2026年實(shí)驗(yàn)室生物安全培訓(xùn)考試試題及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共40分）1.2026年新版《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》中，對(duì)BSL-3實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)最低換氣次數(shù)的要求是A.6次/hB.9次/hC.12次/hD.15次/h答案：C解析：新版標(biāo)準(zhǔn)將BSL-3核心區(qū)最低換氣次數(shù)由9次/h上調(diào)至12次/h，以降低氣溶膠累積風(fēng)險(xiǎn)。2.在處理高致病性禽流感病毒培養(yǎng)物時(shí)，若發(fā)生大量濺灑，首選的消毒藥物及作用濃度為A.0.1%次氯酸鈉B.0.5%次氯酸鈉C.1%過(guò)氧乙酸D.5%過(guò)氧化氫答案：B解析：0.5%次氯酸鈉（有效氯5000mg/L）可在1min內(nèi)滅活流感病毒，且對(duì)金屬腐蝕性較低，適合大面積應(yīng)急消毒。3.關(guān)于CRISPR-Cas9基因編輯實(shí)驗(yàn)的生物安全評(píng)估，下列哪項(xiàng)必須寫(xiě)入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告A.引物合成公司資質(zhì)B.脫靶效應(yīng)潛在致瘤性C.電轉(zhuǎn)染儀型號(hào)D.培養(yǎng)箱CO?濃度答案：B解析：脫靶效應(yīng)可能激活原癌基因或抑制抑癌基因，屬于高等級(jí)風(fēng)險(xiǎn)源，必須評(píng)估并給出控制措施。4.實(shí)驗(yàn)室收到一份標(biāo)注為“UN3373B類(lèi)生物物質(zhì)”的快遞，下列做法正確的是A.直接帶入細(xì)胞室開(kāi)箱B.在生物安全柜內(nèi)拆除外層包裝C.用75%酒精噴灑內(nèi)層即可D.無(wú)需記錄接收溫度答案：B解析：UN3373雖為B類(lèi)，仍可能泄漏；在生物安全柜內(nèi)拆除可保護(hù)操作者及環(huán)境，并便于表面消毒。5.對(duì)BSL-2實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)（PPD）監(jiān)測(cè)的頻率建議是A.每月一次B.每季度一次C.入職及此后每年D.僅在發(fā)生暴露后答案：C解析：我國(guó)《結(jié)核病預(yù)防控制工作規(guī)范》要求入職篩查并年度復(fù)查，以及時(shí)發(fā)現(xiàn)潛伏感染。6.當(dāng)生物安全柜出現(xiàn)“氣流中斷”報(bào)警時(shí)，操作者第一優(yōu)先動(dòng)作是A.關(guān)閉風(fēng)機(jī)B.繼續(xù)操作并加快節(jié)奏C.立即雙臂退出并停止實(shí)驗(yàn)D.撥打維修電話答案：C解析：氣流中斷意味著人員保護(hù)屏障消失，應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)、雙臂退出，避免繼續(xù)產(chǎn)生氣溶膠。7.2026年起，所有從事新冠病毒分離培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室必須備案的行政級(jí)別是A.縣級(jí)衛(wèi)健委B.市級(jí)衛(wèi)健委C.省級(jí)衛(wèi)健委D.國(guó)家衛(wèi)健委答案：C解析：根據(jù)《人間傳染的高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理規(guī)定》，新冠病毒分離培養(yǎng)須省級(jí)衛(wèi)健委審批備案。8.在動(dòng)物生物安全三級(jí)（ABSL-3）實(shí)驗(yàn)室中，關(guān)于動(dòng)物墊料處理正確的是A.直接裝入醫(yī)療垃圾袋B.高壓蒸汽滅菌后雙層封裝C.化學(xué)消毒后可直接丟棄D.可隨污水排放答案：B解析：墊料可能攜帶高致病微生物，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌（121℃≥30min）后，再雙層醫(yī)療垃圾袋封裝。9.實(shí)驗(yàn)室發(fā)生銳器傷，已知源病毒為HBVDNA10?IU/mL，受傷者HBsAb<10mIU/mL，最恰當(dāng)?shù)谋┞逗箢A(yù)防（PEP）方案是A.單用乙肝疫苗20μgB.乙肝免疫球蛋白400IU+疫苗C.僅觀察D.用拉米夫定4周答案：B解析：高病毒載量暴露且抗體陰性，應(yīng)立即注射HBIG400IU并啟動(dòng)0-1-2-6月疫苗程序。10.對(duì)含有非洲豬瘟病毒（ASFV）的血液樣本進(jìn)行滅活，下列哪種條件可確保完全滅活A(yù).56℃30minB.60℃20minC.65℃30minD.72℃5s答案：C解析：ASFV為雙鏈DNA囊膜病毒，65℃30min可破壞囊膜及核酸，驗(yàn)證無(wú)感染性。11.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室個(gè)人防護(hù)裝備（PPE）穿戴順序，下列正確的是A.口罩→護(hù)目鏡→手套→實(shí)驗(yàn)服B.實(shí)驗(yàn)服→口罩→護(hù)目鏡→手套C.口罩→實(shí)驗(yàn)服→護(hù)目鏡→手套D.手套→口罩→護(hù)目鏡→實(shí)驗(yàn)服答案：C解析：先戴口罩阻斷呼吸道，再穿實(shí)驗(yàn)服覆蓋軀干，再戴護(hù)目鏡保護(hù)黏膜，最后戴手套確保手部屏障。12.在BSL-4實(shí)驗(yàn)室中，用于生命維持的正壓防護(hù)服內(nèi)氣壓應(yīng)高于環(huán)境A.10PaB.50PaC.100PaD.250Pa答案：B解析：正壓防護(hù)服維持約50Pa，可阻止外界空氣進(jìn)入，同時(shí)避免過(guò)高壓力導(dǎo)致服裝破裂。13.對(duì)“雙重包裝”概念理解正確的是A.兩層塑料袋B.主容器+防水第二層C.主容器+剛性第二層D.主容器+次級(jí)容器+外包裝答案：D解析：雙重包裝指主容器、次級(jí)容器及剛性外包裝三層結(jié)構(gòu)，符合UN2814/2900要求。14.實(shí)驗(yàn)室冰箱發(fā)生斷電超過(guò)4h，下列哪類(lèi)物品必須丟棄A.酶試劑B.質(zhì)粒DNAC.減毒活疫苗D.抗血清答案：C解析：減毒活疫苗對(duì)溫度敏感，一旦冷鏈中斷可能失活或毒力返強(qiáng)，不得再使用。15.關(guān)于生物安全實(shí)驗(yàn)室“三區(qū)兩緩”布局，下列描述錯(cuò)誤的是A.污染區(qū)與半污染區(qū)之間設(shè)緩沖B.半污染區(qū)與清潔區(qū)之間設(shè)緩沖C.清潔區(qū)可設(shè)淋浴D.緩沖間門(mén)可同時(shí)間開(kāi)啟答案：D解析：緩沖間兩門(mén)必須互鎖，不能同時(shí)間開(kāi)啟，防止氣流倒灌造成交叉污染。16.對(duì)含朊病毒（PrP^Sc）的組織切片進(jìn)行脫色，推薦的方法是A.二甲苯B.甲酸+過(guò)氧化氫C.高錳酸鉀D.漂白粉答案：B解析：甲酸+過(guò)氧化氫可破壞朊病毒構(gòu)象，降低感染性，同時(shí)保留部分組織形態(tài)便于病理觀察。17.實(shí)驗(yàn)室采用γ射線對(duì)一次性塑料耗材滅菌，常用劑量為A.5kGyB.15kGyC.25kGyD.50kGy答案：C解析：25kGy為標(biāo)準(zhǔn)滅菌劑量，可確保10??無(wú)菌保證水平（SAL），且對(duì)塑料性能影響小。18.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室生物安全委員會(huì)（IBC）職能，下列不屬于其職責(zé)的是A.審批涉及重組DNA實(shí)驗(yàn)B.監(jiān)督廢棄物處理C.任命實(shí)驗(yàn)室主任D.審查事故調(diào)查報(bào)告答案：C解析：實(shí)驗(yàn)室主任由機(jī)構(gòu)行政任命，IBC負(fù)責(zé)技術(shù)審查與監(jiān)督，不涉人事任免。19.在BSL-3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，下列哪項(xiàng)操作必須在Ⅲ級(jí)生物安全柜中進(jìn)行A.流感病毒血凝實(shí)驗(yàn)B.炭疽芽孢涂片C.新冠病毒動(dòng)物攻毒D.大腸桿菌質(zhì)粒提取答案：C解析：動(dòng)物攻毒產(chǎn)生大量感染性氣溶膠，涉及哺乳動(dòng)物病原，需在Ⅲ級(jí)柜或隔離器內(nèi)完成。20.實(shí)驗(yàn)室生物安全演練中，對(duì)“模擬泄漏”評(píng)估有效性最核心的指標(biāo)是A.演練耗時(shí)B.參與人數(shù)C.從泄漏到完成消毒的時(shí)間D.拍照數(shù)量答案：C解析：從泄漏發(fā)生到完成消毒的時(shí)間越短，越能減少暴露范圍，是衡量應(yīng)急響應(yīng)效率的核心指標(biāo)。二、多項(xiàng)選擇題（每題3分，共30分，每題至少有兩個(gè)正確答案，多選少選均不得分）21.以下哪些屬于BSL-2實(shí)驗(yàn)室必須配備的安全設(shè)備A.Ⅱ級(jí)生物安全柜B.離心機(jī)安全杯C.眼部沖洗器D.高壓蒸汽滅菌器E.正壓防護(hù)服答案：ABCD解析：正壓防護(hù)服為BSL-4裝備，BSL-2無(wú)需配備。22.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室獲得性感染（LAI）流行病學(xué)特點(diǎn)，正確的有A.80%由操作失誤導(dǎo)致B.針刺傷占主要比例C.多數(shù)發(fā)生在BSL-3以上實(shí)驗(yàn)室D.新員工風(fēng)險(xiǎn)高于老員工E.真菌感染占比最高答案：ABD解析：LAI主要發(fā)生在BSL-2實(shí)驗(yàn)室；細(xì)菌感染最多，真菌占比低。23.下列哪些情況需要重新進(jìn)行生物安全培訓(xùn)并考核A.崗位調(diào)整至更高等級(jí)實(shí)驗(yàn)室B.離開(kāi)崗位半年以上復(fù)崗C.發(fā)生事故后D.每年例行E.發(fā)表SCI論文后答案：ABCD解析：發(fā)表論文與生物安全培訓(xùn)無(wú)直接關(guān)聯(lián)。24.對(duì)含有寨卡病毒（ZIKV）的蚊媒樣本進(jìn)行核酸提取，可采用的滅活步驟有A.60℃30minB.TRIzolLS裂解C.β-丙內(nèi)酯4℃過(guò)夜D.75%乙醇4℃24hE.紫外線照射30min答案：ABC解析：75%乙醇及紫外線對(duì)ZIKV滅活效果不徹底，不能替代化學(xué)裂解或加熱。25.實(shí)驗(yàn)室生物安全文化核心要素包括A.領(lǐng)導(dǎo)承諾B.個(gè)人責(zé)任C.匿名舉報(bào)D.經(jīng)濟(jì)激勵(lì)E.持續(xù)改進(jìn)答案：ABCE解析：經(jīng)濟(jì)激勵(lì)并非文化核心，過(guò)度激勵(lì)可能掩蓋事件報(bào)告。26.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室廢棄物標(biāo)簽，必須注明A.產(chǎn)生科室B.病原體名稱(chēng)C.滅活方式D.重量E.產(chǎn)生日期答案：ABCE解析：重量非強(qiáng)制項(xiàng)，但需注明體積或數(shù)量。27.以下哪些操作會(huì)產(chǎn)生氣溶膠A.火焰灼燒接種環(huán)B.高速勻漿C.超聲波破碎D.打開(kāi)凍干菌種安瓿E.傾倒液體培養(yǎng)物答案：BCD解析：火焰灼燒產(chǎn)生熱對(duì)流非氣溶膠；傾倒液體若無(wú)飛濺亦不產(chǎn)生。28.對(duì)BSL-3實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)高效過(guò)濾器（HEPA）更換，正確做法有A.由雙人完成B.先進(jìn)行原位消毒C.使用袋進(jìn)袋出系統(tǒng)D.更換后做檢漏E.舊過(guò)濾器直接焚燒答案：ABCD解析：舊過(guò)濾器需先消毒再封裝，焚燒需危廢資質(zhì)，非直接焚燒。29.實(shí)驗(yàn)室生物安全柜年度驗(yàn)證需包含A.氣流流速B.煙霧流型C.HEPA檢漏D.噪聲E.照度答案：ABCDE解析：五項(xiàng)均為YY0569-2022標(biāo)準(zhǔn)必檢項(xiàng)目。30.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室自建qPCR檢測(cè)體系，下列哪些文件必須存檔A.引物探針序列B.靈敏度驗(yàn)證數(shù)據(jù)C.臨床樣本結(jié)果D.滅活確認(rèn)實(shí)驗(yàn)E.試劑批號(hào)答案：ABDE解析：臨床樣本結(jié)果屬患者信息，按隱私管理，不強(qiáng)制存檔于安全體系。三、判斷題（每題1分，共10分，正確打“√”，錯(cuò)誤打“×”）31.實(shí)驗(yàn)室可用75%酒精對(duì)諾如病毒污染表面進(jìn)行徹底滅活。答案：×解析：諾如病毒為無(wú)囊膜病毒，75%酒精穿透力差，需用0.1%次氯酸鈉。32.在BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行HIV分離培養(yǎng)時(shí)，必須佩戴N95口罩。答案：√解析：HIV雖主要通過(guò)血液，但培養(yǎng)過(guò)程可能產(chǎn)生氣溶膠，需呼吸防護(hù)。33.實(shí)驗(yàn)室生物安全柜高效過(guò)濾器對(duì)0.3μm粒子過(guò)濾效率≥99.97%。答案：√解析：符合EN1822H14等級(jí)，為生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)。34.實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生病原菌泄漏，應(yīng)立即打開(kāi)門(mén)窗通風(fēng)。答案：×解析：打開(kāi)門(mén)窗會(huì)導(dǎo)致病原擴(kuò)散，應(yīng)關(guān)閉空調(diào)系統(tǒng)，啟動(dòng)應(yīng)急排風(fēng)。35.對(duì)含布魯氏菌的樣本進(jìn)行血清學(xué)實(shí)驗(yàn)可在BSL-1實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。答案：×解析：布魯氏菌為第二類(lèi)病原，血清學(xué)前處理需在BSL-2。36.實(shí)驗(yàn)室所有醫(yī)療垃圾均按感染性廢物處理。答案：×解析：一次性塑料外包裝屬生活垃圾，無(wú)害化處理即可。37.實(shí)驗(yàn)室生物安全培訓(xùn)考核合格分?jǐn)?shù)為80分。答案：√解析：機(jī)構(gòu)普遍采用80分合格線，低于需補(bǔ)考。38.實(shí)驗(yàn)室可委托無(wú)資質(zhì)企業(yè)運(yùn)輸U(kuò)N2814樣本。答案：×解析：須由具備危廢運(yùn)輸資質(zhì)的單位承運(yùn)，否則違法。39.實(shí)驗(yàn)室發(fā)生職業(yè)暴露后，預(yù)防用藥越早越好，最好在2h內(nèi)。答案：√解析：暴露后阻斷時(shí)間窗通常為72h，但2h內(nèi)效果最佳。40.實(shí)驗(yàn)室生物安全柜前窗開(kāi)啟高度超過(guò)標(biāo)定值會(huì)導(dǎo)致人員保護(hù)失效。答案：√解析：前窗過(guò)高會(huì)擾亂氣流，導(dǎo)致外逸，必須保持廠家標(biāo)定高度。四、填空題（每空2分，共20分）41.2026年起，高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)審批實(shí)行________承諾制，即“________、________、________”三同時(shí)。答案：告知、備案、承諾、監(jiān)管解析：國(guó)家衛(wèi)健委第9號(hào)令改革審批制度，強(qiáng)化事中事后監(jiān)管。42.實(shí)驗(yàn)室生物安全柜分為三級(jí)，其中Ⅲ級(jí)柜對(duì)操作者保護(hù)系數(shù)≥________。答案：10?解析：Ⅲ級(jí)柜為氣密隔離器，保護(hù)系數(shù)遠(yuǎn)高于Ⅱ級(jí)。43.對(duì)含SARS-CoV-2的痰液樣本進(jìn)行滅活，推薦采用________℃________min。答案：65、30解析：WHO技術(shù)指南確認(rèn)該條件可完全滅活冠狀病毒且核酸完整。44.實(shí)驗(yàn)室銳器盒裝載不得超過(guò)容積的________。答案：3/4解析：過(guò)滿易刺傷清潔人員，規(guī)定≤75%。45.實(shí)驗(yàn)室生物安全演練評(píng)估報(bào)告需在演練結(jié)束后________個(gè)工作日內(nèi)提交管理層。答案：5解析：GB19489-2026要求5日內(nèi)完成整改計(jì)劃。46.實(shí)驗(yàn)室高壓蒸汽滅菌器生物監(jiān)測(cè)采用________芽孢，每周一次。答案：嗜熱脂肪土芽孢桿菌（Geobacillusstearothermophilus）解析：該芽孢耐熱最強(qiáng)，可驗(yàn)證121℃滅菌效果。47.實(shí)驗(yàn)室生物安全柜氣流報(bào)警閾值通常為下降風(fēng)速低于________m/s。答案：0.36解析：低于0.36m/s即觸發(fā)聲光報(bào)警，提示氣流不足。48.實(shí)驗(yàn)室對(duì)含埃博拉病毒的動(dòng)物尸體處理，必須采用________℃________min高壓滅菌。答案：121、90解析：高載量組織需延長(zhǎng)滅菌時(shí)間，確保徹底滅活。49.實(shí)驗(yàn)室生物安全培訓(xùn)檔案保存期限不少于________年。答案：5解析：機(jī)構(gòu)認(rèn)證要求可追溯，至少保存5年。50.實(shí)驗(yàn)室發(fā)生高致病性病原泄漏，應(yīng)在________小時(shí)內(nèi)網(wǎng)絡(luò)直報(bào)。答案：2解析：《突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例》規(guī)定2小時(shí)內(nèi)直報(bào)。五、簡(jiǎn)答題（每題10分，共30分）51.簡(jiǎn)述BSL-3實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)“三區(qū)兩緩”布局要點(diǎn)，并說(shuō)明緩沖間氣流控制原理。答案：（1）三區(qū)：污染區(qū)（實(shí)驗(yàn)操作間）、半污染區(qū)（準(zhǔn)備及洗消間）、清潔區(qū)（更衣室及辦公）。（2）兩緩：污染區(qū)與半污染區(qū)之間設(shè)緩沖1，半污染區(qū)與清潔區(qū)之間設(shè)緩沖2。（3）氣流方向：清潔區(qū)→半污染區(qū)→污染區(qū)→排風(fēng)，壓差梯度≥-25Pa。（4）緩沖間采用送排風(fēng)獨(dú)立系統(tǒng)，送風(fēng)經(jīng)粗效+中效過(guò)濾，排風(fēng)經(jīng)BIBO高效過(guò)濾；兩門(mén)互鎖，同時(shí)間只能開(kāi)啟一扇，防止氣流倒灌。（5）緩沖間內(nèi)設(shè)自動(dòng)閉門(mén)器及壓差顯示，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，異常時(shí)聲光報(bào)警并啟動(dòng)應(yīng)急排風(fēng)。52.實(shí)驗(yàn)室獲得性感染（LAI）常見(jiàn)原因有哪些？請(qǐng)?zhí)岢鲋辽傥鍡l針對(duì)性預(yù)防措施。答案：常見(jiàn)原因：1.口吸移液導(dǎo)致誤吸；2.離心管破裂產(chǎn)生氣溶膠；3.手套破損未及時(shí)發(fā)現(xiàn)；4.未在生物安全柜內(nèi)操作高濃度菌液；5.動(dòng)物抓咬傷；6.銳器盒過(guò)滿刺傷。預(yù)防措施：1.全面禁用口吸，改用移液器；2.使用帶密封蓋的離心桶，離心30s后停機(jī)觀察；3.雙層手套并每30min檢查；4.所有高濃度操作均在Ⅱ級(jí)柜完成；5.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)佩戴Kevlar防咬手套；6.銳器盒滿3/4立即封口更換。53.實(shí)驗(yàn)室新建BSL-3平臺(tái)，請(qǐng)寫(xiě)出風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估流程及關(guān)鍵文檔清單。答案：流程：1.立項(xiàng)階段：收集病原清單、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)、涉及動(dòng)物、重組DNA信息；2.危害識(shí)別：對(duì)病原毒力、感染量、傳播途徑、宿主范圍打分；3.風(fēng)險(xiǎn)分析：結(jié)合操作量、濃度、氣溶膠產(chǎn)生概率計(jì)算風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)；4.控制措施：工程控制（BIBO、隔離器）、行政控制（SOP、準(zhǔn)入）、PPE選型；5.殘余風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估；6.專(zhuān)家論證；7.管理層批準(zhǔn)；8.動(dòng)態(tài)復(fù)審，每年一次或發(fā)生重大變更時(shí)重新評(píng)估。關(guān)鍵文檔：《風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告》《病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)申請(qǐng)表》《實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)方案》《SOP匯編》《應(yīng)急預(yù)案》《人員培訓(xùn)記錄》《專(zhuān)家意見(jiàn)表》《批準(zhǔn)書(shū)》《年度復(fù)審報(bào)告》。六、案例分析題（20分）54.2026年4月，某高校BSL-3實(shí)驗(yàn)室在進(jìn)行H7N