“第1部分：遺傳質(zhì)量控制2014-10-27發(fā)布2014-12-26實(shí)施湖南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I Ⅱ 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 4遺傳分類及命名 2 本部分按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草?！?部分：遺傳質(zhì)量控制；——第2部分：微生物學(xué)等級與監(jiān)測；——第3部分：配合飼料；——第4部分：病理學(xué)診斷規(guī)范；——第5部分：環(huán)境與設(shè)施。本部分為《實(shí)驗(yàn)用小型豬》的第1部分。本部分由湖南省科技實(shí)驗(yàn)動物管理辦公室提出并歸口。本部分起草單位：中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院，湖南賽諾生物科技有限責(zé)任公司。本部分主要起草人：王維、易受南、俞遠(yuǎn)京、胡鵬志、郭飛、馬海明。本部分規(guī)定了實(shí)驗(yàn)用小型豬的遺傳分類、繁殖方法、近交系及封閉群的遺于實(shí)驗(yàn)用小型豬的遺傳質(zhì)量控制。2規(guī)范性引用文件件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB14923實(shí)驗(yàn)動物哺乳類動物的遺傳質(zhì)量控制3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。經(jīng)人工飼養(yǎng)與培育，對其攜帶的病原微生物、寄生蟲進(jìn)行控制，遺傳背景明確或者來源清楚，12月齡體重宜不超過50kg,用于科學(xué)研究(非臨床應(yīng)用研究)、教學(xué)、生產(chǎn)、質(zhì)量控制鑒定以及其他科學(xué)經(jīng)至少連續(xù)15代的全同胞兄妹交配培育而成，品系內(nèi)所有個體都可追溯到起源于一對共同祖先。近交系數(shù)(inbreedingcoefficient)>96.1%,或經(jīng)微衛(wèi)星檢測基因純合度>80%。經(jīng)連續(xù)15代以上親代與子代交配和全同胞兄妹交配有等同效果。封閉群(遠(yuǎn)交群)closedcolony(outbredstock)繁殖4代以上且每一代近交系數(shù)增量不超過1%。4遺傳分類及命名根據(jù)遺傳特點(diǎn)的不同，實(shí)驗(yàn)用小型豬分為近交系和封閉群。24.2.1近交系命名4.2.2近交代數(shù)近交系的近交代數(shù)用大寫英文字母F表示。例如當(dāng)一個近交系的近交代數(shù)為30代時(shí)，寫成(F30)。封閉群的命名按照GB14923執(zhí)行。5.1近交系的繁殖5.1.1原則選擇近交系實(shí)驗(yàn)用小型豬繁殖方法的原則是保持近交系小型豬的同基因性及基因純合性。作為繁殖用種豬的近交系實(shí)驗(yàn)用小型豬，應(yīng)來自于近交系的基礎(chǔ)群或血緣擴(kuò)大群，有完整的資料(包括品系名稱、近交代數(shù)、遺傳基因特點(diǎn)及主要生物學(xué)特征等)。5.1.3方法基礎(chǔ)群、血緣擴(kuò)大群和生產(chǎn)群的具體繁殖方式按照GB14923執(zhí)行。5.2封閉群的繁殖交系數(shù)增速過快。5.2.2.1作為繁殖用種子的封閉群實(shí)驗(yàn)用小型豬應(yīng)遺傳背景明確或來源清楚，有完整的資料(包括種5.2.2.2根據(jù)繁殖方式，在保證每代近交系數(shù)增量不大于1%的前提下，決定最小引種規(guī)模。如采用循環(huán)交配方式，引種數(shù)量不得少于13對無血緣關(guān)系(三代以內(nèi)無共同祖先)的公母豬；若采用隨機(jī)交配方式，引種數(shù)量不得少于25對無血緣關(guān)系的公母豬。3封閉群應(yīng)保持封閉群實(shí)驗(yàn)用小型豬的遺傳基因的穩(wěn)定，并盡量避免近親交配。具體繁殖方法按照6.1檢測方法等位基因數(shù)、等位基因片段范圍、引物序列、熒光標(biāo)記、PCR反應(yīng)的Tm值、鎂離子濃度等見表4。對基礎(chǔ)群，凡在子代留有種豬的雙親動物都對生產(chǎn)群，按表1要求從每個近交系中隨機(jī)抽取非同窩成年豬，公母各半。<50頭50-100頭100-500頭>500頭近交系實(shí)驗(yàn)用小型豬遺傳檢測結(jié)果的判定按表2執(zhí)行。判定未發(fā)現(xiàn)遺傳變異所有樣品檢測位點(diǎn)的等位基因都符合品系的特征，沒有新的等位基因出現(xiàn)為系，否則判為不合格。近交系實(shí)驗(yàn)用小型豬生產(chǎn)群每年至少進(jìn)行一次遺傳質(zhì)采用微衛(wèi)星DNA標(biāo)記檢測方法。具體方法按照NY/T1673執(zhí)行，各微衛(wèi)星D4<50頭50-100頭100-500頭>500頭見表4。(個)等位基因片段范圍熒光引物序列5→3'17F-TGTTCTCTGTTTCTCCTCR-AAAGTGGAAAGAGTCAA4656F-GACAAGCTCCAGGAAGCTR-ATTGCCTTGTGATCCCA7F-GAATGCAAAGAGTTCAG8795955表4(續(xù))(個)等位基因片段范