2025年大學(xué)生物技術(shù)（生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)）上學(xué)期期末測試卷

（考試時間：90分鐘滿分100分）班級______姓名______一、選擇題（總共10題，每題3分，每題只有一個正確答案，請將正確答案填寫在括號內(nèi)）1.在生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，用于核酸分離與純化的常用方法是（）A.離子交換層析B.親和層析C.凝膠過濾層析D.離心法2.以下哪種試劑常用于蛋白質(zhì)定量分析（）A.雙縮脲試劑B.斐林試劑C.碘液D.蘇丹Ⅲ染液3.進(jìn)行PCR反應(yīng)時，需要的酶是（）A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.限制性內(nèi)切酶D.連接酶4.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，常用的培養(yǎng)基是（）A.肉湯培養(yǎng)基B.馬鈴薯培養(yǎng)基C.合成培養(yǎng)基D.半合成培養(yǎng)基5.用于檢測DNA片段的常用方法是（）A.聚丙烯酰胺凝膠電泳B.瓊脂糖凝膠電泳C.SDSD.雙向電泳6.蛋白質(zhì)印跡技術(shù)中，用于檢測蛋白質(zhì)的顯色劑是（）A.溴酚藍(lán)B.考馬斯亮藍(lán)C.二氨基聯(lián)苯胺D.伊紅7.在基因克隆實(shí)驗(yàn)中，常用的載體是（）A.質(zhì)粒B.噬菌體C.病毒D.以上都是8.以下哪種技術(shù)可用于基因表達(dá)分析（）A.NorthernblotB.WesternblotC.SouthernblotD.原位雜交9.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，常用的滅菌方法是（）A.干熱滅菌B.濕熱滅菌C.過濾滅菌D.以上都是10.用于細(xì)胞固定的常用試劑是（）A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.以上都是二、多項(xiàng)選擇題（總共5題，每題4分，每題有兩個或兩個以上正確答案，請將正確答案填寫在括號內(nèi)，多選、少選或錯選均不得分）1.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中常用的緩沖液有（）A.Tris-HCl緩沖液B.PBS緩沖液C.檸檬酸緩沖液D.醋酸緩沖液2.以下哪些儀器可用于核酸定量分析（）A.紫外可見分光光度計(jì)B.熒光定量PCR儀C.凝膠成像系統(tǒng)D.離心機(jī)3.蛋白質(zhì)純化過程中常用的方法有（）A.鹽析B.透析C.離子交換層析D.親和層析4.基因工程實(shí)驗(yàn)中，常用的工具酶有（）A.限制性內(nèi)切酶B.DNA連接酶C.DNA聚合酶D.逆轉(zhuǎn)錄酶5.細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要注意的事項(xiàng)有（）A.無菌操作B.合適的培養(yǎng)基C.適宜的溫度和pHD.定期傳代三、判斷題（總共10題，每題2分，請判斷下列說法的正誤，正確的打“√”，錯誤的打“×”）1.所有的核酸都可以通過凝膠電泳進(jìn)行分離和檢測。（）2.蛋白質(zhì)定量分析只能使用一種方法進(jìn)行。（）3.PCR反應(yīng)中，引物的設(shè)計(jì)對擴(kuò)增結(jié)果沒有影響。（）4.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，不需要添加血清。（）5.基因克隆實(shí)驗(yàn)中，載體的選擇不重要。（）6.蛋白質(zhì)印跡技術(shù)只能檢測蛋白質(zhì)的分子量。（）7.生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)中，所有的試劑都需要滅菌。（）8.用于檢測DNA的探針可以是DNA、RNA或蛋白質(zhì)。（）9.細(xì)胞固定后，就不能再進(jìn)行其他實(shí)驗(yàn)操作了。（）10.基因表達(dá)分析只能通過定量PCR技術(shù)進(jìn)行。（）四、簡答題（總共3題，每題10分，請簡要回答下列問題）1.請簡述核酸分離與純化的主要步驟及原理。2.蛋白質(zhì)印跡技術(shù)的基本原理是什么？有哪些應(yīng)用？3.簡述基因克隆的基本流程及關(guān)鍵步驟。五、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題（總共1題，每題20分）設(shè)計(jì)一個實(shí)驗(yàn)方案，從植物組織中提取總RNA，并進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。要求寫出實(shí)驗(yàn)原理、主要試劑及儀器、實(shí)驗(yàn)步驟。答案：一、選擇題1.D2.A3.A4.C5.B6.C7.D8.A9.D10.D二、多項(xiàng)選擇題1.ABCD2.ABC3.ABCD4.ABCD5.ABCD三、判斷題1.×2.×3.×4.×5.×6.×7.×8.×9.×10.×四、簡答題1.核酸分離與純化主要步驟包括破碎細(xì)胞、去除雜質(zhì)、沉淀核酸等。原理是利用核酸與其他生物大分子在溶解性、電荷等方面的差異，通過離心、層析等方法將核酸分離出來。2.蛋白質(zhì)印跡技術(shù)基本原理是將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相膜上，然后用特異性抗體進(jìn)行檢測。應(yīng)用包括蛋白質(zhì)定性定量分析、蛋白質(zhì)分子量測定、蛋白質(zhì)相互作用研究等。3.基因克隆基本流程包括獲取目的基因、選擇載體、連接目的基因與載體、轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞、篩選陽性克隆。關(guān)鍵步驟有目的基因的獲取和載體的選擇與構(gòu)建。五、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題實(shí)驗(yàn)原理：利用RNA提取試劑裂解植物組織細(xì)胞，釋放出總RNA，通過一系列步驟去除雜質(zhì)得到純凈總RNA，再以總RNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA。主要試劑及儀器：植物RNA提取試劑盒、反轉(zhuǎn)錄試劑盒、離心機(jī)、移液器、PCR儀等。實(shí)驗(yàn)步驟