2025年大學本科大四（生物技術(shù)）基因工程綜合測試題及答案

（考試時間：90分鐘滿分100分）班級______姓名______第I卷（選擇題，共40分）每題只有一個正確答案，請將正確答案填在括號內(nèi)。(總共20題，每題2分，每題給出的選項中，只有一項符合題目要求)1.基因工程中常用的載體不包括以下哪種？（）A.質(zhì)粒B.噬菌體C.動植物病毒D.染色體答案：D2.限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA后產(chǎn)生的末端類型不包括（）A.黏性末端B.平末端C.鈍性末端D.發(fā)卡末端答案：D3.以下關(guān)于DNA連接酶的作用，正確的是（）A.連接DNA單鏈B.連接DNA雙鏈C.連接RNA單鏈D.連接RNA雙鏈答案：B4.基因工程中獲取目的基因的方法不包括（）A.從基因組文庫中獲取B.從cDNA文庫中獲取C.人工合成D.從蛋白質(zhì)中提取答案：D5.以下哪種技術(shù)可用于基因的體外擴增？（）A.PCRB.核酸分子雜交C.蛋白質(zhì)電泳D.細胞培養(yǎng)答案：A6.用于將目的基因?qū)胫参锛毎某Ｓ梅椒ㄊ牵ǎ〢.顯微注射法B.電穿孔法C.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.脂質(zhì)體介導法答案：C7.基因工程中篩選重組體的方法不包括（）A.抗生素抗性篩選B.藍白斑篩選C.核酸分子雜交篩選D.細胞形態(tài)篩選答案：D8.以下關(guān)于基因表達載體的構(gòu)建，說法錯誤的是（）A.要有啟動子B.要有終止子C.要有標記基因D.不需要復制原點答案：D9.基因工程中常用的工具酶不包括（）A.限制性核酸內(nèi)切酶B.DNA連接酶C.DNA聚合酶D.淀粉酶答案：D10.以下哪種生物不是基因工程常用的受體細胞？（）A.大腸桿菌B.酵母菌C.植物細胞D.病毒答案：D11.核酸分子雜交技術(shù)不包括（）A.Southern雜交B.Northern雜交C.Western雜交D.原位雜交答案：C12.基因工程中用于檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄的方法是（）A.Southern雜交B.Northern雜交C.Western雜交D.免疫熒光檢測答案：B13.以下關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法，正確的是（）A.直接改造蛋白質(zhì)B.改造基因C.與基因工程無關(guān)D.只改造蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)答案：B14.基因工程中常用的載體應具備的條件不包括（）A.有多個限制酶切割位點B.有標記基因C.能在受體細胞中自主復制D.能表達目的基因答案：D15.以下哪種技術(shù)可用于檢測目的基因是否表達出蛋白質(zhì)？（）A.Southern雜交B.Northern雜交C.Western雜交D.熒光定量PCR答案：C16.基因工程中用于將目的基因?qū)雱游锛毎某Ｓ梅椒ㄊ牵ǎ〢.顯微注射法B.電穿孔法C.磷酸鈣轉(zhuǎn)染法D.脂質(zhì)體介導法答案：A17.以下關(guān)于基因文庫的說法，錯誤的是（）A.基因組文庫包含了某種生物的全部基因B.cDNA文庫只包含某種生物的部分基因C.構(gòu)建基因文庫有利于目的基因的篩選D.基因文庫中的基因都能表達答案：D18.基因工程中用于切割目的基因的工具是（）A.限制性核酸內(nèi)切酶B.DNA連接酶C.DNA聚合酶D.解旋酶答案：A19.以下哪種技術(shù)可用于基因的定點突變？（）A.PCR技術(shù)B.核酸分子雜交技術(shù)C.蛋白質(zhì)工程技術(shù)D.基因編輯技術(shù)答案：D20.基因工程中用于將目的基因?qū)胛⑸锛毎某Ｓ梅椒ㄊ牵ǎ〢.顯微注射法B.電穿孔法C.氯化鈣轉(zhuǎn)化法D.脂質(zhì)體介導法答案：C第II卷（非選擇題，共60分）二、填空題（每題2分，共10分）1.基因工程的核心步驟是________________。答案：基因表達載體的構(gòu)建2.限制性核酸內(nèi)切酶識別的DNA序列具有________________特點。答案：特異性3.PCR技術(shù)的原理是________________。答案：DNA雙鏈復制4.基因工程中常用的標記基因有________________等。（寫出一種即可）答案：抗生素抗性基因5.蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→________________→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列。答案：設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)三、簡答題（每題10分，共30分）1.簡述基因工程的基本操作流程。答案：基因工程的基本操作流程包括：獲取目的基因，可從基因組文庫、cDNA文庫中獲取或人工合成；構(gòu)建基因表達載體，將目的基因與啟動子、終止子、標記基因等連接；將目的基因?qū)胧荏w細胞，根據(jù)受體細胞類型選擇合適方法，如導入植物細胞用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，導入動物細胞用顯微注射法，導入微生物細胞用氯化鈣轉(zhuǎn)化法等；篩選含有目的基因的受體細胞，利用抗生素抗性篩選、藍白斑篩選等方法；目的基因的表達與檢測，檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄用Northern雜交，檢測是否表達出蛋白質(zhì)用Western雜交等。2.說明限制性核酸內(nèi)切酶在基因工程中的作用及特點。答案：限制性核酸內(nèi)切酶在基因工程中用于切割DNA分子。它能識別雙鏈DNA分子中特定的核苷酸序列，并在特定位置切割DNA，產(chǎn)生黏性末端或平末端。其特點包括：具有特異性，每種酶識別特定的核苷酸序列；切割位點具有專一性；切割后的DNA末端可用于后續(xù)的連接等操作，是基因工程中重要的工具酶，為獲取目的基因、構(gòu)建基因表達載體等提供了關(guān)鍵手段。3.簡述核酸分子雜交技術(shù)的原理及應用。答案：核酸分子雜交技術(shù)的原理是利用核酸分子的變性和復性特點，使來源不同的DNA或RNA單鏈在一定條件下按照堿基互補配對原則形成雜交雙鏈。其應用廣泛，如Southern雜交用于檢測DNA，可分析基因組結(jié)構(gòu)、基因定位等；Northern雜交用于檢測RNA，可研究基因轉(zhuǎn)錄情況；原位雜交用于在細胞或組織水平定位特定核酸序列，還可用于基因診斷、疾病研究等領(lǐng)域，幫助了解基因的表達和分布情況。四、分析題（每題10分，共20分）材料：在基因工程實驗中，科研人員將某目的基因?qū)氪竽c桿菌細胞后，通過抗生素抗性篩選得到了一些可能含有重組質(zhì)粒的菌落。然后對這些菌落進行進一步檢測。1.請分析如何利用核酸分子雜交技術(shù)檢測目的基因是否成功導入大腸桿菌細胞并轉(zhuǎn)錄？答案：首先提取大腸桿菌細胞中的總RNA，通過Northern雜交進行檢測。將提取的RNA轉(zhuǎn)移到固相支持物上，與標記的目的基因探針進行雜交。如果能形成雜交雙鏈，說明目的基因成功轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生了相應的RNA。因為Northern雜交的原理是利用核酸分子雜交，只有當目的基因轉(zhuǎn)錄出的RNA與探針堿基互補配對時，才會出現(xiàn)雜交信號，從而判斷目的基因是否轉(zhuǎn)錄。2.若檢測發(fā)現(xiàn)部分菌落中目的基因未成功表達出蛋白質(zhì)，可能的原因有哪些？答案：可能原因有多種。一是基因表達載體構(gòu)建有誤，比如啟動子功能異常，無法有效啟動目的基因轉(zhuǎn)錄；或者終止子位置不當，導致轉(zhuǎn)錄提前終止。二是導入的目的基因發(fā)生了突變，使其編碼的蛋白質(zhì)失去功能或無法正常表達。三是大腸桿菌細胞內(nèi)的翻譯系統(tǒng)存在問題，如缺乏必要的翻譯因子，影響了蛋白質(zhì)的合成過程。四是可能存在基因沉默現(xiàn)象，使得目的基因不能正常表達。五、設計題（10分）設計一個利用基因工程技術(shù)提高植物抗蟲能力的方案。答案：首先從抗蟲生物中獲取抗蟲基因，比如從某種抗蟲的細菌中分離出抗蟲蛋白基因。然后構(gòu)建基因表達載