高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1海南省部分中學(xué)2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期第三次模擬考試一、選擇題：本題共15小題，每小題3分，共45分。在每小題給出的四個選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。1.下圖中甲是稀釋涂布平板法中的部分操作，乙是平板劃線法操作結(jié)果。下列敘述中錯誤的是（）A.為避免空氣中雜菌的污染，進(jìn)行甲操作時不可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿B.甲圖中將涂布器放在火焰上灼燒，待酒精燃盡冷卻后才能涂布C.乙中第二次以及以后劃線的起點(diǎn)均是上一次劃線的末端D.完成整個乙操作過程需蘸取菌種1次、灼燒接種環(huán)6次【答案】A〖祥解〗微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻，A錯誤；B、甲圖中的接種方法為稀釋涂布平板法，采用的工具是涂布器，涂布前要將沾有少量酒精的涂布器引燃、灼燒，冷卻后才能將菌液涂布均勻，B正確；C、乙中除第一次外，第二次以及以后的連續(xù)劃線的起點(diǎn)均是上一次劃線的末端（末端的菌種數(shù)目更少），這樣能使菌種的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)胞繁殖而來的菌落，C正確；D、利用平板劃線法接種時需要蘸取菌液1次，乙培養(yǎng)基中有5個劃線區(qū)域，蘸取菌液之前以及每次劃線后均需要灼燒滅菌，一共需要灼燒接種環(huán)6次，D正確。故選A。2.HAT選擇培養(yǎng)基可以篩選出融合成功的雜交瘤細(xì)胞，研究人員將兩株不同的雜交瘤細(xì)胞融合形成雙雜交瘤細(xì)胞。該細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長繁殖，產(chǎn)生具有CD3和CD87結(jié)合位點(diǎn)的雙特異性抗體，如圖所示。CD87是一種癌細(xì)胞膜上的受體蛋白，研發(fā)針對CD87的抗體類藥物能提高癌癥的治愈率；CD3是所有T細(xì)胞表面均有表達(dá)的特異性抗原，該抗原被激活后，能極大促進(jìn)T細(xì)胞的免疫效力。下列敘述正確的是（）A.雙雜交瘤細(xì)胞受到CD87和CD3兩種抗原刺激后才能產(chǎn)生雙特異性抗體B.培養(yǎng)雙雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)基中應(yīng)加入水、無機(jī)鹽、瓊脂和血清等C.雙特異性單克隆抗體使T細(xì)胞更精準(zhǔn)接觸并殺傷癌細(xì)胞D.將兩株不同的雜交瘤細(xì)胞融合后，可利用HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雙雜交瘤細(xì)胞【答案】C〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞?！驹斘觥緼、雜交瘤細(xì)胞無需抗原刺激就能產(chǎn)生單克隆抗體，雙雜交瘤細(xì)胞也一樣，并非受到CD87和CD3兩種抗原刺激后才產(chǎn)生雙特異性抗體，A錯誤；B、雙雜交瘤細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長繁殖，說明是在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，而瓊脂是制作固體培養(yǎng)基的凝固劑，不需要加入，B錯誤；C、CD87是癌細(xì)胞膜上受體蛋白，CD3激活后能促進(jìn)T細(xì)胞免疫效力，雙特異性單克隆抗體一端與癌細(xì)胞上CD87結(jié)合，一端與T細(xì)胞上CD3結(jié)合，能使T細(xì)胞更精準(zhǔn)接觸并殺傷癌細(xì)胞，C正確；D、HAT選擇培養(yǎng)基是用于篩選融合成功的雜交瘤細(xì)胞，而將兩株不同雜交瘤細(xì)胞融合后，不能再用HAT選擇培養(yǎng)基篩選雙雜交瘤細(xì)胞，D錯誤。故選C。3.通過設(shè)計(jì)引物，運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定點(diǎn)誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計(jì)增加限制酶a和限制酶b的識別位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.在PCR反應(yīng)體系中還需要加入4種游離核苷酸、解旋酶、耐高溫的DNA聚合酶等B.第3輪PCR結(jié)束后，含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA占1/4C.引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識別位點(diǎn)有利于目的基因定向插入運(yùn)載體D.復(fù)性溫度過高會導(dǎo)致引物不能與模板牢固結(jié)合，PCR擴(kuò)增效率下降【答案】A〖祥解〗（1）PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制，步驟包括高溫變性、復(fù)性、延伸。該過程需要耐高溫的DNA聚合酶催化，需要四種游離的脫氧核苷酸做原料（2）分析圖示可知：表示基因工程中獲取突變基因的過程，引物的一個堿基在不影響與模板鏈整體配對的前提下不與目的基因配對，再利用PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)了目的基因的定點(diǎn)誘變。該技術(shù)原理是堿基互補(bǔ)配對原則?！驹斘觥緼、在PCR反應(yīng)體系中不需要解旋酶，A錯誤；B、第3輪PCR結(jié)束后，含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA只有2個，而子代DNA有23=8個，故含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA占1/4，B正確；C、引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識別位點(diǎn)，可以配合載體的限制酶識別位點(diǎn)，幫助目的基因定向定點(diǎn)插入運(yùn)載體，避免發(fā)生自身環(huán)化，C正確；D、復(fù)性溫度過高會導(dǎo)致引物不能與模板牢固結(jié)合，PCR擴(kuò)增效率下降，D正確。故選A。4.生物技術(shù)的安全性和倫理問題已經(jīng)成為廣受關(guān)注的社會熱點(diǎn)。下列技術(shù)或要求不符合安全與倫理規(guī)范的是（）A.將目的基因?qū)朕r(nóng)作物的葉綠體基因組，可以有效防止基因污染B.利用基因組編輯技術(shù)設(shè)計(jì)試管嬰兒，解決不孕不育問題C.生物武器具有傳染性強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn)，應(yīng)嚴(yán)格禁止D.生殖性克隆涉及細(xì)胞核移植技術(shù)，中國政府不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)【答案】B〖祥解〗轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全(滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變)、生物安全(對生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)。【詳析】A、將目的基因?qū)朕r(nóng)作物的葉綠體基因組，可以有效防止基因污染，因?yàn)榛ǚ壑袔缀醪缓屑?xì)胞質(zhì)基因，進(jìn)而可避免目的基因進(jìn)入到近緣物種中，A正確；B、基因編輯技術(shù)存在安全風(fēng)險，我們不反對試管嬰兒技術(shù)，但濫用設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)設(shè)計(jì)嬰兒性別，不符合生物技術(shù)的安全與倫理規(guī)范，B錯誤；C、生物武器是指有意識地利用微生物、毒素、昆蟲侵襲敵人的軍隊(duì)、人口、農(nóng)作物或者牲畜等目標(biāo)，以達(dá)到戰(zhàn)爭目的的一類武器，有致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣等特點(diǎn)，應(yīng)嚴(yán)格禁止，C正確；D、生殖性克隆涉及細(xì)胞核移植技術(shù)，中國政府不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實(shí)驗(yàn)，D正確。故選B。5.有些細(xì)菌具有溶菌特性，能夠破壞其他細(xì)菌的結(jié)構(gòu)使細(xì)胞內(nèi)容物釋出?？茖W(xué)家試圖從某湖泊水樣中分離出有溶菌特性的細(xì)菌，用于分離細(xì)菌的固體培養(yǎng)基包含水、葡萄糖、蛋白胨和瓊脂等成分。A菌通常被用作溶菌對象，研究者將含有一定濃度A菌的少量培養(yǎng)基傾倒在固體平板上，待其凝固形成薄層后，培養(yǎng)一段時間，薄層變渾濁（如圖）。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.蛋白胨主要為細(xì)菌提供氮源、碳源和維生素等B.若薄層變渾濁，表明A菌不能在平板上生長繁殖C.應(yīng)將含菌量較高的湖泊水樣稀釋涂布于渾濁薄層上D.培養(yǎng)一段時間后，能溶解A菌的菌落周圍會出現(xiàn)溶菌圈【答案】B〖祥解〗微生物接種的兩種常見的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、蛋白胨中含有豐富的營養(yǎng)成分，主要為細(xì)菌提供氮源、碳源和維生素等，A正確；B、若薄層變渾濁，這表明A菌能夠在平板上生長繁殖，使得平板上細(xì)菌數(shù)量增多而變渾濁，B錯誤；C、將含菌量較高的湖泊水樣稀釋涂布于渾濁薄層上，這樣可以保證在平板上形成單個菌落，便于分離出有溶菌特性的細(xì)菌，C正確；D、由于A菌會被溶解，培養(yǎng)一段時間后，能溶解A菌的菌落周圍不會出現(xiàn)菌體（菌體被破壞），會出現(xiàn)透明的溶菌圈，D正確。故選B。6.豬體內(nèi)隱藏的病毒少，是人類器官移植的優(yōu)質(zhì)供體。為避免免疫排斥，科研人員培育了用于器官移植的基因編輯豬，具體流程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.可用電刺激、Ca2+載體、蛋白酶等方法激活重構(gòu)胚B.從1號收集的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)到MII期再去除細(xì)胞核C.CMAH基因和β4GalNT2基因可能是豬的抗原決定基因D.胚胎移植前需用促性腺激素對3號進(jìn)行同期發(fā)情處理【答案】C〖祥解〗動物細(xì)胞核移植技術(shù)的一般步驟：①采集卵母細(xì)胞，體外培育到MⅡ期，并進(jìn)行去核操作；②將供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞；③通過電融合法使兩細(xì)胞融合，供體核進(jìn)入卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚；④用物理或化學(xué)方法（如電刺激、Ca2+載體、乙醇和蛋白酶合成抑制劑等）激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程；⑤將胚胎移入受體（代孕母動物）體內(nèi)，并發(fā)育成與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個體?！驹斘觥緼、可用電刺激、Ca2+載體、乙醇或蛋白酶合成抑制劑等方法激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，A錯誤；B、從1號收集的卵母細(xì)胞需體外培養(yǎng)到MⅡ期再利用顯微操作進(jìn)行去核處理，這里的核是指染色體-紡錘體復(fù)合物，B錯誤；C、由圖可知，為防止免疫排斥，在去細(xì)胞核時需敲出CMAH基因和β4GalNT2基因，由此可知二者可能是抗原決定基因，C正確；D、胚胎移植前需用孕激素對3號進(jìn)行同期發(fā)情處理，需要用促性腺激素對1號進(jìn)行超數(shù)排卵處理，D錯誤。故選C。7.質(zhì)粒K中含有β-半乳糖苷酶基因，將該質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞后，其編碼的酶可分解X-gal，產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，進(jìn)而形成藍(lán)色菌落，如圖所示。科研小組以該質(zhì)粒作為載體，采用基因工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)人源干擾素基因在大腸桿菌中的高效表達(dá)。下列敘述錯誤的是（）A.使用氯化鈣處理大腸桿菌以提高轉(zhuǎn)化效率，可增加篩選平板上白色和藍(lán)色菌落數(shù)B.如果篩選平板中僅含卡那霉素，生長出的白色菌落不可判定為含目的基因的菌株C.因質(zhì)粒K中含兩個標(biāo)記基因，篩選平板中長出的白色菌落即為表達(dá)目標(biāo)蛋白的菌株D.若篩選平板中藍(lán)色菌落偏多，原因可能是質(zhì)粒K經(jīng)酶切后自身環(huán)化并導(dǎo)入了大腸桿菌【答案】C〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣；（4）目的基因的檢測與鑒定?！驹斘觥緼、使用氯化鈣處理大腸桿菌，可使其處于感受態(tài)，提高轉(zhuǎn)化效率，即更多的大腸桿菌能吸收質(zhì)粒，無論吸收的是含目的基因的重組質(zhì)粒（可能形成白色菌落）還是未重組的質(zhì)粒K（形成藍(lán)色菌落），都可增加篩選平板上白色和藍(lán)色菌落數(shù)，A正確；B、由于僅含卡那霉素，未添加X-gal，無論導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒還是空白質(zhì)粒，因不含X-gal，無法產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，故生長出的菌落均為白色，B正確；C、篩選平板中長出的白色菌落，可能是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒（含目的基因），但也可能是雖然導(dǎo)入了質(zhì)粒但目的基因沒有成功表達(dá)目標(biāo)蛋白，不能僅僅因?yàn)槭前咨渚团卸楸磉_(dá)目標(biāo)蛋白的菌株，C錯誤；D、若篩選平板中藍(lán)色菌落偏多，原因可能是質(zhì)粒K經(jīng)酶切后自身環(huán)化并導(dǎo)入了大腸桿菌，因?yàn)樽陨憝h(huán)化的質(zhì)粒K中β-半乳糖苷酶基因完整，能表達(dá)活性β-半乳糖苷酶，分解X-gal形成藍(lán)色菌落，D正確。

故選C8.體外受精技術(shù)是提高動物繁殖能力的有效措施，該技術(shù)還可為胚胎移植提供可用的胚胎。下列關(guān)于體外受精和胚胎移植的敘述，正確的是（）A.精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，會發(fā)生卵細(xì)胞膜反應(yīng)，防止多精子入卵B.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”利用了體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)和遺傳學(xué)診斷技術(shù)C.對優(yōu)良供體母牛進(jìn)行人工授精，收集胚胎后即可移植到受體母牛體內(nèi)進(jìn)行繁殖D.對胚胎進(jìn)行移植時，需要將胚胎移植到同種的、遺傳性狀優(yōu)良的雌性體內(nèi)【答案】B〖祥解〗體外受精包括精子的采集和獲能、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、體外受精，該技術(shù)產(chǎn)生的動物稱為試管動物?！驹斘觥緼、體內(nèi)受精時，當(dāng)精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，透明帶會迅速產(chǎn)生生理反應(yīng)阻止后來的精子進(jìn)入，A錯誤；B、設(shè)計(jì)試管嬰兒是指體外受精形成的胚胎在植入母體孕育前，根據(jù)人們的需要，將胚胎的一個細(xì)胞取出，進(jìn)行某些基因檢測，設(shè)計(jì)試管嬰兒利用了體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)和植入前胚胎遺傳學(xué)診斷技術(shù)，B正確；C、收集胚胎后要先進(jìn)行質(zhì)量檢查，才能進(jìn)行移植，C錯誤；D、進(jìn)行胚胎移植時，代孕個體不需要具有優(yōu)良的遺傳性狀，D錯誤。故選B。9.石油對土壤的污染不僅給周邊生態(tài)環(huán)境帶來嚴(yán)重的損害，還嚴(yán)重影響居民的健康生活，且污染物含量越多，降解難度越大。為解決石油污染問題，某科研小組用了將近1年的時間，從長慶油田中被石油污染最嚴(yán)重的土壤中分離出了高效分解石油的細(xì)菌，如圖所示。小明用該法進(jìn)行了過程④的操作，將1mL樣品稀釋100倍，在3個平板上分別接種0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為46、58和52。下列說法中錯誤的是（）A.步驟③培養(yǎng)基中以石油為唯一碳源，使用高壓蒸汽滅菌法滅菌B.平板冷卻后倒置可防止皿蓋上的水珠落回污染培養(yǎng)基和防止培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)C.采用稀釋涂布平板法對石油分解菌進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)D.根據(jù)小明的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可得出每升該樣品中的活菌數(shù)為5.2×106個【答案】D〖祥解〗統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)；③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作：a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性；b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)；③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)?！驹斘觥緼、配制好的培養(yǎng)基通常使用高壓蒸汽滅菌法滅菌；由題干信息分析可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，故步驟③培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基成分與普通液體培養(yǎng)基相比，最大的區(qū)別是培養(yǎng)基中以石油為唯一碳源，A正確；B、平板冷卻后需要倒置，目的有兩個：一是防止皿蓋上的水珠落回培養(yǎng)基造成污染；二是防止培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)，B正確；C、稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的是活菌數(shù)目，常采用稀釋涂布平板法對石油分解菌進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)，C正確；D、將1mL樣品稀釋100倍在3個平板上分別接種0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后3個平板上的菌落數(shù)分別為46、58和52，據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為（46+58+52）÷3÷0.1×1000×100=5.2×107（個），D錯誤。故選D。10.黃曲霉素（AFB）是黃曲霉（真菌）產(chǎn)生的具有極強(qiáng)致癌力的代謝產(chǎn)物?？蒲腥藛T為準(zhǔn)確檢測食品中殘留的AFB，利用動物細(xì)胞融合技術(shù)制備AFB的單克隆抗體，過程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.推測體內(nèi)大量的AFB可能誘發(fā)人體的抑癌基因突變成原癌基因B.制備AFB單克隆抗體需骨髓瘤細(xì)胞和T細(xì)胞融合獲得雜種細(xì)胞C.制備的AFB單克隆抗體可使人體內(nèi)癌變的細(xì)胞發(fā)生裂解死亡D.陽性的雜交瘤細(xì)胞通過在體外大規(guī)模培養(yǎng)可獲得大量單克隆抗體【答案】D〖祥解〗單克隆抗體的制備：用特定的抗原對小鼠進(jìn)行免疫，并從該小鼠的脾中得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞，將多種B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，利用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選：在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長。對上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取大量的單克隆抗體?！驹斘觥緼、原癌基因和抑癌基因是人體的正?；?，原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變可能導(dǎo)致人體細(xì)胞癌變，AFB誘發(fā)原癌基因和抑癌基因突變可能導(dǎo)致細(xì)胞癌變，A錯誤；B、制備AFB單克隆抗體需要骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞融合獲得雜種細(xì)胞，B錯誤；C、AFB單克隆抗體只能識別抗原，不能使靶細(xì)胞裂解死亡，C錯誤；D、陽性的雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生特定的抗體，且能無限增殖，故陽性的雜交瘤細(xì)胞通過在體外大規(guī)模培養(yǎng)可獲得大量單克隆抗體，D正確。故選D。11.農(nóng)桿菌是一種土壤中的常見微生物，可在自然條件下侵染雙子葉植物和裸子植物。農(nóng)科院的研究員利用農(nóng)桿菌這一特性成功將耐鹽基因?qū)霟煵菁?xì)胞，最終獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽煙草植株。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.用該方法也可將目的基因?qū)雴巫尤~植物B.構(gòu)建表達(dá)載體時需要使用限制酶和DNA連接酶C.構(gòu)建表達(dá)載體時應(yīng)將耐鹽基因插入到T-DNA序列之后D.利用該方法可將耐鹽基因整合到煙草細(xì)胞染色體DNA中【答案】C〖祥解〗農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上；【詳析】A、農(nóng)桿菌易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力，但通過人工改造用該方法也可將目的基因?qū)雴巫尤~植物，A正確；B、構(gòu)建表達(dá)載體時需要使用限制酶和DNA連接酶，前者被稱為基因的剪刀，后者被稱為基因針線，B正確；C、構(gòu)建表達(dá)載體時應(yīng)將耐鹽基因插入到T-DNA序列之中，因?yàn)門-DNA是可轉(zhuǎn)移的DNA，能將目的基因與受體細(xì)胞的染色體整合到一起，C錯誤；D、利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將耐鹽基因整合到煙草細(xì)胞染色體DNA中，因?yàn)檗r(nóng)桿菌質(zhì)粒中含有T-DNA，D正確。故選C。12.如圖表示植株A(雜合子Dd)和植株B培育植株①②③④⑤的過程，下列說法正確的是（）A.培育植株①的過程為單倍體育種，獲得的植株為純合子B.植株⑤的獲得可以證明該技術(shù)能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和性，獲得新品種C.采用化學(xué)法、物理法或滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合D.正常情況下，植株②④與植株A基因型相同的概率分別是1/4、1【答案】B〖祥解〗分析題圖可知，對植株A的花粉經(jīng)過離體培養(yǎng)得到的植株①單倍體植株，而后對該單倍體幼苗經(jīng)秋水仙素處理得到的植物②是純合二倍體，該過程屬于單倍體育種；植株③的獲得采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該植株的獲得利用了誘變育種方法；植株④采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，屬于細(xì)胞工程育種；植株⑤的培育采用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)?！驹斘觥緼、單倍體育種包括花藥離體培養(yǎng)和秋水仙素處理兩個環(huán)節(jié)，對植株A（雜合子Dd）的花粉（D或d）經(jīng)過離體培養(yǎng)得到的植株①為單倍體植株（D或d），秋水仙素處理單倍體植株①，獲得的植株②（DD或dd）為純合子，A錯誤；B、植株⑤植物體細(xì)胞雜交技術(shù)打破了生殖隔離，實(shí)現(xiàn)了遠(yuǎn)緣雜交，通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)能克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，B正確；C、誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合可以采用化學(xué)法、物理法，但滅活的病毒用于誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合，C錯誤；D、植株A的花粉粒是D或d，秋水仙素處理得到植株②（DD或dd），植株④是通過植物組織培養(yǎng)獲得的，其基因型為Dd，故植株②④與植株A基因型相同的概率分別是0、1，D錯誤。故選B。13.如圖是“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)中幾個重要操作的示意圖，下列敘述正確的是（）A.本實(shí)驗(yàn)正確的操作順序應(yīng)是③①②④B.圖中④用到的NaCl溶液濃度為2mol/LC.圖中①的原理是DNA溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)不溶于酒精D.將二苯胺試劑加入含DNA的燒杯中即可觀察到顏色變藍(lán)【答案】B〖祥解〗DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的?！驹斘觥緼、圖中“DNA的粗提取和鑒定”的正確的實(shí)驗(yàn)操作順序是③破碎細(xì)胞→②獲取含DNA的濾液→①DNA析出→④DNA的鑒定，A正確；B、圖④用到的NaCl溶液濃度為2mol/L，其目的是溶解DNA，B正確；C、圖①的原理是DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)可溶于酒精，這樣可以進(jìn)一步純化DNA，C錯誤；D、圖④操作后加入二苯胺試劑充分振蕩，經(jīng)過沸水浴加熱可觀察到顏色變藍(lán)，D錯誤。故選B。14.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉在我國的種植面積已占全國棉花種植面積的90%。研究者利用PCR技術(shù)檢測雜草中有無轉(zhuǎn)基因成分，得到如圖所示結(jié)果。相關(guān)分析錯誤的是（）A.空白實(shí)驗(yàn)是未加入DNA模板得到的電泳結(jié)果B.推測棉田雜草6、7與抗蟲棉的親緣關(guān)系較近C.結(jié)果說明校園雜草與棉花間一定存在生殖隔離D.轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)入雜草體內(nèi)可能會引發(fā)生態(tài)問題【答案】C〖祥解〗由圖可知，2轉(zhuǎn)基因抗蟲棉和棉田雜草6和7均含有轉(zhuǎn)基因成分。轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是指棉花細(xì)胞染色體上整合有外源抗蟲基因的棉花品種。抗蟲基因通常為來源于蘇云金芽孢桿菌的Bt基因?！驹斘觥緼、空白對照是為了消除或減少實(shí)驗(yàn)誤差，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性；未加入DNA模板得到的電泳結(jié)果是空白實(shí)驗(yàn)，作為空白對照，A正確；B、根據(jù)雜草6和7含有轉(zhuǎn)基因成分可以推測，雜草6和7可能與抗蟲棉的親緣關(guān)系較近，獲得了轉(zhuǎn)基因特性，B正確；C、由題圖可知，棉田雜草（6號和7號）含有轉(zhuǎn)基因成分，校園雜草不含有轉(zhuǎn)基因成分，但不能說明兩者存在生殖隔離，C錯誤；D、轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)入雜草內(nèi)，可能導(dǎo)致雜草獲得轉(zhuǎn)基因特性，可能會引發(fā)生態(tài)問題，D正確。故選C。15.啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)中，大麥經(jīng)發(fā)芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、發(fā)酵、消毒等工序后，最終過濾、調(diào)節(jié)、分裝。下列說法不正確的是（）A.用赤霉素處理大麥，可使大麥種子無須發(fā)芽就能產(chǎn)生a-淀粉酶B.焙烤是為了利用高溫殺死大麥種子胚并進(jìn)行滅菌C.糖漿經(jīng)蒸煮、冷卻后需接種酵母菌進(jìn)行發(fā)酵D.蒸煮可產(chǎn)生風(fēng)味組分，終止酶的進(jìn)一步作用【答案】B〖祥解〗啤酒發(fā)酵過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個階段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成。主發(fā)酵結(jié)束后，發(fā)酵液還不適合飲用，要在低溫、密閉的環(huán)境下儲存一段時間進(jìn)行后發(fā)酵，這樣才能形成澄清、成熟的啤酒。【詳析】A、用赤霉素處理大麥，可誘導(dǎo)α-淀粉酶相關(guān)基因的表達(dá)，促進(jìn)α-淀粉酶的合成，進(jìn)而使大麥種子無須發(fā)芽就能產(chǎn)生α-淀粉酶，A正確；B、焙烤可以殺死大麥種子的胚，但不使淀粉酶失活，沒有進(jìn)行滅菌，B錯誤；C、糖漿經(jīng)蒸煮，其作用是終止酶的進(jìn)一步作用，并對糖漿滅菌、冷卻后再接種酵母菌進(jìn)行發(fā)酵，防止高溫殺死菌種，C正確；D、蒸煮過程中可以產(chǎn)生一些風(fēng)味組分，同時高溫能使酶失活，終止酶的進(jìn)一步作用，D正確。故選B。二、非選擇題：本題共5小題，共55分。16.制作泡菜時，為什么泡菜壇只能裝八成滿?_____。用水密封泡菜壇的目的是什么?_____。制作的泡菜“咸而不酸”,可能的原因是什么?_____。分析泡菜在腌制過程中亞硝酸鹽的含量變化的原因？_____。泡菜發(fā)酵時間是不是越長越好?_____。制作泡菜時,為了縮短制作時間,有人還會在冷卻后的鹽水中加人少量陳泡菜液,其原因是什么?_____。【答案】①.發(fā)酵過程中產(chǎn)生較多的CO2，如果泡菜壇裝得太滿，發(fā)酵液可能會溢出壇外。另外，泡菜壇裝得太滿，會使鹽水不太容易完全浸沒菜料，從而導(dǎo)致壇內(nèi)菜料變質(zhì)腐爛。泡菜壇留有一定的空間，也更方便拿取泡菜②.保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境③.可能是食鹽濃度過高、發(fā)酵溫度過低④.發(fā)酵初期，乳酸菌數(shù)量和乳酸含量都比較少，而由于硝酸鹽還原菌的活動，亞硝酸鹽含量逐漸增加；發(fā)酵后期，由于硝酸鹽還原菌的活動受抑制，同時形成的亞硝酸鹽又被分解，所以亞硝酸鹽含量下降⑤.不是⑥.增加乳酸菌數(shù)量，加速乳酸的產(chǎn)生【詳析】在泡菜發(fā)酵初期，由蔬菜表面帶入的大腸桿菌、酵母菌等較為活躍，它們可進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵過程中產(chǎn)生較多的CO2，如果泡菜壇裝得太滿，發(fā)酵液可能會溢出壇外。另外，泡菜壇裝得太滿，會使鹽水不太容易完全浸沒菜料，從而導(dǎo)致壇內(nèi)菜料變質(zhì)腐爛。泡菜壇留有一定的空間，也更方便拿取泡菜。乳酸菌為厭氧菌，用水密封泡菜壇的目的是保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境。制作的泡菜“咸而不酸”可能的原因是可能是食鹽濃度過高（乳酸菌失水過多活性降低）、發(fā)酵溫度過低導(dǎo)致泡菜未能正常發(fā)酵。發(fā)酵初期，乳酸菌數(shù)量和乳酸含量都比較少，而由于硝酸鹽還原菌的活動，亞硝酸鹽含量逐漸增加；發(fā)酵后期，由于硝酸鹽還原菌的活動受抑制，同時形成的亞硝酸鹽又被分解，所以亞硝酸鹽含量下降。泡菜發(fā)酵時間并不是越長越好，泡菜的發(fā)酵時間長，亞硝酸鹽含量低，但是發(fā)酵時間過長會產(chǎn)生其他有害物質(zhì)；泡菜發(fā)酵時間過長，乳酸含量過高，口味不佳。加入陳泡菜液的作用是增加乳酸菌數(shù)量，加速乳酸的產(chǎn)生，從而縮短發(fā)酵時間。17.抗人絨毛膜促性腺激素（HCG）單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”具有診斷早、準(zhǔn)確率高的特點(diǎn)。下圖表示抗HCG單克隆抗體制備流程的示意圖。（1）注射的物質(zhì)X為________。該技術(shù)主要利用了Y細(xì)胞_______的特點(diǎn)。為了得到融合細(xì)胞采用不同于植物體細(xì)胞雜交的融合方法是______。（2）正常細(xì)胞的DNA合成有D和S兩條途徑，而瘤細(xì)胞只有D途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。在HAT培養(yǎng)基中加入了氨基嘌呤可以從多種融合細(xì)胞中篩選獲得能連續(xù)增殖的雜交瘤細(xì)胞，原因是______。（3）Z處理包括_______，所獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是________。【答案】（1）①.HCG（或人絨毛膜促性腺激素）②.無限增殖③.滅活病毒（2）雜交瘤細(xì)胞具有S途徑可以進(jìn)行DNA合成，瘤細(xì)胞的DNA合成被阻斷，B淋巴細(xì)胞不能連續(xù)增殖（3）①.克隆化培養(yǎng)、抗體檢測②.既能大量增殖又能分泌所需抗體（或HCG抗體）〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，再通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！窘馕觥浚?）在抗HCG單克隆抗體制備過程中，注射物質(zhì)X的目的是獲得能產(chǎn)生抗HCG抗體的B淋巴細(xì)胞，因此物質(zhì)X是HCG（或人絨毛膜促性腺激素）。Y細(xì)胞是骨髓瘤細(xì)胞，該技術(shù)主要利用了Y細(xì)胞無限增殖的特點(diǎn)。動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等，其中，不同于植物體細(xì)胞雜交的融合方法是滅活病毒誘導(dǎo)法。（2）氨基嘌呤能阻斷D途徑，在HAT培養(yǎng)基中加入氨基嘌呤后，B細(xì)胞只存在S途徑，但不能連續(xù)增殖，因此B淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的融合細(xì)胞在培養(yǎng)基存活一段時間后死亡；骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成途徑被阻斷，骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞因無法合成DNA，也不能存活。而雜交瘤細(xì)胞既有B淋巴細(xì)胞的S途徑進(jìn)行DNA合成，又有骨髓瘤細(xì)胞無限增殖的能力，因此可以在培養(yǎng)基中存活下來。（3）在單克隆抗體制備過程中，有兩次篩選：第一次篩選是利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次培養(yǎng)是通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，篩選出既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。18.水稻是重要的糧食作物，病蟲害嚴(yán)重影響水稻產(chǎn)量。研究人員為了育好“中國種”，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育抗蟲、抗除草劑水稻。回答下列問題：（1）將抗蟲基因?qū)胨緝?yōu)質(zhì)品種，獲得抗蟲水稻甲。水稻甲自交得到的F1中，抗蟲水稻約占3/4，推測可能是水稻染色體上導(dǎo)入了一個抗蟲基因，該抗蟲性狀的遺傳遵循孟德爾的_______定律。（2）檢測轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻乙，發(fā)現(xiàn)其染色體上含兩個相同的抗蟲基因，則抗蟲基因在染色體上的位置有_______種可能，研究人員欲通過雜交實(shí)驗(yàn)確定抗蟲基因的位置。①水稻雌雄同花，花小且多，進(jìn)行雜交時________操作十分困難，因此研究人員培育了不抗蟲的光溫敏感型雄性不育水稻（如圖所示），以方便進(jìn)行雜交操作。但操作過程需精準(zhǔn)控制溫度和日照時間，以防止在_______時其育性發(fā)生紊亂。②讓乙和不抗蟲光溫敏雄性不育的水稻進(jìn)行雜交，若后代全為抗蟲水稻，則兩個抗蟲基因位于________上；若兩個抗蟲基因位于非同源染色體，則后代的表型及比例為__________。（3）科研人員將抗蟲基因和抗除草劑同時轉(zhuǎn)入水稻，獲得若干轉(zhuǎn)基因植株，從中選擇抗蟲抗除草劑的單株S1和S2，讓其分別進(jìn)行自交獲得子代，子代性狀表現(xiàn)如圖所示。①基因在染色體上所在的位置稱為_______，請根據(jù)上述子代性狀表現(xiàn)，試在下圖細(xì)胞內(nèi)染色體上標(biāo)出S1和S2中抗蟲基因（D）及抗除草劑（T）的插入位點(diǎn)_______。②若給S1自交子代植株噴施適量的除草劑，讓存活植株再自交，得到的子代群體中不抗蟲抗除草劑的個體占______。（4）轉(zhuǎn)基因安全性問題不容忽視，為防止抗性基因通過基因漂移擴(kuò)散到雜草，可以考慮的解決方案是______（寫兩點(diǎn)）。【答案】（1）分離（2）①.三②.人工去雄③.氣候異常④.一對同源染色體⑤.抗蟲：不抗蟲=3：1（3）①.基因座位②.③.1/2（4）將抗蟲、抗除草劑基因?qū)刖€粒體，避免通過花粉擴(kuò)散；將花粉致死或不育基因和抗性基因緊密連鎖，使含有抗性基因的花粉致死或不育〖祥解〗基因自由組合定律的實(shí)質(zhì)：控制不同性狀的遺傳因子的分離和組合是互不干擾的；在形成配子時，決定同一性狀的成對的遺傳因子彼此分離，決定不同性狀的遺傳因子自由組合?！窘馕觥浚?）抗蟲水稻甲自交，后代性狀分離比為3：1，推測可能導(dǎo)入了一個抗蟲基因，該抗蟲性狀的遺傳遵循孟德爾的分離定律。（2）導(dǎo)入兩個相同的抗蟲基因，在染色體上的位置可能有3種，分別是兩個抗蟲基因在同一條染色體上、在一對同源染色體上、在非同源染色體上。①水稻雌雄同花，花小且多，人工雜交時去雄非常困難。光溫敏感型雄性不育水稻在氣候異常時會發(fā)生育性混亂，需要精準(zhǔn)控制溫度和日照時間。②若兩個抗蟲基因位于一對同源染色體，則和不抗蟲光溫敏雄性不育的水稻進(jìn)行雜交，后代全為抗蟲水稻。若兩個抗蟲基因位于非同源染色體，則符合自由組合定律，后代的表型及比例為抗蟲：不抗蟲=3：1。（3）①基因在染色體上所在的位置稱為基因座位。根據(jù)S1、S2自交后代比例，抗蟲基因和抗除草劑基因的位置如下②S1自交子代植株噴施適量的除草劑，去除不抗除草劑的品種，則存活的植株基因型為DdTt：ddTT=2：1，讓存活植株再自交，得到的子代群體中不抗蟲抗除草劑的個體占1/2。（4）抗性基因可通過花粉擴(kuò)散造成基因漂移，可通過將抗蟲、抗除草劑基因?qū)刖€粒體，避免通過花粉擴(kuò)散，或?qū)⒒ǚ壑滤阑虿挥蚝涂剐曰蚓o密連鎖，使含有抗性基因的花粉致死或不育加以解決。19.角蛋白酶能降解角蛋白，在飼料工業(yè)中具有廣闊的應(yīng)用前景。某實(shí)驗(yàn)小組將角蛋白酶基因（KerA）導(dǎo)人大腸桿菌中，獲得了能高效表達(dá)角蛋白酶的工程菌，下圖為含KerA基因的外源DNA和質(zhì)粒，EcoRI、BamHI、SalI、XhoI均為限制酶，其切割位點(diǎn)如圖所示。Kanr、Tcr分別為卡那霉素抗性基因、四環(huán)素抗性基因。請回答下列相關(guān)問題：（1）據(jù)圖可知，構(gòu)建重組質(zhì)粒時選用的工具酶包括_________和DNA連接酶，這些工具酶作用的化學(xué)鍵_________（填“相同”或“不同”）。（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增KerA基因時，需根據(jù)其兩端序列設(shè)計(jì)引物。若KerA兩端部分序列為一5'AATGGA……ATTCTC-3'，則需要設(shè)計(jì)的一對引物序列是__________________。若一個KerA基因擴(kuò)增了4次，則需要_________個引物，同時含兩種引物的DNA分子所占的比例為_________。KerA基因擴(kuò)增過程可以在PCR儀中自動完成，完成以后，常采用_________來鑒定PCR的產(chǎn)物。（3）將構(gòu)建的重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時，需使用_________處理大腸桿菌，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。將目的基因?qū)氪竽c桿菌時，常出現(xiàn)三種情況：未轉(zhuǎn)化的細(xì)菌、含空載體（普通質(zhì)粒）的細(xì)菌、含重組質(zhì)粒的細(xì)菌?？稍谔砑佑衉________的培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選，能在該培養(yǎng)基上生長的是_________________。（4）轉(zhuǎn)基因技術(shù)除了在微生物領(lǐng)域取得廣泛的成果，在動植物領(lǐng)域也取得了巨大的成果。下列有關(guān)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的敘述，正確的是_________。①我國對農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實(shí)行了標(biāo)識制度②只要有證據(jù)表明轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用③轉(zhuǎn)基因技術(shù)本身是中性的，應(yīng)理性看待該技術(shù)④轉(zhuǎn)基因植物的基因來自自然界，不會產(chǎn)生安全性問題【答案】（1）①.BamHI、XhoI②.相同（2）①.引物I5'-AATGGA-3'，引物Ⅱ5'-GAGAAT-3'②.30③.7/8④.瓊脂糖凝膠電泳（3）①.Ca2+②.四環(huán)素③.含空載體（普通質(zhì)粒）的細(xì)菌、含重組質(zhì)粒的細(xì)菌（4）①③〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟:（1）目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞∶根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！窘馕觥浚?）SalI會破壞KerA基因，因此獲取KerA基因時不能用限制酶SalI進(jìn)行切割；為了防止目的基因和載體切割后自身環(huán)化、不定向連接，應(yīng)該選用兩種限制酶進(jìn)行切割，可以選擇限制酶BamHI和XhoI或限制酶EcoRI和XhoI，若選擇限制酶EcoRI和XhoI會破壞質(zhì)粒上的兩個標(biāo)記基因，因此不能選用該組限制酶；限制酶和DNA連接酶作用的化學(xué)鍵相同，都是磷酸二酯鍵。（2）使用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時需要一對特異性的引物，引物能與目的基因兩端的核苷酸序列堿基互補(bǔ)配對，子鏈延伸時是從引物的5'端向3'端延伸，若KerA兩端部分序列為-5'AATGGA……ATTCTC-3'，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增KerA基因，根據(jù)其兩端序列，則需要設(shè)計(jì)的一對引物序列是引物I5'-AATGGA-3'，引物Ⅱ5'-GAGAAT-3'。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，擴(kuò)增4次共產(chǎn)生24=16個DNA分子，16個DNA分子共具有32條鏈，其中有2條鏈不含有引物，因此一個KerA基因擴(kuò)增4次，則需要32-2=30個引物。這16個DNA分子中，只有2個DNA分子各含有一種引物，因此一個KerA基因擴(kuò)增4次，同時含兩種引物的DNA分子所占的比例為1-2/16=7/8。常采用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物。（3）將構(gòu)建的重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時，需使用Ca2+處理大腸桿菌，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。將目的基因?qū)氪竽c桿菌時，常出現(xiàn)三種情況：未轉(zhuǎn)化的細(xì)菌、含空載體（普通質(zhì)粒）的細(xì)菌、含重組質(zhì)粒的細(xì)菌。由于選用的限制酶是BamHI、XhoI，所以含有該重組質(zhì)粒的細(xì)菌在添加四環(huán)素的培養(yǎng)基中能生長，而含空載體（普通質(zhì)粒）的細(xì)菌也含有四環(huán)素抗性基因，二者都可在添加有四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長。（4）①我國對農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實(shí)行了標(biāo)識制度，為保障轉(zhuǎn)基因生物安全提供了重要的技術(shù)支撐，①正確；②我們應(yīng)持有的正確做法是趨利避害，不能因噎廢食，②錯誤；③轉(zhuǎn)基因作為一項(xiàng)技術(shù)，本身是中性的，面對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，我們不能人云亦云，應(yīng)理性看待該技術(shù)，③正確；④轉(zhuǎn)基因植物的基因來自自然界，也可能產(chǎn)生安全性問題，④錯誤。故選①③。海南省部分中學(xué)2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期第三次模擬考試一、選擇題：本題共15小題，每小題3分，共45分。在每小題給出的四個選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。1.下圖中甲是稀釋涂布平板法中的部分操作，乙是平板劃線法操作結(jié)果。下列敘述中錯誤的是（）A.為避免空氣中雜菌的污染，進(jìn)行甲操作時不可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿B.甲圖中將涂布器放在火焰上灼燒，待酒精燃盡冷卻后才能涂布C.乙中第二次以及以后劃線的起點(diǎn)均是上一次劃線的末端D.完成整個乙操作過程需蘸取菌種1次、灼燒接種環(huán)6次【答案】A〖祥解〗微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻，A錯誤；B、甲圖中的接種方法為稀釋涂布平板法，采用的工具是涂布器，涂布前要將沾有少量酒精的涂布器引燃、灼燒，冷卻后才能將菌液涂布均勻，B正確；C、乙中除第一次外，第二次以及以后的連續(xù)劃線的起點(diǎn)均是上一次劃線的末端（末端的菌種數(shù)目更少），這樣能使菌種的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)胞繁殖而來的菌落，C正確；D、利用平板劃線法接種時需要蘸取菌液1次，乙培養(yǎng)基中有5個劃線區(qū)域，蘸取菌液之前以及每次劃線后均需要灼燒滅菌，一共需要灼燒接種環(huán)6次，D正確。故選A。2.HAT選擇培養(yǎng)基可以篩選出融合成功的雜交瘤細(xì)胞，研究人員將兩株不同的雜交瘤細(xì)胞融合形成雙雜交瘤細(xì)胞。該細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長繁殖，產(chǎn)生具有CD3和CD87結(jié)合位點(diǎn)的雙特異性抗體，如圖所示。CD87是一種癌細(xì)胞膜上的受體蛋白，研發(fā)針對CD87的抗體類藥物能提高癌癥的治愈率；CD3是所有T細(xì)胞表面均有表達(dá)的特異性抗原，該抗原被激活后，能極大促進(jìn)T細(xì)胞的免疫效力。下列敘述正確的是（）A.雙雜交瘤細(xì)胞受到CD87和CD3兩種抗原刺激后才能產(chǎn)生雙特異性抗體B.培養(yǎng)雙雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)基中應(yīng)加入水、無機(jī)鹽、瓊脂和血清等C.雙特異性單克隆抗體使T細(xì)胞更精準(zhǔn)接觸并殺傷癌細(xì)胞D.將兩株不同的雜交瘤細(xì)胞融合后，可利用HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雙雜交瘤細(xì)胞【答案】C〖祥解〗單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞?！驹斘觥緼、雜交瘤細(xì)胞無需抗原刺激就能產(chǎn)生單克隆抗體，雙雜交瘤細(xì)胞也一樣，并非受到CD87和CD3兩種抗原刺激后才產(chǎn)生雙特異性抗體，A錯誤；B、雙雜交瘤細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長繁殖，說明是在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，而瓊脂是制作固體培養(yǎng)基的凝固劑，不需要加入，B錯誤；C、CD87是癌細(xì)胞膜上受體蛋白，CD3激活后能促進(jìn)T細(xì)胞免疫效力，雙特異性單克隆抗體一端與癌細(xì)胞上CD87結(jié)合，一端與T細(xì)胞上CD3結(jié)合，能使T細(xì)胞更精準(zhǔn)接觸并殺傷癌細(xì)胞，C正確；D、HAT選擇培養(yǎng)基是用于篩選融合成功的雜交瘤細(xì)胞，而將兩株不同雜交瘤細(xì)胞融合后，不能再用HAT選擇培養(yǎng)基篩選雙雜交瘤細(xì)胞，D錯誤。故選C。3.通過設(shè)計(jì)引物，運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定點(diǎn)誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計(jì)增加限制酶a和限制酶b的識別位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.在PCR反應(yīng)體系中還需要加入4種游離核苷酸、解旋酶、耐高溫的DNA聚合酶等B.第3輪PCR結(jié)束后，含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA占1/4C.引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識別位點(diǎn)有利于目的基因定向插入運(yùn)載體D.復(fù)性溫度過高會導(dǎo)致引物不能與模板牢固結(jié)合，PCR擴(kuò)增效率下降【答案】A〖祥解〗（1）PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制，步驟包括高溫變性、復(fù)性、延伸。該過程需要耐高溫的DNA聚合酶催化，需要四種游離的脫氧核苷酸做原料（2）分析圖示可知：表示基因工程中獲取突變基因的過程，引物的一個堿基在不影響與模板鏈整體配對的前提下不與目的基因配對，再利用PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)了目的基因的定點(diǎn)誘變。該技術(shù)原理是堿基互補(bǔ)配對原則?！驹斘觥緼、在PCR反應(yīng)體系中不需要解旋酶，A錯誤；B、第3輪PCR結(jié)束后，含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA只有2個，而子代DNA有23=8個，故含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA占1/4，B正確；C、引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識別位點(diǎn)，可以配合載體的限制酶識別位點(diǎn)，幫助目的基因定向定點(diǎn)插入運(yùn)載體，避免發(fā)生自身環(huán)化，C正確；D、復(fù)性溫度過高會導(dǎo)致引物不能與模板牢固結(jié)合，PCR擴(kuò)增效率下降，D正確。故選A。4.生物技術(shù)的安全性和倫理問題已經(jīng)成為廣受關(guān)注的社會熱點(diǎn)。下列技術(shù)或要求不符合安全與倫理規(guī)范的是（）A.將目的基因?qū)朕r(nóng)作物的葉綠體基因組，可以有效防止基因污染B.利用基因組編輯技術(shù)設(shè)計(jì)試管嬰兒，解決不孕不育問題C.生物武器具有傳染性強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn)，應(yīng)嚴(yán)格禁止D.生殖性克隆涉及細(xì)胞核移植技術(shù)，中國政府不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)【答案】B〖祥解〗轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全(滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變)、生物安全(對生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)?！驹斘觥緼、將目的基因?qū)朕r(nóng)作物的葉綠體基因組，可以有效防止基因污染，因?yàn)榛ǚ壑袔缀醪缓屑?xì)胞質(zhì)基因，進(jìn)而可避免目的基因進(jìn)入到近緣物種中，A正確；B、基因編輯技術(shù)存在安全風(fēng)險，我們不反對試管嬰兒技術(shù)，但濫用設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)設(shè)計(jì)嬰兒性別，不符合生物技術(shù)的安全與倫理規(guī)范，B錯誤；C、生物武器是指有意識地利用微生物、毒素、昆蟲侵襲敵人的軍隊(duì)、人口、農(nóng)作物或者牲畜等目標(biāo)，以達(dá)到戰(zhàn)爭目的的一類武器，有致病能力強(qiáng)、攻擊范圍廣等特點(diǎn)，應(yīng)嚴(yán)格禁止，C正確；D、生殖性克隆涉及細(xì)胞核移植技術(shù)，中國政府不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實(shí)驗(yàn)，D正確。故選B。5.有些細(xì)菌具有溶菌特性，能夠破壞其他細(xì)菌的結(jié)構(gòu)使細(xì)胞內(nèi)容物釋出?？茖W(xué)家試圖從某湖泊水樣中分離出有溶菌特性的細(xì)菌，用于分離細(xì)菌的固體培養(yǎng)基包含水、葡萄糖、蛋白胨和瓊脂等成分。A菌通常被用作溶菌對象，研究者將含有一定濃度A菌的少量培養(yǎng)基傾倒在固體平板上，待其凝固形成薄層后，培養(yǎng)一段時間，薄層變渾濁（如圖）。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.蛋白胨主要為細(xì)菌提供氮源、碳源和維生素等B.若薄層變渾濁，表明A菌不能在平板上生長繁殖C.應(yīng)將含菌量較高的湖泊水樣稀釋涂布于渾濁薄層上D.培養(yǎng)一段時間后，能溶解A菌的菌落周圍會出現(xiàn)溶菌圈【答案】B〖祥解〗微生物接種的兩種常見的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斘觥緼、蛋白胨中含有豐富的營養(yǎng)成分，主要為細(xì)菌提供氮源、碳源和維生素等，A正確；B、若薄層變渾濁，這表明A菌能夠在平板上生長繁殖，使得平板上細(xì)菌數(shù)量增多而變渾濁，B錯誤；C、將含菌量較高的湖泊水樣稀釋涂布于渾濁薄層上，這樣可以保證在平板上形成單個菌落，便于分離出有溶菌特性的細(xì)菌，C正確；D、由于A菌會被溶解，培養(yǎng)一段時間后，能溶解A菌的菌落周圍不會出現(xiàn)菌體（菌體被破壞），會出現(xiàn)透明的溶菌圈，D正確。故選B。6.豬體內(nèi)隱藏的病毒少，是人類器官移植的優(yōu)質(zhì)供體。為避免免疫排斥，科研人員培育了用于器官移植的基因編輯豬，具體流程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.可用電刺激、Ca2+載體、蛋白酶等方法激活重構(gòu)胚B.從1號收集的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)到MII期再去除細(xì)胞核C.CMAH基因和β4GalNT2基因可能是豬的抗原決定基因D.胚胎移植前需用促性腺激素對3號進(jìn)行同期發(fā)情處理【答案】C〖祥解〗動物細(xì)胞核移植技術(shù)的一般步驟：①采集卵母細(xì)胞，體外培育到MⅡ期，并進(jìn)行去核操作；②將供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞；③通過電融合法使兩細(xì)胞融合，供體核進(jìn)入卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚；④用物理或化學(xué)方法（如電刺激、Ca2+載體、乙醇和蛋白酶合成抑制劑等）激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程；⑤將胚胎移入受體（代孕母動物）體內(nèi)，并發(fā)育成與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個體。【詳析】A、可用電刺激、Ca2+載體、乙醇或蛋白酶合成抑制劑等方法激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，A錯誤；B、從1號收集的卵母細(xì)胞需體外培養(yǎng)到MⅡ期再利用顯微操作進(jìn)行去核處理，這里的核是指染色體-紡錘體復(fù)合物，B錯誤；C、由圖可知，為防止免疫排斥，在去細(xì)胞核時需敲出CMAH基因和β4GalNT2基因，由此可知二者可能是抗原決定基因，C正確；D、胚胎移植前需用孕激素對3號進(jìn)行同期發(fā)情處理，需要用促性腺激素對1號進(jìn)行超數(shù)排卵處理，D錯誤。故選C。7.質(zhì)粒K中含有β-半乳糖苷酶基因，將該質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞后，其編碼的酶可分解X-gal，產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，進(jìn)而形成藍(lán)色菌落，如圖所示?？蒲行〗M以該質(zhì)粒作為載體，采用基因工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)人源干擾素基因在大腸桿菌中的高效表達(dá)。下列敘述錯誤的是（）A.使用氯化鈣處理大腸桿菌以提高轉(zhuǎn)化效率，可增加篩選平板上白色和藍(lán)色菌落數(shù)B.如果篩選平板中僅含卡那霉素，生長出的白色菌落不可判定為含目的基因的菌株C.因質(zhì)粒K中含兩個標(biāo)記基因，篩選平板中長出的白色菌落即為表達(dá)目標(biāo)蛋白的菌株D.若篩選平板中藍(lán)色菌落偏多，原因可能是質(zhì)粒K經(jīng)酶切后自身環(huán)化并導(dǎo)入了大腸桿菌【答案】C〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣；（4）目的基因的檢測與鑒定。【詳析】A、使用氯化鈣處理大腸桿菌，可使其處于感受態(tài)，提高轉(zhuǎn)化效率，即更多的大腸桿菌能吸收質(zhì)粒，無論吸收的是含目的基因的重組質(zhì)粒（可能形成白色菌落）還是未重組的質(zhì)粒K（形成藍(lán)色菌落），都可增加篩選平板上白色和藍(lán)色菌落數(shù)，A正確；B、由于僅含卡那霉素，未添加X-gal，無論導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒還是空白質(zhì)粒，因不含X-gal，無法產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，故生長出的菌落均為白色，B正確；C、篩選平板中長出的白色菌落，可能是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒（含目的基因），但也可能是雖然導(dǎo)入了質(zhì)粒但目的基因沒有成功表達(dá)目標(biāo)蛋白，不能僅僅因?yàn)槭前咨渚团卸楸磉_(dá)目標(biāo)蛋白的菌株，C錯誤；D、若篩選平板中藍(lán)色菌落偏多，原因可能是質(zhì)粒K經(jīng)酶切后自身環(huán)化并導(dǎo)入了大腸桿菌，因?yàn)樽陨憝h(huán)化的質(zhì)粒K中β-半乳糖苷酶基因完整，能表達(dá)活性β-半乳糖苷酶，分解X-gal形成藍(lán)色菌落，D正確。

故選C8.體外受精技術(shù)是提高動物繁殖能力的有效措施，該技術(shù)還可為胚胎移植提供可用的胚胎。下列關(guān)于體外受精和胚胎移植的敘述，正確的是（）A.精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，會發(fā)生卵細(xì)胞膜反應(yīng)，防止多精子入卵B.“設(shè)計(jì)試管嬰兒”利用了體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)和遺傳學(xué)診斷技術(shù)C.對優(yōu)良供體母牛進(jìn)行人工授精，收集胚胎后即可移植到受體母牛體內(nèi)進(jìn)行繁殖D.對胚胎進(jìn)行移植時，需要將胚胎移植到同種的、遺傳性狀優(yōu)良的雌性體內(nèi)【答案】B〖祥解〗體外受精包括精子的采集和獲能、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、體外受精，該技術(shù)產(chǎn)生的動物稱為試管動物。【詳析】A、體內(nèi)受精時，當(dāng)精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，透明帶會迅速產(chǎn)生生理反應(yīng)阻止后來的精子進(jìn)入，A錯誤；B、設(shè)計(jì)試管嬰兒是指體外受精形成的胚胎在植入母體孕育前，根據(jù)人們的需要，將胚胎的一個細(xì)胞取出，進(jìn)行某些基因檢測，設(shè)計(jì)試管嬰兒利用了體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)和植入前胚胎遺傳學(xué)診斷技術(shù)，B正確；C、收集胚胎后要先進(jìn)行質(zhì)量檢查，才能進(jìn)行移植，C錯誤；D、進(jìn)行胚胎移植時，代孕個體不需要具有優(yōu)良的遺傳性狀，D錯誤。故選B。9.石油對土壤的污染不僅給周邊生態(tài)環(huán)境帶來嚴(yán)重的損害，還嚴(yán)重影響居民的健康生活，且污染物含量越多，降解難度越大。為解決石油污染問題，某科研小組用了將近1年的時間，從長慶油田中被石油污染最嚴(yán)重的土壤中分離出了高效分解石油的細(xì)菌，如圖所示。小明用該法進(jìn)行了過程④的操作，將1mL樣品稀釋100倍，在3個平板上分別接種0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為46、58和52。下列說法中錯誤的是（）A.步驟③培養(yǎng)基中以石油為唯一碳源，使用高壓蒸汽滅菌法滅菌B.平板冷卻后倒置可防止皿蓋上的水珠落回污染培養(yǎng)基和防止培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)C.采用稀釋涂布平板法對石油分解菌進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)D.根據(jù)小明的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可得出每升該樣品中的活菌數(shù)為5.2×106個【答案】D〖祥解〗統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)；③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作：a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性；b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)；③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。【詳析】A、配制好的培養(yǎng)基通常使用高壓蒸汽滅菌法滅菌；由題干信息分析可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，故步驟③培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基成分與普通液體培養(yǎng)基相比，最大的區(qū)別是培養(yǎng)基中以石油為唯一碳源，A正確；B、平板冷卻后需要倒置，目的有兩個：一是防止皿蓋上的水珠落回培養(yǎng)基造成污染；二是防止培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)，B正確；C、稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的是活菌數(shù)目，常采用稀釋涂布平板法對石油分解菌進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)，C正確；D、將1mL樣品稀釋100倍在3個平板上分別接種0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后3個平板上的菌落數(shù)分別為46、58和52，據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為（46+58+52）÷3÷0.1×1000×100=5.2×107（個），D錯誤。故選D。10.黃曲霉素（AFB）是黃曲霉（真菌）產(chǎn)生的具有極強(qiáng)致癌力的代謝產(chǎn)物?？蒲腥藛T為準(zhǔn)確檢測食品中殘留的AFB，利用動物細(xì)胞融合技術(shù)制備AFB的單克隆抗體，過程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.推測體內(nèi)大量的AFB可能誘發(fā)人體的抑癌基因突變成原癌基因B.制備AFB單克隆抗體需骨髓瘤細(xì)胞和T細(xì)胞融合獲得雜種細(xì)胞C.制備的AFB單克隆抗體可使人體內(nèi)癌變的細(xì)胞發(fā)生裂解死亡D.陽性的雜交瘤細(xì)胞通過在體外大規(guī)模培養(yǎng)可獲得大量單克隆抗體【答案】D〖祥解〗單克隆抗體的制備：用特定的抗原對小鼠進(jìn)行免疫，并從該小鼠的脾中得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞，將多種B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，利用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選：在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長。對上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取大量的單克隆抗體。【詳析】A、原癌基因和抑癌基因是人體的正?；颍┗蚝鸵职┗虬l(fā)生突變可能導(dǎo)致人體細(xì)胞癌變，AFB誘發(fā)原癌基因和抑癌基因突變可能導(dǎo)致細(xì)胞癌變，A錯誤；B、制備AFB單克隆抗體需要骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞融合獲得雜種細(xì)胞，B錯誤；C、AFB單克隆抗體只能識別抗原，不能使靶細(xì)胞裂解死亡，C錯誤；D、陽性的雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生特定的抗體，且能無限增殖，故陽性的雜交瘤細(xì)胞通過在體外大規(guī)模培養(yǎng)可獲得大量單克隆抗體，D正確。故選D。11.農(nóng)桿菌是一種土壤中的常見微生物，可在自然條件下侵染雙子葉植物和裸子植物。農(nóng)科院的研究員利用農(nóng)桿菌這一特性成功將耐鹽基因?qū)霟煵菁?xì)胞，最終獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽煙草植株。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.用該方法也可將目的基因?qū)雴巫尤~植物B.構(gòu)建表達(dá)載體時需要使用限制酶和DNA連接酶C.構(gòu)建表達(dá)載體時應(yīng)將耐鹽基因插入到T-DNA序列之后D.利用該方法可將耐鹽基因整合到煙草細(xì)胞染色體DNA中【答案】C〖祥解〗農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上；【詳析】A、農(nóng)桿菌易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力，但通過人工改造用該方法也可將目的基因?qū)雴巫尤~植物，A正確；B、構(gòu)建表達(dá)載體時需要使用限制酶和DNA連接酶，前者被稱為基因的剪刀，后者被稱為基因針線，B正確；C、構(gòu)建表達(dá)載體時應(yīng)將耐鹽基因插入到T-DNA序列之中，因?yàn)門-DNA是可轉(zhuǎn)移的DNA，能將目的基因與受體細(xì)胞的染色體整合到一起，C錯誤；D、利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將耐鹽基因整合到煙草細(xì)胞染色體DNA中，因?yàn)檗r(nóng)桿菌質(zhì)粒中含有T-DNA，D正確。故選C。12.如圖表示植株A(雜合子Dd)和植株B培育植株①②③④⑤的過程，下列說法正確的是（）A.培育植株①的過程為單倍體育種，獲得的植株為純合子B.植株⑤的獲得可以證明該技術(shù)能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和性，獲得新品種C.采用化學(xué)法、物理法或滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合D.正常情況下，植株②④與植株A基因型相同的概率分別是1/4、1【答案】B〖祥解〗分析題圖可知，對植株A的花粉經(jīng)過離體培養(yǎng)得到的植株①單倍體植株，而后對該單倍體幼苗經(jīng)秋水仙素處理得到的植物②是純合二倍體，該過程屬于單倍體育種；植株③的獲得采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該植株的獲得利用了誘變育種方法；植株④采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，屬于細(xì)胞工程育種；植株⑤的培育采用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)?！驹斘觥緼、單倍體育種包括花藥離體培養(yǎng)和秋水仙素處理兩個環(huán)節(jié)，對植株A（雜合子Dd）的花粉（D或d）經(jīng)過離體培養(yǎng)得到的植株①為單倍體植株（D或d），秋水仙素處理單倍體植株①，獲得的植株②（DD或dd）為純合子，A錯誤；B、植株⑤植物體細(xì)胞雜交技術(shù)打破了生殖隔離，實(shí)現(xiàn)了遠(yuǎn)緣雜交，通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)能克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，B正確；C、誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合可以采用化學(xué)法、物理法，但滅活的病毒用于誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合，C錯誤；D、植株A的花粉粒是D或d，秋水仙素處理得到植株②（DD或dd），植株④是通過植物組織培養(yǎng)獲得的，其基因型為Dd，故植株②④與植株A基因型相同的概率分別是0、1，D錯誤。故選B。13.如圖是“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)中幾個重要操作的示意圖，下列敘述正確的是（）A.本實(shí)驗(yàn)正確的操作順序應(yīng)是③①②④B.圖中④用到的NaCl溶液濃度為2mol/LC.圖中①的原理是DNA溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)不溶于酒精D.將二苯胺試劑加入含DNA的燒杯中即可觀察到顏色變藍(lán)【答案】B〖祥解〗DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的。【詳析】A、圖中“DNA的粗提取和鑒定”的正確的實(shí)驗(yàn)操作順序是③破碎細(xì)胞→②獲取含DNA的濾液→①DNA析出→④DNA的鑒定，A正確；B、圖④用到的NaCl溶液濃度為2mol/L，其目的是溶解DNA，B正確；C、圖①的原理是DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)可溶于酒精，這樣可以進(jìn)一步純化DNA，C錯誤；D、圖④操作后加入二苯胺試劑充分振蕩，經(jīng)過沸水浴加熱可觀察到顏色變藍(lán)，D錯誤。故選B。14.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉在我國的種植面積已占全國棉花種植面積的90%。研究者利用PCR技術(shù)檢測雜草中有無轉(zhuǎn)基因成分，得到如圖所示結(jié)果。相關(guān)分析錯誤的是（）A.空白實(shí)驗(yàn)是未加入DNA模板得到的電泳結(jié)果B.推測棉田雜草6、7與抗蟲棉的親緣關(guān)系較近C.結(jié)果說明校園雜草與棉花間一定存在生殖隔離D.轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)入雜草體內(nèi)可能會引發(fā)生態(tài)問題【答案】C〖祥解〗由圖可知，2轉(zhuǎn)基因抗蟲棉和棉田雜草6和7均含有轉(zhuǎn)基因成分。轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是指棉花細(xì)胞染色體上整合有外源抗蟲基因的棉花品種?？瓜x基因通常為來源于蘇云金芽孢桿菌的Bt基因?！驹斘觥緼、空白對照是為了消除或減少實(shí)驗(yàn)誤差，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性；未加入DNA模板得到的電泳結(jié)果是空白實(shí)驗(yàn)，作為空白對照，A正確；B、根據(jù)雜草6和7含有轉(zhuǎn)基因成分可以推測，雜草6和7可能與抗蟲棉的親緣關(guān)系較近，獲得了轉(zhuǎn)基因特性，B正確；C、由題圖可知，棉田雜草（6號和7號）含有轉(zhuǎn)基因成分，校園雜草不含有轉(zhuǎn)基因成分，但不能說明兩者存在生殖隔離，C錯誤；D、轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)入雜草內(nèi)，可能導(dǎo)致雜草獲得轉(zhuǎn)基因特性，可能會引發(fā)生態(tài)問題，D正確。故選C。15.啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)中，大麥經(jīng)發(fā)芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、發(fā)酵、消毒等工序后，最終過濾、調(diào)節(jié)、分裝。下列說法不正確的是（）A.用赤霉素處理大麥，可使大麥種子無須發(fā)芽就能產(chǎn)生a-淀粉酶B.焙烤是為了利用高溫殺死大麥種子胚并進(jìn)行滅菌C.糖漿經(jīng)蒸煮、冷卻后需接種酵母菌進(jìn)行發(fā)酵D.蒸煮可產(chǎn)生風(fēng)味組分，終止酶的進(jìn)一步作用【答案】B〖祥解〗啤酒發(fā)酵過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個階段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成。主發(fā)酵結(jié)束后，發(fā)酵液還不適合飲用，要在低溫、密閉的環(huán)境下儲存一段時間進(jìn)行后發(fā)酵，這樣才能形成澄清、成熟的啤酒?！驹斘觥緼、用赤霉素處理大麥，可誘導(dǎo)α-淀粉酶相關(guān)基因的表達(dá)，促進(jìn)α-淀粉酶的合成，進(jìn)而使大麥種子無須發(fā)芽就能產(chǎn)生α-淀粉酶，A正確；B、焙烤可以殺死大麥種子的胚，但不使淀粉酶失活，沒有進(jìn)行滅菌，B錯誤；C、糖漿經(jīng)蒸煮，其作用是終止酶的進(jìn)一步作用，并對糖漿滅菌、冷卻后再接種酵母菌進(jìn)行發(fā)酵，防止高溫殺死菌種，C正確；D、蒸煮過程中可以產(chǎn)生一些風(fēng)味組分，同時高溫能使酶失活，終止酶的進(jìn)一步作用，D正確。故選B。二、非選擇題：本題共5小題，共55分。16.制作泡菜時，為什么泡菜壇只能裝八成滿?_____。用水密封泡菜壇的目的是什么?_____。制作的泡菜“咸而不酸”,可能的原因是什么?_____。分析泡菜在腌制過程中亞硝酸鹽的含量變化的原因？_____。泡菜發(fā)酵時間是不是越長越好?_____。制作泡菜時,為了縮短制作時間,有人還會在冷卻后的鹽水中加人少量陳泡菜液,其原因是什么?_____?！敬鸢浮竣?發(fā)酵過程中產(chǎn)生較多的CO2，如果泡菜壇裝得太滿，發(fā)酵液可能會溢出壇外。另外，泡菜壇裝得太滿，會使鹽水不太容易完全浸沒菜料，從而導(dǎo)致壇內(nèi)菜料變質(zhì)腐爛。泡菜壇留有一定的空間，也更方便拿取泡菜②.保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境③.可能是食鹽濃度過高、發(fā)酵溫度過低④.發(fā)酵初期，乳酸菌數(shù)量和乳酸含量都比較少，而由于硝酸鹽還原菌的活動，亞硝酸鹽含量逐漸增加；發(fā)酵后期，由于硝酸鹽還原菌的活動受抑制，同時形成的亞硝酸鹽又被分解，所以亞硝酸鹽含量下降⑤.不是⑥.增加乳酸菌數(shù)量，加速乳酸的產(chǎn)生【詳析】在泡菜發(fā)酵初期，由蔬菜表面帶入的大腸桿菌、酵母菌等較為活躍，它們可進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵過程中產(chǎn)生較多的CO2，如果泡菜壇裝得太滿，發(fā)酵液可能會溢出壇外。另外，泡菜壇裝得太滿，會使鹽水不太容易完全浸沒菜料，從而導(dǎo)致壇內(nèi)菜料變質(zhì)腐爛。泡菜壇留有一定的空間，也更方便拿取泡菜。乳酸菌為厭氧菌，用水密封泡菜壇的目的是保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境。制作的泡菜“咸而不酸”可能的原因是可能是食鹽濃度過高（乳酸菌失水過多活性降低）、發(fā)酵溫度過低導(dǎo)致泡菜未能正常發(fā)酵。發(fā)酵初期，乳酸菌數(shù)量和乳酸含量都比較少，而由于硝酸鹽還原菌的活動，亞硝酸鹽含量逐漸增加；發(fā)酵后期，由于硝酸鹽還原菌的活動受抑制，同時形成的亞硝酸鹽又被分解，所以亞硝酸鹽含量下降。泡菜發(fā)酵時間并不是越長越好，泡菜的發(fā)酵時間長，亞硝酸鹽含量低，但是發(fā)酵時間過長會產(chǎn)生其他有害物質(zhì)；泡菜發(fā)酵時間過長，乳酸含量過高，口味不佳。加入陳泡菜液的作用是增加乳酸菌數(shù)量，加速乳酸的產(chǎn)生，從而縮短發(fā)酵時間。17.抗人絨毛膜促性腺激素（HCG）單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”具有診斷早、準(zhǔn)確率高的特點(diǎn)。下圖表示抗HCG單克隆抗體制備流程的示意圖。（1）注射的物質(zhì)X為________。該技術(shù)主要利用了Y細(xì)胞_______的特點(diǎn)。為了得到融合細(xì)胞采用不同于植物體細(xì)胞雜交的融合方法是______。（2）正常細(xì)胞的DNA合成有D和S兩條途徑，而瘤細(xì)胞只有D途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。在HAT培養(yǎng)基中加入了氨基嘌呤可以從多種融合細(xì)胞中篩選獲得能連續(xù)增殖的雜交瘤細(xì)胞，原因是______。（3）Z處理包括_______，所獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是________。【答案】（1）①.HCG（或人絨毛膜促性腺激素）②.無限增殖③.滅活病毒（2）雜交瘤細(xì)胞具有S途徑可以進(jìn)行DNA合成，瘤細(xì)胞的DNA合成被阻斷，B淋巴細(xì)胞不能連續(xù)增殖（3）①.克隆化培養(yǎng)、抗體檢測②.既能大量增殖又能分泌所需抗體（或HCG抗體）〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，再通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！窘馕觥浚?）在抗HCG單克隆抗體制備過程中，注射物質(zhì)X的目的是獲得能產(chǎn)生抗HCG抗體的B淋巴細(xì)胞，因此物質(zhì)X是HCG（或人絨毛膜促性腺激素）。Y細(xì)胞是骨髓瘤細(xì)胞，該技術(shù)主要利用了Y細(xì)胞無限增殖的特點(diǎn)。動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等，其中，不同于植物體細(xì)胞雜交的融合方法是滅活病毒誘導(dǎo)法。（2）氨基嘌呤能阻斷D途徑，在HAT培養(yǎng)基中加入氨基嘌呤后，B細(xì)胞只存在S途徑，但不能連續(xù)增殖，因此B淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的融合細(xì)胞在培養(yǎng)基存活一段時間后死亡；骨髓瘤細(xì)胞的DNA合成途徑被阻斷，骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞因無法合成DNA，也不能存活。而雜交瘤細(xì)胞既有B淋巴細(xì)胞的S途徑進(jìn)行DNA合成，又有骨髓瘤細(xì)胞無限增殖的能力，因此可以在培養(yǎng)基中存活下來。（3）在單克隆抗體制備過程中，有兩次篩選：第一次篩選是利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次培養(yǎng)是通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，篩選出既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。18.水稻是重要的糧食作物，病蟲害嚴(yán)重影響水稻產(chǎn)量。研究人員為了育好“中國種”，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育抗蟲、抗除草劑水稻。回答下列問題：（1）將抗蟲基因?qū)胨緝?yōu)質(zhì)品種，獲得抗蟲水稻甲。水稻甲自交得到的F1中，抗蟲水稻約占3/4，推測可能是水稻染色體上導(dǎo)入了一個抗蟲基因，該抗蟲性狀的遺傳遵循孟德爾的_______定律。（2）檢測轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻乙，發(fā)現(xiàn)其染色體上含兩個相同的抗蟲基因，則抗蟲基因在染色體上的位置有_______種可能，研究人員欲通過雜交實(shí)驗(yàn)確定抗蟲基因的位置。①水稻雌雄同花，花小且多，進(jìn)行雜交時________操作十分困難，因此研究人員培育了不抗蟲的光溫敏感型雄性不育水稻（如圖所示），以方便進(jìn)行雜交操作。但操作過程需精準(zhǔn)控制溫度和日照時間，以防止在_______時其育性發(fā)生紊亂。②讓乙和不抗蟲光溫敏雄性不育的水稻進(jìn)行雜交，若后代全為抗蟲水稻，則兩個抗蟲基因位于________上；若兩個抗蟲基因位于非同源染色體，則后代的表型及比例為__________。（3）科研人員將抗蟲基因和抗除草劑同時轉(zhuǎn)入水稻，獲得若干轉(zhuǎn)基因植株，從中選擇抗蟲抗除草劑的單株S1和S2，讓其分別進(jìn)行自交獲得子