病理科組織活檢診療指南與技術(shù)操作規(guī)范一、引言組織活檢是病理科的重要診斷手段，它通過(guò)獲取病變組織進(jìn)行病理檢查，為臨床疾病的診斷、治療方案的制定以及預(yù)后評(píng)估提供關(guān)鍵依據(jù)。準(zhǔn)確規(guī)范的組織活檢操作和診療流程對(duì)于提高診斷準(zhǔn)確性、保障患者安全至關(guān)重要。本指南旨在為病理科組織活檢診療提供全面、科學(xué)、實(shí)用的技術(shù)操作規(guī)范。二、組織活檢的適應(yīng)證與禁忌證（一）適應(yīng)證1.明確病變性質(zhì)：對(duì)于臨床上發(fā)現(xiàn)的不明原因的腫塊、結(jié)節(jié)，如乳腺腫塊、肺部結(jié)節(jié)等，通過(guò)活檢確定其是良性還是惡性病變。2.指導(dǎo)治療方案選擇：在制定腫瘤治療方案前，了解腫瘤的組織學(xué)類型、分級(jí)、分期等信息，如肺癌患者需明確是小細(xì)胞肺癌還是非小細(xì)胞肺癌，以選擇合適的治療方法。3.判斷預(yù)后：某些腫瘤的病理特征與預(yù)后密切相關(guān)，如乳腺癌的分子分型，活檢結(jié)果有助于評(píng)估患者的預(yù)后情況。4.研究疾病發(fā)病機(jī)制：通過(guò)對(duì)病變組織的研究，深入了解疾病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程，為醫(yī)學(xué)研究提供基礎(chǔ)。（二）禁忌證1.嚴(yán)重凝血功能障礙：患者的凝血指標(biāo)如凝血酶原時(shí)間（PT）、活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）等明顯異常，活檢后可能出現(xiàn)難以控制的出血。2.嚴(yán)重心肺功能不全：患者無(wú)法耐受活檢操作，如存在嚴(yán)重的心力衰竭、呼吸衰竭等情況。3.穿刺部位有感染：在感染部位進(jìn)行活檢可能導(dǎo)致感染擴(kuò)散。4.病變部位臨近重要血管、神經(jīng)或臟器：活檢操作可能損傷這些重要結(jié)構(gòu)，引起嚴(yán)重并發(fā)癥。三、組織活檢的術(shù)前準(zhǔn)備（一）患者評(píng)估1.病史采集：詳細(xì)詢問(wèn)患者的病史，包括現(xiàn)病史、既往史、家族史等，了解患者的疾病情況和可能存在的危險(xiǎn)因素。2.體格檢查：對(duì)患者進(jìn)行全面的體格檢查，重點(diǎn)檢查病變部位的大小、形態(tài)、質(zhì)地、活動(dòng)度等情況。3.實(shí)驗(yàn)室檢查：包括血常規(guī)、凝血功能、肝腎功能、傳染病篩查等，評(píng)估患者的一般狀況和凝血功能。4.影像學(xué)檢查：根據(jù)病變部位選擇合適的影像學(xué)檢查，如超聲、CT、MRI等，了解病變的位置、大小、與周圍組織的關(guān)系，為活檢定位提供依據(jù)。（二）簽署知情同意書(shū)向患者或其家屬詳細(xì)解釋活檢的目的、方法、可能出現(xiàn)的并發(fā)癥等情況，取得他們的理解和同意，并簽署知情同意書(shū)。（三）物品準(zhǔn)備1.活檢器械：根據(jù)活檢方法選擇合適的活檢器械，如穿刺針、手術(shù)刀、活檢鉗等。活檢器械應(yīng)嚴(yán)格按照無(wú)菌操作原則進(jìn)行消毒處理。2.固定液：常用的固定液為10%中性福爾馬林，固定液的量應(yīng)不少于組織體積的510倍。3.標(biāo)本容器：準(zhǔn)備合適的標(biāo)本容器，如塑料標(biāo)本瓶或玻璃標(biāo)本瓶，容器上應(yīng)標(biāo)明患者的姓名、年齡、住院號(hào)、標(biāo)本名稱等信息。4.其他物品：如局部麻醉藥、消毒用品、紗布、注射器等。（四）人員準(zhǔn)備活檢操作應(yīng)由經(jīng)過(guò)專業(yè)培訓(xùn)、具備豐富經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)生進(jìn)行。操作前，操作人員應(yīng)熟悉患者的病情和活檢部位的解剖結(jié)構(gòu)，制定詳細(xì)的操作方案。四、組織活檢的方法及操作規(guī)范（一）手術(shù)切除活檢1.操作步驟麻醉：根據(jù)病變部位和患者情況選擇合適的麻醉方式，如局部麻醉、全身麻醉等。切口設(shè)計(jì)：在病變表面或附近選擇合適的切口，切口應(yīng)足夠大，以便完整切除病變組織。切除病變：使用手術(shù)刀或手術(shù)剪將病變組織完整切除，注意避免損傷周圍正常組織。止血：切除病變后，對(duì)創(chuàng)面進(jìn)行止血處理，可采用縫合、電凝等方法?？p合切口：用縫線將切口逐層縫合，注意縫合的張力和對(duì)合情況。2.注意事項(xiàng)手術(shù)過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作原則，防止感染。盡量完整切除病變組織，避免腫瘤細(xì)胞殘留。對(duì)于較大的病變或深部病變，可在術(shù)中進(jìn)行快速冰凍切片檢查，以確定手術(shù)范圍。（二）穿刺活檢1.細(xì)針穿刺活檢（FNA）操作步驟定位：在超聲、CT等影像學(xué)引導(dǎo)下，確定穿刺點(diǎn)和進(jìn)針路徑。消毒與麻醉：對(duì)穿刺部位進(jìn)行常規(guī)消毒、鋪巾，用局部麻醉藥進(jìn)行局部麻醉。穿刺取材：使用細(xì)針（通常為2025G）經(jīng)皮穿刺進(jìn)入病變組織，抽取細(xì)胞成分。穿刺過(guò)程中應(yīng)避免損傷周圍重要結(jié)構(gòu)。涂片與固定：將抽取的細(xì)胞成分均勻涂片，立即用95%乙醇固定，送病理檢查。注意事項(xiàng)穿刺前應(yīng)準(zhǔn)確評(píng)估穿刺路徑，避免損傷重要血管、神經(jīng)和臟器。穿刺過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作原則，防止感染。涂片時(shí)應(yīng)注意細(xì)胞的分布和形態(tài)，避免人為擠壓造成細(xì)胞變形。2.粗針穿刺活檢（CNB）操作步驟定位：同細(xì)針穿刺活檢。消毒與麻醉：同細(xì)針穿刺活檢。穿刺取材：使用粗針（通常為1418G）經(jīng)皮穿刺進(jìn)入病變組織，獲取組織條。穿刺時(shí)應(yīng)根據(jù)病變大小和質(zhì)地調(diào)整進(jìn)針深度和取材次數(shù)。標(biāo)本處理：將獲取的組織條放入固定液中固定，送病理檢查。注意事項(xiàng)粗針穿刺活檢可能引起出血、感染等并發(fā)癥，穿刺后應(yīng)密切觀察患者的生命體征和穿刺部位情況。穿刺過(guò)程中應(yīng)避免多次反復(fù)穿刺同一部位，以免增加并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于較小的病變，應(yīng)盡量準(zhǔn)確穿刺，確保獲取足夠的組織進(jìn)行病理診斷。（三）內(nèi)鏡活檢1.操作步驟患者準(zhǔn)備：患者應(yīng)在檢查前禁食、禁水一段時(shí)間，以減少胃腸道內(nèi)容物對(duì)檢查的影響。給予患者適當(dāng)?shù)逆?zhèn)靜、麻醉藥物，以減輕患者的痛苦和不適。內(nèi)鏡插入：在直視下將內(nèi)鏡經(jīng)口腔、鼻腔或肛門插入至病變部位，觀察病變的形態(tài)、大小、位置等情況?；顧z取材：使用活檢鉗通過(guò)內(nèi)鏡活檢孔道插入至病變部位，準(zhǔn)確鉗取病變組織。活檢時(shí)應(yīng)避免損傷周圍正常組織，盡量從病變的不同部位取材，以提高診斷的準(zhǔn)確性。標(biāo)本處理：將鉗取的組織放入固定液中固定，送病理檢查。2.注意事項(xiàng)內(nèi)鏡活檢前應(yīng)評(píng)估患者的心肺功能和內(nèi)鏡檢查的耐受性?；顧z過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格遵守內(nèi)鏡操作規(guī)范，防止內(nèi)鏡損傷消化道黏膜。對(duì)于有出血傾向的患者，活檢后應(yīng)密切觀察有無(wú)出血情況，并采取相應(yīng)的止血措施。五、組織活檢標(biāo)本的處理（一）標(biāo)本固定活檢標(biāo)本應(yīng)及時(shí)放入固定液中固定，固定時(shí)間一般為24小時(shí)左右。固定液的溫度應(yīng)保持在室溫，避免標(biāo)本因溫度過(guò)高或過(guò)低而影響固定效果。（二）標(biāo)本脫水固定后的標(biāo)本需要進(jìn)行脫水處理，以去除組織中的水分，便于后續(xù)的透明和浸蠟。脫水通常采用梯度酒精脫水法，從低濃度酒精到高濃度酒精依次進(jìn)行。（三）透明脫水后的標(biāo)本需要進(jìn)行透明處理，使標(biāo)本能夠更好地被石蠟浸透。常用的透明劑有二甲苯、氯仿等。（四）浸蠟透明后的標(biāo)本放入熔化的石蠟中，使其完全被石蠟浸透。浸蠟過(guò)程需要在恒溫箱中進(jìn)行，溫度一般控制在5658℃。（五）包埋將浸蠟后的標(biāo)本放入包埋模具中，加入熔化的石蠟，待石蠟?zāi)毯?，制成含有?biāo)本的石蠟塊。包埋時(shí)應(yīng)注意標(biāo)本的擺放方向，以便于后續(xù)的切片和觀察。六、組織活檢的病理診斷（一）常規(guī)病理診斷1.切片制作：使用切片機(jī)將石蠟塊切成薄片，厚度一般為46μm。切片應(yīng)完整、均勻，無(wú)刀痕、皺折等缺陷。2.染色：常用的染色方法為蘇木精伊紅染色（HE染色），通過(guò)染色使細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)不同的顏色，便于觀察細(xì)胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。3.顯微鏡觀察：病理醫(yī)生在顯微鏡下觀察切片，根據(jù)細(xì)胞和組織的形態(tài)特征進(jìn)行診斷。診斷結(jié)果應(yīng)包括病變的性質(zhì)、類型、分級(jí)、分期等信息。（二）特殊病理診斷1.免疫組織化學(xué)染色：對(duì)于一些難以通過(guò)常規(guī)病理診斷明確的病變，可采用免疫組織化學(xué)染色方法。該方法通過(guò)特異性抗體與組織中的抗原結(jié)合，再通過(guò)顯色反應(yīng)顯示抗原的存在和分布情況，有助于腫瘤的分類、分級(jí)、預(yù)后評(píng)估等。2.分子病理學(xué)檢測(cè)：隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，分子病理學(xué)檢測(cè)在腫瘤診斷和治療中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。常用的分子病理學(xué)檢測(cè)方法包括基因測(cè)序、熒光原位雜交（FISH）等，可檢測(cè)腫瘤細(xì)胞中的基因突變、染色體異常等情況，為腫瘤的個(gè)體化治療提供依據(jù)。七、組織活檢的術(shù)后處理（一）患者觀察活檢后應(yīng)密切觀察患者的生命體征、穿刺部位或手術(shù)切口情況，有無(wú)出血、疼痛、感染等并發(fā)癥的發(fā)生。對(duì)于穿刺活檢患者，應(yīng)囑咐其臥床休息一段時(shí)間，避免劇烈運(yùn)動(dòng)。（二）并發(fā)癥處理1.出血：少量出血可通過(guò)壓迫止血、冷敷等方法處理；對(duì)于大量出血或出血不止的患者，應(yīng)及時(shí)采取輸血、手術(shù)止血等措施。2.感染：如果出現(xiàn)發(fā)熱、局部紅腫、疼痛等感染癥狀，應(yīng)及時(shí)給予抗生素治療。3.氣胸：對(duì)于肺部穿刺活檢后出現(xiàn)氣胸的患者，應(yīng)根據(jù)氣胸的嚴(yán)重程度采取保守治療或胸腔閉式引流等措施。（三）標(biāo)本報(bào)告與溝通病理科應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)發(fā)出病理報(bào)告，報(bào)告內(nèi)容應(yīng)準(zhǔn)確、詳細(xì)。病理醫(yī)生應(yīng)與臨床醫(yī)生保持密切溝通，及時(shí)解答臨床醫(yī)生對(duì)病理報(bào)告的疑問(wèn)，為臨床治療提供準(zhǔn)確的病理依據(jù)。八、質(zhì)量控制與安全管理（一）質(zhì)量控制1.人員培訓(xùn)：定期對(duì)病理科工作人員進(jìn)行專業(yè)培訓(xùn)，提高其業(yè)務(wù)水平和操作技能。培訓(xùn)內(nèi)容包括活檢技術(shù)、標(biāo)本處理、病理診斷等方面。2.標(biāo)本管理：建立完善的標(biāo)本管理制度，確保標(biāo)本的采集、運(yùn)輸、處理、保存等環(huán)節(jié)符合規(guī)范要求。標(biāo)本應(yīng)妥善保存，以備復(fù)查和研究之用。3.診斷質(zhì)量控制：定期進(jìn)行病理診斷質(zhì)量檢查，包括切片質(zhì)量、診斷準(zhǔn)確性等方面。對(duì)于疑難病例，應(yīng)組織多學(xué)科會(huì)診，提高診斷的準(zhǔn)確性。（二）安全管理1.生物安全：病理科工作人員應(yīng)嚴(yán)格遵守生物安全操作規(guī)程，防止生物污染和交叉感染。在處理標(biāo)本