2026年生物醫(yī)藥研發(fā)實(shí)驗(yàn)技能考核題目一、選擇題（共10題，每題2分，合計(jì)20分）背景：本部分考察生物醫(yī)藥研發(fā)中基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)操作和原理的理解，重點(diǎn)關(guān)注中國生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)前沿技術(shù)。題目：1.在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，若培養(yǎng)基pH值持續(xù)偏高（>7.4），可能的原因是？A.CO?濃度不足B.培養(yǎng)基中碳酸氫鈉含量過高C.細(xì)胞代謝耗盡葡萄糖D.溫度控制異常2.高效液相色譜（HPLC）中，反相柱（如C18）主要用于分離哪種物質(zhì)？A.離子型小分子B.非極性有機(jī)化合物C.多糖類物質(zhì)D.蛋白質(zhì)3.RNA干擾（RNAi）技術(shù)中，siRNA的長度通常為？A.21ntB.50ntC.100ntD.200nt4.中藥成分提取中，超聲輔助提取相較于傳統(tǒng)加熱回流法的優(yōu)勢是？A.提取效率更高B.成本更低C.對熱敏感成分破壞更小D.操作更簡單5.下列哪種試劑常用于蛋白質(zhì)SDS電泳前的變性處理？A.Tris-HClB.SDS（十二烷基硫酸鈉）C.硫酸銨D.磷酸緩沖液6.體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究常使用的技術(shù)是？A.流式細(xì)胞術(shù)B.微透析技術(shù)C.原位雜交D.免疫熒光染色7.下列哪種方法最適合檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物？A.WesternBlotB.ELISAC.流式細(xì)胞術(shù)D.qPCR8.中藥復(fù)方配伍中，"君臣佐使"原則中"臣藥"的主要作用是？A.擔(dān)任主藥，發(fā)揮主要療效B.輔助主藥，增強(qiáng)療效或減輕毒副作用C.引藥入經(jīng)，提高吸收率D.調(diào)和諸藥，減少不良反應(yīng)9.制備重組蛋白時(shí)，常用的表達(dá)載體是？A.真核表達(dá)載體（如pCMV）B.原核表達(dá)載體（如pET）C.病毒載體（如腺病毒）D.以上都是10.中藥質(zhì)量評價(jià)中，指紋圖譜技術(shù)主要用于？A.確定化學(xué)成分結(jié)構(gòu)B.評估整體質(zhì)量特征C.測定含量指標(biāo)D.研究藥理作用二、簡答題（共5題，每題4分，合計(jì)20分）背景：考察對實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、操作規(guī)范及結(jié)果分析的理解，結(jié)合中國生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)特點(diǎn)。題目：1.簡述細(xì)胞培養(yǎng)過程中無菌操作的要點(diǎn)，并列舉三種常見的污染類型及應(yīng)對措施。2.解釋酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）的基本原理及其在藥物研發(fā)中的應(yīng)用場景。3.中藥提取過程中，如何通過控制溶劑極性實(shí)現(xiàn)目標(biāo)成分的富集？請舉例說明。4.描述蛋白質(zhì)印跡（WesternBlot）實(shí)驗(yàn)的步驟，并說明其中關(guān)鍵的抗體選擇原則。5.簡述藥物體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)（PK）研究的基本流程，并解釋"生物利用度"的概念。三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題（共3題，每題10分，合計(jì)30分）背景：考察解決實(shí)際問題的能力，結(jié)合中國醫(yī)藥監(jiān)管要求（如《藥品注冊管理辦法》）。題目：1.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)任務(wù)：某中藥復(fù)方用于治療高血壓，現(xiàn)需驗(yàn)證其活性成分是否通過調(diào)節(jié)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ACE）活性發(fā)揮藥效。請?jiān)O(shè)計(jì)體外酶抑制實(shí)驗(yàn)方案，包括：-實(shí)驗(yàn)?zāi)康?主要試劑與儀器-實(shí)驗(yàn)步驟（含對照組設(shè)置）-數(shù)據(jù)分析方法2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)任務(wù)：某生物藥需進(jìn)行穩(wěn)定性研究，請?jiān)O(shè)計(jì)加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)方案，需考慮至少三個(gè)降解因素（如溫度、濕度、光照），并說明如何通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)預(yù)測藥品貨架期。3.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)任務(wù)：為篩選中藥抗腫瘤復(fù)方，需建立體外細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。請?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，包括：-實(shí)驗(yàn)?zāi)康?細(xì)胞模型選擇（如HeLa細(xì)胞）-實(shí)驗(yàn)分組（含陰性對照）-結(jié)果評價(jià)指標(biāo)（如IC50值）及計(jì)算方法四、論述題（共2題，每題25分，合計(jì)50分）背景：考察對復(fù)雜實(shí)驗(yàn)問題的綜合分析和批判性思維能力，結(jié)合中國醫(yī)藥創(chuàng)新政策（如《創(chuàng)新藥研發(fā)指導(dǎo)原則》）。題目：1.論述題：試述中藥現(xiàn)代化研究中，如何平衡傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)與現(xiàn)代科學(xué)驗(yàn)證？結(jié)合具體實(shí)例說明。-要求：分析傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)（如君臣佐使）的科學(xué)內(nèi)涵，并探討現(xiàn)代技術(shù)（如代謝組學(xué)、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)）如何助力中藥創(chuàng)新。2.論述題：闡述生物藥仿制藥的相似性評價(jià)策略，結(jié)合中國NMPA的仿制藥質(zhì)量和療效一致性評價(jià)要求，分析實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的合理性。-要求：對比原研藥與仿制藥的體外溶出實(shí)驗(yàn)、體內(nèi)生物等效性試驗(yàn)，并討論統(tǒng)計(jì)學(xué)方法在評價(jià)中的重要性。答案與解析一、選擇題答案1.B（培養(yǎng)基中碳酸氫鈉是pH緩沖系統(tǒng)關(guān)鍵組分，含量過高導(dǎo)致pH失衡）2.B（反相柱基于"相似相溶"原理，分離非極性有機(jī)物）3.A（siRNA標(biāo)準(zhǔn)長度為21nt，雙鏈）4.C（超聲作用機(jī)制是高頻振動(dòng)，能促進(jìn)細(xì)胞膜通透性，減少熱損傷）5.B（SDS使蛋白質(zhì)變性并帶上負(fù)電荷，利于電泳分離）6.B（微透析技術(shù)可原位獲取組織液，用于藥代動(dòng)力學(xué)研究）7.C（流式細(xì)胞術(shù)實(shí)時(shí)檢測細(xì)胞表面標(biāo)記物表達(dá)）8.B（臣藥輔助君藥，增強(qiáng)療效或降低毒副作用）9.D（重組蛋白表達(dá)載體涵蓋真核、原核及病毒載體）10.B（指紋圖譜通過多成分圖譜對比，評價(jià)中藥整體質(zhì)量）二、簡答題答案與解析1.無菌操作要點(diǎn)：-工作臺(tái)面使用70%酒精消毒；-穿戴無菌手套，避免接觸非無菌區(qū)域；-使用無菌吸管、培養(yǎng)皿等耗材；-燒瓶口需火焰滅菌。-常見污染類型：-細(xì)菌污染（表現(xiàn)為渾濁、菌落）；-真菌污染（表現(xiàn)為棉絮狀菌落）；-病毒污染（需通過電鏡或PCR檢測）。-應(yīng)對措施：及時(shí)更換培養(yǎng)基，滅菌廢棄耗材，調(diào)整培養(yǎng)環(huán)境溫濕度。2.ELISA原理與應(yīng)用：-原理：利用抗原抗體特異性結(jié)合，通過酶標(biāo)二抗顯色定量目標(biāo)分子。-應(yīng)用：藥物靶點(diǎn)驗(yàn)證、抗體藥物研發(fā)、病毒抗體檢測等。3.中藥提取溶劑極性控制：-低極性溶劑（如石油醚）優(yōu)先提取揮發(fā)油類成分；-中極性溶劑（如乙醇）提取黃酮、皂苷類；-高極性溶劑（如甲醇）提取多糖、生物堿。4.WesternBlot步驟與抗體選擇：-步驟：SDS分離→轉(zhuǎn)膜→封閉→一抗孵育→二抗孵育→化學(xué)發(fā)光成像。-抗體選擇原則：特異性強(qiáng)（如兔抗人IgG）、親和度高、已驗(yàn)證文獻(xiàn)支持。5.藥代動(dòng)力學(xué)研究流程：-基本流程：給藥→定時(shí)采血→檢測血藥濃度→繪制濃度-時(shí)間曲線。-生物利用度：藥物被吸收進(jìn)入血液循環(huán)的相對量（F=AUC服藥/AUC靜脈注射×100%）。三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題答案與解析1.體外酶抑制實(shí)驗(yàn)方案：-目的：驗(yàn)證中藥復(fù)方對ACE活性的抑制效果。-試劑：ACE酶制劑、底物（如HOBP）、中藥提取物；-步驟：-陰性對照（無抑制劑）；-陽性對照（已知ACE抑制劑如卡托普利）；-實(shí)驗(yàn)組（不同濃度中藥提取物）；-測定各管底物水解速率，計(jì)算抑制率。-數(shù)據(jù)分析：IC50值評估抑制強(qiáng)度。2.加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)方案：-降解因素：高溫（40℃）、高濕（75%）、強(qiáng)光；-預(yù)測貨架期：通過Arrhenius方程擬合降解速率，外推室溫下穩(wěn)定性。3.體外細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)方案：-目的：篩選中藥抗腫瘤活性成分。-細(xì)胞模型：HeLa（宮頸癌細(xì)胞）；-分組：-陰性對照（DMSO）；-實(shí)驗(yàn)組（中藥提取物梯度濃度）；-陽性對照（順鉑）；-評價(jià)指標(biāo)：MTT法檢測細(xì)胞存活率，計(jì)算IC50值。四、論述題答案與解析1.中藥現(xiàn)代化與經(jīng)驗(yàn)平衡：-傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)科學(xué)內(nèi)涵：君臣佐使體現(xiàn)多成分協(xié)同作用（如甘草調(diào)和藥性）；-現(xiàn)代技術(shù)助力：代謝組學(xué)揭示復(fù)方整體效應(yīng)，網(wǎng)