牡荊子油膠丸祛痰作用的研究[摘要]目的：通過實驗證明牡荊子油膠丸具有祛痰作用。方法：采用水提取法提取牡荊子油，通過比較牡荊子與水的二種不同比例的提取結(jié)果，確定牡荊子油的最佳提取方法；通過老鼠等動物實驗探究牡荊子的祛痰作用。結(jié)果：正式試驗中成功制備牡荊子油膠丸并探索得到牡荊子具有祛痰作用。結(jié)論：成功提取出牡荊子揮發(fā)油，制備出牡荊子油膠丸，并通過動物實驗得出牡荊子油膠丸可能具有祛痰作用的論斷。[關(guān)鍵詞]牡荊子油膠丸；油膠丸；祛痰作用；小鼠酚紅實驗。牡荊子味道味苦、辛，性平，為馬鞭草科植物牡荊的成熟果實；在我國分布廣泛，資源豐富。牡荊子為傳統(tǒng)藥用植物，民間用其莖、葉、花來清暑、止咳、利尿等。許多藥理實驗已經(jīng)證明從牡荊子、葉提取出的揮發(fā)油具有祛痰、鎮(zhèn)咳及平喘作用,且對漫性氣管炎有較好的療效,黃荊子根煎劑有擴張支氣管作用和抑菌作用；此外牡荊制劑可以應用于小兒咳喘、治療腸炎，并且細菌性痢疾、腳癬等亦有報導。本研究旨在通過牡荊子果實，利用相關(guān)的現(xiàn)代藥學技術(shù)與設(shè)備制備牡荊子油膠丸并通過簡單的動物實驗對牡荊子油膠丸的祛痰作用進行探討。1原理小鼠酚紅實驗。指示劑酚紅，經(jīng)小鼠腹腔注射給藥后，經(jīng)腹腔吸收，可部分地由支氣管粘液腺分泌進入氣道，有祛痰作用的藥物會使支氣管的分泌液增加，同時經(jīng)呼吸道粘膜排出的酚紅也隨之增加。因而可以通過觀察呼吸道排出的酚紅的量而探究藥物的祛痰作用。酚紅在堿性環(huán)境下呈現(xiàn)紅色，通過一定的方法將呼吸道中分泌的液體洗出，并測出酚紅的量，從而確定在堿祛痰藥物的作用強弱及其劑量關(guān)系。2器材實驗動物實驗小白鼠（由南華大學實驗動物中心提供）。試劑蒸餾水、酚紅試劑、碳酸氫鈉試劑、氫氧化鈉、酚紅試劑等。實驗儀器燒杯、棉花、天平、玻璃棒、剪刀、注射器、試管、試管架等。3方法（1）分別取牡荊子油膠丸3、6、9、12粒，分離出內(nèi)容物于試管中，并分別用食用油稀釋至10ml，分成對應的四組a、b、c、d；另取10ml食用油做為空白對照組e。（3）每組取小鼠6只，隨機分成五組，禁食不禁水10小時，以0.2ml10/g，給A、B、C、D四個小組的小白鼠灌胃給藥，E組給以相應劑量的食用油。灌胃給藥1小時后,腹腔注射0.5%酚紅溶液0.5ml/只，在30min后脫頸椎處死動物，固定于蛙板上手術(shù)分離氣管。用注射器吸5%的碳酸氫鈉溶液o.5ml注入氣管,反復抽吸3次，最后用注射器將灌洗液抽出并注入試管中。合并洗出液，對洗出液進行離心或沉淀，然后用分光光度計測酚紅的濃度，分析祛痰作用，進行統(tǒng)計學的t檢驗，與對照組進行比較。4注意事項4.1小鼠呼吸道沖洗：實驗動物分組和給藥方法相對應，腹腔注射0.5ml酚紅后30分鐘，將小鼠脫頸椎處死或者用濕布悶死亦可，仰位固定于蛙板上；固定牢固后，剪開頸前皮膚，分離出氣管。將8號針頭插入位于喉頭的氣管內(nèi)，大概0.3cm；用絲線將氣管下端結(jié)扎并且固定（防止灌洗液流入肺部），用注射器吸取5%NaHCO31ml，并用針頭來回灌洗呼吸道3次，最后一次將灌洗液抽出注入試管中，得到灌洗液。按上述方法連續(xù)操作3次，沖洗共9次，收得灌洗液約3ml，置于試管中，靜置或離心后取上清液，用分光光度計檢測濃度，進行統(tǒng)計學處理，并與對照組相比較。4.2酚紅標準液的配制：用分析天平準確稱取50毫克的酚紅，以5%NaHCO3溶解，使每1ml含酚紅1000μg。然后稀釋兩次，配成毫升含酚紅10.0、5.0、2.5、1.0、0.5μg每毫升，用722型分光光度計測定不同濃度酚紅的吸光度值，并建立吸光度和濃度的方程。4.3給藥后到處死動物的時間應該盡可能的準確：解剖時，須將氣管周圍組織去除干凈，氣管段周圍如果粘附有血液應立即用濾紙等吸收干凈，否則會造成污染。在呼吸道沖洗的過程中，碳酸氫鈉的用量要準確，灌洗過程中動作要輕，以免針頭穿破氣管和肺臟，注射器的抽推速度也必須盡可能相同（保證各次灌洗液的抽吸的平行），并盡可能將洗液抽盡。5結(jié)果取30只20至30克的小白鼠，隨機分成五組，分別灌胃給予0.06、0.12、0.18、0.24mg/L的藥液，并用食用油做空白對照，進行小鼠酚紅實驗。得出每組小鼠呼吸道酚紅的平均濃度，通過小鼠酚紅實驗得到了一些相關(guān)數(shù)據(jù)，并對這些數(shù)據(jù)進行了統(tǒng)計學分析。將牡荊子油膠丸配成一定的濃度梯度，并對小鼠進行灌胃給藥、腹腔注射酚紅試劑；根據(jù)數(shù)據(jù)可以看出，在一定范圍內(nèi)，呼吸道酚紅的濃度隨著生藥的濃度增大而增加，所以灌胃給藥有增強小鼠氣管排泌酚紅的作用，牡荊子油膠丸具有促進呼吸道的分泌作用其作用，且隨劑量而增強。所以牡荊子油膠丸可能具有祛痰作用。6討論牡荊為馬鞭草科牡荊屬植物，牡荊以果實、根莖和葉入藥。牡荊與同屆械物黃荊，相似，互為藥用,而無嚴格區(qū)別。民間早已廣泛地應用，并主要用于治療痢疾腸炎、預防中署、咳嗽哮喘、風寒感冒、腹痛吐瀉、關(guān)節(jié)風濕痛、腳癬及治療預防瘧疾等。近來對牡荊的化學成份,藥理作用及臨床應用已有許多報導。從不同種的牡荊屬植物中提出黃酮、假靛谷母、揮發(fā)油、牡荊三萜等類成份。藥理實驗已經(jīng)證明牡荊子、葉所含的揮發(fā)油具有鎮(zhèn)咳、祛痰及平喘作用,且對漫性氣管炎有較好的療效,黃荊子根煎劑有擴張支氣管作用和抑菌作用；此外牡荊制劑可以應用于小兒咳喘、治療腸炎，并且細菌性痢疾、腳癬等亦有報導。7結(jié)論通過動物實驗，將動物分組，進行組間和組內(nèi)相對照；利用小鼠酚紅實驗，對小白鼠給予不同濃度的牡荊油和相同濃度的酚紅試劑，并分析小鼠氣管中酚紅的濃度差異，以此探究牡荊子的祛痰作用。取適量的牡荊子油膠丸進行動物實驗，將30只小白鼠分成5組，并得出牡荊子油膠丸可能具有祛痰作用；但是由于實驗動物數(shù)量較少，還有筆者的理論水平和實驗操作水平有限，實驗結(jié)果的可靠性有待進一步考察。[參考文獻][1]田代華.實用中藥辭典[M].人民衛(wèi)生出版社.2013，1455-1457.[2]徐淑云,卞如廉,陳修.藥理實驗方法學[M].第三版，人民衛(wèi)生出版社，2013:1311.[3]孫紹美,宋玉梅,劉新民.祛痰寧對大、小鼠的祛痰作用[J].中國實驗動物學雜志，2013，4（1）：6-8.[4]邱騰穎，謝振家，劉詩洪，鄧元