合成生物學實驗平臺運維工程師崗位招聘考試試卷及答案一、填空題（每題1分，共10分）1.實驗室高壓滅菌鍋的常用滅菌溫度為____℃。2.PCR儀核心加熱模塊類型包括金屬模塊和____模塊。3.凝膠成像系統(tǒng)觀察核酸電泳常用的激發(fā)光源是____。4.能有效防止氣溶膠擴散的生物安全柜是____級及以上。5.合成生物學常用原核表達宿主菌是____（答1種即可）。6.移液器校準的主要參數(shù)是量程和____。7.發(fā)酵罐D(zhuǎn)O電極校準常用____法（飽和空氣/亞硫酸鈉）。8.限制酶識別序列通常具有____特性。9.感染性生物垃圾需放入____色垃圾袋。10.核酸定量方法除紫外分光光度法外，還有____法（答1種即可）。二、單項選擇題（每題2分，共20分）1.以下不屬于分子克隆常用設備的是？A.PCR儀B.發(fā)酵罐C.凝膠成像儀D.移液器2.生物安全柜使用前需開啟風機運行至少____分鐘。A.5B.10C.15D.203.對大腸桿菌有抑制作用的抗生素是？A.青霉素B.鏈霉素C.紅霉素D.兩性霉素B4.PCR退火溫度通常比引物Tm值低____℃。A.1-3B.3-5C.5-7D.7-95.核酸電泳遷移率無關的因素是？A.分子大小B.電荷C.凝膠濃度D.環(huán)境溫度6.高壓滅菌鍋常用壓力為____MPa。A.0.101B.0.103C.0.152D.0.2057.去除DNA中RNA污染的試劑是？A.RNaseAB.DNaseIC.蛋白酶KD.溶菌酶8.發(fā)酵罐攪拌的作用不包括？A.增加DOB.促進混合C.降低菌體代謝D.減少泡沫9.合成生物學常用載體不包括？A.質(zhì)粒載體B.噬菌體載體C.病毒載體D.細胞載體10.移液器使用后正確操作是？A.直接掛架B.卸槍頭掛架C.調(diào)至最小量程掛架D.調(diào)至最大量程掛架三、多項選擇題（每題2分，共20分）1.儀器運維要點包括？A.定期校準B.清潔保養(yǎng)C.耗材更換D.故障記錄2.BSL-2實驗室操作規(guī)范包括？A.穿防護服B.戴手套C.廢棄物滅菌D.無需生物安全柜3.核酸純化方法有？A.酚氯仿抽提B.硅膠膜柱法C.乙醇沉淀D.電泳回收4.pH電極校準常用緩沖液是？A.pH4.0B.pH6.86C.pH7.0D.pH9.185.實驗室感染風險包括？A.氣溶膠吸入B.針刺傷C.皮膚接觸D.誤食6.常用DNA連接酶是？A.T4DNA連接酶B.E.coliDNA連接酶C.TaqDNA連接酶D.逆轉(zhuǎn)錄酶7.儀器運維記錄應包含？A.維護日期B.維護內(nèi)容C.耗材更換D.故障處理8.需避光保存的試劑是？A.熒光染料B.限制酶C.氨芐青霉素D.乙醇9.合成生物學常用宿主細胞是？A.大腸桿菌B.酵母菌C.哺乳動物細胞D.植物細胞10.生物安全柜正確操作是？A.物品緊湊擺放B.避免遮擋進風口C.開啟后立即操作D.操作后消毒臺面四、判斷題（每題2分，共20分）1.PCR儀加熱模塊溫度均勻性不影響實驗結果。（）2.生物安全柜風機故障時可操作非感染性材料。（）3.限制酶切割位點必須是回文序列。（）4.發(fā)酵罐D(zhuǎn)O電極無需定期校準。（）5.實驗室針頭需放入銳器盒。（）6.質(zhì)粒載體的復制原點是必需元件。（）7.DNA電泳向正極遷移。（）8.高壓滅菌鍋裝載量不影響滅菌效果。（）9.移液器槍頭可重復使用。（）10.實驗平臺運維記錄無需存檔。（）五、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述PCR儀日常維護要點。2.簡述BSL-2實驗室廢棄物處理原則。3.簡述發(fā)酵罐D(zhuǎn)O電極校準步驟。4.簡述實驗室無菌操作核心要點。六、討論題（每題5分，共10分）1.PCR儀擴增效率低的可能原因及排查步驟。2.如何制定實驗平臺年度儀器維護計劃？---答案部分一、填空題1.1212.半導體（帕爾貼）3.紫外燈（UV燈）4.II5.大腸桿菌（E.coli）6.精度7.飽和空氣8.回文結構9.黃10.熒光定量（瓊脂糖凝膠電泳定量）二、單項選擇題1.B2.B3.B4.B5.D6.B7.A8.C9.D10.C三、多項選擇題1.ABCD2.ABC3.ABCD4.BCD5.ABCD6.AB7.ABCD8.AB9.ABCD10.BD四、判斷題1.×2.×3.√4.×5.√6.√7.√8.×9.×10.×五、簡答題1.PCR儀日常維護要點：①每日清潔加熱模塊，避免液體殘留腐蝕；②每月校準溫度，用標準探頭檢測均勻性；③檢查加熱/冷卻系統(tǒng)，無異常噪音或延遲；④保持通風，避免粉塵積累；⑤按周期更換加熱塊襯墊等耗材；⑥記錄維護及故障情況存檔。維護不當會導致擴增效率下降、假陽性等問題。2.BSL-2廢棄物處理原則：①分類：感染性垃圾用黃色袋，銳器用專用盒，普通垃圾用黑色袋；②滅菌：所有感染性廢棄物經(jīng)121℃/30min高壓滅菌或化學消毒；③記錄：標注產(chǎn)生時間、類型、滅菌參數(shù)及處理人；④合規(guī)：委托有資質(zhì)單位處理，符合當?shù)厣锇踩ㄒ?guī)，避免污染及感染風險。3.DO電極校準步驟：①取出電極清洗，連接校準儀；②0點校準：浸入飽和亞硫酸鈉溶液（無氧），待讀數(shù)穩(wěn)定校準；③100%點校準：浸入曝氣去離子水，待讀數(shù)穩(wěn)定校準；④驗證：用標準溶液確認準確性；⑤安裝回發(fā)酵罐，避免氣泡附著；⑥記錄校準日期、參數(shù)存檔，每兩周校準一次。4.無菌操作核心要點：①環(huán)境：生物安全柜內(nèi)操作，紫外線滅菌30min后開啟風機；②防護：穿實驗服、戴手套口罩，避免觸摸面部；③耗材：試劑/耗材滅菌后使用；④操作：火焰滅菌接種工具，試劑瓶口過火焰，避免交叉污染；⑤監(jiān)測：定期采樣檢測環(huán)境無菌性，操作后消毒臺面。六、討論題1.PCR擴增效率低的原因及排查：①試劑因素：引物降解（重新合成）、Taq酶失活（換酶）、dNTP失效；②儀器因素：溫度校準異常（重新校準）、加熱/冷卻延遲（檢查系統(tǒng)）；③操作因素：模板濃度低（加量）、退火溫度高（降3-5℃）、循環(huán)數(shù)不足（加循環(huán)）；④環(huán)境因素：氣溶膠污染（換耗材）。排查先做陽性對照驗證試劑，再檢查儀器，最后排查操作。2.年度儀器維護計劃制定：①分類：核心儀器（PCR、發(fā)酵罐