時也為工廠化育苗奠21.一種大麻快速擴繁的方法，其特征在于，包括以下實施步驟：(1)種子的消毒：選取大麻種子，進行消毒滅菌處理后，接種于MS培養(yǎng)基上；大麻種子萌芽，長成為無菌苗；(2)水培培養(yǎng)：大麻種子接種于MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)4-7天后，無菌苗生長至6-10厘米，將無菌苗取出，根系在流水下沖洗干凈，再放入水培箱中進行水培，時間為7-11天；培養(yǎng)液成份為：1升A液：硝酸鉀45-50克，硝酸鈣164-168克，螯合鐵6-7克，余為水；1升B液：硫酸鎂40-45克，磷酸二氫鉀26—30克，余為水；使用時將A液和B液分別稀釋80-120倍后混合，即為培養(yǎng)液；(3)大麻苗轉入栽培基質：將經(jīng)步驟(2)水培的大麻苗轉入栽培基質，栽培基質的質量比為：泥炭土：蛭石：珍珠巖=2～3:1～1.2:1;(4)大麻苗打頂處理：栽培基質內大麻苗生長至高15-20厘米時，進行打頂處理；(5)側芽生根培養(yǎng)：將經(jīng)步驟(4)打頂處理后的大麻苗繼續(xù)培養(yǎng)7-11天，腋芽伸長至10-15厘米時，斜切剪下腋芽，將腋芽放入步驟(2)的水培箱中進行水培，水培條件與步驟(2)中(6)增殖培養(yǎng)：將步驟(5)所得的生根腋芽又重復步驟(3)和步驟(4)、步驟(5)處理，獲得更多大麻植株；(7)煉苗：得到要求數(shù)量的大麻植株后，將栽培基質中的大麻植株，置于涼爽通風處7天以上，即可移入大田或其它栽培環(huán)境。2.根據(jù)權利要求1所述的大麻快速擴繁的方法，其特征在于，步驟(1)中，消毒滅菌處理采用以下處理方法：①用質量濃度98%的工業(yè)硫酸浸泡20min后，于自來水下沖洗30min;②用體積濃度75%的酒精浸洗2min;③用質量濃度為3%的次氯酸鈉溶液浸泡20min后，用無菌水沖洗，于干凈濾紙上吸干水分，用手術刀和鑷子剝去種皮。3.根據(jù)權利要求1或2所述的大麻快速擴繁的方法，其特征在于，步驟(2)中，水培光照周期為：光照16-18小時，無光照6-8小時；光照強度為8000-100001x。4.根據(jù)權利要求1或2所述的大麻快速擴繁的方法，其特征在于，步驟(3)中，光照周期為：光照16-18小時，無光照6-8小時；光照強度為8000-100001x。5.根據(jù)權利要求1或2所述的大麻快速擴繁的方法，其特征在于，步驟(5)中，光照周期為：光照16-18小時，無光照6-8小時；光照強度為8000-100001x。3一種大麻快速擴繁的方法技術領域[0001]本發(fā)明涉及植物繁殖技術領域，具體涉及一種大麻高效快速擴繁的方法。技術背景[0002]大麻(CannabisSativaL.)是大麻科(Cannabinaceace)大麻屬(Cannabis)一年生草本植物，在我國有數(shù)千年的種植利用歷史。大麻渾身是寶，既能生產(chǎn)優(yōu)質的紡織纖維，在食品、藥用和建材工業(yè)等方面也有巨大應用價值。根據(jù)其四氫大麻酚(THC)含量分為毒品大麻、中間型大麻和纖用大麻三種，我國是纖用大麻種植大國，種植面積占世界的30%左右。而藥用大麻近年來也成為業(yè)界關注的焦點，其藥用成份CBD(大麻二酚)是大麻中的非成癮性成分，可以有效地消除四氫大麻酚(THC)對人體產(chǎn)生的致幻作用，同時具有抗痙攣、抗焦麻品種成為產(chǎn)業(yè)發(fā)展的關鍵。而從現(xiàn)有大麻種質資源中篩選符合要求的材料并加以利用，是推動藥用大麻產(chǎn)業(yè)發(fā)展的關鍵。[0003]從生產(chǎn)實踐的角度來說，傳統(tǒng)的大麻種植方法中，用100粒種子，按出苗成活率90%計算，在2-3個月內，僅能長成90個植株。其繁殖植株數(shù)量和速度有限，不能滿足需要。[0004]從種資源的保存和利用角度來說，目前國家種質資源庫中存有大麻資源近千份，但因大麻種子不耐儲存，發(fā)芽率逐年降低，部分珍稀資源不僅發(fā)芽率低，數(shù)量也極為有限，限制了其應用。[0005]這就需要高效且繁殖系數(shù)高的擴繁技術，而這種技術不僅能使優(yōu)良大麻材料得以保存和繁殖，同時也可為工廠化育苗奠定基礎。發(fā)明內容[0006]本發(fā)明要解決的技術問題是，克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種需要時間短的大麻快速擴繁的方法。[0007]本發(fā)明解決其技術問題采用的技術方案是，一種大麻快速擴繁的方法，包括以下[0009]消毒滅菌處理為現(xiàn)有技術，可參照以下文獻：程超華，李育君，趙立寧，等.三重處理法獲得大麻種子無菌苗研究[J].中國麻業(yè)科學，2011,33(1):24-26.[0010]優(yōu)選以下處理方法：[0011]①用質量濃度98%的工業(yè)硫酸浸泡20min后，于自來水下沖洗30min;[0012]②用體積濃度75%的酒精浸洗2min;[0013]③用質量濃度為3%的次氯酸鈉溶液浸泡20min后，用無菌水沖洗，于干凈濾紙上吸干水分，用手術刀和鑷子剝去種皮。[0014](2)水培培養(yǎng)：大麻種子接種于MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)4-7天后，無菌苗生長至6-10厘米，4將無菌苗取出，根系在流水下沖洗干凈，再放入水培箱中進行水培，時間為7-11天；培養(yǎng)液后混合，即為培養(yǎng)液；水培光照周期為：光照16-18小時，無光照6-8小時；光照強度為8000-[0015](3)大麻苗轉入栽培基質：將經(jīng)步驟(2)水培的大麻苗轉入栽培基質，栽培基質的[0016](4)大麻苗打頂處理：栽培基質內大麻苗生長至高15-20厘米時(大約需要一周),進行打頂處理；以促進腋芽增殖和伸長；[0017](5)側芽生根培養(yǎng)：將經(jīng)步驟(4)打頂處理后的大麻苗繼續(xù)培養(yǎng)7-11天，腋芽伸長至10-15厘米時，斜切剪下腋芽，將腋芽放入步驟(2)的水培箱中進行水培，水培條件與步驟[0018](6)增殖培養(yǎng)：將步驟(5)所得得生根腋芽又重復步驟(3)和步驟(4)、步驟(5)處[0019](7)煉苗：得到要求大小的大麻植株后，將栽培基質中的大麻植株，置于涼爽通風處7天以上，即可移入大田或其它栽培環(huán)境。為8000-100001x。[0021]進一步，步驟(3)中，光照周期為：光照16-18小時，無光照6-8小時；光照強度為[0022]進一步，步驟(5)中，光照周期為：光照16-18小時，無光照6-8小時；光照強度為[0023]本發(fā)明具有擴繁周期短、增殖系數(shù)高、培養(yǎng)過程簡單、遺傳一致性高等優(yōu)點。采用本方法對大麻種子進行組織培養(yǎng)擴繁，按100天為一周期計算，每株基質苗取腋芽8個，則每粒種子苗可產(chǎn)生擴繁苗約500株，可有效解決優(yōu)良或珍稀大麻品種在短期內的快速繁殖問題，在保證遺傳一致性的情況下，使得優(yōu)良大麻材料得以保存或繁殖，同時也為工廠化育苗奠定基礎。本方法尤其適用于發(fā)芽率低下或數(shù)量稀少的珍稀種子。附圖說明[0024]圖1為實施例1中打頂后的基質苗；[0025]圖2為實施例1中可用于切取腋芽的基質苗；[0026]圖3為實施例1中可用于第二次切取腋芽的基質苗。具體實施方式[0027]以下結合附圖和具體實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明。[0029]本實施例之大麻快速擴繁的方法，包括以下實施步驟：5[0032]①用質量濃度98%的工業(yè)硫酸浸泡20min后，于自來水下沖洗30min;[0033]②用體積濃度75%的酒精浸洗2min;[0034]③用質量濃度為3%的次氯酸鈉溶液浸泡20min后，用無菌水沖洗，于干凈濾紙上吸干水分，用手術刀和鑷子剝去種皮。[0035](2)水培培養(yǎng)：大麻種子接種于MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)4天后，無菌苗生長至6厘米，將無1升A液：硝酸鉀45克，硝酸鈣164克，螯合鐵(DPTA鐵)6克，余為水；1升B液磷酸二氫鉀26克，余為水；使用時將A液和B液分別稀釋80倍后混合，即為培養(yǎng)液；水培[0036](3)大麻苗轉入栽培基質：將經(jīng)步驟(2)水培的大麻苗轉入栽培基質，栽培基質的為80001x;[0037](4)大麻苗打頂處理：栽培基質內大麻苗生長至高20厘米時(一周后),進行打頂處[0038](5)側芽生根培養(yǎng)：將經(jīng)步驟(4)打頂處理后的大麻苗繼續(xù)培養(yǎng)11天，腋芽伸長至15厘米時，斜切剪下腋芽，將腋芽放入步驟(2)的水培箱中進行水培，水培條件與步驟(2)中[0039](6)增殖培養(yǎng)：將步驟(5)所得得生根腋芽又重復步驟(3)和步驟(4)、步驟(5)處[0040](7)煉苗：得到要求大小的大麻植株后，將栽培基質中的大麻植株，置于涼爽通風處7天以上，即可移入大田或其它栽培環(huán)境。[0041]本實施例按100天為一周期計算，每株基質苗取腋芽8個，則每粒種子苗可產(chǎn)生擴繁苗約500株。[0043]本實施例之大麻快速擴繁的方法，包括以下實施步驟：[0046]①用質量濃度98%的工業(yè)硫酸浸泡20min后，于自來水下沖洗30min;[0047]②用體積濃度75%的酒精浸洗2min;[0048]③用質量濃度為3%的次氯酸鈉溶液浸泡20min后，用無菌水沖洗，于干凈濾紙上吸干水分，用手術刀和鑷子剝去種皮。1升A液：硝酸鉀50克，硝酸鈣168克，螯合鐵(DPTA鐵)7克，余為水；1升B液[0050](3)大麻苗轉入栽培基質：將經(jīng)步驟(2)水培的大麻苗轉入栽培基質，栽培基質的6質量比為：泥炭土：蛭石：珍珠巖=3:1.2:1;光照周期為：光照18小時，無光照6小時；光照強度為100001x。[0051](4)大麻苗打頂處理：栽培基質內大麻苗生長至高20厘米時(一周后),進行打頂處[0052](5)側芽生根培養(yǎng)：將經(jīng)步驟(4)打頂處理后的大麻苗繼續(xù)培養(yǎng)11天，腋芽伸長至15厘米時，斜切剪下腋芽，將腋芽放入步驟(2)的水培箱中進行水培，水培條件與步驟(2)中相同，直至生根，得生根腋芽；光照周期為：光照18小時，無光照6小時；光照強度為100001x。[0053](6)增殖培養(yǎng)：將步驟(5)所得得生根腋芽又重復步驟(3)和步驟(4)、步驟(5)處理，獲得更多大麻植株。[0054](7)煉苗：得到要求大小的大麻植株后，將栽培基質中的大麻植株，置于涼爽通風處7天以上，即可