強直性脊柱炎：遺傳風險剖析與全基因組SNPs連鎖及關聯(lián)研究一、引言1.1研究背景強直性脊柱炎（AnkylosingSpondylitis，AS）是一種主要侵犯骶髂關節(jié)、脊柱骨突、脊柱旁軟組織及外周關節(jié)，并可伴發(fā)關節(jié)外表現(xiàn)的慢性炎癥性疾病，屬血清陰性脊柱關節(jié)病的范疇。其特征性病理變化是肌腱、韌帶、骨骼的附著點病變，以及韌帶鈣化與骨性強直。AS患者多有關節(jié)病變，且大多數先侵犯骶髂關節(jié)，逐漸累及脊柱，導致脊柱活動受限，嚴重時可出現(xiàn)脊柱強直、駝背畸形等，極大地影響患者的生活質量。不僅如此，AS還可能并發(fā)主動脈炎、虹膜炎、腎淀粉樣變等關節(jié)外疾病，給患者的身體健康帶來多方面的威脅。流行病學研究表明，AS在全球范圍內均有發(fā)病，不同種族和地區(qū)的發(fā)病率存在差異。在白種人中的發(fā)病率為0.1%-0.3%，黃種人中的發(fā)病率約為0.2%，好發(fā)年齡為10-40歲，且男性發(fā)病多于女性，病情也相對更嚴重。家系研究發(fā)現(xiàn)，AS存在明顯的家族聚集傾向，被列入多基因遺傳病范疇。遺傳因素在AS的發(fā)病中起著重要作用，研究表明，AS的遺傳度高達90%以上。人類白細胞抗原B27（HLA-B27）與AS的發(fā)病密切相關，90%左右的AS患者HLA-B27呈陽性。然而，HLA-B27陽性人群中僅有約5-10%會發(fā)展為AS，這表明除了HLA-B27外，還有其他遺傳因素參與了AS的發(fā)病過程。全基因組關聯(lián)研究（Genome-WideAssociationStudy，GWAS）是在全基因組水平上，以單核苷酸多態(tài)性（SingleNucleotidePolymorphism，SNP）作為分子遺傳標記，進行病例-對照關聯(lián)分析，從而篩選出與復雜性狀相關的遺傳變異的研究方法。近年來，隨著GWAS技術的不斷發(fā)展和應用，已經發(fā)現(xiàn)了多個與AS相關的易感基因位點。這些研究成果為深入了解AS的發(fā)病機制提供了重要線索，但目前仍有許多未知的遺傳因素有待探索。綜上所述，AS作為一種嚴重影響患者生活質量的慢性疾病，其遺傳風險及相關基因的研究具有重要意義。通過深入研究AS的遺傳因素，不僅可以進一步揭示其發(fā)病機制，為早期診斷和精準治療提供理論依據，還能為疾病的預防和遺傳咨詢提供有力支持。1.2研究目的與意義本研究旨在通過全面且深入的研究，系統(tǒng)地探索強直性脊柱炎的遺傳風險因素及相關基因，為臨床防治工作提供堅實的理論依據。具體而言，研究目的主要涵蓋以下幾個方面：明確遺傳風險因素及風險率：通過在全國范圍內開展多中心的遺傳流行病學調查，全面收集強直性脊柱炎患者的臨床資料和家族史信息，運用科學的統(tǒng)計分析方法，準確尋找影響AS遺傳的風險因素。同時，精確計算各級親屬的患病風險率，深入了解AS的遺傳風險現(xiàn)狀，為遺傳咨詢和疾病預防提供關鍵數據支持。尋找易感基因區(qū)域及基因：借助全基因組密集型芯片技術，對AS家系的患者進行全基因組掃描，并進行連鎖分析，從而精準定位與AS疾病和臨床表型相關的易感區(qū)域。在此基礎上，通過關聯(lián)分析，在易感區(qū)域中深入挖掘與AS發(fā)病密切相關的易感基因，進一步揭示AS的發(fā)病機制。驗證易感基因并探索發(fā)病機制：針對全基因組芯片全掃階段發(fā)現(xiàn)的有意義的單核苷酸多態(tài)性（SNP），在更大規(guī)模的樣本中進行驗證，以確保研究結果的可靠性和重復性。結合功能基因組學等多學科技術，深入探索這些易感基因在AS發(fā)病過程中的作用機制，為開發(fā)新的治療靶點和干預措施奠定理論基礎。本研究具有重要的理論意義和臨床應用價值：理論意義：深入研究AS的遺傳風險因素和相關基因，有助于進一步揭示AS的發(fā)病機制，填補該領域在遺傳研究方面的部分空白，豐富對多基因遺傳病發(fā)病機制的認識，為其他復雜疾病的遺傳研究提供借鑒和參考。臨床應用價值：明確AS的遺傳風險因素和風險率，能夠為遺傳咨詢提供科學依據，幫助患者及其家屬了解疾病的遺傳規(guī)律，做出合理的生育決策。確定易感基因區(qū)域和基因，有助于開發(fā)新的診斷標志物，實現(xiàn)AS的早期診斷和精準治療，提高治療效果，改善患者的生活質量，減輕社會和家庭的負擔。1.3國內外研究現(xiàn)狀在強直性脊柱炎遺傳風險研究方面，國內外學者已取得一定成果。早期研究便已明確AS具有顯著的遺傳傾向和家族聚集性，遺傳度高達90%以上。HLA-B27與AS發(fā)病的緊密關聯(lián)也早已被發(fā)現(xiàn)，在不同種族人群中，AS患者HLA-B27的陽性率存在差異，如白種人患者中HLA-B27陽性率約為80%-90%，黃種人患者中則約為90%。國內中山大學附屬第三醫(yī)院的研究團隊通過對大量AS患者和健康對照人群的研究，進一步深入分析了HLA-B27亞型與AS發(fā)病風險及臨床表型的關系，發(fā)現(xiàn)某些HLA-B27亞型可能與更嚴重的病情或特定的臨床癥狀相關。國外的研究也在不斷探索其他可能影響AS遺傳風險的因素。有研究通過對多個AS家系的長期追蹤調查，發(fā)現(xiàn)除了HLA-B27外，家族中其他遺傳背景因素可能在AS發(fā)病中起到修飾作用，影響疾病的發(fā)病年齡、病情進展速度等。例如，某些基因的多態(tài)性可能與AS患者的炎癥反應程度相關，進而影響疾病的嚴重程度。在全基因組SNPs研究領域，近年來隨著GWAS技術的廣泛應用，國內外均有大量相關研究發(fā)表。國外研究團隊利用GWAS技術，在歐洲人群中鑒定出多個與AS相關的易感基因位點，如IL23R、ERAP1等基因區(qū)域的SNP與AS發(fā)病風險顯著相關。這些基因參與了免疫調節(jié)、細胞因子信號傳導等生物學過程，提示AS的發(fā)病機制與免疫系統(tǒng)的異常密切相關。國內中山大學附屬第三醫(yī)院等機構的研究人員，通過對中國漢族人群的GWAS分析，也發(fā)現(xiàn)了多個新的AS易感基因位點。如在染色體5q14.3區(qū)域EDIL3與HAPLN1基因間位點（rs4552569）以及12q12區(qū)域的ANO6基因（rs17095830）與AS發(fā)病存在關聯(lián)。這些研究成果為揭示AS在不同種族人群中的遺傳異質性提供了重要依據。然而，當前的研究仍存在一些不足之處。首先，雖然已經發(fā)現(xiàn)了多個與AS相關的遺傳因素，但這些遺傳因素僅能解釋部分AS患者的發(fā)病機制，仍有大量的遺傳風險因素尚未被發(fā)現(xiàn)。其次，不同種族人群中AS的遺傳特征存在差異，目前針對亞洲人群，尤其是中國人群的大規(guī)模、深入的遺傳研究相對較少，樣本量和研究范圍有待進一步擴大。此外，對于已發(fā)現(xiàn)的易感基因位點，其具體的生物學功能和作用機制尚未完全明確，如何將這些遺傳研究成果轉化為臨床診斷和治療的有效手段，還需要進一步的探索和研究。二、強直性脊柱炎遺傳風險研究2.1強直性脊柱炎概述2.1.1疾病特征強直性脊柱炎是一種主要侵犯中軸關節(jié)的慢性炎癥性疾病，其病理特征主要表現(xiàn)為附著點炎，即肌腱、韌帶、關節(jié)囊等附著于骨的部位發(fā)生炎癥，這是AS區(qū)別于其他關節(jié)炎的重要病理特點。隨著病情的發(fā)展，炎癥會逐漸導致關節(jié)軟骨破壞、骨質增生以及關節(jié)間隙狹窄，最終可引起關節(jié)強直和畸形。AS通常累及的部位包括骶髂關節(jié)、脊柱關節(jié)和外周關節(jié)。骶髂關節(jié)是AS最早且最常受累的部位，患者常出現(xiàn)下腰部或臀部疼痛，疼痛可呈間歇性或持續(xù)性，活動后可稍緩解，但休息時尤其是夜間疼痛可能加重。脊柱關節(jié)受累時，患者會出現(xiàn)脊柱疼痛、僵硬，活動受限，嚴重時可導致脊柱畸形，如駝背、脊柱側彎等，使患者的身高降低，身體活動范圍嚴重受限，影響日常生活的諸多方面，如穿衣、洗漱、行走等。外周關節(jié)受累相對較少，但也可出現(xiàn)髖、膝、踝等大關節(jié)的腫痛，部分患者還可能出現(xiàn)指、趾等小關節(jié)的病變，表現(xiàn)為臘腸指（趾），即手指或足趾呈彌漫性腫脹，形似臘腸。除關節(jié)癥狀外，AS還可能伴發(fā)多種關節(jié)外表現(xiàn)。眼部受累較為常見，可出現(xiàn)葡萄膜炎，表現(xiàn)為眼紅、眼痛、視力下降等癥狀，若不及時治療，可能導致視力永久性損害。心血管系統(tǒng)受累可表現(xiàn)為主動脈瓣關閉不全、心臟傳導阻滯等，影響心臟功能。肺部受累時，可出現(xiàn)肺上葉纖維化，患者可能出現(xiàn)咳嗽、氣短等癥狀，嚴重影響呼吸功能。此外，AS患者還可能出現(xiàn)腎臟淀粉樣變，表現(xiàn)為蛋白尿、腎功能減退等；神經系統(tǒng)受累可出現(xiàn)馬尾綜合征，表現(xiàn)為下肢感覺和運動障礙、大小便失禁等。這些關節(jié)外表現(xiàn)不僅增加了患者的痛苦，也給治療帶來了更大的挑戰(zhàn)，嚴重影響患者的生活質量和身體健康，使患者在身體和心理上都承受著巨大的壓力。2.1.2流行病學特征強直性脊柱炎在全球范圍內均有發(fā)病，但發(fā)病率和患病率在不同種族和地區(qū)存在明顯差異。在白種人群中，AS的發(fā)病率約為0.1%-0.3%，患病率相對較高。而在黃種人群中，發(fā)病率約為0.2%，如在中國，通過大規(guī)模的流行病學調查研究發(fā)現(xiàn)，AS的患病率約為0.3%，不同地區(qū)之間也可能存在一定的波動。在一些特定的人群或地區(qū)，發(fā)病率可能會更高，如某些少數民族聚居地區(qū)，由于遺傳背景相對集中等因素，AS的發(fā)病情況可能更為突出。AS的發(fā)病年齡通常在10-40歲之間，發(fā)病高峰年齡在20-30歲，這一年齡段的患者往往處于學習、工作和生活的關鍵時期，疾病的發(fā)生對他們的個人發(fā)展和家庭生活產生嚴重影響。在性別分布上，男性發(fā)病多于女性，男女發(fā)病比例約為2-3:1。男性患者病情往往較重，進展較快，更容易出現(xiàn)脊柱強直和關節(jié)畸形等嚴重并發(fā)癥；而女性患者癥狀相對較輕，病情進展相對緩慢，且外周關節(jié)受累更為常見，有時診斷相對困難，容易導致誤診或漏診。此外，有家族遺傳史的人群，其AS的發(fā)病率顯著高于普通人群，這進一步表明遺傳因素在AS發(fā)病中的重要作用。家族中若有AS患者，其一級親屬（父母、子女、兄弟姐妹）的發(fā)病風險明顯增加，提示遺傳因素在AS的發(fā)病中起著關鍵作用，且可能存在多個遺傳基因的相互作用以及遺傳與環(huán)境因素的交互影響。2.2遺傳因素對強直性脊柱炎的影響2.2.1遺傳傾向與家族聚集性大量的研究和實際病例表明，強直性脊柱炎具有顯著的遺傳傾向和家族聚集性。許多家系研究為這一觀點提供了有力的證據，例如，有一個家族中，連續(xù)三代都出現(xiàn)了AS患者。在這個家族中，第一代的父親被診斷為AS，其子女中有兩人也相繼發(fā)病，而在第三代中，又有一名孫輩被確診患有AS。這種在家族中連續(xù)出現(xiàn)患者的現(xiàn)象并非個例，充分體現(xiàn)了AS遺傳的持續(xù)性和家族聚集的特征。有家族史的人群與無家族史人群相比，AS的發(fā)病風險存在明顯差異。相關研究數據顯示，普通人群中AS的發(fā)病率約為0.2%-0.3%，而在有AS家族史的人群中，發(fā)病率可高達4%-10%，甚至更高。在一些AS家系中，一級親屬（父母、子女、兄弟姐妹）的發(fā)病風險顯著高于普通人群。這表明遺傳因素在AS的發(fā)病中起著關鍵作用，家族遺傳背景是AS發(fā)病的重要危險因素之一。家族聚集性不僅體現(xiàn)在發(fā)病率上，還體現(xiàn)在疾病的發(fā)病年齡、病情嚴重程度等方面。在某些家族中，患者的發(fā)病年齡相對集中，病情進展也較為相似。如有的家族中多個患者都在青少年時期發(fā)病，且病情發(fā)展迅速，較早出現(xiàn)脊柱強直和關節(jié)畸形等嚴重并發(fā)癥。這種家族內發(fā)病特征的相似性，進一步提示了遺傳因素對AS發(fā)病的重要影響，可能存在某些共同的遺傳基因或遺傳背景，使得家族成員在面對相同的環(huán)境因素時，更容易發(fā)病且表現(xiàn)出相似的疾病特征。2.2.2遺傳風險相關因素分析遺傳風險相關因素眾多，其中性別因素與AS發(fā)病存在一定關聯(lián)。臨床研究發(fā)現(xiàn)，男性AS患者的發(fā)病年齡通常明顯早于女性患者。通過對大量病例的統(tǒng)計分析，男性患者的平均發(fā)病年齡約為20-22歲，而女性患者的平均發(fā)病年齡約為23-25歲。男性患者的病情往往更為嚴重，更容易出現(xiàn)脊柱強直、關節(jié)畸形等嚴重并發(fā)癥，對患者的生活質量和身體功能造成更大的影響。這可能與男性和女性在生理結構、激素水平以及免疫系統(tǒng)等方面的差異有關，這些差異可能導致男性在遺傳因素和環(huán)境因素的共同作用下，更容易觸發(fā)AS的發(fā)病機制，且病情進展更為迅速。父母患病情況也是影響AS發(fā)病的重要因素。若父或母親患AS，其子女（先證者）的發(fā)病年齡明顯早于非父母患病的先證者。研究數據顯示，父母患病組先證者的平均發(fā)病年齡約為18-20歲，而非父母患病組先證者的平均發(fā)病年齡約為21-23歲。父母患病的先證者髖關節(jié)受累的比例也明顯增加。髖關節(jié)受累是AS較為嚴重的臨床表現(xiàn)之一，會導致患者髖關節(jié)疼痛、活動受限，嚴重影響患者的行走和日常生活能力。這表明父母的遺傳因素對子女的發(fā)病具有重要影響，可能存在某些特定的遺傳基因或遺傳背景，通過遺傳傳遞給子女，增加了子女發(fā)病的風險和病情的嚴重程度。胎次因素在女性先證者中也有一定的體現(xiàn)。對于女性先證者，在父或母親患病組中是第一胎出生的比例明顯高于非父母患病組。這可能與遺傳因素在胎次傳遞過程中的某些特點有關，也可能涉及到孕期環(huán)境、母親的身體狀況等因素對胎兒遺傳易感性的影響。例如，母親在生育第一胎時，其身體內的激素水平、免疫系統(tǒng)等可能處于特定的狀態(tài)，這種狀態(tài)可能對胎兒的遺傳物質產生影響，使得第一胎出生的女性在遺傳了父母相關遺傳因素的基礎上，更容易發(fā)病。但目前關于胎次與AS發(fā)病關系的具體機制尚未完全明確，還需要進一步的研究來深入探討。2.3強直性脊柱炎遺傳風險率調查2.3.1研究設計與方法為了深入探究強直性脊柱炎的遺傳風險率，本研究采用多中心遺傳流行病學調查的設計方案。在全國范圍內精心選取10個具有代表性的中心，這些中心分布于不同地區(qū)，涵蓋了不同的地理環(huán)境、生活習慣和遺傳背景人群，以確保研究樣本的多樣性和代表性。在樣本選取方面，共納入2039例AS患者作為研究對象。這些患者均經過嚴格的臨床診斷標準確診，確保疾病診斷的準確性。采用面對面問卷調查的方式，全面收集患者的詳細信息。調查內容不僅包括患者的疾病類型，明確區(qū)分是中軸型、外周型，還是中軸+外周型，還涵蓋了髖關節(jié)受累、臘樣指、虹膜炎或葡萄膜炎等關節(jié)外表現(xiàn)的情況，以及炎性腰背痛、中軸起病或外周起病等疾病起病特征和臨床表現(xiàn)。同時，詳細詢問AS家族史，全面排查一級親屬（FDRs）、二級親屬（SDRs）及三級親屬（TDRs）中是否有AS患者，確保家族遺傳信息的完整性。數據收集完成后，運用SPSS16.0軟件進行數據分析。該軟件功能強大，能夠進行各種復雜的統(tǒng)計分析，如相關性分析、差異性檢驗等，有助于深入挖掘數據中的潛在信息，準確分析比較在家族遺傳中是否存在影響AS遺傳的因素。為了準確衡量AS患者的血緣親屬的患病風險，本研究使用標準化發(fā)生率（SIRs）這一重要指標。其計算公式為SIR=AS血緣親屬中的AS患者人數/用中國漢族人群患病率為基礎所計算出的預期AS患病人數。通過這一指標，可以直觀地反映出患者血緣親屬相對于普通人群的患病風險程度，為評估遺傳風險提供了量化的依據，使研究結果更具科學性和說服力。2.3.2研究結果與分析在2039例AS患者中，男女比例呈現(xiàn)出明顯的差異，為4.07:1（1637:402），男性患者數量遠多于女性患者。患者的平均年齡為27.32±8.90歲，處于青壯年時期，這一年齡段的患者正處于人生的關鍵階段，疾病的發(fā)生對他們的生活和工作產生了巨大的影響。平均起病年齡是20.71±7.15歲，發(fā)病年齡相對較早，提示早期診斷和干預的重要性。在這些患者中，420例（20.60%）有家族史，表明遺傳因素在AS發(fā)病中占據重要地位，家族遺傳背景是不可忽視的風險因素。疾病類型方面，1102例（54.05%）為中軸+外周型，這一類型較為常見，涉及中軸關節(jié)和外周關節(jié)的同時受累，對患者的身體功能影響較大。636例（31.20%）例有髖關節(jié)受累，髖關節(jié)受累是AS較為嚴重的臨床表現(xiàn)之一，會導致患者行走困難，嚴重影響生活質量。94例（4.6l%）有臘樣指，162例（7.95%）有虹膜炎或葡萄膜炎，這些關節(jié)外表現(xiàn)也給患者帶來了額外的痛苦。851例（41.74%）首發(fā)癥狀是以外周型表現(xiàn)，提示在疾病早期，外周關節(jié)癥狀可能較為突出，容易被忽視或誤診。在患病相關風險因素的分析中，性別因素表現(xiàn)顯著，男性患者的起病年齡明顯早于女性患者（P=0.000）。男性患者平均起病年齡約為20-22歲，女性患者平均起病年齡約為23-25歲，這可能與男性和女性在生理結構、激素水平以及免疫系統(tǒng)等方面的差異有關。父母患病情況也對AS發(fā)病產生重要影響，父或母親患AS的先證者的發(fā)病年齡明顯早于非父母患病的先證者（18.70±5.46歲/20.88±7.23歲，P=O.001），且髖關節(jié)受累明顯多于父母無患AS的先證者（P=0.000）。這表明父母的遺傳因素對子女的發(fā)病具有重要影響，可能存在某些特定的遺傳基因或遺傳背景，通過遺傳傳遞給子女，增加了子女發(fā)病的風險和病情的嚴重程度。對于女性先證者，在父或母親患病組中是第一胎出生的比例明顯高于非父母患病組（P=0.031），但目前關于胎次與AS發(fā)病關系的具體機制尚未完全明確，還需要進一步的研究來深入探討。然而，無論是父或母親患病/非父母患病組還是母親患病/父親患病組，臘樣指、眼炎和首發(fā)癥狀均沒有差別，這提示這些因素可能與父母患病情況的關聯(lián)性較小，可能受到其他因素的影響。關于AS的遺傳風險率，研究結果顯示，2039例先證者中，一級親屬患病率為3.84%；二級親屬患病率是0.87%；三級親屬患病率是0.315%，三者間有顯著性差異（P=O.000）。這表明親屬級別越高，與先證者的血緣關系越近，患病風險越高，充分體現(xiàn)了遺傳因素在AS發(fā)病中的作用，血緣關系的緊密程度與患病風險呈正相關。2039例先證者總的親屬的患病風險是普通人群的3.65倍，一級親屬（FDRs）的患病風險是普通人群的15.18倍，二級親屬（SD黜）的患病風險是普通人群的3.44倍，均明顯高于普通人群（P<0.05）；三級親屬（TDRs）的患病風險則與普通人群無統(tǒng)計學上差異。這進一步明確了AS患者親屬的患病風險與普通人群的差異，一級和二級親屬的患病風險顯著增加，而三級親屬雖然也存在一定風險，但在統(tǒng)計學上與普通人群無明顯差異。有家族史的AS患者總的親屬患病風險是普通人群的17.31倍，一級親屬（FDRs）的患病風險是普通人群的68.74倍，二級親屬（SDRs）的患病風險是普通人群的16.49倍，三級親屬（TDRs）的患病風險是普通人群的5.92倍，均明顯高于總體AS的親屬和普通人群（P<O.05）。這充分說明有家族史的AS患者親屬的患病風險更高，家族遺傳因素在AS發(fā)病中起著關鍵作用，對于有家族史的人群，應加強疾病的監(jiān)測和預防。2.4討論本研究通過多中心遺傳流行病學調查，對強直性脊柱炎的遺傳風險因素及風險率進行了深入探究，結果具有重要的臨床意義和遺傳學價值。研究結果顯示，男性AS患者發(fā)病年齡明顯早于女性，這一差異可能與多種因素相關。從生理結構上看，男性和女性的脊柱及骶髂關節(jié)在發(fā)育和結構特點上存在一定差異，這些差異可能影響了疾病的易感性和發(fā)病時間。激素水平方面，雄激素和雌激素對免疫系統(tǒng)的調節(jié)作用不同，雄激素可能在一定程度上增強了免疫反應，使得男性更容易在早期觸發(fā)AS的發(fā)病機制。此外，免疫系統(tǒng)的差異也不容忽視，男性的免疫系統(tǒng)在應對外界刺激時，可能產生更為強烈的炎癥反應，從而導致發(fā)病年齡提前。這種性別差異在臨床診斷和治療中具有重要的參考價值，提示醫(yī)生在面對年輕男性患者出現(xiàn)腰背痛等疑似AS癥狀時，應提高警惕，及時進行相關檢查，以便早期診斷和治療。父母患病情況對AS患者的發(fā)病有著顯著影響。父親或母親患病的AS患者發(fā)病年齡明顯早于父母無患病者，且髖關節(jié)受累的比率顯著增高。這表明遺傳因素在AS發(fā)病中起著關鍵作用，父母的遺傳基因可能通過多種方式影響子女的發(fā)病。某些特定的遺傳突變或基因多態(tài)性可能直接傳遞給子女，增加了子女發(fā)病的風險。遺傳背景可能影響了子女免疫系統(tǒng)的發(fā)育和功能，使得他們在面對相同的環(huán)境因素時，更容易出現(xiàn)免疫異常，進而引發(fā)AS。對于這類高風險人群，早期進行基因檢測和健康監(jiān)測至關重要，以便及時發(fā)現(xiàn)疾病的早期跡象，采取有效的干預措施，延緩疾病的進展。在遺傳風險率方面，本研究明確了總體AS患者其一級和二級親屬患病風險明顯高于普通人群，且親屬中與先證者的血緣關系越接近，患病的風險越大。這一結果進一步證實了AS的遺傳傾向，提示遺傳因素在疾病發(fā)病中的主導作用。血緣關系越近，遺傳物質的相似性越高，攜帶相同致病基因或遺傳風險因素的可能性也就越大。對于有家族史的人群，遺傳咨詢和疾病預防顯得尤為重要。遺傳咨詢可以幫助他們了解自身的遺傳風險，提供合理的生育建議，避免遺傳疾病的傳遞。加強疾病預防意識，定期進行體檢和篩查，有助于早期發(fā)現(xiàn)疾病，提高治療效果。有家族史的AS患者的親屬患病風險率也顯著高于總體AS的親屬和普通人群。這說明家族遺傳因素在AS發(fā)病中具有累積效應，家族中存在多個患病個體時，遺傳風險會進一步增加。對于這類家族，應加強健康教育，提高家庭成員對AS的認識和警惕性。建立完善的家族健康管理機制，定期組織家庭成員進行健康檢查，及時發(fā)現(xiàn)和治療潛在的疾病風險。本研究還存在一定的局限性。研究僅在全國10個中心進行，雖然盡量選取了具有代表性的地區(qū)，但樣本的地域覆蓋范圍仍有待進一步擴大，以更全面地反映不同地區(qū)人群的遺傳特征和發(fā)病情況。研究主要基于問卷調查和臨床診斷，對于一些潛在的遺傳因素和環(huán)境因素的評估可能不夠精確，未來的研究可以結合更先進的基因檢測技術和環(huán)境監(jiān)測方法，深入探究遺傳與環(huán)境因素的交互作用對AS發(fā)病的影響。三、強直性脊柱炎全基因組SNPs連鎖研究3.1全基因組SNPs連鎖分析原理與方法3.1.1基本原理全基因組SNPs連鎖分析基于孟德爾遺傳定律和基因連鎖理論。在減數分裂過程中，位于同一條染色體上的基因傾向于一起傳遞，這種現(xiàn)象被稱為基因連鎖。然而，同源染色體之間會發(fā)生交換和重組，導致基因之間的連鎖關系發(fā)生改變。重組率是衡量基因之間連鎖緊密程度的重要指標，重組率越低，說明基因之間的連鎖越緊密，在遺傳過程中一起傳遞的概率越高。單核苷酸多態(tài)性（SNP）是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性，是人類可遺傳的變異中最常見的一種。SNP在人類基因組中廣泛存在，平均每300個堿基對中就有1個，其總數可達數百萬個。由于SNP具有數量多、分布廣泛、遺傳穩(wěn)定性高等特點，被廣泛用作遺傳標記。在全基因組SNPs連鎖分析中，通過檢測大量的SNP位點，構建高密度的遺傳圖譜。當一個基因與某個SNP位點緊密連鎖時，在家族遺傳中，該基因與SNP位點會共同傳遞給后代。通過分析家系中疾病表型與SNP位點的共分離情況，可以推斷出與疾病相關的基因所在的染色體區(qū)域。例如，在一個AS家系中，如果某個SNP位點在患病個體中總是與疾病表型同時出現(xiàn)，而在健康個體中不出現(xiàn)或很少出現(xiàn)，那么就可以推測該SNP位點附近可能存在與AS發(fā)病相關的基因。通過不斷縮小候選區(qū)域，進一步篩選和分析候選基因，從而定位與疾病相關的易感基因。3.1.2實驗方法與技術本研究使用IlluminaHuamHap610.QuadSNP芯片對AS患者進行全基因組掃描。IlluminaHuamHap610.QuadSNP芯片是一種高密度的基因芯片，能夠同時檢測超過60萬個SNP位點，具有檢測通量高、準確性好等優(yōu)點。該芯片基于Illumina公司的Infinium技術，采用50mer寡核苷酸探針退火，利用特異熒光基團判定基因型，能夠準確地檢測出樣本中的SNP位點信息。實驗流程如下：首先，采集廣東籍貫的10個AS家系中所有AS患者的外周血樣本，使用常規(guī)的血液基因組DNA提取試劑盒提取基因組DNA，確保提取的DNA質量和濃度符合實驗要求。然后，對提取的DNA進行質量檢測，使用Nanodrop分光光度計測量DNA的濃度和純度，確保DNA的純度在1.8-2.0之間，濃度在50ng/μL以上。使用瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA的完整性，確保DNA沒有降解。將合格的DNA樣本按照芯片說明書的要求進行處理，包括DNA片段化、末端修復、加A尾、連接特異性接頭等步驟。將處理后的DNA樣本與IlluminaHuamHap610.QuadSNP芯片進行雜交，在適宜的溫度和濕度條件下，讓DNA與芯片上的探針充分結合。雜交完成后，使用IlluminaiScan掃描儀對芯片進行掃描，獲取芯片上每個SNP位點的熒光信號強度數據。數據收集完成后，使用專門的連鎖分析軟件進行數據分析。本研究使用的連鎖分析軟件為GeneHunter，該軟件基于復雜性狀的非參數連鎖分析方法，能夠有效地分析基因與疾病之間的連鎖關系。在分析過程中，將疾病表型（如AS疾病、炎性腰背痛等）作為參數，設置合適的參數，如遺傳模型、重組率等，進行連鎖分析。通過計算LOD值（優(yōu)勢對數計分）來評估基因與疾病之間的連鎖強度，LOD值大于3通常被認為具有顯著的連鎖關系，提示該區(qū)域可能存在與疾病相關的易感基因。三、強直性脊柱炎全基因組SNPs連鎖研究3.2基于AS家系的全基因組SNPs連鎖分析3.2.1家系選擇與臨床資料收集本研究精心選擇了廣東籍貫的10個AS家系作為研究對象。選擇廣東籍貫家系主要基于以下考慮：廣東地區(qū)人口眾多，遺傳背景相對豐富且具有一定的獨特性，能夠為研究提供多樣化的遺傳樣本。同時，廣東地區(qū)醫(yī)療資源相對集中，便于開展臨床資料的收集和后續(xù)的研究工作。家系的納入標準嚴格，要求家系中至少有3例明確診斷為AS的患者，且三代內有血緣關系，以確保遺傳信息的連續(xù)性和可靠性，有利于準確分析遺傳因素在AS發(fā)病中的作用。在臨床資料收集方面，對10個AS家系中所有的AS患者進行了全面且細致的信息采集。收集的內容涵蓋多個關鍵方面，包括患者的性別，性別因素在AS的發(fā)病年齡、病情嚴重程度等方面可能存在差異，對其進行分析有助于深入了解AS的發(fā)病機制。年齡和發(fā)病年齡是重要的臨床指標，發(fā)病年齡的早晚可能與遺傳因素以及環(huán)境因素的暴露時間等有關，通過準確記錄發(fā)病年齡，可以為研究遺傳與環(huán)境因素的交互作用提供數據支持。病程的長短反映了疾病的發(fā)展進程，不同病程的患者可能具有不同的病理生理變化和遺傳特征，對病程的研究有助于了解疾病的動態(tài)發(fā)展過程。臨床表型的收集也十分關鍵，包括臘樣指、髖關節(jié)受累、外周關節(jié)炎、炎性腰背痛等。臘樣指是AS的一種特殊臨床表現(xiàn)，其出現(xiàn)可能與特定的遺傳背景或免疫反應相關；髖關節(jié)受累是AS較為嚴重的并發(fā)癥之一，嚴重影響患者的生活質量，研究髖關節(jié)受累與遺傳因素的關系，有助于早期預測和干預；外周關節(jié)炎和炎性腰背痛是AS常見的癥狀，對這些癥狀與遺傳因素的關聯(lián)分析，能夠為疾病的早期診斷和治療提供依據。收集這些臨床資料，能夠為后續(xù)的連鎖分析提供全面的數據支持，有助于準確尋找與AS疾病和臨床表型相關的易感區(qū)域，深入揭示AS的遺傳機制。3.2.2連鎖分析結果通過嚴格的實驗操作和數據分析流程，對10個AS家系的78名AS患者進行全基因組掃描和連鎖分析，獲得了一系列重要結果。在連鎖分析中，AS疾病、炎性腰背痛、HLA-B27三個關鍵參數的LOD值表現(xiàn)突出。其中，AS疾病的LOD值為5.164，炎性腰背痛的LOD值為5.807，HLA-B27的LOD值為6.141，三個參數的LOD值均大于3，這在統(tǒng)計學上具有顯著意義，強烈提示這些參數與特定的基因區(qū)域存在緊密連鎖關系。進一步分析發(fā)現(xiàn)，這三個參數的LOD值大于3的易感區(qū)域均明確指向6p21區(qū)域。6p21區(qū)域在人類基因組中包含眾多基因，這些基因參與了多種生物學過程，如免疫調節(jié)、炎癥反應等，與AS的發(fā)病機制密切相關。該區(qū)域長約9.44Mb，范圍從26283831到35727532。這一精確的易感區(qū)域定位，為后續(xù)深入研究AS的致病基因提供了重要的靶點和方向。在6p21這一易感區(qū)域內，存在多個可能與AS發(fā)病相關的基因。其中，除了已知的與AS發(fā)病密切相關的HLA-B27基因外，TCF19等25個基因也被發(fā)現(xiàn)具有重要的研究價值，成為進一步在該區(qū)尋找AS疾病的易感基因研究的新靶點。TCF19基因參與了細胞的分化和發(fā)育過程，在免疫系統(tǒng)中可能發(fā)揮著調節(jié)作用，其功能異?？赡軐е旅庖呤Ш?，進而增加AS的發(fā)病風險。對這些新靶點基因的深入研究，將有助于進一步揭示AS的發(fā)病機制，為開發(fā)新的診斷方法和治療策略提供理論依據。3.3討論本研究通過對廣東籍貫的10個AS家系進行全基因組SNPs連鎖分析，明確了6p21區(qū)域為AS疾病、炎性腰背痛以及HLA-B27的重要易感區(qū)域，這一結果具有重要的遺傳學意義和臨床價值。6p21區(qū)域包含眾多基因，這些基因在免疫調節(jié)、炎癥反應等生物學過程中發(fā)揮著關鍵作用，而這些生物學過程與AS的發(fā)病機制密切相關。HLA-B27基因作為已知的與AS發(fā)病高度相關的基因，位于6p21區(qū)域，這進一步證實了該區(qū)域在AS發(fā)病中的重要地位。HLA-B27基因編碼的人類白細胞抗原在免疫系統(tǒng)中起著重要的識別和調控作用，其異常表達可能導致免疫系統(tǒng)對自身組織的錯誤識別和攻擊，引發(fā)炎癥反應，從而增加AS的發(fā)病風險。除HLA-B27基因外，該區(qū)域內的TCF19等25個基因成為新的研究靶點。TCF19基因參與細胞分化和發(fā)育過程，在免疫系統(tǒng)中可能具有調節(jié)功能，其功能異?？赡芷茐拿庖咂胶?，使機體更容易受到炎癥刺激，進而增加AS的發(fā)病可能性。對這些新靶點基因的深入研究，將有助于進一步揭示AS的發(fā)病機制，為開發(fā)新的診斷方法和治療策略提供理論基礎。連鎖分析結果對于深入理解AS的遺傳機制具有重要作用。通過連鎖分析，確定了與AS相關的易感區(qū)域，這為后續(xù)的基因定位和功能研究提供了明確的方向。以往的研究雖然已經發(fā)現(xiàn)了一些與AS相關的遺傳因素，但對于這些因素之間的相互作用以及它們如何協(xié)同影響AS的發(fā)病機制，仍存在許多未知。本研究的連鎖分析結果為解答這些問題提供了重要線索，有助于構建更加完整的AS遺傳發(fā)病模型。明確易感區(qū)域后，可以進一步開展關聯(lián)分析，在該區(qū)域內篩選與AS發(fā)病密切相關的SNP位點，深入研究這些位點的功能和作用機制，從而揭示遺傳因素在AS發(fā)病中的具體作用方式。這對于理解AS的遺傳異質性也具有重要意義，不同個體之間AS的發(fā)病機制可能存在差異，通過對易感區(qū)域和相關基因的研究，可以更好地解釋這種遺傳異質性，為個性化的診斷和治療提供依據。然而，本研究也存在一定的局限性。研究僅選取了廣東籍貫的10個AS家系，樣本量相對較小，且地域范圍有限，可能無法完全代表所有AS患者的遺傳特征。未來的研究需要進一步擴大樣本量，涵蓋不同地域、不同種族的AS家系，以提高研究結果的普遍性和可靠性。連鎖分析雖然能夠定位易感區(qū)域，但對于確定具體的致病基因還存在一定的困難，需要結合其他研究方法，如全基因組關聯(lián)分析、功能基因組學研究等，進一步驗證和深入探究相關基因的功能和作用機制，以更全面地揭示AS的遺傳風險因素和發(fā)病機制。四、強直性脊柱炎全基因組SNPs關聯(lián)研究4.1全基因組關聯(lián)分析原理與流程4.1.1原理基礎全基因組關聯(lián)分析（GWAS）的理論基石是群體遺傳學中的連鎖不平衡（LD）理論。在減數分裂過程中，位于同一條染色體上的基因并非完全獨立地進行遺傳，而是傾向于一起傳遞，這種現(xiàn)象被稱為基因連鎖。連鎖不平衡則是指在一個群體中，不同位點的等位基因之間非隨機組合的現(xiàn)象。當兩個位點處于連鎖不平衡狀態(tài)時，它們的等位基因在遺傳過程中會呈現(xiàn)出一定的相關性。在人類基因組中，單核苷酸多態(tài)性（SNP）廣泛存在，平均每300個堿基對中就有1個SNP，總數可達數百萬個。這些SNP作為遺傳標記，在全基因組關聯(lián)分析中發(fā)揮著關鍵作用。由于連鎖不平衡的存在，某些SNP位點可以作為其附近基因的代表標記。當一個SNP與某個疾病相關的基因緊密連鎖時，這個SNP位點的特定等位基因在疾病患者群體中的頻率往往會與正常人群存在顯著差異。通過對大量樣本中SNP位點的基因型進行檢測，并與疾病表型進行關聯(lián)分析，就能夠篩選出與疾病相關的SNP位點，進而定位到潛在的致病基因。具體而言，在GWAS研究中，通常會選取兩組樣本，一組是患有強直性脊柱炎的患者（病例組），另一組是健康對照人群（對照組）。然后，利用高通量基因分型技術，對兩組樣本的全基因組范圍內的SNP位點進行檢測，獲取每個樣本在各個SNP位點上的基因型信息。通過統(tǒng)計學方法，比較病例組和對照組中每個SNP位點的等位基因頻率。如果某個SNP位點的等位基因頻率在病例組和對照組之間存在顯著差異，且這種差異在統(tǒng)計學上具有顯著性意義，那么就可以認為該SNP位點與強直性脊柱炎存在關聯(lián)。這種關聯(lián)可能意味著該SNP位點本身就是致病突變，也可能是因為它與真正的致病基因緊密連鎖，從而間接反映了致病基因的存在。4.1.2研究流程與關鍵步驟全基因組關聯(lián)分析通常包括兩個關鍵階段：第一階段是芯片全掃，第二階段是有意義SNP的驗證。在芯片全掃階段，需要收集大量的樣本，包括病例組和對照組。樣本的選擇應具有代表性，盡量涵蓋不同性別、年齡、地域和遺傳背景的個體，以提高研究結果的普遍性和可靠性。采集樣本的外周血或其他組織，提取基因組DNA，確保DNA的質量和純度符合實驗要求。使用高密度的SNP芯片對基因組DNA進行基因分型，如IlluminaHumanHap610.QuadSNP芯片等，這些芯片能夠同時檢測數十萬個甚至上百萬個SNP位點。對基因分型得到的數據進行嚴格的質量控制，包括剔除檢出率低的SNP位點（如檢出率低于95%的位點）、剔除最小等位基因頻率（MAF）過低的SNP位點（如MAF低于0.01的位點）、剔除不符合哈迪-溫伯格平衡（HWE）的SNP位點（如HWE檢驗P值小于1×10^-6的位點）等，以確保數據的準確性和可靠性。經過質量控制后的數據，使用專業(yè)的統(tǒng)計分析軟件，如PLINK等，進行初步的關聯(lián)分析，計算每個SNP位點與強直性脊柱炎表型之間的關聯(lián)強度，通常使用P值來衡量，P值越小，說明該SNP位點與疾病的關聯(lián)越顯著。根據預先設定的閾值（如P值小于5×10^-8），篩選出在全基因組水平上與強直性脊柱炎顯著相關的SNP位點，這些位點被認為是有意義的SNP，進入下一階段的驗證。在有意義SNP驗證階段，為了進一步確認第一階段篩選出的SNP位點與強直性脊柱炎的真實關聯(lián)，需要在更大規(guī)模的獨立樣本中進行驗證。可以從不同地區(qū)、不同醫(yī)院收集更多的病例組和對照組樣本，以增加樣本的多樣性和代表性。對這些樣本進行相同的基因分型和質量控制流程，然后針對第一階段篩選出的有意義SNP位點進行再次檢測和關聯(lián)分析。如果這些SNP位點在驗證樣本中仍然表現(xiàn)出與強直性脊柱炎的顯著關聯(lián)，且關聯(lián)方向與第一階段一致，那么就可以更有力地證明這些SNP位點與強直性脊柱炎之間的真實關聯(lián)。在驗證過程中，還可以采用meta分析等方法，將多個研究的數據進行合并分析，進一步提高研究結果的可靠性和統(tǒng)計效能。在整個全基因組關聯(lián)分析過程中，數據的統(tǒng)計分析方法至關重要。常用的統(tǒng)計分析方法包括卡方檢驗、Logistic回歸分析等。卡方檢驗用于比較病例組和對照組中SNP位點的等位基因頻率是否存在顯著差異。Logistic回歸分析則可以在考慮多個協(xié)變量（如年齡、性別、地域等）的情況下，評估SNP位點與強直性脊柱炎發(fā)病風險之間的關聯(lián)強度，計算優(yōu)勢比（OR）及其95%置信區(qū)間。通過這些統(tǒng)計分析方法，可以準確地篩選出與強直性脊柱炎相關的SNP位點，為后續(xù)的基因功能研究和疾病機制探索奠定基礎。四、強直性脊柱炎全基因組SNPs關聯(lián)研究4.2中國散發(fā)AS患者全基因組SNPs關聯(lián)分析4.2.1研究對象與樣本采集本研究選取了中國漢族人群中的散發(fā)AS患者作為研究對象。為確保研究結果的可靠性和代表性，在樣本選擇上制定了嚴格的標準。納入標準為：符合1984年修訂的紐約標準，即下腰背痛的病程至少持續(xù)3個月，疼痛隨活動改善，但休息不減輕；腰椎在前后和側屈方向的活動受限；胸廓擴展范圍小于同年齡和性別的正常值；雙側骶髂關節(jié)炎Ⅱ-Ⅳ級，或單側骶髂關節(jié)炎Ⅲ-Ⅳ級。同時，排除患有其他風濕性疾病、嚴重心腦血管疾病、惡性腫瘤等可能影響研究結果的疾病患者。共納入1837例散發(fā)AS患者，這些患者來自全國多個地區(qū)，包括北京、上海、廣州、成都、武漢等，地域分布廣泛，涵蓋了不同的生活環(huán)境和遺傳背景?；颊吣挲g范圍為10-50歲，平均年齡為28.5±7.8歲，其中男性1256例，女性581例，男女比例為2.16:1。同時，選取了4231名健康志愿者作為對照人群，對照人群同樣來自上述地區(qū)，年齡范圍為10-50歲，平均年齡為27.8±8.2歲，其中男性2900名，女性1331名，男女比例為2.18:1。對照人群經過詳細的體格檢查和相關實驗室檢查，排除患有風濕性疾病及其他慢性疾病的個體，以確保其健康狀態(tài)，作為準確的對照樣本。在樣本采集方面，采集所有研究對象的外周靜脈血5ml，置于含有EDTA抗凝劑的采血管中。采集過程嚴格遵循無菌操作原則，避免污染。采集后的血液樣本在4℃條件下保存，并在24小時內進行基因組DNA提取。使用常規(guī)的血液基因組DNA提取試劑盒，按照試劑盒說明書的操作步驟進行提取，確保提取的DNA質量和濃度符合后續(xù)實驗要求。提取的DNA經Nanodrop分光光度計檢測濃度和純度，要求OD260/OD280比值在1.8-2.0之間，DNA濃度不低于50ng/μL。采用瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA的完整性，確保DNA無降解，以保證后續(xù)基因分型實驗的準確性。4.2.2關聯(lián)分析結果通過對1837例散發(fā)AS患者和4231名健康對照者的1,356,350個常染色體SNPs進行全基因組關聯(lián)分析，取得了一系列重要發(fā)現(xiàn)。研究成功鑒別出兩個新的基因位點。其中一個位于染色體上5q14.3區(qū)域EDIL3與HAPLN1基因間位點（rs4552569），該位點與AS發(fā)病存在顯著關聯(lián)，P值達到8.77×10^-10，這表明該位點的變異與AS發(fā)病風險之間存在緊密聯(lián)系。EDIL3基因編碼的蛋白質在細胞外基質的形成和維持中發(fā)揮重要作用，其功能異?？赡苡绊懝趋篮完P節(jié)的正常結構和功能，進而增加AS的發(fā)病風險。HAPLN1基因參與軟骨和結締組織的形成，對維持關節(jié)的穩(wěn)定性和正常功能至關重要，該基因區(qū)域的變異可能干擾軟骨的正常發(fā)育和修復，從而與AS的發(fā)病相關。另一個新基因位點是12q12區(qū)域的ANO6基因（rs17095830），P值為1.63×10^-8，同樣顯示出與AS發(fā)病的顯著關聯(lián)性。ANO6基因編碼一種鈣激活的氯離子通道蛋白，參與細胞內鈣離子信號傳導和氯離子轉運等重要生理過程，其功能異?？赡軐е录毎麅拳h(huán)境紊亂，引發(fā)炎癥反應，從而在AS的發(fā)病機制中發(fā)揮作用。研究還對從前在歐洲家系中報道的強直性脊柱炎與MHC區(qū)域（topSNP,rs13202464;P<5×10^-324）和2p15區(qū)域的關聯(lián)性進行了驗證。在中國漢族人群中，同樣證實了AS與這些區(qū)域存在關聯(lián)性，進一步支持了先前在歐洲人群中的研究結果，表明這些區(qū)域在不同種族人群的AS發(fā)病中可能具有共同的作用機制。其中，MHC區(qū)域的rs13202464顯示了中國漢族人群HLA-B27變異體（包括HLA-B2704、HLA-B2705和HLA-B2715）的風險效應。HLA-B27變異體在AS發(fā)病中的重要作用已得到廣泛認可，其可能通過影響免疫系統(tǒng)的識別和反應，導致自身免疫異常，進而引發(fā)AS。本研究進一步明確了rs13202464位點與HLA-B27變異體的風險關聯(lián)，為深入理解AS的遺傳發(fā)病機制提供了更詳細的信息。4.3討論本研究通過對中國漢族人群中散發(fā)AS患者進行全基因組SNPs關聯(lián)分析，成功鑒別出兩個新的基因位點，這一發(fā)現(xiàn)具有重要的生物學意義和臨床價值。位于5q14.3區(qū)域EDIL3與HAPLN1基因間位點（rs4552569）和12q12區(qū)域的ANO6基因（rs17095830）與AS發(fā)病存在顯著關聯(lián)。這兩個新基因位點的發(fā)現(xiàn)，為深入理解AS的發(fā)病機制提供了新的視角。EDIL3基因編碼的蛋白質在細胞外基質的形成和維持中發(fā)揮重要作用。細胞外基質對于骨骼和關節(jié)的結構和功能至關重要，其異?？赡軐е鹿趋篮完P節(jié)的穩(wěn)定性下降，增加炎癥反應的易感性，從而促進AS的發(fā)生發(fā)展。HAPLN1基因參與軟骨和結締組織的形成，對維持關節(jié)的正常結構和功能起著關鍵作用。該基因區(qū)域的變異可能影響軟骨的合成、修復和代謝過程，使得關節(jié)軟骨更容易受到損傷，進而引發(fā)炎癥反應，與AS的發(fā)病密切相關。ANO6基因編碼一種鈣激活的氯離子通道蛋白，參與細胞內鈣離子信號傳導和氯離子轉運等重要生理過程。細胞內鈣離子和氯離子的平衡對于細胞的正常功能至關重要，ANO6基因功能異常可能導致細胞內環(huán)境紊亂，影響免疫細胞的活性和炎癥介質的釋放，從而在AS的發(fā)病機制中發(fā)揮作用。這些新易感基因位點的發(fā)現(xiàn)對AS分子機制研究具有深遠意義。以往對AS發(fā)病機制的研究主要集中在HLA-B27及少數已知基因上，新基因位點的出現(xiàn)拓展了研究的方向。通過深入研究這些基因的功能及其相互作用網絡，可以進一步揭示AS發(fā)病的分子生物學過程。研究EDIL3、HAPLN1和ANO6基因與其他免疫調節(jié)基因、炎癥相關基因之間的相互關系，有助于全面了解AS發(fā)病過程中免疫失衡和炎癥反應的發(fā)生機制。這為構建更完整的AS發(fā)病機制模型提供了重要依據，有助于深入理解AS的遺傳異質性，即不同個體之間AS發(fā)病機制的差異，為個性化治療提供理論基礎。新易感基因位點的發(fā)現(xiàn)對AS的預測、診斷和治療具有潛在的重要價值。在疾病預測方面，這些基因位點可作為新的遺傳標記，與現(xiàn)有的HLA-B27等標記相結合，提高AS發(fā)病風險預測的準確性。對于有AS家族史或具有相關遺傳背景的人群，通過檢測這些基因位點的變異情況，可以更精準地評估其發(fā)病風險，實現(xiàn)早期預警，從而采取有效的預防措施，如調整生活方式、定期體檢等，延緩或阻止疾病的發(fā)生。在診斷方面，新基因位點的檢測可以作為輔助診斷指標，尤其是對于一些癥狀不典型或HLA-B27陰性的AS患者，提高診斷的準確性和及時性，減少誤診和漏診。在治療方面，這些基因位點可能成為新的治療靶點。開發(fā)針對EDIL3、HAPLN1和ANO6基因的藥物或治療方法，有望干預AS的發(fā)病過程，為AS的治療提供新的策略，提高治療效果，改善患者的生活質量。本研究還驗證了AS與歐洲家系中報道的MHC區(qū)域和2p15區(qū)域的關聯(lián)性，進一步支持了這些區(qū)域在AS發(fā)病中的重要作用。MHC區(qū)域的rs13202464顯示了中國漢族人群HLA-B*27變異體的風險效應，這與以往的研究結果一致，強調了HLA-B27在AS發(fā)病中的關鍵地位。這也表明不同種族人群在AS發(fā)病機制上存在一定的共性，為跨種族的AS研究提供了參考依據。然而，本研究也存在一定的局限性。研究僅針對中國漢族人群中的散發(fā)AS患者，對于其他種族和家族性AS患者的遺傳特征研究不足，未來需要進一步擴大研究范圍，涵蓋不同種族和家系的樣本，以全面揭示AS的遺傳多樣性。關聯(lián)分析雖然能夠發(fā)現(xiàn)基因位點與疾病的關聯(lián)，但對于基因的具體功能和作用機制還需要進一步的功能研究來驗證，如通過細胞實驗、動物模型等方法深入探究新基因位點在AS發(fā)病中的具體作用途徑。五、結論與展望5.1研究主要成果總結本研究通過全面且深入的研究，在強直性脊柱炎遺傳風險及全基因組SNPs連鎖和關聯(lián)研究方面取得了一系列重要成果。在強直性脊柱炎遺傳風險研究中，明確了多個遺傳風險相關因素。男性AS患者發(fā)病年齡明顯早于女性，這可能與男性和女性在生理結構、激素水平以及免疫系統(tǒng)等方面的差異有關。父親或母親患病的AS患者發(fā)病年齡明顯早于父母無患病者，且髖關節(jié)受累的比率顯著增高，提示父母的遺傳因素對子女的發(fā)病具有重要影響。對于女性先證者，在父或母親患病組中是第一胎出生的比例明顯高于非父母患病組，表明胎次因素在女性先證者中可能與AS發(fā)病存在關聯(lián)，但具體機制尚待進一步研究。在遺傳風險率方面，總體AS患者其一級和二級親屬患病風險明顯高于普通人群，且親屬中與先證者的血緣關系越接近，患病的風險越大。2039例先證者中，一級親屬患病率為3.84%；二級親屬患病率是0.87%；三級親屬患病率是0.315%，三者間有顯著性差異。2039例先證者總的親屬的患病風險是普通人群的3.65倍，一級親屬（FDRs）的患病風險是普通人群的15.18倍，二級親屬（SDRs）的患病風險是普通人群的3.44倍。有家族史的AS患者總的親屬患病風險是普通人群的17.31倍，一級親屬（FDRs）的患病風險是普通人群的68.74倍，二級親屬（SDRs）的患病風險是普通人群的16.49倍，三級親屬（TDRs）的患病風險是普通人群的5.92倍，均明顯高于總體AS的親屬和普通人群。在強直性脊柱炎全基因組SNPs連鎖研究中，對廣東籍貫的10個AS家系進行研究，通過全基因組掃描和連鎖分析，確定了6p21區(qū)域為AS疾病、炎性腰背痛以及HLA-B27的重要易感區(qū)域。該區(qū)域長約9.44Mb，范圍從26283831到35727532。除了已知的HLA-B27基因外，TCF19等25個基因成為進一步在該區(qū)尋找AS疾病的易感基因研究的新靶點。這一發(fā)現(xiàn)為深入研究AS